ColiBox - et kombineret koncept til filtrering og ... - Naturstyrelsen
ColiBox - et kombineret koncept til filtrering og ... - Naturstyrelsen
ColiBox - et kombineret koncept til filtrering og ... - Naturstyrelsen
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
10.1 Optimering af FIB:Lite<br />
19<br />
<strong>ColiBox</strong><br />
Udviklingen af FIB:Lite blev indledt med en række optimeringsforsøg med fokus på følgende<br />
param<strong>et</strong>re:<br />
• Relevante enzymsubstrater<br />
• Co-‐substrater<br />
• Buffere <strong>og</strong> pH<br />
• Substratkoncentrationer (enzymkin<strong>et</strong>ik)<br />
• Inkubationstid<br />
• Inkubationstemperatur<br />
• Permeabilisering<br />
• Signalforstærkere<br />
• Prøvevolumen <strong>og</strong> filtertyper<br />
• Specificit<strong>et</strong> <strong>og</strong> sensitivit<strong>et</strong><br />
Eksempler på resultater fra optimeringsforsøgene er præsenter<strong>et</strong> i de følgende afsnit.<br />
Inkuberingstid<br />
Mål<strong>et</strong> med FIB:Lite er, at analys<strong>et</strong>iden skal være så kort, at der i løb<strong>et</strong> af en arbejdsdag kan<br />
gives svar på om en vandprøve er kontaminer<strong>et</strong> eller ej. Et eksempel på sammenhængen<br />
mellem inkubationstid <strong>og</strong> fluorescensintensit<strong>et</strong> for drikkevand foruren<strong>et</strong> med spildevand er<br />
vist i Figur 10.3. Disse forsøg viste, at der er en lineær sammenhæng mellem<br />
inkubationstiden <strong>og</strong> fluorescensintensit<strong>et</strong> i minimum 4 timer. D<strong>et</strong> er således muligt at øge<br />
m<strong>et</strong>odens følsomhed ved at øge inkubationstiden. Efterfølgende blev 2 timer valgt som<br />
generel inkubationstid for FIB:Lite som <strong>et</strong> kompromis mellem analys<strong>et</strong>id <strong>og</strong> følsomhed. I<br />
enkelte forsøg er 1 time d<strong>og</strong> <strong>og</strong>så blev<strong>et</strong> benytt<strong>et</strong> for at give <strong>et</strong> hurtigere svar.<br />
Figur 10.3. Sammenhængen mellem fluorescenssignal <strong>og</strong> inkubationstid for FIB:Lite.