XE-2100 - Sysmex Deutschland GmbH
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Neutrophiler Eosinophiler Basophiler Monozyt Lymphozyt<br />
Stab Metamyelozyt Myelozyt Promyelozyt Blast<br />
HPC<br />
Abb. 7 Reagenzeinwirkung von stromatolyser-im auf reife und unreife<br />
Leukozyten<br />
Dabei werden DC- (Direct Current = Gleichstrom)<br />
und RF- (Radio Frequency = Hochfrequenz) Signale<br />
erfasst. Diese Signale spiegeln das Volumen (DC)<br />
und das Kern/Plasma-Verhältnis (RF) der Zellen<br />
wider. Dadurch können die Zellen in stabkernige<br />
Granulozyten, unreife Granulozyten (Promyelozyten,<br />
Myelozyten, Metamyelozyten) und Blasten<br />
separiert werden.<br />
7. RET-Kanal: Fluoreszenz-Durchflusszytometrie<br />
Auch in diesem Messkanal zur Bestimmung der Retikulozyten und ihrer Altersstufen wird das Blut mit<br />
einem spezifischen Reagenziensystem inkubiert. ret-search (ii) besteht aus einem Lysereagenz, welches<br />
die Membranen aller Blutzellen perforiert, und einem Fluoreszenzfarbstoff, der anschließend in die<br />
Zellen eindringt und an die vorhandenen Nukleinsäuren in Zellkern und Zytoplasma bindet (Abb. 8).<br />
RBC RET PLT NRBC WBC<br />
In der Durchflusszelle werden dann das Vorwärtsstreulicht<br />
und die Fluoreszenzintensität analysiert.<br />
Auf Grund des deutlich höheren Nukleinsäuregehalts<br />
werden kernhaltige Zellen wie Leukozyten<br />
Abb. 8 Einwirkung von ret-search (ii) auf Blutzellen<br />
und Erythroblasten intensiver angefärbt und klar<br />
von den Retikulozyten getrennt. Erythrozyten dagegen<br />
enthalten so gut wie gar keine Nukleinsäuren und können deswegen klar von den Retikulozyten<br />
unterschieden werden. Mit der Reifung der Retikulozyten nimmt der RNA-Gehalt in der Zelle kontinuierlich<br />
ab, sodass sich Retikulozyten in drei Altersstufen einteilen lassen:<br />
n Gruppe der »reifen« Retikulozyten (LFR – Low Fluorescence Reticulocyte)<br />
n Gruppe der »halbreifen« Retikulozyten (MFR – Medium Fluorescence Reticulocyte)<br />
n Gruppe der »unreifen« Retikulozyten (HFR – High Fluorescence Reticulocyte)<br />
Für den xe-<strong>2100</strong> ist eine optionale Software, der xe-ret master, verfügbar. Damit lässt sich ein weiterer<br />
Parameter aus diesem Messkanal bestimmen: der Hämoglobingehalt der Retikulozyten. Ausgehend von<br />
der Analyse der Vorwärtsstreulichtsignale der Retikulozyten wird deren Hämoglobingehalt ermittelt<br />
und als Parameter RET-He an die Labor-EDV übertragen.<br />
Fluoreszenz-Durchflusszytometrie<br />
in der Hämatologie (<strong>XE</strong>-<strong>2100</strong>)<br />
<strong>Sysmex</strong> Xtra 2/2008
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