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· 1474·HeraldofMedicineVol26No12December2007[3]polyoxyethyleneether(brij) 等 包 衣 。ILLUM 等 发 现 poloxamer407 包 衣 的 聚 苯 乙 烯 纳 米 粒 ( 粒 径 为 50~60nm) 的 只 有 15% 被肝 吞 噬 , 而 未 包 衣 的 则 高 达 90% 的 被 吞 噬 , 且 较 多 poloxamer407 包 衣 的 纳 米 粒 到 达 骨 髓 ; 用 poxamine908 包 衣 的 微 粒 被 肝[4]脾 吞 噬 只 有 8%, 大 部 分 仍 被 保 留 在 血 中 。TAN 等 研 究 表 明pluronicF108、tetronic908、1508 在 减 少 微 粒 与 蛋 白 吸 附 方 面 是最 有 效 的 表 面 修 饰 剂 。 对 4 类 表 面 活 性 剂 的 长 循 环 包 衣 效 果的 研 究 表 明 , 纳 米 粒 的 体 内 分 布 与 表 面 活 性 剂 同 载 体 之 间 的 接触 角 无 直 接 关 系 [5] 。poloxamer338 和 poxamine908 在 增 加 纳 米粒 的 血 中 循 环 时 间 , 减 少 肝 摄 取 是 最 有 效 的 , 而 polysorbate80和 poloxamer184 却 增 加 了 非 RES 系 统 的 吸 收 。1.3 壳 聚 糖 、 环 糊 精 等 多 糖 除 了 这 些 材 料 的 亲 水 性 质 可 延长 纳 米 粒 在 体 内 的 循 环 时 间 和 减 少 巨 噬 细 胞 的 捕 获 外 , 这 类 物质 特 别 是 两 亲 性 的 环 糊 精 作 为 纳 米 粒 表 面 修 饰 剂 还 可 以 起 到[6]增 加 药 物 包 封 率 和 载 药 量 的 效 果 。BOUDAD 等 将 氰 基 丙 烯酸 烷 基 酯 (ACA) 单 体 在 沙 奎 那 韦 的 羟 丙 基 β 环 糊 精 包 合 物 溶液 中 发 生 聚 合 反 应 , 所 得 PACA 纳 米 粒 的 载 药 量 比 不 用 羟 丙 基 β 环 糊 精 时 增 长 20 倍 。1.4 两 亲 性 嵌 段 共 聚 物 的 合 成 将 纳 米 材 料 与 亲 水 性 聚 合 物共 聚 , 使 材 料 同 时 具 有 亲 水 基 团 ( 链 段 ) 和 亲 油 基 团 ( 链 段 ), 然后 在 水 介 质 中 自 发 地 形 成 外 层 为 亲 水 性 链 段 , 内 部 为 疏 水 性 链段 的 核 壳 结 构 , 从 而 解 决 纳 米 粒 表 面 疏 水 的 缺 陷 , 有 效 地 避 免[7]了 蛋 白 质 的 吸 附 和 MPS 的 吞 噬 。WEN 等 制 备 了 与 磷 酸 盐 共聚 的 PLA 材 料 。 该 聚 合 材 料 具 有 良 好 的 线 性 降 解 速 率 , 并 且 用双 乳 化 法 制 得 的 载 BSA 微 球 在 注 射 入 鼠 大 脑 后 未 见 有 炎 症 反应 。 由 于 一 般 药 物 很 难 穿 透 血 脑 屏 障 (BBB), 所 以 这 为 脑 内 植入 药 物 进 行 直 接 释 药 提 供 了 可 能 。1.5 血 液 成 分 补 体 系 统 在 RES 吞 噬 异 物 时 发 挥 重 要 作 用 ,通 过 抑 制 补 体 系 统 , 可 避 免 被 吞 噬 。 肝 素 能 在 不 同 阶 段 抑 制 补[8]体 系 统 的 活 性 ,PASSIRANI 等 将 它 共 价 连 接 到 聚 甲 基 丙 烯 酸甲 酯 (PMMA) 纳 米 粒 上 , 发 现 其 半 衰 期 为 5h, 在 血 中 停 留 长 达到 72h, 而 PMMA 纳 米 粒 的 半 衰 期 只 有 3min。BORCHARD[9]等 将 纳 米 粒 用 血 浆 包 衣 后 , 在 静 注 前 ,56℃ 处 理 30min, 使 补体 失 活 , 可 延 长 微 粒 的 血 中 循 环 时 间 。2 主 动 靶 向 修 饰主 动 靶 向 是 指 在 纳 米 粒 表 面 偶 联 特 异 性 的 靶 向 分 子 ( 特 异性 的 配 体 、 单 克 隆 抗 体 等 ), 通 过 靶 向 分 子 与 细 胞 表 面 特 异 性 受体 结 合 , 实 现 主 动 靶 向 治 疗 。 常 用 的 配 体 包 括 特 定 的 表 面 活 性剂 : 糖 类 、 叶 酸 、 转 铁 蛋 白 、 多 肽 等 。2.1 以 聚 山 梨 酯 等 表 面 活 性 剂 为 配 体 大 量 治 疗 性 药 物 难 以透 过 BBB, 纳 米 粒 本 身 可 因 脑 内 皮 细 胞 的 内 吞 作 用 而 进 入BBB。 将 纳 米 粒 用 聚 山 梨 酯 80 等 表 面 活 性 剂 进 行 修 饰 可 以 进一 步 增 加 药 物 对 BBB 的 渗 透 , 显 著 提 高 脑 内 药 物 浓 度 而 减 少 全身 血 液 循 环 中 的 药 量 。 研 究 发 现 , 用 吐 温 80 包 衣 的 多 柔 比 星聚 氰 基 丙 烯 酸 异 丁 酯 (PIBCA) 纳 米 球 与 未 包 衣 的 PIBCA 纳 米球 相 比 , 在 大 鼠 体 内 包 衣 纳 米 球 内 的 药 物 明 显 被 转 运 到 大 鼠 脑中 , 静 脉 注 射 2~4h 后 , 脑 中 药 物 物 浓 度 为 6mg·kg 1 , 而 此 时血 浆 中 药 物 浓 度 为 0.1mg·kg 1[10] 。2.2 以 糖 类 为 配 体 在 一 些 细 胞 和 组 织 表 面 有 糖 类 特 定 的 受体 。 去 唾 液 酸 糖 蛋 白 受 体 (ASGPR) 又 称 为 肝 细 胞 半 乳 糖 受 体 ,仅 存 在 于 哺 乳 动 物 的 肝 细 胞 膜 上 , 能 特 异 识 别 末 端 糖 基 为 D 半乳 糖 或 N 乙 酰 D 半 乳 糖 胺 的 糖 蛋 白 , 是 目 前 了 解 最 透 彻 的 肝细 胞 受 体 。 因 此 , 通 过 半 乳 糖 与 ASGPR 之 间 的 相 互 作 用 , 可 以[11]主 动 靶 向 于 肝 细 胞 。CHO 等 制 备 了 以 半 乳 糖 为 配 体 的 纳 米粒 , 在 纳 米 粒 上 分 别 载 有 细 胞 调 节 剂 秋 水 仙 碱 、 细 胞 松 弛 素 B和 紫 杉 醇 , 应 用 荧 光 显 微 镜 和 共 聚 显 微 镜 检 查 发 现 , 纳 米 粒 发生 了 受 体 介 导 的 胞 吞 作 用 , 而 且 绝 大 多 数 肝 细 胞 发 生 变 形 , 但是 对 照 组 3 种 细 胞 调 节 剂 与 空 白 纳 米 粒 的 混 合 物 没 有 使 肝 细胞 变 形 。2.3 以 叶 酸 为 配 体 叶 酸 是 一 种 相 对 分 子 质 量 低 的 维 生 素 ,体 积 小 、 无 免 疫 原 性 、 稳 定 性 好 、 方 便 易 得 , 而 叶 酸 受 体 在 肿 瘤细 胞 表 面 又 过 度 表 达 , 因 此 将 叶 酸 连 接 到 纳 米 粒 , 可 主 动 靶 向[12]于 癌 细 胞 。 张 良 珂 等 成 功 制 备 了 叶 酸 偶 联 蛋 白 纳 米 粒(folatecojugatedbovineserum album innanoparticles,Folate2BSANP), 并 选 用 人 卵 巢 癌 SKOV3 细 胞 作 为 模 型 细 胞 , 探 讨 了其 体 外 肿 瘤 细 胞 靶 向 性 , 证 实 了 叶 酸 偶 联 白 蛋 白 纳 米 粒 可 通 过细 胞 膜 上 叶 酸 受 体 介 导 途 径 , 主 动 靶 向 富 集 叶 酸 受 体 丰 富 的 肿瘤 细 胞 。2.4 以 转 铁 蛋 白 为 配 体 转 铁 蛋 白 是 一 类 非 血 红 蛋 白 铁 离 子结 合 糖 蛋 白 。 转 铁 蛋 白 受 体 在 所 有 有 核 细 胞 中 都 有 表 达 , 但 表达 水 平 各 异 。 在 分 裂 活 跃 的 细 胞 上 表 达 水 平 很 高 , 如 在 肿 瘤 细胞 上 每 个 细 胞 能 达 到 10000~100000 个 分 子 , 而 在 非 增 殖 细 胞上 很 少 表 达 甚 至 检 测 不 到 表 达 。 因 此 , 也 有 研 究 者 利 用 转 铁 蛋[13]白 与 其 受 体 的 相 互 作 用 介 导 主 动 靶 向 。XU 等 在 PEG 化 的PCANP 上 接 上 转 铁 蛋 白 , 作 为 紫 杉 醇 的 载 体 , 制 成 主 动 靶 向 性NP(activetargetableNP,ATN),S180 实 体 瘤 荷 瘤 小 鼠 的 体 内 分布 结 果 显 示 ,ATN 静 注 后 , 紫 杉 醇 在 肿 瘤 部 位 的 累 积 量 随 时 间的 增 加 而 增 加 ,6h 后 其 浓 度 分 别 是 游 离 药 物 和 没 有 连 接 转 铁蛋 白 的 PEG 化 纳 米 粒 的 4.8 和 2.1 倍 。[14]2.5 以 生 物 素 为 配 体 GREF 等 将 PEGPLA 纳 米 粒 子 表 面接 上 生 物 素 , 然 后 利 用 生 物 素 与 抗 生 物 素 蛋 白 的 强 而 专 一 的 反应 接 上 麦 胚 凝 集 素 。 这 种 抗 生 物 素 蛋 白 可 特 征 地 识 别 细 胞 表面 的 N 乙 酰 基 D 氨 基 葡 萄 糖 。 在 体 外 与 Caco2 细 胞 的 共 培 养过 程 中 , 发 现 接 枝 后 的 粒 子 与 细 胞 有 很 好 的 结 合 作 用 , 且 对 细胞 的 毒 性 小 。 由 于 Caco2 细 胞 与 人 体 的 肠 上 皮 细 胞 性 质 相 似 ,这 就 使 得 有 可 能 制 备 出 靶 向 肠 的 载 药 粒 子 。2.6 以 多 肽 为 配 体 多 肽 包 括 肽 链 、 单 克 隆 抗 体 (MAb) 及 片段 。 由 于 在 完 整 的 MAb 中 Fc 区 域 会 与 巨 噬 细 胞 的 Fc 受 体 结合 , 而 使 MPS 摄 取 连 有 MAb 的 纳 米 粒 , 因 此 与 完 整 的 MAb 相比 , 用 没 有 Fc 区 域 的 MAb 片 段 可 使 纳 米 粒 延 长 在 血 中 的 循 环[15]时 间 。 盛 洁 等 用 化 学 偶 联 法 将 抗 人 膀 胱 癌 单 克 隆 抗 体 分子 偶 联 到 阿 霉 素 清 蛋 白 毫 微 球 (ADRNP) 上 , 构 建 了 一 个 有 靶向 杀 伤 力 的 免 疫 纳 米 粒 子 (ADRNPAb)。 经 免 疫 实 验 及 显 微镜 观 察 分 析 证 明 , 该 纳 米 粒 可 有 效 地 和 人 膀 胱 癌 细 胞 结 合 。 同时 体 外 杀 伤 实 验 表 明 , 此 纳 米 粒 对 靶 细 胞 EJ( 人 膀 胱 癌 细 胞 株 )有 高 度 特 异 性 杀 伤 活 性 , 而 对 于 无 关 的 人 直 肠 癌 Lovo 细 胞 则 无