本季精選 - 波仕特生物科技股份有限公司

GC Cloning & Amplification Kit市 面 上 已 知 的 non-proofreading DNA Polymerase ( 例 如 Taq, Tfl, Tth 等 ) 會在 PCR 產 物 3’ 端 加 上 一 個 A; 而 市 面 上 常 見 的 TOPO 或 TA 就 是 利 用 此 一特 性 。 但 是 現 在 你 有 更 佳 的 選 擇 ! 許 多 文 獻 指 出 Taq, Tfl, Tth 等 酵 素 不 僅 會在 3’ 端 加 上 一 個 “A”, 有 一 半 的 機 率 則 會 加 上 一 個 ”G” , 根 據 以 上 特 性Lucigen 開 發 一 套 新 的 GC Cloning Kit。 上 圖 表 示 出 相 同 的 PCR 產 物 利 用GC Cloning Kit 及 TOPO TA Cloning Kit, 發 現 GC 可 以 或 更 佳 的 選 殖 效 果 ,這 是 因 為 (1). vector 事 先 去 磷 酸 化 處 理 , 大 幅 減 少 self-ligation clone. (2). 選用 Kanamycin, 有 效 減 少 background clone. (3). Vector backbone 上 有Transcription terminators, 提 高 insert 最 高 穩 定 性 的 環 境 .為 何 要 改 用 GC cloning vector?●●只 需 要 ng 量 的 DNA 即 可 以 進 行 CloningKanamycin-resistant GC Cloning vector, 可 以 避 免 ”satellite” colonies的 問 題●可 獲 得 更 多 正 確 的 insert clone. 明 顯 優 於 TOPO cloning 的 選 殖效 率 。●No Screening Needed - GC Cloning vector 可 以 獲 得 > 99% 的recombinant clone; 相 對 的 , TOPO 或 TA 則 較 常 獲 得 self ligation的 產 物●●●Insert up to 10 kb. 不 管 PCR enzyme 是 proofreader or nonproofreaders,blunt end or sticky end 皆 可 .Ready-to-use vectors: GC cloning vectors 是 pre-digested. 整 組 kit內 已 包 含 實 驗 所 有 的 enzymes and buffers. 如 PCR enzyme,buffer, dNTP, Kinase, Ligase, vector, competent cells and sequenceprimers.操 作 步 驟 簡 單 與 快 速 , 與 TA clone 相 似Schematic diagrams of the GC Cloningvectors. Ori, origin of replication; Kan,Kanamycin resistance gene; plac, lac promoter;lacZ, lacZ ORF; ROP, Repressor ofpriming. Approximate positions of T7 and SP6promoters, and transcription terminators (T)are indicated.● 可 根 據 您 的 需 求 選 擇 不 同 vector( 見 右 圖 )2

PyroPhage 3173 DNA Polymerase- Wild type (WT) & Exo Minus (Exo - ) -RT-PCR application:特 性 : PyroPhage 3173 DNA Polymerase Exo Minus can be used for both Reverse Transcription andsubsequent PCR in a single tube.實 驗 條 件 : Only add DNA polymerase Exo - (5U) in total RT-PCR reaction volume 50 ulRT+PCR將 PyroPhage 3173 DNA Polymerase(Exo Minus) 同 時 當reverse transcription 和 PCR的 酵 素 . Mouse Liver RNA 當template, actin-specific 為primer. 得 到 一 個 很 強 的single band, 位 置 為 283 bp. .Isothermal DNA Synthesis:特 性 : PyroPhage 3173 DNA Polymerase 優 異 的 strand displacing activity. 不 僅 能 針 對 linear, circular,supercoiled DNA, either single - or double strand DNA 進 行 恆 溫 下 的 amplify, 也 能 從 nick 處 開 始 進行 酵 素 活 性 , 執 行 Nick-induced isothermal DNA amplify.訂 購 資 料 :產 品 名 稱 包 裝 Cat. No.500 U 30051-1PyroPhage 3173 DNAPolymerase WT (5U/ul)PyroPhage 3173 DNAPolymerase Exo — (5U/ul)5 x 500 U 30051-210 x 500 U 30051-3500 U 30053-15 x 500 U 30053-210 x 500 U 30053-35

MN 新 世 代 的 陰 離 子 交 換 (anion exchangers) 技 術 — 萃 取 出 來 的 plasmid DNA 純 度 最 高 , 產 量 最 高●●●●●●●●能 節 省 60% 的 實 驗 操 作 的 時 間 . Midi prep 28 min 內 , Maxi prep 34 min 內能 增 加 transfection-grade plasmid DNA 產 量 達 1 倍 ,Midi 產 量 約 250 ug, Maxi 產 量 約 1000 ug因 為 採 用 陰 離 子 交 換 (anion-exchange) 技 術 , 所 以 獲 得 的 plasmid DNA 純 度 最 高column 內 已 附 column filter 用 來 做 lysate clarification: 流 速 快 , 可 一 邊 過 濾 一 邊 進 行 loadingonto the column, 所 以 可 大 幅 節 省 操 作 時 間 .NucleoBond Xtra columns:大 孔 徑 + 小 的 silica resin bed = 提 高 流 速 —> 省 時NucleoBond Xtra Plus kits 多 附 了 NucleoBond Finalizers 用 以 加 快 DNA precipitation 的 速 度—> 省 時改 良 過 的 Silica material 能 大 幅 提 高 DNA biding capacity —> 高 產 量最 有 效 的 buffer 內 容 物 提 高 了 alkaline lysis 的 效 率 和 流 速 —> 在 更 短 的 時 間 內 , 獲 取 更 多 的 DNA技 術 / 原 理樣 式Lysate 澄 清 法Sample 材 料Vector 大 小產 量沉 澱時 間MN Xtra Midi/Maxi 所 萃 取 出 高 品 質 , 高 產 量 的 plasmid DNA, 在 PCR, transfection, 或定 序 上 皆 沒 有 問 題6

MN Xtra Midi/Maxi 與 其 他 品 牌 (I, Q) 的比 較 上 , — MN 能 有 較 高 的 plasmid 產 量 且花 的 時 間 較 少 , 這 是 因 為 MN Xtra Midi/Maxi 不 需 要 透 過 離 心 的 方 法 來 分 離 lysate,一 般 而 言 , 在 萃 取 Midi/Maxi 時 .lysate 要 靠超 高 速 離 心 法 來 分 離 , 在 isopropanol 沉 澱 時或 酒 精 wash 時 都 需 要 靠 超 高 速 低 溫 離 心 來處 理 , 所 以 整 體 操 作 的 時 間 就 會 拉 長 很 多 ,但 ,MN Xtra Midi/Maxi 則 依 靠 著 Filter 和Finalizer ( 類 似 小 飛 碟 ) 完 美 的 組 合 , 全 程 省 去離 心 的 步 驟 , 大 幅 縮 短 實 驗 操 作 時 間 , 並 且DNA 產 量 也 大 幅 度得 以 提 高 .訂 購 資 料 :7

●●●●●●金 屬 螫 化 基 (chelating group) TED, 具 有 一 個 蛋 白 黏 結 位 置鍵 結 穩 定 性 最 高低 金 屬 過 濾 性最 高 等 級 的 蛋 白 純 度與 IMAC matrices 相 比 ,Ni‐TED 鍵 結 的 專 一 性 最 高 , 雜 質 最 少Dry resin, 可 室 溫 下 保 存●●Ready‐to‐use 的 管 柱 包 裝 , 管 內 已 經 填 充 了 dry Protino Ni‐TED ResinBuffers included●●●●●Dry bulk matrix在 高 壓 和 高 流 速 狀 態 下 能 保 持 不 變 形能 應 用 在 Gravity‐flow column charomatography, FPLC 等Protino Ni‐TED Resin 能 填 充 在 空 的 Protino ColumnsProtino Ni‐TED Resin 能 填 充 在 空 的 96‐well Receiver PlatesA: Protino® Ni-TED 是 一 種 silica bead, 具 有 5 爪 金屬 螫 合 者 並 與 Ni 2+ ion 穩 定 牢 靠 鍵 結 著 .B: 一 個 重 組 蛋 白 上 的 polyhistidine-tag 的 Histidine 殘基 與 resin 鍵 結 示 意 圖C: TED 他 是 一 種 強 力 的 五 爪 金 屬 螫 合 者 , 佔 據 著 Ni 2+ion 的 配 位 環 境 內 的 5 個 鍵 結 位 置 , 剩 下 的 Ni 2+ ion的 配 位 位 置 則 是 能 與 protein 做 一 個 最 專 一 性 的 鍵 結 .使 用 Protino Ni-TED and Ni-NTAAgarose 來 純 化 polyhistidinetaggedGFPuv可 見 , Ni-NTA Agarose 在 10 mMand 20 mM imidazole 時 會 釋 放 出 雜質 蛋 白 , 但 Protino Ni-TED 卻 依 然 很 純淨 . 因 此 , 證 明 了 Protino Ni-TED 對 於polyhistidine-tagged proteins 的 專一 性 最 強 , 純 度 最 高 .8

●●●●●金 屬 螫 化 基 (chelating group) IDA, 具 有 3 個 蛋 白 黏 結 位 置高 蛋 白 質 產 量 / 即 使 是 稀 濃 度 的 samples.最 主 要 目 的 是 獲 取 高 蛋 白 質 濃 度高 鍵 結 專 一 性 , 與 其 他 像 是 IMAC 相 比 ,contaminating proteins 鍵 結 更 少Dry resin, 可 室 溫 下 保 存●●Ready‐to‐use 的 管 柱 包 裝 , 管 內 已 經 填 充 了 dry Protino Ni‐IDA ResinBuffers included●●●●●Dry bulk matrix與 Sephadex/Agarose 相 較 , 在 高 壓 和 高 流 速 狀 態 下 能 保 持 不 變 形能 應 用 在 Gravity‐flow column charomatography, FPLC 等Protino Ni‐IDA Resin 能 填 充 在 空 的 Protino ColumnsProtino Ni‐IDA Resin 能 填 充 在 空 的 96‐well Receiver Plates●●Ready‐to‐use 的 管 柱 包 裝 , 管 內 已 經 填 充 了 dry Protino Ni‐IDA ResinBuffers includedA: Protino® Ni-IDA 是 一 種 silica bead, 具 有 3 爪 金 屬 螫合 者 並 與 Ni 2+ ion 鍵 結 著 . 剩 下 的 3 個 配 位 位 置 則 被 水分 子 所 佔 據 並 且 能 與 重 組 蛋 白 上 的 Histidine 殘 基 做 一個 交 換B: 低 密 度 的 IDA ligands 來 自 於 特 殊 的 製 造 過 程 , 而 這 個非 滲 透 的 表 面 則 能 有 效 的 防 止 雜 質 蛋 白 的 吸 附 . 也 因此 , Protino Ni-IDA 才 有 高 純 度 的 target protein使 用 Protino Ni-IDA and Ni-IDAAgarose 來 純 化 polyhistidinetaggedGFPuv可 見 , Ni-NTA Agarose 在 10 mM 到100 mM imidazole 時 會 釋 放 出 大 量 的 雜質 蛋 白 , 但 Protino Ni-TED 卻 依 然 很 純淨 . 因 此 , 證 明 了 Protino Ni-IDA 對 於polyhistidine-tagged proteins 的 純 度比 目 前 市 售 的 方 式 來 的 高 .9

一 般 而 言 , Ni-TED 得 到 的 蛋 白 質 純 度 最 高 ; Ni-IDA 得 到 的 蛋 白 質 的 量 最 多 !Q&A list1. 何 時 要 選 用 Ni-TED? 高 表 現 的 蛋 白 , 大 量 的 sample, 或 想 要 純 化 出 最 高 純 度 的 蛋 白2. 何 時 要 選 用 Ni-IDA? 較 低 表 現 的 蛋 白 , 已 被 稀 釋 的 sample, 小 量 的 sample, 或 想 要 得 到較 高 產 量 的 蛋 白3. Sample 來 源 是 E.coli, Protino Ni-TED 是 最 好 的 選 擇或 高 表 現 的 蛋 白 , 大 量 的sample, 哪 種 Protinomaterial 最 好 ?4. Sample 來 源 是 insect cells, Protino Ni-IDA 是 最 好 的 選 擇或 較 低 表 現 的 蛋 白 , 小 量 的sample. 哪 種 Protino material最 好 ?5. Protino Ni-TED 純 化 出 的 蛋 白 由 於 是 只 有 1 個 蛋 白 與 Ni-TED 呈 現 極 為 專 一 的 鍵 結 , 所 以 純 度 最純 度 如 何 ?高 , 尤 其 比 Protino Ni-IDA, Ni-NTA, Ni-IDA Agarose 來 的 高6. Protino Ni-IDA 純 化 出 的 蛋 白 由 與 較 低 的 IDA Ligand Density, 所 以 在 純 化 His Taq Proteins 純度 如 何 ?上 的 純 度 仍 比 Ni-NTA, Ni-IDA Agarose 來 的 高7. Silica-based 與 Sephadex/Agarose Dry material, 可 在 室 溫 下 保 存 , 在 高 流 速 下 , 並 不 會 收 縮 或 腫相 比 下 , 優 點 在 哪 裡 ?8. Protino 能 reuse 嗎 ? 幾 次 ?a. Protino Ni-TED: 以 LEW buffer wash 後 , 可 重 複 使 用 3-5 次 , 每 次 會 些 微 的 減 少 其 capacityb. Protino Ni-IDA : 使 用 後 , 若 使 用 LEW buffer wash, 則 capacity 會 有 較 大 的 減 少 , 但 , 若 使 用特 殊 的 配 方 ( 請 見 操 作 手 冊 Section 7), 則 可 重 複 使 用 3-5 次 .9. 能 容 許 Urea 嗎 ? 可 以 , up to 8M Urea訂 購 資 訊 :10

RNA Keeper Tissue Sample Storage Reagent●●組 織 樣 品 保 存 液適 合 動 物 組 織 , 植 物 組 織 , culture cell, bacterial 使 用● 使 用 RNA Keeper, 樣 品 可 儲 存 在 37 o C: 一 天 , 室 溫 : 一 週 , 4 o C: 一 個 月 , -20 o C: 永 久 保 存 ,且 抽 出 來 的 RNA quality 就 像 樣 品 儲 存 在 液 態 氮 或 -70 o C 冰 箱 一 般● RNA Keeper Tissue Sample Storage Reagent 為 non-toxin reagent, 您 可 安 心 使 用 !產 品 名 稱 產 品 編 號 包 裝RNA Keeper TissueSample Storage ReagentPT-R485100 ml / 500 mlRNA Armor Reagent●●●●RNA 保 存 液 - 去 除 溶 液 中 的 RNase, 可 取 代 DEPCRNA Armor Reagent 是 由 non-toxic reagent 組 成 , 用 來 儲 存 由 樣 品 中 純 化 出 的 RNA 並避 免 RNase 的 汙 染使 用 方 法 簡 單 , 只 需 簡 單 的 加 熱 步 驟 及 可 去 除 RNA solution 中 的 RNase經 RNA Armor 處 理 的 RNA 可 後 續 應 用 在 各 種 實 驗Ex: Northern Blot, cDNA synthesis and RT-PCR產 品 名 稱 產 品 編 號 包 裝RNA Armor Reagent PT-R486 1 ml / 5 mlRNase/DNase Terminator●●●●RNase/DNase 去 除 劑RNase/DNase Terminator 為 non-alkaline, non-corrosive and non-carcinogenic cleaningsolution 用 來 對 抗 RNase 的 汙 染RNase/DNase Terminator 內 含 surfactant agent 可 破 壞 RNase and DNase activityRNase/DNase Terminator is ready-to-use 可 直 接 用 來 移 除 桌 面 或 是 離 心 管 的 RNase andDNase .產 品 名 稱 產 品 編 號 包 裝RNase/DNase Terminator PT-R475 100 ml / 500 ml11

Fast PCR ExpertTAQXpedite PCR System●●●●Increased throughput, 較 一 般 PCR 的 速 度 快 3~4 倍High fidelity: MasterMixes 內 含 PFU 讓 準 確 度 大 大 提 升Kit 內 附 兩 種 MasterMixes1.universal MasterMixes for routine PCR 2.difficult/long MasterMixes for GC rich template應 用 : FAST PCR 、Amplify up to 80% GC content 、Fast PCR for amplicons longer than30 kb and FAST multiplex PCRFig. 1. Amplification using lambda DNA as a startingtemplate for a 539-bp amplicon. Different starting concentrationsof template were used in a 16-minute reaction.Lanes M, kilobase ladder; lane 2, 100 pg; lane 3, 10 pg; lane4, 1 pg.Table 1. Total amplification times for TAQXpedite and standard PCRprotocols.操 作 方 法 :↓Fig. 2. Amplification of various sequence lengths using theTAQXpedite System. Panel A: lane M, DNA size marker; lane 1,20-kb lambda sequence. Panel B: lane 1, DNA size marker; lanes 1-3, 30-kb fosmid sequences amplified from three different clones.12產 品 名 稱 產 品 編 號 包 裝 (25 ul reaction)TAQXpeditePCR SystemTXP78200 /TXP78001200 rxn /1000 rxn

Protein Crystallization 最 強 選 擇生 物 體 中 的 蛋 白 質 在 剛 製 造 出 來 , 尚 未 經 由 摺 疊 聚 合 等 步 驟 , 即 尚 未 擁 有 立 體 結 構 時是 沒 有 生 理 活 性 的 , 所 以 想 了 解 蛋 白 質 的 功 能 與 活 性 , 就 必 須 先 分 析 其 立 體 結 構 , 也因 此 , 若 蛋 白 質 的 結 構 有 錯 , 就 會 導 致 功 能 異 常 或 失 去 功 能 。 而 研 究 蛋 白 質 結 構 很 重要 的 一 個 條 件 就 是 Sample 的 製 備 , 若 是 不 可 結 晶 , 則 鐵 定 不 能 進 行 X 光 繞 射 。 蛋 白質 要 結 晶 , 首 先 必 須 要 先 大 量 製 備 我 們 所 要 結 晶 的 蛋 白 質 , 因 此 會 用 載 體 將 記 載 蛋 白質 序 列 的 核 酸 輸 入 到 生 產 蛋 白 質 的 菌 體 中 , 如 此 便 可 大 量 製 造 出 純 度 高 的 蛋 白 質 , 而後 用 氣 相 擴 散 法 將 此 蛋 白 質 結 晶 出 來 。 氣 相 擴 散 法 結 晶 (Vapor DiffusionMethod), 也 就 是 將 含 有 高 濃 度 的蛋 白 質 溶 液 加 入 適 當 的 溶 劑 , 慢 慢 降 低 蛋 白 質 的 溶 解 度 , 使 其 接 近 自 發 性 的 沉 澱 狀 態 時 , 蛋 白 質 分 子 將在 整 齊 的 堆 疊 下 形 成 晶 體 。WizardTM I matrix in tubesWizardTM I & II matrices in a 96-wellblock plate.Emerald 提 供 您 各 式 不 同 的結 晶 篩 選 條 件 試 劑 組 , 內 含沉 澱 劑 、buffer、salt 讓 您輕 鬆 篩 選 結 晶 條 件 , 由 於 試劑 眾 多 , 歡 迎 您 向 各 區 業 務索 取 更 詳 細 資 料 !CompactClover PlatesCompactClover PlatesCompactClover Plates 操 作 流 程 :產 品 名 稱 產 品 編 號 包 裝CompactClover Plates EBS-XPT 50 / case15

限 開 發 票 及 一 次 取 貨優 惠 期 限 : 即 日 起 至 2008 十 二 月 底 止» 特 惠 活 動 1做 PCR 也 要 A 好 康現 在 購 買 EconoTaq Plus Green Master Mix特 價 再 送 好 禮 三 選 一500 rxns(30033-1)可 選 擇 隨 身 碟 8G or7-11 禮 卷 1000 元 or波 仕 特 產 品 1000 元原 價 6880特 價 58001000 rxns(30033-2):可 選 擇 隨 身 碟 16G or7-11 禮 卷 1500 元原 價 11550特 價 10550產 品 名 稱 包 裝 編 號 定 價EconoTaq PLUS Green 2X Master Mix500 rxns (10 tube, each 1,250 ul) 30033-1 $ 6,8801000 rxns (20 tube, each 1,250 ul) 30033-2 $ 11,550» 特 惠 活 動 2下 列 精 選 產 品可 享 折 扣8 折20% OFF產 品 名 稱 包 裝 編 號 定 價EconoTaq DNA Polymerase (with Mg++) 1000U 30031-1 $4,900PyroPhage 3173 DNA Polymerase, Wild Type 500U 30051-1 $5,340PyroPhage 3173 DNA Polymerase, Exo Minus 500U 30053-1 $5,340» 特 惠 活 動 3GC cloning Kits 買 一 送 一( 可 選 等 值 GC cloning Kits 或EconoTaq 500rxns #30033-1)套 組 包 含 細 胞 包 裝 編 號 定 價GC Cloning & Amplification Kit(pSMART® GC HK)屬 於 High copy vector, 不 需 藍 白 篩 選 , 選 殖 效 率 >90%with 10G Chemically Competent Cells 10rxns 40733-1 $8,030with 10G ELITE Electrocompetent Cells 10rxns 40731-1 $9,960with 10G SUPREME Electrocompetent Cells 10rxns 40732-1 $11,280Low copy vector, 適 用 大 於 8Kb insertGC Cloning & Amplification Kit(pSMARTGC LK)GC Cloning & Amplification Kit(pGC Blue)with 10G Chemically Competent Cells 10rxns 40738-1 $8,030with 10G ELITE Electrocompetent Cells 10rxns 40736-1 $9,960with 10G SUPREME Electrocompetent Cells 10rxns 40737-1 $11,280希 望 進 行 藍 白 篩 選 的 screenwith 10G Chemically Competent Cells 10rxns 40743-1 $8,030with 10G ELITE Electrocompetent Cells 10rxns 40742-1 $9,960with 10G SUPREME Electrocompetent Cells 10rxns 40741-1 $11,280