Arbeitsanweisung Probenahme - Wasserlabor-goettingen.de

Abteilung Allg. Hygiene und Umweltmedizin, Laborbereich Umwelthygiene
Titel:
Probenahme und Konservierung DIN EN ISO 19648
Seitenzahl: 11
Version: 6 AWS-TW-002.6
Datum: 03.08.2009
Genehmigt tech. Leiter: __________________ Genehmigt QMB: _____________________
1. Allgemeine Bemerkungen
Die Probenahme aus Grundwasserleitern erfolgt im Wesentlichen nach dem
Verfahren A13 der Deutschen Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und
Schlammuntersuchung (DIN 38402 Teil 13). Die Probenahme von Rohwasser und
Trinkwasser erfolgt nach dem Verfahren A14 der Deutschen Einheitsverfahren zur
Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung. Für beide Verfahren ergeben sich
Abweichungen aus folgenden Punkten:
a) Schöpfprobe steril: sterile Glasflasche in sterilen Halter mit Kette (Kettenhund)
wird in den Grundwasserleiter komplett ca. 10 bis 30 cm getaucht, befüllt,
herausgezogen und mit sterilem Stopfen verschlossen.
b) Schöpfprobe unsteril: Die unsterile Glasflasche wird in einen Flaschenhalter
gespannt, der an einer variablen Stange befestigt ist und wird dann in den
Grundwasserleiter komplett ca. 10 bis 30 cm eingetaucht, befüllt,
herausgezogen und verschlossen.
c) Sterile Entnahme am Zapfhahn: Wasser ablaufen lassen bis Temperaturkonstanz
erreicht wird (mit Digitalthermometer ermitteln). Hahn zudrehen und mit
Bunsenbrenner abflammen (vorher eventuell vorhandene Kunststoffteile
entfernen). Wasser erneut laufen lassen, Probengefäß öffnen und unter
laufenden Wasserstrahl befüllen. Probengefäß verschließen.
d) Unsterile Entnahme am Zapfhahn: wie Punkt c) jedoch ohne Abflammen des
Hahns.
Wird an einer Stelle hintereinander eine Probe mit Abflammen des Hahns für die
Bakteriologie und ohne Abflammen für die Chemie entnommen, dann soll zuerst die
Probe ohne Abflammen (unsterile Entnahme) gewonnen werden. Durch das
Abflammen kann es zu einer chemischen Kontamination der Probe kommen, wenn
beispielsweise Metallstücke abplatzen und in das Gefäß gespült werden.
Für die Bestimmung von Gasen wie z.B. Sauerstoff in der Wasserprobe wird die
Probe vorsichtig über einen Schlauch in die Flasche abgefüllt.
Das Flaschenetikett wird mit Probenahmeort, Probenehmer, Probeentnahmeart,
Datum und Analysenumfang beschriftet, sofern vor Ort ein Vordruck eines
Probenidentifikationsdokumentes zur Verfügung steht.
Die Identifikationsnummer unterscheidet sich von der eigentlichen Tagebuchnummer im Labor dadurch, daß sie
täglich neu mit 1 beginnend fortlaufend über die Zahl der Proben des jeweiligen Tages vergeben wird. Sie dient
der Zuordnung Probe – Identifikationsdokument außerhalb des Labors vor Ort.
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Das Etikett enthält folgende Angaben:
Universität Göttingen, Abteilung Allgemeine Hygiene und Umweltmedizin
Humboldtallee 34A, 37073 Göttingen Tel.: 0551-394970
Kunde:...........................................................................................................
.........................................................................
Entnahmest.:.................................................................................................
..................................................................................................
..................................................................................................
Datum:...................................... Uhrzeit:.....................................
Wassertemp.:................°C Probenehmer:..............................
? Routine ? Chem. ? Periodisch ? Anlage II/1 ? Anlage II/2
? Badechem. ? Sonstiges: ...........................................
Das Beispiel zeigt ein Etikett für Flaschen zur chemischen Trinkwasseruntersuchung.
Die Felder „Kunde“, „Entnahmestelle“, „Datum“, „Uhrzeit“ und „Probenehmer“ können
frei bleiben, wenn (wie zuvor bemerkt) die Probendaten unmittelbar nach erfolgter
Entnahme durch den Probenehmer in den Probenidentifikationsschein eingetragen
werden. In diesem Fall müssen sämtliche fehlende Daten des Etiketts im
Probenidentifikationsschein erscheinen!
Ist kein Probenidentifikationsdokument vor Ort verfügbar, so werden sämtliche
Angaben an den dafür vorgesehen Stellen auf dem Flaschenetikett vermerkt.
Wahrnehmungen vor Ort bezüglich Färbung, Trübung, Geruch, Bodensatzbildung
sind im Probenidenfikationsschein bereits vor Ort eingetragen worden, wenn dieser
direkt bei Entnahme ausgefüllt wurde. Das gilt auch für eventuell gemessene
Leitfähigkeit, pH-Werte, die Konzentration an freiem oder gebundenem Chlor.
Sind die Daten gesamt oder teilweise auf dem Etikett vermerkt, so werden diese vom
Etikett in den Probeidentifikationsschein unmittelbar während des Probeneingangs
im Labor übertragen.
Die Proben werden im Probenannahmeraum (Raum 0.225) gesammelt. Zur
eindeutigen Identifizierung erhalten sie dort eine fortlaufende Nummer
(Tagebuchnummer; vierstellig; z.B. 0001; Beginn der Zählung am jeweils 01.01.
eines jeden Jahres). Die Tagebuchnummer zur endgültigen Zuordnung der Probe im
Labor wird dokumentenecht auf dem Probenidentifikationsschein und das
Flaschenetikett aufgetragen.
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2. Routinemäßige Entnahme von Trinkwasserproben:
Es wird zwischen einer Probenahme für die chemische (unsterile Bedingungen) und
für die mikrobiologische (sterile Bedingungen) Analytik unterschieden. In den meisten
Fällen werden Parameter aus beiden Gruppen untersucht, d.h. es sind an einer
Probenahmestelle Proben sowohl für die chemische als auch für die
mikrobiologische Analytik zu entnehmen.
Werden chemische und mikrobiologische Parameter untersucht, so ist es
zweckmäßig, zuerst die Probe für die chemischen (unsteril), dann für die
mikrobiologischen (steril) Parameter zu entnehmen. Begründung: Für die
mikrobiologischen Parameter muß die Probenahmestelle abgeflammt werden, was
zur Freisetzung von Schwermetallen führen kann und die nach der mikrobiologische
Probenahme erfolgende chemische Probenahme stören würde.
2.1 Vorgehen:
Es sind ausschließlich Probenahmeflaschen des Labors zu verwenden.
In der Regel wird eine kontinuierliche Stichprobe des Kaltwassersystems
entnommen. In Sonderfällen kann nach Anweisung der Aufsichtsbehörden oder um
zusätzlichen Wünschen des Betreibers zu entsprechen, davon abgewichen werden
(z.B. diskontinuierliche Stichprobe als gestaffelte Stagnationsprobe zur Klärung der
Frage, ob die Hausinstallation oder Armatur einen nachteiligen Einfluß auf die
Trinkwasserbeschaffenheit ausübt).
2.2 Probenahme für die chemische Analytik (als kontinuierliche Stichprobe):
o Probenahmearmatur prüfen (thermische Beständigkeit, Sichtprüfung auf
Sauberkeit).
o Ggf. vorhandenen Perlator einschließlich Dichtung entfernen.
o Kaltwasserventil (sofern nicht anders angewiesen) der Armatur öffnen,
Wasser bis zur Temperaturkonstanz ablaufen lassen. Temperaturkonstanz mit
einem meßtechnisch rückgeführten Thermometer des Labors überprüfen.
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o Probenahmeflasche (1,0 oder 0,5 L PE-HD-Flasche) öffnen, mit dem aus der
Armatur auslaufenden Wasserstrahl ca. halb füllen, schwenken und den Inhalt
verwerfen. Begründung: Es ist möglich, daß sich noch Salpetersäurereste der
Aufbereitung in der Flasche befunden haben, die zu falsch positiven Befunden
des Nitrats oder falsch niedrigen pH-Werten führen würden.
o Anschließend die Probenahmeflasche mit dem Wasserstrahl aus der Armatur
randvoll füllen und sofort verschließen.
o Beschriftung des Etiketts sorgfältig durchführen, auch eventuelle
Bemerkungen vor Ort eintragen (z.B. Geruch, örtliche Gegebenheiten, etc.).
o Flasche in eine Kühlbox überführen und alsbald in das Labor verbringen. Die
Temperatur der Wasserprobe sollte in keiner Weise ansteigen.
o Im Labor die Probe sofort in einen Kühlschrank oder Kühlraum stellen
(Temperatur ca. 4°C).
o Beginn der Analyse innerhalb von 24 Stunden nach Probenahme.
Anmerkung: Für die Bestimmung von organischen Substanzen (z.B. PAKs, etc.) sind
1,0 oder 2,5 Liter-Braunglasflaschen mit Schraubdeckel; für die Bestimmung von
halogenorganischen Stoffen (LHKWs) sind 250 oder 500 mL Braunglasflaschen mit
Normschliff und Glasstopfen anstelle der routinemäßig zu verwendenden PE-HD-
Flaschen einzusetzen. Die Flaschen müssen jeweils randvoll gefüllt sein.
2.3 Probenahme für die mikrobiologische Analytik (als kontinuierliche
Stichprobe):
o Entnahmearmatur nach chemischer Analyse schließen.
o Bei thermischer Beständigkeit mit einem Lötbrenner die Armatur abflammen
bis das Geräusch von siedendem Wasser an der Armatur vernommen werden
kann. 1 Vorsicht bei verchromten Armaturen (Chromüberzug kann abplatzen
oder es zeigen sich Anlauffarben).
o Nach dem Abflammen die Armatur öffnen und Wasser bis zur
Temperaturkonstanz ablaufen lassen.
o Derweil eine hygienische Händedesinfektion durchführen.
o Anschließend die Probenahmeflasche (sterilisierte Glasflasche mit
Kunststoffdeckel in Alufolie-Schutzmantel) öffnen und durch den Wasserstrahl
der Armatur bis ca. ¾ des Volumens füllen. Begründung: Der Luftraum wird
benötigt, damit möglicherweise suspendierte Mikroorganismen vor der
Analyse durch Aufschütteln resuspendiert werden können.
1 Ist die Armatur thermisch nicht beständig, kann mit Ethanol-Wasserstoffperoxid-Lösung (80% Ethanol, 0,3%
Wasserstoffperoxid mit Wasser ad 100%) im Sprühverfahren desinfiziert warden. Einwirkzeit ca. 3 Minuten
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o Den Deckel während der Befüllung der Flasche nach unten richten um
Spritzkontaminationen zu vermeiden.
o Flasche anschließend verschließen, beschriften und in Kühlbox in das Labor
verbringen. Dort ebenfalls bei ca. 4°C kühlen bis innerhalb von 24h die
Untersuchung begonnen werden kann.
2.4 Besonderheiten bei desinfizierten Wässern:
Ist es bekannt oder besteht der Verdacht, daß das zu untersuchende Wasser durch
Chlor, Chlordioxid oder Ozon desinfiziert wurde, ist der Wasserprobe für die
mikrobiologische Untersuchung ein Volumen von 4,0mL steriler Na2S2O3-Lösung
(c=0,05 mol/L) pro Liter zuzufügen, um das Desinfektionsmittel zu inaktivieren.
Begründung: Es würden durch die (wenn auch geringe) Remanenz des
Desinfektionsmittels Mikroorganismen nach der Probenahme unkontrolliert
inaktiviert, was zu falsch niedrigen Befunden führen würde.
3. Besonderheiten der Trinkwasserprobenahme bei speziellen
Fragestellungen:
3.1. Mikrobiologische Probenahme für die Legionellenbestimmung:
Für die Bewertung von Legionella sp. im Trinkwasser sind mindestens drei
Entnahmestellen erforderlich:
o Trinkwassererwärmerausgang
o Eine möglichst weit davon entfernte Zapfstelle
o Zirkulationsrücklauf
Begründung: Durch die dreigliedrige Probenahme kann festgestellt werden, ob die
erforderliche Desinfektions-Temperatur von > 60°C an jeder Stelle des
Warmwassersystems erreicht werden kann.
o Ggf. vorhandenen Perlator oder vorhandene Brauseeinrichtung entfernen.
o Durchführung einer hygienischen Händedesinfektion
o Ca. 3 Liter Warmwasser aus der Armatur in einen Eimer ablaufen lassen,
Temperatur messen und dokumentieren
o Entnahmestelle mit Lötbrenner abflammen und anschließend Warmwasser
öffnen
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o 1,0 Liter Probe in eine sterile Glasflasche des Labors ablaufen lassen, bis
diese ¾ gefüllt ist.
o Bei Vorhandensein von Desinfektionsmitteln im Warmwasser (Chlor,
Chlordioxid oder Ozon) muß ein Volumen von 4 mL Na2S2O3-Lösung
(c=0,05mol/L) zugegeben werden, um das Desinfektionsmittel zu inaktivieren
(vgl. 1.4)
o Abschließend Warmwasser weiter ablaufen lassen bis Temperaturkonstanz
erreicht ist. Endtemperatur ebenfalls dokumentieren.
o Die Probe ist anschließend zu kühlen und analog 1.3 zu handhaben.
3.2 Zufallsstichprobe (Z-Probe):
An einer von der Aufsichtsbehörde festgelegten Entnahmestelle eines
Versorgungsgebietes wird zu einer zufälligen Zeit am Tage eine Probe von 1 Liter
Trinkwasser in eine PE Probenflasche entnommen. Es wird kein Ablaufmanöver bis
Temperaturkonstanz und kein Entfernen des ggf. vorhandenen Perlators
durchgeführt. Die Probe gibt einen Überblick über die Beschaffenheit des Wassers
unter üblichen Nutzungsbedingungen des Verbrauchers. Die Probe ist zu kühlen und
analog 1.2 zu handhaben.
3.3 Chemische Probenahme als gestaffelte Stagnationsprobe:
Um den Einfluß von Werkstoffen der Hausinstallation auf die
Trinkwasserbeschaffenheit unter Stagnationsbedingungen zu untersuchen, ist eine
gestaffelte Stagnationsprobe erforderlich (Bundesgesundheitsblatt (2004) 47; Seiten
296ff). Es werden insgesamt 3 Proben (S0,S1 und S3) entnommen, in denen die
Parameter Blei, Kupfer und Nickel bestimmt werden. Weitere
Schwermetallparameter sind fakultativ möglich.
Die drei Probenahmeflaschen sind zusätzlich zur üblichen Beschriftung mit dem
Vermerk S0, S1 und S2 zu versehen.
o Probenahme S0:
o Ggf. vorhandenen Perlator entfernen und Wasser bis
Temperaturkonstanz ablaufen lassen.
o Danach 1,0 Liter in eine PE-Probenahmeflasche füllen.
o Diese Probe repräsentiert das Wasser des Trinkwasserversorgers
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o Probenahme S1 und S2:
o Nach der S0-Probe die Armatur für mindestens 2, maximal 4 Stunden
schließen, so daß Stagnation in dem zugehörigen Strang vorliegt.
o Danach unmittelbar 1,0 Liter Wasser in eine PE-Probenahmeflasche
füllen = S1-Probe. Diese Probe zeigt den Einfluß der Entnahmearmatur
auf das Trinkwasser
o Ist die S1 – Probe erfolgt, noch einmal 1,0 Liter Wasser in eine weitere
PE-Probenahmeflasche füllen = S2-Probe. Diese Probe weist den
Einfluß des Rohrmaterials der Hausinstallation auf das Trinkwasser
aus.
Die Proben sind zu kühlen und analog 1.2 zu handhaben.
4. Probenahme aus Schwimm- und Badebecken für die mikrobiolog.
Untersuchung
Das Beckenwasser wird als Schöpfprobe aus einer Tiefe von 10 bis 30 cm unter dem
Wasserspiegel entnommen. Begründung: An der Oberfläche des Wasserspiegels
liegt ein Mikrolayer aus verschiedenen Bakterien vor, der falsch hohe Meßwerte
vortäuschen würde.
o Es sind in Umverpackungen (Papier-Folienverbundverpackung) sterilisierte
Probenahmeflaschen des Labors aus Glas (V= 1 Liter) zu verwenden, um eine
Anflugverkeimung der Außenoberflächen zu vermeiden.
o Die Flaschen müssen vor der Verpackung und Sterilisation mit 4,0 mL
Na2S2O3-Lösung (c=0,05 mol/L) beschickt werden, um das Chlor des
Badebeckenwassers zu inaktivieren.
o Vor der eigentlichen Probenahme die Durchströmungsrichtung des Beckens
feststellen.
o Die Probe muß gegenüber dem Beckeneinlauf entnommen werden.
o Eine hygienische Händedesinfektion ist durchführen.
o Probenahmeflasche möglichst aspetisch aus der Sterilgutverpackung (Papier-
Folienverbund-Verpackung) auspacken und in eine zuvor desinfizierte 2
Probenahmestange einspannen.
2 mit Ethanol-Wasserstoffperoxid-Lösung; 80% Ethanol, 0,3% Wasserstoffperoxid
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o Alternativ kann bei Fehlen einer geeigneten Probenahmestange ein steriler
Handschuh angelegt werden und die Probenahmeflasche mit der Hand
geführt werden.
o Probenahmeflasche öffnen, Deckel kontaminationsfrei zur Seite legen.
o Die Probenahmeflasche nun horizontal in eine Tiefe von 10 bis 30 cm
tauchen, dann senkrecht drehen und Wasser einlaufen lassen.
o Die Flasche sollte nach der Beprobung von ¾ des Gesamtvolumens gefüllt
sein.
o Flasche verschließen, beschriften (Bleistift) und analog 1.3 handhaben.
Die Proben sind zu kühlen und analog 1.2 zu handhaben.
Die weiteren Probenahmen (Füllwasser, Wasser nach Aufbereitung, etc.) in
Badeanstalten unterscheiden sich nicht von dem unter 1.2 und 1.3 beschriebenen
Vorgehen.
5. Material für die Probenahme
5.1 Flaschenmaterial:
o Sterile Probenahmeflaschen aus Glas mit Institutsetikett und
Behandlungsindikator für die Probenahme von mikrobiologischen
Wasserproben (V= 1000 mL oder 500 mL) [T+B]
o Unsterile Probenahmeflaschen aus Kunststoff (PE) mit Institutsetikett (V=
1000 mL oder 500 mL), säuregespült, für die Probenahme von Wasserproben
zur chemischen Untersuchung (anorganische Parameter) [T+B]
o Unsterile Probenahmeflaschen aus Glas mit Institutsetikett (V= 1000 mL oder
2500 mL), säuregespült und ausgekocht, für die Probenahme von
Wasserproben zur chemischen Untersuchung (organische Parameter) [T]
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5.2 Hilfsmittel:
o Kühlbox mit Kühlakkus [T+B]
o Wasserpumpenzange [T+B]
o Eimer, 5 Liter Inhalt [T]
o Laborgasbrenner („Lötlampe“) [T+B]
o Ethanol w=80% v/v mit 0,3 % H2O2 in Sprühflasche (sporentötend, wenn
Laborgasbrenner zur Desinfektion der Entnahmestelle nicht zum Einsatz
kommen kann) [T+B]
o Sterile Handschuhe [B]
o Secchi-Scheibe für Sichttiefe bei offenen Gewässern [B]
o Flaschenhalterung mit Einspannvorrichtung und Verlängerung für
Probenahme aus Becken oder offenen Gewässern ("Probenahmestange")
[T+B]
o Zeituhr, funkrückgeführt für die genaue Feststellung der Ortszeit [T+B]
o Kugelschreiber [T+B]
o Filzschreiber, wasserfest [T+B]
o Bleistift [T+B]
o Probenidentifikationsscheine
o Natriumthiosulfat-Lösung, sterilisiert (c=0,05 mol/L); abgefüllt in
Kunststoffröhrchen á 4 mL für 1,0 Liter Probe, bzw. á 2mL für 0,5 Liter Probe
[T+B]
Die Materialien müssen in ausreichender Reserve vorhanden sein.
Anmerkung: Signatur T = Utensielien für Trinkwasser; B = Utensilien für Badewasser
5.3 Meßgeräte für die Bestimmung von instabilen Parametern vor Ort:
o Thermometer (meßtechnisch rückgeführt)
o pH-Meter (arbeitstäglich kalibriert)
o Photometer (z.B. MN 300D) zur photometrischen Chlor,- Ozon,- und
Chlordioxidmessung
o Macherey-Nagel Testsets zur Chlor,- Ozon- und Chlordioxidmessung
o Feinpipette (Kolbenhubpipette) V = 5 mL
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6. Abbildungsanhang:
Abb.1: Abb.2:
Unsterile PE-HD-Flasche für Routineproben Sterile Glasflasche für Trinkwasser-
der chemischen Analytik proben zur mikrobiol. Analytik,
2 Röhrchen Na2S2O3-Lsg. für 1 Liter
Abb.3: Abb.4:
Sterile Glasflasche in Sterilgutverpackung Glasflasche (Braunglas) mit Schraub-
mit Na2S2O3-Beschickung für Schöpfperoben verschluß für organische Parameter
aus Badebecken
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Abb.5:
Braunglasflasche mit Schliffstopfen für die
Halogenkohlenwasserstoff-Analytik
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