7. Resultatsanalyse - RUDAR - Roskilde Universitet

3.1 HPLCHPLC står for High Performance Liquid Chromotography, der som den første i den omtalteanalyserække, virker ved at separere de forskellige kemiske komponenter i prøven. Dettegøres ved at opløse prøven i en ”mobil fase” (i et solvent der her betegnes et eluent) der underhøjt tryk pumpes igennem en kolonne, der er tætpakket med et upolært materiale, densåkaldte ”stationære fase”. Det upolære materiale er siliciumdioxid coated med en upolæroverflade af C18-carbonkæder. Afhængig af de forskellige komponenters evne til at binde tilden stationære fase, sænkes hastigheden på, hvor hurtigt de gennemløber kolonnen.Komponenterne vil på den måde blive separeret, og passere igennem detektoren til forskelligetider, hvilket registreres som toppe i et kromatografi, se figur 8.Omvendt fasekromatografiDen stationære fase og eluentsammensætningen kan varieres, afhængig af separtionsmetoden.I vores forsøg anvender vi en kolonne, der separerer komponenterne i forhold til polaritet. Denstationære fase er upolær mens eluenten(den mobile fase) er polær, i dette tilfælde H2O. Detbetyder at komponenter med høj polaritet vil binde sig godt til mobile fase og eluerere relativthurtigt igennem kolonnen mens upolære komponenter vil være lang tid undervejs. For atsænke analysetiden kan der gradvist tilsættes et mindre polært solvent, som f.eks methanol(MeOH) eller acetonitrile (ACN). Dette kaldes gradienteluering.- 17 -