人体尿液代谢组NMR 分析 - ä¸­å›½ç§‘å­¦é™¢æ­¦æ±‰ç‰©ç†ä¸Žæ•°å­¦ç ”ç©¶æ‰€

中 国 科 学 B 辑 : 化 学
2008 年 第 38 卷 第 1 期
图 3 固 相 萃 取 馏 分 1 的 二 维 HSQC 谱 (a) 和 HMBC 谱 (b)( 下 午 尿 液 )
图 4 是 馏 分 1 的 J-RES 实 验 结 果 , 可 以 看 出 该 谱
图 具 有 较 强 的 t 1 噪 声 , 但 是 由 于 这 种 噪 声 主 要 发 生 在
强 度 较 大 的 谱 峰 位 置 , 对 实 验 结 果 分 析 影 响 较 小 , 所
以 该 谱 图 仍 然 对 代 谢 物 的 解 析 产 生 较 大 的 帮 助 .
图 4 右 图 为 馏 分 1 的
1 H NMR 和 J-RES 谱 在
δ (1.7−1.1)×10 −6 区 间 的 放 大 图 , 上 方 一 维 谱 图 清 晰 地
出 现 多 个 双 峰 , 在 J-RES 谱 中 得 到 确 认 (10 个 双 峰 , 2
个 单 峰 ); 图 4(b) 为 δ (4.01−3.76)×10 −6 区 间 的 放 大 图 ,
上 方 一 维 谱 图 中 1, 2, 3, 4 看 起 来 像 是 两 个 双 峰 或 四
个 单 峰 , 在 J-RES 上 可 以 清 晰 地 确 认 是 一 个 dd 多 重
峰 , 5 和 6 看 起 来 像 2 个 双 峰 , 实 际 上 也 是 一 个 dd 多
重 峰 , 7 和 8 看 起 来 像 两 个 单 峰 , 实 际 上 是 一 个 双 峰
( 峰 8 可 能 与 其 他 峰 重 叠 而 显 偏 高 ). 这 种 峰 的 分 离 及
多 重 性 的 确 认 对 化 合 物 的 解 析 具 有 重 要 意 义 .
2.3 尿 样 代 谢 物 解 析 结 果
对 上 述 5 种 二 维 NMR 谱 图 进 行 对 照 分 析 , 从 尿
样 组 分 中 共 解 析 出 了 74 种 化 合 物 的
1 H 和
13 C 化 学 位
移 , 这 是 目 前 报 道 直 接 从 生 物 体 液 解 析 出 来 最 多 的
化 合 物 , 说 明 经 过 简 单 的 浓 缩 和 分 离 后 , 尿 样 中 许 多
代 谢 物 质 可 以 直 接 利 用 多 种 二 维 NMR 实 验 联 合 分 析
的 方 法 进 行 解 析 , 与 目 前 多 数 从 事 代 谢 组 学 研 究 的
实 验 室 采 用 测 量 标 准 化 合 物 谱 图 解 析 生 物 体 液 NMR
谱 图 相 比 , 该 方 法 除 可 节 省 大 量 时 间 及 标 准 样 品 的
消 耗 外 , 有 可 能 直 接 获 得 以 前 很 少 见 到 的 代 谢 物 质 .
在 74 种 代 谢 物 中 , 有 49 种 直 接 从 馏 分 1 中 解 析
得 到 , 18 种 从 馏 分 2 中 得 到 . 馏 分 3 至 馏 分 5 三 个 馏
分 仅 解 析 出 了 7 个 代 谢 物 , 算 原 因 一 方 面 是 这 三 个 馏
分 中 代 谢 物 浓 度 较 低 , 另 一 方 面 代 谢 物 结 构 更 加 复
杂 , 给 解 析 带 来 了 困 难 .
从 馏 分 1 中 解 析 出 来 代 谢 物 质 最 多 的 为 各 种 非
芳 香 组 氨 基 酸 及 其 衍 生 物 , 如 组 氨 酸 、3- 甲 基 组 氨 酸 、
1- 甲 基 组 氨 酸 、β- 丙 氨 酰 -1- 甲 基 组 氨 酸 、 亮 氨 酸 、 异
亮 氨 酸 、 天 门 冬 酰 胺 、 缬 氨 酸 、 丙 胺 酸 、 赖 氨 酸 、 甘
氨 酸 、N, N- 二 甲 基 甘 氨 酸 、 肌 氨 酸 、 肌 氨 酸 酐 、β- 氨 基
异 丁 酸 、 谷 氨 酸 、 苏 氨 酸 、3- 甲 胺 基 丙 氨 酸 、 焦 谷 氨 酸 、
图 4 固 相 萃 取 馏 分 1 的 二 维 J-RES 谱 和 局 部 放 大 图 ( 下 午 尿 液 )
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