Model 175 Tube Cell Instruction Manual - Bio-Rad

Model 175Tube CellInstructionManualCatalog Number165-1980For Technical ServiceCall Your Local Bio-Rad Office orin the U.S. Call 1-800-4BIORAD(1-800-424-6723)

NoteTo insure best performance from the Model 175 Tube Cell, become fully acquainted with theseoperating instructions before using the cell to separate samples. Then assemble and disassemble the cellcompletely without casting a gel. After these preliminary steps, you should be ready to cast and run agel.Bio-Rad also recommends that all Model 175 Tube Cell components and accessories be cleanedwith a suitable laboratory cleaner (such as Bio-Rad Cleaning Concentrate, catalog number161-0722) and rinsed thoroughly with distilled water, before use.ModelCatalog No.Date of DeliveryWarranty PeriodSerial No.Invoice No.Purchase Order No.WarrantyBio-Rad Laboratories warrants the Model 175 Tube Cell against defects in materials and workmanshipfor 1 year. If any defects occur in the instrument during this warranty period,Bio-Rad Laboratories will repair or replace the defective parts free. The following defects, however,are specifically excluded:1. Defects caused by improper operation.2. Repair or modification done by anyone other than Bio-Rad Laboratories or an authorizedagent.3. Use of fittings or other spare parts supplied by anyone other than Bio-Rad Laboratories.4. Damage caused by accident or misuse.5. Damage caused by disaster.6. Corrosion due to use of improper solvent or sample.For any inquiry or request for repair service, contact Bio-Rad Laboratories after confirming themodel and serial number of your instrument. Note: Clean all components of the tube cell with suitablelaboratory cleaner (such as Bio-Rad's Cleaning Concentrate, catalog number 161-0722), and rinse thoroughlywith distilled water, before use.i

Table of ContentsSection 1 Introduction..................................................................................................11.1 General Information ...................................................................................................11.2 Specifications .............................................................................................................11.3 Safety..........................................................................................................................2Section 2 General Operating Instructions .................................................................22.1 Preparation of Gels.....................................................................................................22.2 Tube Placement ..........................................................................................................32.3 Lower Buffer Reservoir Preparation..........................................................................32.4 Sample Preparation and Application .........................................................................32.5 Sample Electrophoresis..............................................................................................42.6 Extruding Tube Gels ..................................................................................................4Section 3 Maintenance of Equipment.........................................................................43.1 Model 175 Cell Chamber, Stoppers, Grommets .......................................................43.2 Glass Tubes ................................................................................................................4Section 4 Protocols........................................................................................................54.1 Reagents and Gel Preparation for SDS-PAGE Slab Gels.........................................54.2 Separating Gel Preparation ........................................................................................64.3 Stacking Gel Preparation............................................................................................74.4 Running Conditions ...................................................................................................74.5 2-D Stock Solutions ...................................................................................................84.6 Preparation of First Dimension IEF Gels ..................................................................94.7 Running Conditions for Capillary (1.0 and 1.5 mm) IEF Tube Gels........................9Section 5 Equipment and Accessories ........................................................................95.1 Cell..............................................................................................................................95.2 Accessories.................................................................................................................95.3 Glass Tubes ..............................................................................................................105.4 Electrophoresis Chemicals.......................................................................................105.5 Power Supplies.........................................................................................................11Section 6 References ...................................................................................................126.1 General References ..................................................................................................126.2 Native Gel Systems References...............................................................................126.3 SDS Gel Systems References ..................................................................................126.4 Urea Gel Systems References..................................................................................126.5 Two-Dimensional IEF / SDS-PAGE Gel Systems References ..............................12Page

iiiO2@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KW2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KW2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M??I@MgI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(YI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y??I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O@?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XJ@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(YO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@HW2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5??O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H??W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@HJ@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5??W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H??7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ J@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ 7@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@(Y? V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?@@@@@@@@@@@@@@@@? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?heO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?hW2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?h7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?g?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@h?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5h?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Yh?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?h?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@heJ@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)KJ@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@heN@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@W@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@UI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??O@K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1f?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?fV4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)XgI'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?f?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?hI'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@h?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)Xh?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?hf?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5h?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?hV4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@Hh?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)XhfI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@?heN@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I@?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@?heJ@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6Khf?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M N@@@@@@@@@@@@@@@@@@?he@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KhfV'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? J@@@@@@@@@@@@@@@@@@?heN@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?e?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?eV@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@@@@@@@@@@@@@L?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@@@@@@@@@@@@@1?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?O2@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??W2@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?O&@@@@@@@@@@@@@0M? ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@Lhe?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V+MI'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@g?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?O&@@@@@@@@@@@@@@0M ?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@@@@(M? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)Xf?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L I4@@@@@@@@@@@@@@@@)X ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??@@@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?e?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@)K? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)KO2@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)Xe?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@@@@@@6K? V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1e?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@@6K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@e?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?V4@@@@@@@@@@@@@@6X? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XO2@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I4@@@@@@@@@)K I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W2@@@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?I4@@@@@@@@@6K ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?O&@@@@@@@@@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@@@6K ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??W2@@@@@@@@@@@@@@0Y? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H V4@@@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XO&@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??W2@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? I4@@@@@@@@@@@6X? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XW&@@@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? I'@@@@@@@@)K I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??W&@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?V'@@@@@@@@@6X ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O&@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? V4@@@@@@@@@)K? V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@W2@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@6K? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O&@@@@@@@@@(M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I'@@@@@@@6K? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W2@@@@@@@@@@@@0Y? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?V4@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XW&@@@@@@@@@(M? ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??W&@@@@@@@@@(Y @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?V'@@@@@@@@6X? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O&@@@@@@@@@0Y? @@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? V4@@@@@@@@)K V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W2@@@@@@@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@6X? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@0M @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L I'@@@@@@)K I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?W2@@@@@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 ?V4@@@@@@@@@6X ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W&@@@@@@@(M? ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 I'@@@@@@@1 ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W&@@@@@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V'@@@@@@@ V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?O&@@@@@@@0Y? ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V'@@@@@@@6K? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)KO2@@@@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?V4@@@@@@@@@6X V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O2@@@@@@@(M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I'@@@@@@)K? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@O2@@@@@@@@0Y @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? V4@@@@@@@6K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?@@@@@@@@(M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I'@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?J@@@@@@@(Y ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? V'@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?O&@@@@@@(Y? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V'@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L V4@@@@@@6X ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@0M? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@)K? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W2@@@@@(M? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H I4@@@@@6X? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??O&@@@@@@H N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@)X I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?3@@@@@1 ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1@@@@@@(M J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V'@@@@@ V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W2@@@@@@0Y? 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? V4@@@@@@6X ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XO&@@@@@(M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? I'@@@@@)X? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?W2@@@@@@0Y @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?V4@@@@@)X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??W&@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@)X? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??7@@@@@5 @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V'@@@@)X ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?@@@@@(Y @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?V'@@@@)K? V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?W2@@@@@0Y? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? V4@@@@@6X? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?O&@@@@(M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@)X I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W2@@@@@(Y @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?@@@@@@)K? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?7@@@@@(Y? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@6X? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?J@@@@@@H @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? ?V'@@@@@1? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W&@@@@@5? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? N@@@@@@L V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?W&@@@@@0Y? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@)X? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??O&@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@)X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W2@@@@(M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?3@@@@@)K? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X??7@@@@@H @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V'@@@@@@6X? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1??@@@@@5? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L N@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@H? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@L I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@ ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H I'@@@@@1 ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@0MJ@@@@(M? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V'@@@@@L? I'@@@@@@@@@@?O&@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? N@@@@@)X ?V4@@@@@@@@@?W2@@@@(Y? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?3@@@@@1 ?@@@@@@@L??7@@@@@H ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 ?N@@@@@@ ?3@@@@@@1??@@@@@5? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ 3@@@@@ ?V'@@@@@@?J@@@@(Y? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 V4@@@@@6X? V4@@@@@@6X?W&@@@@H ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@)X ?I'@@@@1W&@@@@@? ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@1 V4@@@@?W&@@@(M 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?V'@@@@@L? ?I4@?7@@@@H? N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? N@@@@@)X?@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?@@@@@@1?@@@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@J@@@@@H? J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V'@@@@@7@@@@@ 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 V4@@@@@6X??J@@@@@5 @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@1??7@@@@@H @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@L?@@@@@5? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@1J@@@@(Y? 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@?W&@@@(Y N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V'@@@@@L?W&@@@@H? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ N@@@@@)X7@@@@@ J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@1?J@@@@@5 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@?7@@@@(Y @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@L??@@@@@H? 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?N@@@@@@)XJ@@@@@ N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ 3@@@@@@1?W&@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 N@@@@@@@L??7@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?@@@@@@@1??@@@@@@H ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?@@@@@@@@LJ@@@@@5? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?@@@@@@@@1?W&@@@@(Y? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 J@@@@@@@@@?7@@@@(Y ?O2@@@@@@@@@@@6Khe?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y 7@@@@@@@@@J@@@@@H? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?eV4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? @@@@@@@@@@7@@@@@ O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?fI'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? @@@@@@@@@@L??J@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?f?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y @@@@@@@@@@1??7@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?g?I4@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? @@@@@@@@@@@??@@@@@@@ W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?heI4@@@@@@@@@@0M O@?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? @@@@@@@@@@@LJ@@@@@@@ ?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? @@@@@@@@@@@17@@@@@@@ ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X ?J@@@@@@@@@@@5@@@@@@@@L? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X? ?7@@@@(M?@@@@H?J@@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X ?@@@@@H??@@@@??7@@@@@@@@@? J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? O&@@@@@@@@@@@@@? @@@@@@@@@@@)K? ?@@@@@e?3@@@??@@@@@@@@@@L ?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X? ?@@@@@e?V4@@??@@@@@@@@@@)X? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? J@@@@@@@f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?gI'@@@@)X ?@@@@@?@@@@@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MheI@?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@e?V'@@@@1 ?@@@@@?@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?7@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@fN@@@@@ ?@@@@@?@@@@@@@@@@@@L ?3@@@@@@@@@@@@ N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?@MI@MfI4@@@@@@@@@6X??@@@@@ J@@@@@e?W&??@@@@@(M?@@@@1 ?N@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@?@@@@@@@@@@@@@0M I4@@@@@@)K?@@@@@ 7@@@@5eW&@L?@@@@@H??@@@@@ 3@@@@@@@@@ J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@0M? ?I4@@@@@@@@@@@ ?J@@@@(Ye7@@1?@@@@@e?@@@@@ N@@@@@@@@@ ?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@ ?7@@@@H??J@@@@?@@@@@e?3@@@@ ?@@@@@@@@@@6K? ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@ ?@@@@5e?7@@@@?@@@@@L??N@@@@L? ?3@@@@@@@@@@@@@@6K O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@ ?@@@@@@@@@ ?@@@(Ye?@@@@@?@@@@@1?e@@@@1? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?@K?gO@?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?@@@@@@@ ?@@@@@@@@@ ?@@@H?e?@@@@@?@@@@@@Le3@@@@L V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@ ?@@@@@@@@5 J@@@f?@@@@@?3@@@@@1eN@@@@1 ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?V'@@@@@@6K? O2@@@@@@@@@@0Y ?W&@@@f?@@@@5?N@@@@@@e?3@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? V'@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@(M? W&@@@5fJ@@@@H@@@@@@e?V'@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y 7@@@@He?W&@@@@?3@@@@@fN@@@L? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(MfI'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M ?J@@@@5?e?7@@@@@?N@@@@@L?e?@@@)X ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@0Y?f?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? ?7@@@@H?e?@@@@@@??@@@@@)Xe?@@@@)X? ?I4@@0?40MhfN@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@f?@@@@@5??@@@@@@1e?3@@@@)X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? J@@@@@fJ@@@@@H??3@@@@@@e?V'@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@0M? ?W&@@@@5e?W&@@@@@?V'@@@@@fN@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@(YeW&@@@@@@L?N@@@@@L?e?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@H?e7@@@@@@@1??3@@@@)Xe?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?@@@@5f@@@@@@@@@??V'@@@@)X??3@@@@ ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?@@@(Ye?J@@@@@@@@@?N@@@@@)X?V4@@@@@ ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? W2@@@@H?e?7@@@@@@@@@??@@@@@@1e?I'@@@ 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? 7@@@@5f?@@@@@@@@@@??3@@@@@@fN@@@@@ N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? ?J@@@@(Yf?@@@@@@@@@@??N@@@@@@f?@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@H?fJ@@@@@@@@@@?@@@@@@f?3@@@@1? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?@@@@@g7@@@@@@@@@@?@@@@@@L?e?N@@@@@L ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y J@@@@5f?J@@@@@@@@@@@?@@@@@@)Xf3@@@@1 V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? ?W&@@@(Yf?7@@@@@@@@@@@?@@@@@@@1fV'@@@@ ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? W&@@@@H?f?@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@L?e?V'@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y ?W&@@@@@gJ@@@@0Y@@@@@@?@@@@@@@@)XfV'@@@@ ?I4@@@@@@0M? ?7@@@@g?W&@@@e?@@@@@@?@@@@@@@@@1f?V'@@@L?J@@@@@gW&@@@@e?@@@@@@?@@@@@@@@@@L?fN@@@)K?W&@@@@5f?W&@@@@5e?@@@@@@?@@@@@@@@@@)Xf?3@@@@6X?7@@@@(Yf?7@@@@(Ye?@@@@@@?@@@@@@@@@@@1f?V'@@@@)X?J@@@@(Y?fJ@@@@@H?e?@@@@@@?@@@@@@@@@@@@L?fN@@@@@)X?W&@@@(Yg7@@@@5f?@@@@@@?@@@@@@?@@@@@1?f?3@@@@@1?7@@@(Y?f?J@@@@(Yf?@@@@@@?@@@@@@?@@@@@@Lf?V'@@@@@?@@@(Yg?7@@@@H?f?@@@@@@?@@@@@@?3@@@@@1gV'@@@@O2@@@@H?gJ@@@@5g?@@@@@@?3@@@@@?V4@@@@@L?f?V'@@@@6X??@@@@@@5g?W&@@@(Yg?@@@@@@LN@@@@@e?I'@@@)KgV'@@@@)X?@@@@@(YgO&@@@(Y?g?@@@@@@@?@@@@@fV'@@@@6Xf?V'@@@@)X??@@@@@@(Y?f?@@@@@(Yh?@@@@@@HJ@@@@@f?N@@@@@1gN@@@@@)X?@@@@@(Yg?@@@@@H?h?@@@@@@L7@@@@@g3@@@@@g?3@@@@@1J@@@@(Y?gJ@@@@@he?@@@@@@@@@@@@@gN@@@@@L?f?V'@@@@@?O&@@@(Yg?W&@@@@5he?@@@@@@?@@@@@@g?3@@@@)XgV4@@@@@6X??W2@@@@(Y?g?7@@@@(Yhe?@@@@@@@@@@@@@g?V'@@@@)X?gI'@@@@)XW&@@@@(Yh?@@@@(Y?he?3@@@@@H@@@@@@hV4@@@@)Kg?V'@@@@)X??W&@@@@(Y?g@@@@@@(Yhf?N@@@@@?@@@@@@he?@@@@@6XgN@@@@@)X O&@@@@(Yg?J@@@@@(Y? @@@@@?3@@@@@he?@@@@@@1g?3@@@@@)X? W2@@@@@0Y?g?7@@@@(Y ?J@@@@@?N@@@@@he?3@@@@@@L?f?V'@@@@@)K ?W&@@@@@heJ@@@@@H? ?7@@@@@LJ@@@@@he?V'@@@@@)XgV4@@@@@@6X W&@@@@@5h?W&@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@hfV'@@@@@1h?I'@@@@)K? ?W&@@@@@(YhO&@@@(M? ?@@@@@@?N@@@@@hf?V'@@@@@heV'@@@@@@ O&@@@@@0Y?g@@@@@@(Y ?@@@@@@1?@@@@@ V'@@@@@6X?g?N@@@@@@ W2@@@@@?h?J@@@@@(Y? ?@@@@@@@?@@@@@ ?V'@@@@@)Xh@@@@@@@6X? ?W&@@@@@5?h?7@@@@@H ?3@@@@@@?@@@@@ N@@@@@@)X?g?I'@@@@@)X W&@@@@@(Y?h?@@@@@5? @@@@@@?@@@@@ ?@@@@@@@)XhV4@@@@@)K? ?W&@@@@@(Yh?@@@@@@(Y? ?7@@@@@5?@@@@@ I'@@@@@)K?h?@@@@@@6K? O&@@@@@(Y?h?@@@@@0Y ?@@@@@@??@@@@@ ?V4@@@@@@6X?g?@@@@@@@@6X? ?W2@@@@@@@0Yg?W2@@@@@0M ?@@@@@@1?@@@@@ ?I'@@@@@)Xhe?@@@@@)X W&@@@@@(M?h?7@@@@@? ?@@@@@@@?@@@@5 N@@@@@@1he?3@@@@@)X? ?W&@@@@@(YheJ@@@@@5? ?@@@@@@5?@@@@? ?3@@@@@@he?V'@@@@@)K O&@@@@@(Y?h?O&@@@@(Y? ?@@@@@@H?@@@@1 ?V'@@@@@@6X?hV4@@@@@@6K ?W2@@@@@@@0Yh?W2@@@@@0Y ?3@@@@@??@@@@@ V'@@@@@@)KheI4@@@@@@6K O&@@@@@(M?heO&@@@@(M @@@@@??@@@@@ ?V4@@@@@@@@@heI4@@@@@@@6X? O2@@@@@@0Yh?W2@@@@@@0Y? ?@@@@@@??@@@@@ I'@@@@@@L?he?@@@@@@@)K W2@@@@@@(Mhe?7@@@@@@ ?N@@@@@??@@@@@ ?N@@@@@@)Xhe?3@@@@@@@@@? ?W&@@@@@@(Y?heJ@@@@@@5 ?J@@@@@??@@@@@ 3@@@@@@)K?h?V4@@@@@@@@? O&@@@@@@(Yhe?O&@@@@@(Y ?7@@@@@L?@@@@@ V4@@@@@@@@6Xh?I4@@@@@@@@6X? W2@@@@@@@0Y?hW2@@@@@@@0Y? ?@@@@@@@?@@@@@ I'@@@@@@@)K?heI'@@@@@@)K ?O&@@@@@@(M?h?W&@@@@@(M ?@@@@@@??@@@@@ ?V4@@@@@@@@@he?V4@@@@@@@@@@? O2@@@@@@@@0YheO&@@@@@(Y? ?@@@@@@1?@@@@@ ?@@@@@@@ I'@@@@@@@L W2@@@@@@@(M?heO2@@@@@@(Y ?3@@@@@@?@@@@@ ?3@@@@@@@6X?he?V'@@@@@@)X? ?W&@@@@@@@(Yhe?@@@@@@@@0Y? @@@@@5?@@@@@ ?V4@@@@@@@)KhfV'@@@@@@)K O&@@@@@@@(Y?he?@@@@@@(M? ?7@@@@@H?@@@@@ ?I4@@@@@@@6Xhe?V4@@@@@@@@@6X ?W2@@@@@@@@@0YheO2@@@@@@0Y ?3@@@@@L?@@@@@ ?I'@@@@@@)K?hfI4@@@@@@@)K? O&@@@@@@(MhfO2@@@@@@0M ?N@@@@@1?@@@@@ V4@@@@@@@@@6X?heI4@@@@@@@@@6K? ?W2@@@@@@@@@@0Y?he@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ ?I'@@@@@@@)Xhf?I'@@@@@@@@@ O&@@@@@@@(M?hf?J@@@@@@ @@@@@@?@@@@@ V'@@@@@@@)K?hfV'@@@@@@@@ W2@@@@@@@@(Y O&@@@@@5 @@@@@@?@@@@@ ?V'@@@@@@@@6K?he?V'@@@@@@@@6K? ?O&@@@@@@@@(Y?hfO2@@@@@@(Y @@@@@@?@@@@@ V4@@@@@@@@@@6XheV4@@@@@@@@@@6X O2@@@@@@@@@@0YhfO2@@@@@@@0Y? @@@@@5?@@@@@ ?@@@@@@@@)K?hfI'@@@@@@@)K? ?O2@@@@@@@@@ O2@@@@@@(M @@@@@H?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@he?V4@@@@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@@@@hf?O2@@@@@@@@0Y? @@@@@L?@@@@@ ?I'@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@ ?W2@@@@@@@ @@@@@1?@@@@@ V4@@@@@@@@@6X?hf?@@@@@@@@@@@6X W2@@@@@@@@@@ O&@@@@@@@@ @@@@@@?@@@@@ I'@@@@@@@@)K I'@@@@@@@@@)K? ?O&@@@@@@@@(M? O2@@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@6X?he?V4@@@@@@@@@@@@@6X W2@@@@@@@@@@@@0Yhf?W2@@@@@@@@@0Y @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@)K ?I4@@@@@@@@@@)K? ?O&@@@@@@@@@0M O&@@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@hf?I4@@@@@@@@@@@@@6X O2@@@@@@@@@@@0M?hf?W2@@@@@@@@@@@0Y @@@@@@?@@@@@ I'@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@)K? O2@@@@@@@@@@0M W&@@@@@@@@(M @@@@@@?@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@ O2@@@@@@@@@@(M ?O&@@@@@@@@0Y? @@@@@@?@@@@@ ?I'@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@@@ O2@@@@@@@@@@@0Y? ?O2@@@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@6K V4@@@@@@@@@@@@@6K? O2@@@@@@@@@@@@@0M?hf?O2@@@@@@@@@@@0Y @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@6K ?I4@@@@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@@(M ?O2@@@@@@@@@(M @@@@@5?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@6X ?I4@@@@@@@@@@@@@@@6X O2@@@@@@@@@@@@@@@0Y? O2@@@@@@@@@@@0Y? @@@@@??@@@@@ ?I'@@@@@@@@@@)K? I4@@@@@@@@@@@)X? O2@@@@@@@@@@@(M? O2@@@@@@@@(M ?J@@@@@@?@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@6X I'@@@@@@@@@@)K O2@@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@(Y? ?7@@@@@??@@@@@ I'@@@@@@@@@@@)K? ?V4@@@@@@@@@@@@6K? O2@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@0Y ?3@@@@@1?@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@0M? O2@@@@@@@@@@@@0M ?N@@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@6X ?O2@@@@@@@@@@@@(M? O2@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@6X? I4@@@@@@@@@@@1eO2@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y ?O2@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@)K ?I'@@@@@@@?@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?O2@@@@@@@@@@(M? ?J@@@@@@?@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@6K V4@@@@@5?@@@@@@@@@6X ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@0M? W2@@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@6K ?I(Y?@@@@@@@@@@)K? O&@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?O&@@@@@@@@@@@0M ?N@@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@6X I4@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? O2@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@)K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? O2@@@@@@@@@@@@@@@@0Y @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@6X? ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?O2@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@)K V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?W2@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? O&@@@@@@@@@@@@(M @@@@@@?@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?@K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?O26?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K? I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?V+MeI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6Xe?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@,e?@@@@@@@@@@@0M ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ I@?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? I@?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0YfI4@0M? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?I@MeI4@@@@@@@@@@@@@@0MI40M ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y? @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?@K? O@K??O26?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI@?(Y @@@@@5?@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@??@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?4@@0M @@@@@1?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@?@@@@@?J@@@@@@?@@@@@?7@@@@@@?@@@@@?@@@@@@@?@@@@@?@@@@@@@?@@@@@?@@@@@@5?@@@@@?@@@@@@H?@@@@@?@@@@@@??@@@@@?@@@@@@??@@@@@?@@@@@5??@@@@@?@@@@@H??@@@@@?@@@@@?@@@@@?@@@@@?@@@@@J@@@@@?@@@@@7@@@@5?@@@@@?J@@@@@H?@@@@@?7@@@@5??@@@@@?@@@@@H??@@@@@?@@@@@?@@@@@?@@@@@?@@@@@J@@@@@?@@@@@7@@@@5?@@@@@?J@@@@(Y?@@@@@?7@@@@H??@@@@@?@@@@@?@@@@@?@@@@@?@@@@@J@@@@@?@@@@@7@@@@5?@@@@@L??J@@@@@H?@@@@@)X?7@@@@5??@@@@@@1?@@@@@H??@@@@@@@?@@@@5?@@@@@@@?@@@(YI'@@@@J@@@H??V'@@@L??W&@@@N@@@1?W&@@@5?@@@@?7@@@@H?3@@@L@@@@5??N@@@)X??J@@@@H?3@@@)X?7@@@@N@@@@1J@@@@@?@@@@@?W&@@@@5?@@@@@?7@@@@(Y?@@@@@L??@@@@@H??3@@@@)XJ@@@@5?V'@@@@1?W&@@@(YV'@@@@L?W&@@@(Y??V'@@@)X?W&@@@@HN@@@@)X??7@@@@5??@@@@@1??@@@@@H??3@@@@@LJ@@@@5?V'@@@@1?W&@@@@HN@@@@@W&@@@@5??3@@@@@@?W&@@@@0Y??N@@@@@@W&@@@@3@@@@@L?7@@@@@V'@@@@)K?J@@@@@5?V'@@@@@6XW&@@@@(YV'@@@@@1?W&@@@@@H??V'@@@@@W&@@@@@@N@@@@@@@?W&@@@@@?@@@@@@@W&@@@@@@?3@@@@@@L??W&@@@@@?V4@@@@@)K?7@@@@@5?I'@@@@@6X?@@@@@(YV'@@@@@1W2@@@@@(Y??V'@@@@@L??W&@@@@@(YN@@@@@)XW&@@@@@0Y??@@@@@@)X??W&@@@@@?@@@@@@@)XW&@@@@@5I'@@@@@)K??W&@@@@@(Y?V4@@@@@@6X?W&@@@@@0Y?@@@@@@)X?W&@@@@@3@@@@@@1W&@@@@@5N@@@@@@@?O&@@@@@(Y?@@@@@@@@@6X?W2@@@@@@0Y?I4@@@@@@@)X?O&@@@@@(M?I'@@@@@@)X?W2@@@@@@@(Y?V'@@@@@@1?7@@@@@@@0Y?N@@@@@@@J@@@@@@@?3@@@@@@@6K??O&@@@@@@5?V4@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@0YI'@@@@@@@6K??O2@@@@@@@(M?V4@@@@@@@@6X??W2@@@@@@@@0Y?@@@@@@@@)X?7@@@@@@@(M?@@@@@@@@@1J@@@@@@@(Y?I'@@@@@@@?O&@@@@@@(Y?V4@@@@@@@@@6X?W2@@@@@@@@0Y?@@@@@@@@@)K?O&@@@@@@(M??@@@@@@@@@@@6XO2@@@@@@@@0Y?I'@@@@@@@@)K?W2@@@@@@@@(MV4@@@@@@@@@6X??W&@@@@@@@@0Y??@@@@@@@@@)KO&@@@@@@@(M??@@@@@@@@@@@@6K??W2@@@@@@@@@0Y?I'@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@(MV4@@@@@@@@@@@@6X?O2@@@@@@@@@@0Y?I'@@@@@@@@@@@)K??W2@@@@@@@@@@??V4@@@@@@@@@@@@6X??7@@@@@@@@@@5??I'@@@@@@@@@@@)K?@@@@@@@@@@0Y?V4@@@@@@@@@@@@6XO2@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@)K?O2@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@6X??O2@@@@@@@@@@@0M?@@@@@@@@@@@)X?W2@@@@@@@@@@(M??@@@@@@@@@@@@)K?W&@@@@@@@@@@(Y?I'@@@@@@@@@@6K??O&@@@@@@@@@@0Y?V4@@@@@@@@@@@@6KW2@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@@@(M?I4@@@@@@@@@@@@@@6K?W2@@@@@@@@@@@@@0Y?@@@@@@@@@@@@@6KO&@@@@@@@@@@(M?@@@@@@@@@@@@@@@6X?W2@@@@@@@@@@@@0Y?I4@@@@@@@@@@@@@)K?O&@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?O2@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@)KO2@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??W2@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@)KO&@@@@@@@@@@@@@@0MI'@@@@@@@@@@@@@@@@@?W2@@@@@@@@@@@@@(M??V4@@@@@@@@@@@@@@@@??O&@@@@@@@@@@@@@0Y?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XW2@@@@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@)K??O&@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI'@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@@@@@@@(M?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?O&@@@@@@@@@@@@@@@@(MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@@@@@@@@0M??V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@(MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M??V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O@?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M??I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?2@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M??I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O@KO2@@@6?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?2@6K??W2@@6?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@X?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?@MeI'@@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@@@e@? ?I4@@@@0M??I4@@@@@@@@@@0?4@0?4@@@0M? ?V@@@@@@@@@@@@@@@6X?W2@@@@@@@@@@@@@@@L@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W&@@@@@@@@@@@@@@@@)X??J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X O2@@@@@@@@@6K?eO26K ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K??O@KfO26KeO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?h?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X??O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@f@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(?4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@HfI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0MI@MheI4@0M??I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?hf@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?@M??I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6Xe@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@e@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@X?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?he?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?I4@@@@@@@@@@@@@@6K??W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@e@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@h?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@6XO&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?gV@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@gI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@W@K?he?@@@@@@@@@@@@@@)K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?eI'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@heI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?)X??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@g?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)KhI4@@@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?e?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K??W2@@@@@@@@@@@@@@@@@0Mg@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@6XhI4@@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@@@@@@@@0M?fW2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K?hI4@@@@@@@@@@@@@6X??O2@@@@@@@@@@@@@@@@Xg?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? I4@@@@@@@@@@@@@@@@6KhI4@@@@@@@@@@@@)KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0R@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X?eI4@@@@@@@@@@@@@@@@6KO2@@@@@@@@@@@@@@@0M?f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X? I4@@@@@@@@@@@@@@)Kh?I'@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@0MeW2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?eV4@@@@@@@@@@@@@@@6X??W2@@@@@@@@@@@@@h?O&@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L I4@@@@@@@@@@@@@@@6K?g?I'@@@@@@@@@)KO&@@@@@@@@@@@@@@gO2@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 I4@@@@@@@@@@@@@@@6X?gV4@@@@@@@@@@6XO2@@@@@@@@@@@@@(M?fO2@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 I4@@@@@@@@@@@@)Kh?I'@@@@@@@@)K??O2@@@@@@@@@@@@@@@0Y?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H I4@@@@@@@@@@@@@@@@6KfV4@@@@@@@@@@@@6K?O2@@@@@@@@@(Mh?@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I4@@@@@@@@@@@@@6KhI'@@@@@@@@6KW2@@@@@@@@@@@@@0Y?eW2@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@6K?e?V4@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@@@h?W&@@@@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?I4@@@@@@@@@@@@@6XgI4@@@@@@@@@6X??@@@@@@@@@@@@@hO&@@@@@@@@@@@@0Y ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@)X?gI4@@@@@@@@)X?@@@@@@@@@@@hO2@@@@@@@@@@@@0M ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@)KhI'@@@@@@@)K??W2@@@@@@@@@@@@@@@e?W2@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?I4@@@@@@@@@@@@@6Xf?V4@@@@@@@@@@6X?O&@@@@@@@@@(M?gO&@@@@@@@@@@0M ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? I4@@@@@@@@@)K?hI'@@@@@@)KO2@@@@@@@@@@@@0Ye?W2@@@@@@@@@@@@@0M ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 I4@@@@@@@@@@@@6Kf?V4@@@@@@@@@6KW2@@@@@@@@@@(MgO&@@@@@@@@@@(M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I'@@@@@@@@@@6Xg?I'@@@@@@@6X?W&@@@@@@@@@@0Y?f?@@@@@@@@@@@@0Y? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@)K?gV4@@@@@@@)X?O&@@@@@@@@@0M?g?@@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?I'@@@@@@@@@@6K?gI'@@@@@@)K?W2@@@@@@@@@@0M?e?W2@@@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? V4@@@@@@@@@@@@6Xf?V4@@@@@@@@@6XO&@@@@@@@@(MgO&@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I4@@@@@@@@)K?g?I'@@@@@@)K?O2@@@@@@@@@@@0Y?e?O2@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?I4@@@@@@@@@@6X?fV4@@@@@@@@6X?@@@@@@@@@@(M?f?W2@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y? I4@@@@@@@@)Xg?I'@@@@@@)X?J@@@@@@@@@0Yg?7@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y I'@@@@@@@)X?gV4@@@@@@)X?O&@@@@@@@(Mh?@@@@@@@@0M? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?V4@@@@@@@)KhI'@@@@@)K?O2@@@@@@@@@0Y?fO2@@@@@@@@@0M? ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@6Xf?V4@@@@@@@6XO2@@@@@@@@(MgO2@@@@@@@@(M @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@)K?gI'@@@@@)K?W2@@@@@@@@@0Y?e?W2@@@@@@@@@@0Y? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@f?V4@@@@@@6K??O&@@@@@@@hW&@@@@@@@@ ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@h?I'@@@@@6X@@@@@@@@@@g?W&@@@@@@@@@ ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V'@@@@@@@@hV'@@@@@)X?@@@@@@@(M?gO&@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@h?V4@@@@@)K?@@@@@@@@@0YgO2@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?I4@@@@@@@@@g?I4@@@@@6K?@@@@@@(M?gO2@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? I'@@@@@@heI'@@@@6KW2@@@@@@@@0YgO2@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?V4@@@@@@@@6X?f?V4@@@@@6X?W&@@@@@@@hW2@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I4@@@@@@@)Xg?I'@@@@)K??7@@@@@@@@g?W&@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?I'@@@@@@1hV4@@@@@@?@@@@@@@hO&@@@@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? V4@@@@@@heI'@@@@?W2@@@@@@@@@f?W2@@@@@@@@0Y? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? I4@@@@@@6Kg?V4@@@@@6XW&@@@@@(M?gO&@@@@@@(M ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y? I4@@@@@@6Xg?I'@@@@)K??W&@@@@@(YgW2@@@@@@@0Y? ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y I4@@@@@)K?gV4@@@@@@6XW&@@@@@(Y?f?W&@@@@@(M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?@@@@@@@he@@@@@1?W&@@@@@(Yg?7@@@@@@H? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? 3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@L?h3@@@@@O&@@@@@(Y?g?@@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@)KhV'@@@@W2@@@@@@0YgO2@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@6Xg?V4@@@@6K??W&@@@@@hO2@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@)K?hI'@@@6K?O&@@@@@@f?W2@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V4@@@@@@6Xg?V'@@@@@W2@@@@(Mg?7@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? O26X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@)X?gV'@@@@L??W&@@@@@H?gJ@@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? W2@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ N@@@@@1?g?V'@@@)XW&@@@@@5g?O&@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?W&@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@?hV'@@@)X??W&@@@@@(Yf?W2@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@@@@6X? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@6Xg?V4@@@)KO&@@@@@(Y?fO&@@@@(M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? J@@@@@@@@@)X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@)K?g?I'@@@6XW2@@@@@@0YfW2@@@@@0Y? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? 7@@@@@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? V4@@@@@@6XgV4@@@)X??W&@@@@@g?W&@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?J@@@@@@@@@@@@L? J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X I'@@@@@1h?@@@1??7@@@@@5g?7@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 O&@@@@@@@@@@@@1? 7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K? ?V'@@@@@h?3@@@LJ@@@@@(Yg?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@? @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? N@@@@@h?V'@@)K??W&@@@@(Y?f?@@@@@@@ ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6KO@?@?@K?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6?@?26KO2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X? ?@@@@@@@hV'@@@6X?O&@@@@(Yg?@@@@(M? W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X ?I'@@@h?V'@@@1?W2@@@@@0Y?fW2@@@@0Y ?W&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 V'@@@@6XgV'@@@L?W&@@@@@g?W&@@@ ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V'@@@@1g?V'@@)X??7@@@@@5gW&@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ N@@@@@L?gN@@@)X?@@@@@(Yf?W&@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@)Xg?@@@@1J@@@@@H?f?7@@@@(Y ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@)X?g?@@@?W&@@@@5g?@@@@(Y? O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@)Kg?3@@@6X??7@@@@0YfW2@@@@0Y O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@0M??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X? V'@@@@6Xf?V'@@@)X?@@@(Mf?W&@@@(M ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@f?@@@@@@@@@@@@@@@X??W@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K ?V'@@@@1gN@@@@1?@@@@@H?f?7@@@@H? O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@f?@@@@@@@@@@@@@@@)KO&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K N@@@@@g?3@@@@?@@@@@g?@@@@5 O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?3@@@@g?V'@@@L??@@@@@@@f?@@@@@(Y ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?V'@@@@@gV4@@)XJ@@@@@gJ@@@@(Y? O&@@@@@@@@@@@@(Mh?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V4@@@@h?@@)K?7@@@@@f?W&@@@(Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@0Y?h?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M??@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@6X?f?3@@@6X??J@@@@@5f?7@@@@H? ?@@@@@@@@@@(M? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Mf?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@)Xf?N@@@@)X?7@@@@(Yf?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y?f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?N@@@@@1g3@@@@1J@@@@@H?f?@@@ ?@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?g?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ 3@@@@@L?fN@@@@@?W&@@@@@fW2@@@5 ?W2@@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@0Mhe?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ V'@@@@1?f?@@@@@L?W&@@@@f?W&@@@(Y W&@@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?N@@@@@Lf?3@@@@)X?W&@@@@@f?7@@@(Y? ?W&@@@@@@@0M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@1f?V'@@@@1?7@@@@@5fJ@@@@H ?7@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@L?fV'@@@@?@@@@@(Yf7@@@5? ?@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@)Xf?N@@@@L??@@@@@H?e?J@@@(Y? J@@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@)X?f3@@@)XJ@@@@5f?7@@(Y ?W&@@@@@0Y ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?N@@@@1?fN@@@@)X?7@@@@Hf?@@@H? W&@@@@(M ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? 3@@@@Lf?3@@@@1??J@@@@5?eW2@@@5 7@@@@(Y? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y N@@@@1f?N@@@@@L?O@K ?7@@@@H?e7@@@@H @@@@@H ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M ?@@@@@g3@@@@1?W2@@@6X ?@@@@5f@@@@@? ?J@@@@5? N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5? ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? ?@@@@@gN@@@@@?&@@@@@) ?@@@(Ye?J@@@@5? ?7@@@@H? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@H? N@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@6X ?3@@@@g?@@@@@?@@(Y?e?7@@@@H? ?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ W2@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?J@@@1 ?N@@@@g?@@@@@?@@Hf?@@@@@ ?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?W&@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@ @@@@g?@@@@@@@@@@@@?he?@@@@@@? W2@@5?f?@@@@@ ?@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ W&@@@@@@@@)X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@ @@@@g?@@@@@?W&@@@H?f?@@@@@ ?@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?W&@@@@@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@ @@@@g?@@@@@?7@@@@g?@@@@@ J@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?7@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@ @@@@g?@@@@@?@@@@@g?@@@@@ 7@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@@@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@ @@@@g?@@@@@?@@@@@L?f?@@@@@ @@@@@@@L ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@@@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ J@@@@@ @@@@g?@@@@@L??@@@@@@?f?@@@@@ @@@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@e?@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?W&@@@@@ @@@@g?@@@@@1??@@@@@gJ@@@@@ @@@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@e?@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@@@ ?J@@@@g?@@@@@@??@@@@@1?f7@@@@@ @@@@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@e?3@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ J@@@@@@@ ?7@@@@g?@@@@@@??@@@@@@?f@@@@@@ @@@@@@@@@L ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hf?@@@@@e?N@@@@@L ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?W&@@@@@@@ ?@@@@5g?@@@@@5??@@@@@@?f3@@@@@ @@@@@@@@@)X? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@hfJ@@@@@e?J@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5 O&@@@@@@@@ ?@@@@Hg?@@@@@?@@@@@@?fN@@@@@ @@@@@@@@@@)X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@he?O&@@@@@e?@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y W2@@@@@@@@@@ J@@@5?g?@@@@@1??@@@@@@Lf?@@@@@ @@@@@@V'@@@)K? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@g?O2@@@@@@@@@e?N@@@@@@L? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?O&@@@@@@@@@@@ ?W&@@@H?gJ@@@@@@??@@@@@@1f?@@@@@ @@@@@@?V4@@@@@6K ?V'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@T2@@@@@@@@@@@@@@@@f@@@@@@1??W2@@6K? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O2@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@5h7@@@@@@??@@@@@@@f?@@@@@ @@@@@@f?@@@@@6X V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M?e?S@@@@@@@@@@@@@@@@@@f@@@@@@5??7@@@@@6K? ?@@@@@@@@(M??@@@@@ ?@@@@Hh@@@@@@@??@@@@@@@f?@@@@@L? @@@@@@f?3@@@@@)X? I4@@@@@@@@@@@@@@@@0Yf?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@f@@@@@@H??@@@@@@@@6X? ?@@@@@@@(Ye?@@@@@ ?@@@5?h@@@@@@@??@@@@@@@f?3@@@@)X @@@@@@f?V'@@@@@)K ?I@?@?4@@@0Mhe?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@f@@@@@@e?@@@@@@@@@)X O2@@@@@@@0Y?e?@@@@@ ?@@@H?h@@@@@@@??@@@@@@@f?V'@@@@1 @@@@@@gV4@@@@@@@@6X W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@f@@@@@@fI4@@@@@@@1 O2@@@@@@@@@0M?f?@@@@@ J@@5h?J@@@@@@@??@@@@@@@L?fN@@@@@ @@@@@@h?I4@@@@@@)K? 7@@@@@@@@0M?f?@@@@@f@@@@@5hI'@@@@L? O2@@@@@@@@0Mh?@@@@@ ?W&@(Yh?7@@@@@@@??@@@@@@@)Xf?@@@@@L? @@@@@@he?I4@@@@@@@@6X? ?J@@@@@@@0M?g?@@@@@f@@@@@Hh?V'@@@1? O2@@@@@@@@@@0MheJ@@@@@ W&@@H?h?@@@@@@@@??@@@@@@@@1g?@@@)X @@@@@@hf?I4@@@@@@@)X ?7@@@@@@heJ@@@@@f@@@@@?heN@@@@? ?O2@@@@@@@@@@@0Mhf@@@@@@ ?W&@@@heJ@@@@@@@@L?@@@@@@@@@g?@@@@)X? @@@@@@ ?I4@@@@@@)K? ?@@@@@@@he7@@@@@f@@@@@?heJ@@@@? O2@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@ ?7@@@5h?W&@@@@@@@@1?@@@@@@@@@L?f?@@@@@)X @@@@@@ I'@@@@@@6K ?@@@@@@@h?J@@@@@@e?J@@@@@Lh?W&@@@5? O2@@@@@@@@@@@(M? 7@@@@@ J@@@@Hh?7@@@@@@@@@5?@@@@@@@@@)Xf?3@@@@@1 O2@@@@@@@@@@@@6K @@@@@@ ?V4@0MeS@@@@@@@@@@6K? ?@@@@@@@@@6Kf?7@@@@@@e?7@@@@@1h?7@@@@H? O2@@@@@@@@@@@@@@@@0Y @@@@@@ ?W&@@@@?hJ@@@@@@@@@@H?@@@@@@@@@@1f?V'@@@@@L? O2@@@@@@@@@@@@@@@@6K @@@@@@ &@@@@@@@@@@@@@@@6K ?@@@@@@@@@@@@6K??@@@@@@@W@X@@@@@@@h?@@@@@ O2@@@@@@@@@@@@@@@@0M @@@@@@ W&@@(Mh?W&@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@gV'@@@@)X W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?f?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? 3@@@@@ ?W&@@(Y?h?7@@@@?@@@@@@??@@@@@@@@@@@g?N@@@@@1 ?O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X? @@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(M? O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M N@@@@@ W&@@@HheJ@@@@@?@@@@@@??@@@@@@@@@@@L?g3@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)X @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@ 7@@@5?he7@@@@5?3@@@@@??@@@@@@@@@@@)XgV'@@@@ ?J@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1 @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@Y? O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?@@@@@ ?J@@@@H?h?J@@@@(Ye@@@@@??@@@@@@@@@@@@1g?V'@@@@6X? ?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@e?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M ?@@@@@ W&@@@@he?7@@@0Y??7@@@@@L?@@@@@@?I'@@@@L?gV'@@@@)K ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@5e?7@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? J@@@@@ ?W&@@(M?heJ@@@f?3@@@@@1?@@@@@@??V'@@@)Xg?V'@@@@@6X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L? @@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Ye?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0?@M? @@@@@@ ?7@@(Yhe?W&@@5f?N@@@@@@?@@@@@5?eN@@@@)X?gV'@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@??@@@@@@@@@@@@@@? @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y?e?V'@@@@@@@@@@@@@@@0MeI@M? N@@@@@ J@@(Y?heW&@@@Hg@@@@@@?@@@@@H?e?@@@@@)Xg?V'@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0YgV+?4@@@@@@0M ?@@@@@ ?W&@(Yhf7@@@5?g@@@@@@?@@@@@f?3@@@@@1hV'@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@1? @@@@@@ ?@@@@@ ?*@(Y?he?J@@@(Y?g@@@@@@?@@@@@f?V'@@@@@L?g?V'@@@@6X? ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? @@@@@@ ?@@@@@ ?V+YhfW&@@@Hh@@@@@@?@@@@@gV'@@@@)XhV'@@@@)K ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? @@@@@@ J@@@@@ ?O&@@@@?h@@@@@@?@@@@@g?V'@@@@1h?V'@@@@@6X ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@? @@@@@@ 7@@@@@ ?W2@@@(Mhe@@@@@@?@@@@@L?gV'@@@@L?hV'@@@@@1 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M?e?@@@@@@? @@@@@@ @@@@@@ @?hfW&@@@@H?h?J@@@@@@?@@@@@1?g?V'@@@1?h?N@@@@@@ ?3@@@@@@(MI4@@@@0Mg?@@@@@@? @@@@@@ @@@@@@ 7@@@@5he?@@@@@@@?@@@@@5?hN@@@@?he@@@@@@ ?N@@@@@@H? ?@@@@@@? @@@@@@ @@@@@@ ?O@?hf?J@@@@@Hhf@@@@@@?@@@@@he?3@@@@6Xh?I'@@@@@6X @@@@@5 ?@@@@@@? @@@@@@ 3@@@@@ W2@@@?hfW&@@@@5?he?7@@@@@@?@@@@@1?h?V'@@@@)X?hV'@@@@@)X?hf@@@@@H ?@@@@@@? @@@@@@ N@@@@@ ?W&@@@5?he?W&@@@@(Y?he?3@@@@@@?@@@@@@?heV'@@@@)Xh?V4@@@@@)Xhf@@@@@? ?@@@@@@? @@@@@@ J@@@@@ W&@@@(Y?heW&@@@@0Y @@@@@@?@@@@@@?he?V'@@@@1hf@@@@@)X?he3@@@@? ?@@@@@@? @@@@@@ @@@@@@ ?W&@@@(Yhe?W&@@@(M ?7@@@@@@?@@@@@@?hfN@@@@@L?he@@@@@@)XheN@@@@? ?@@@@@5? @@@@@@ ?@@@@@ W&@@@@H?heW&@@@@H? ?@@@@@@@?@@@@@@?hf?@@@@@)Khe?I'@@@@)X?h?@@@@? ?@@@@@H? @@@@@@ 7@@@@@ 7@@@@5he?W&@@@@5 ?@@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@6XheV4@@@@1?h?@@@@? ?@@@@@ @@@@@@ 3@@@@@ ?J@@@@0YheW&@@@@(Y ?@@@@@@@?@@@@@@? ?3@@@@@)X?heI'@@5?hJ@@@@? ?@@@@@L? @@@@@@ N@@@@@ O&@@0Mhe?W&@@@@(Y? ?@@@@@@@?@@@@@@? ?V4@@@@@)Xhe?V40Y?h7@@@@? ?@@@@@1? @@@@@@ ?@@@@@ O2@@(MhfO&@@@@(Y ?@@@@@@@?@@@@@5? ?I'@@@@)K? ?J@@@@@? ?@@@@@@? @@@@@@ J@@@@@ ?@@@@(Y?he?@@@@@@0Y? ?@@@@@@@?@@@@@ V'@@@@@6X? ?7@@@@@? ?@@@@@@? @@@@@@ 7@@@@@ J@@@(YhfJ@@@@@ ?@@@@@@@?@@@@@@? ?V'@@@@@)X ?@@@@@@L ?@@@@@@? @@@@@@ @@@@@@ ?O&@@(Y?he?O&@@@@5 ?@@@@@@@?@@@@@ V'@@@@@1 ?@@@@@@@@1 ?@@@@@@? ?J@@@@@@ @@@@@@ O2@@R40Yhe?W2@@@@@(Y ?3@@@@@@?@@@@@@? ?V'@@@@@ ?@@@@@@@@@ ?@@@@@@? ?@@@@@@@ @@@@@@ O2@@@5 O&@@@@@(Y? @@@@@@?@@@@@ V'@@@@@6K?hf?3@@@@@@@@ ?@@@@@@? @@@@@@ @@@@@@L? W2@@@@(YhfW2@@@@@@0Y ?7@@@@@@?@@@@@@? ?V'@@@@@@6X?he?N@@@@@@@@ ?@@@@@@? ?7@@@@@@ 3@@@@@)K ?W&@@@@@H?he?W&@@@@@ ?@@@@@@@?@@@@@H? V'@@@@@@)Xhf3@@@@@@@@6X?hf?@@@@@@? ?@@@@@@@ ?@@@@@@@6K W&@@@@@5hf?7@@@@@5 ?@@@@@@@?@@@@@ ?V'@@@@@@)X?heV'@@@@@@@@)Khf?@@@@@@? ?@@@@@@@ 7@@@@@@@@@6K ?O&@@@@@0Yhf?@@@@@(Y ?@@@@@@@?@@@@@ V4@@@@@@)Xhe?V4@@@@@@@@@6Xhe?@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?W2@@@@@@@0MhfW2@@@@@0Y? ?3@@@@@@?@@@@@L? I'@@@@@)K?he?I4@@@@@@@@)K?h?@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? O&@@@@@(M?hf?O&@@@(M @@@@@@?@@@@@1? ?V4@@@@@@@6XhfI4@@@@@@@@@6K?f?@@@@@@? O2@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?W2@@@@@@@0YhfW2@@@@@(Y? ?7@@@@@@?@@@@@@? ?I'@@@@@@1 I'@@@@@@@6X?e?@@@@@@? O@?2@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@@(MI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? W&@@@@@@(Mhf?W&@@@@@(Y ?@@@@@@@?@@@@@@? N@@@@@@@L? ?V'@@@@@@@)Ke?@@@@@@? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@(YfI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6X? ?W&@@@@@@0Y?hf?7@@@@@@H? ?@@@@@@@?@@@@@@? ?3@@@@@@)K V'@@@@@@@@6K?@@@@@@? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@H?gI4@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K ?7@@@@@(M? ?@@@@@@@ ?@@@@@@@?@@@@@@? ?V4@@@@@@@@@6Xhf?V4@@@@@@@@@@@@@@@@L ?O2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@he?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K? ?O@K?@@@@@0Y W2@@@@@0M? ?@@@@@@@?@@@@@@? ?I4@@@@@@@@)K? I'@@@@@@@@@@@@@1 O2@@@@@@@@@@@@@@@@0Mhe@@@@@@ @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?O2@@@@@0M *@@@(M ?@@@@@@@?@@@@@@? ?I4@@@@@@@@6X?hf?V4@@@@@@@@@@@@@ W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Mhf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hf?O2@@@@@(Y ?3@@@@@@?@@@@@H? I'@@@@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@6K ?O2@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@ @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@6K? O&@@@@@@@0M? ?O2@@@@@@0Y? ?N@@@@@@?@@@@@ ?V'@@@@@@@@@@6X? I4@@@@@@@@@@@@@6K?g?W2@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@ @@@@@@ I4@@@@@@@@@@@@@@@6K?e?W2@@@@@@@@@@0M? ?O2@@@@@@0M? @@@@@@?@@@@@L? N@@@@@@@@@@@)X ?I4@@@@@@@@@@6K?fO&@@@@@@@@@@@@(M @@@@@@ @@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@6K?O&@@@@@@@(M? ?O2@@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@1? ?@@@@@@@@@@@@)X? ?I'@@@@@@@@@@@@6?2@@@@@@@@@@@@@0Y? @@@@@@ @@@@@@ ?3@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0Y ?W2@@@@@@@0Y @@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@@@@@@@@)K V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? @@@@@@ @@@@@@ ?V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M O&@@@@@(M? @@@@@@?@@@@@@? ?3@@@@@@@@@@@@@@@@6X I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@0M? ?J@@@@@@ @@@@@@ ?I'@@@@@@@@@@@@@@@0M ?W2@@@@@@@0Y ?J@@@@@@?@@@@@@? ?N@@@@@@eI'@@@@@@@)K? I'@@@@@@@@@@@@@@@X ?7@@@@@@ @@@@@@ V@@@@@@@@@@@@0M? O&@@@@@@(M ?7@@@@@@?@@@@@@? @@@@@@e?V4@@@@@@@@@@6X? ?V4@@@@@@@@@@@@@@)K? ?@@@@@@@ @@@@@@ ?O2@@@@@@@@@@@@0M? ?W2@@@@@@@@0Y? ?3@@@@@@?@@@@@@L @@@@@5f?I'@@@@@@@@@)X I'@@@@@@@@@@@6K? ?O2@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?O2@@@@@@@@@@(M? O&@@@@@@ @@@@@@?@@@@@@@ @@@@@HgV4@@@@@@@@@)K? ?V4@@@@@@@@@@@@@6X ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?O2@@@@@@@@@@@0Y ?W2@@@@@@@@@ ?@@@@@@@?@@@@@@H @@@@@?hI4@@@@@@@@@@6K ?I'@@@@@@@@@@@@)K? O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?O2@@@@@@@@@@(M? O&@@@@@@@(M? ?N@@@@@@?@@@@@@? ?J@@@@@?heI4@@@@@@@@@@@6X? V4@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ W2@@@@@@@@@@@@@@0Y O2@@@@@@@@(Y @@@@@@?@@@@@@? ?7@@@@@?hf?I'@@@@@@@@@)K I4@@@@@@@@@@@@6K O&@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?W&@@@@@@@@@@0M? ?O2@@@@@@@@@@@Y? @@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@? V'@@@@@@@@@@@@6X I4@@@@@@@@@@@@@@@@6Kf?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ @@@@@@ ?7@@@@@@@@@0M? O2@@@@@@@@@@@@@@@@@? ?J@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@L @@@@@@@@@@@@@)K? ?I'@@@@@@@@@@@@@6KeO&@@@@@@@@@0M?g?I'@@@@@@@ @@@@@@ ?3@@@@@0M? W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@L ?@@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@1 ?7@@@@@@@@@@@@@@@@6X V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(MhfN@@@@@@@ @@@@@@ ?O@Kg?V4@0M ?W&@@@@@@@@(?4@@@@@@@@@)X? ?N@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@5 ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@)K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?3@@@@@@ @@@@@@ ?W2@@@@? O&@@@@@@@@0YfI'@@@@@@)K ?J@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@Hhe?W2@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@)Xhf?N@@@@@@ @@@@@@ ?O2@@6?&@@@@H? W2@@@@@@@@@@@0M?g?V4@@@@@@@@@6X ?7@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@LheO&@@@@@@@@@@@@e?I'@@@@@@@@@@6K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@)K?he?J@@@@@@ @@@@@@L?hf?O2@@@@@@@@@@@@@ ?O&@@@@@@@@0M? I4@@@@@@@)K? ?3@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@@gW2@@@@@@@@@@@@@@@5fV4@@@@@@@@@@@@@6K? ?I4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@6K?eO&@@@@@@ ?J@@@@@@)Xf?O2@@@@@@@@@@@@@@0?4@0M? O2@@@@@@@@@@0M I4@@@@@@@6K? ?N@@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@?f?W&@@@@@@@@@@@@@@@@Hh?I'@@@@@@@@@@6K? ?I'@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?7@@@@@@@)K?O2@@@@@@@@@@@@@(M? O2@@@@@@@@@0M? I'@@@@@6K? @@@@@@?@@@@@@? ?@@@@@@1f?7@@@@@@@@@@@@@@@@@?heV'@@@@@@@@@@@@ V4@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@ ?@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@(Y ?W2@@@@@@@@@@(M? ?V'@@@@@@@

Section 1Introduction1.1 General InformationBio-Rad's Model 175 Tube Cell can be used for all common tube gel electrophoretic techniques,including discontinuous buffer systems such as Laemmli SDS electrophoresis, nondenaturing"native" buffer systems, preparative tube gel applications, and tube gel isoelectricfocusing as in the first dimension of 2-D electrophoresis.The combination cooling buffer/upper core chamber of the Model 175 Tube Cell accommodatestwelve 4-8 mm OD glass tubes (1-6 mm diameter gels) and is useful for most analyticaland electrofocusing applications.The cooling core allows tube gels to be run below ambient temperature. This can be usefulin many non-denaturing or preparative systems where recovery of active molecules is necessary.The core can be connected to any circulating water chiller and will maintain the lowerbuffer and gels at a reset temperature. The cooling core also houses the upper and lower electrodeswhich have been recessed to prevent breakage.The lid of the Model 175 Tube Cell fully encloses the upper buffer chamber and overlapsthe lower chamber so that the upper buffer chamber/cooling core cannot be removed withoutfirst removing the lid. Removing the lid disconnects the unit from the power source, preventingaccidental electrical mishap. The lid can only be placed on the Model 175 Tube Cellin "On" orientation, which prevents unintentional reversal of the anode/cathode connections.1.2 SpecificationsConstruction:Upper buffer chamber/coolingcore, lower buffer chamber, lidElectrical leadsElectrodesShipping weightOverall sizeCooling core maximum flow ratePower LimitVoltage LimitFabricated acrylicflexible, coiled with banana plugsPlatinum wire 0.010 inch diameter (0.254 mm)2.7 kg (5.9 lb)7-5/8 inch diameter x 11.0 inch length2 liters/min12 Watts3,000 VDCNote: Cell components are not compatible with chlorinated hydrocarbons (e.g., chloroform),aromatic hydrocarbons (e.g., toluene, benzene), acetone. Use of such organic solventsvoids all warranties. Call 1-800-4BIORAD for technical information regardingchemical compatibility of Model 175 Tube Cell components with various laboratoryreagents.1

!1.3 SafetyPower to the Model 175 Tube Cell is to be supplied by an external DC voltage powersupply. This power supply must be ground isolated in such a way that the DC voltage outputfloats with respect to ground. All of Bio-Rad's power supplies meet this important safetyrequirement. Regardless of which power supply is used, the maximum specified operatingparameters for the cell are:3000 VDC maximum voltage limit12 Watts maximum power limit50°C maximum ambient temperature limitCurrent to the cell, provided from the external power supply, enters the unit through thelid assembly, providing a safety interlock to the user. Current to the cell is broken when thelid is removed. Do not attempt to circumvent this safety interlock, and always turn thepower supply off before removing the lid, or when working with the cell in any way.ImportantThis Bio-Rad instrument is designed and certified to meet IEC1010-1* safety standards.Certified products are safe to use when operated in accordance with the instruction manual.This instrument should not be modified in any way. Alteration of this instrumentwill:• Void the manufacturer's warranty• Void the IEC1010-1 safety certification• Create a potential safety hazardBio-Rad is not responsible for any injury or damage caused by the use of this instrumentfor purposes other than those for which it is intended or by modifications of the instrumentnot performed by Bio-Rad or an authorized agent.*IEC1010-1 is an internationally accepted electrical safety standard for laboratory instruments.Section 2General Operating InstructionsNote: Since several applications can be performed using the Model 175 Tube Cell, discussionin this section is a general description of the operation of the unit which can beapplied to most buffer systems. Formulations for SDS-PAGE (Laemmli) gels and isoelectricfocusing (IEF) gels are included in Section 4 of this manual.2.1 Preparation of Gels1. Prepare the monomer solution by combining all reagents except the initiators (usuallyammonium persulfate and TEMED). Degas under vacuum for at least 15 minutes.2. Mark the tubes at the level to which the acrylamide should be poured.3. Wrap a double thickness of Parafilm ® laboratory film over the opposite end of each geltube.4. Place each glass tube in a leveled tube gel preparation rack (such as Bio-Rad's Model225 Tube Gel Casting Stand, catalog number 165-2020), with the parafilm end down.2

5. Add initiators to the monomer solution, mix by swirling, and pour the tube gels.a. For capillary tube gels ≤ 2.5 mm I. D., gels must be poured with a syringe and a finegauge needle long enough to reach the bottom of the tubes (catalog number 165-1943). To prevent bubbles at the bottom of the capillary gels, apply a little extra forceon the syringe initially to remove trapped air.b. For tube gels ≥ 2.5 mm I. D., gels may be poured as above, or with a long Pasteurpipet and bulb.6. Overlay each gel with a suitable overlay solution (see Section 4). Allow to polymerizeapproximately 1 hour.2.2 Tube Placement1. After the gels have polymerized, remove the Parafilm and rinse the top and bottom ofeach gel with distilled water.2. Push each cast tube gel into an appropriate size grommet, so that the application surfaceof the gel is visible above the grommet.3. Place each tube and grommet assembly into a hole in the upper buffer chamber from thetop. Firmly seat the stopper to provide a good seal.4. Fill any unused holes with a solid stopper.2.3 Lower Buffer Reservoir Preparation1. Place a magnetic stir bar into the bottom of the lower buffer chamber.2. Fill the lower reservoir with the lower reservoir buffer. With the upper buffer chamber/coolingcore in place, the volume required to fill the reservoir almost to the top isapproximately 3.5 liters. To provide maximum cooling conditions, the lower buffer shouldcover the entire separating gel.3. Lower the upper chamber/cooling core into the lower chamber and adjust the lower buffervolume as needed.4. Add approximately 600 ml of upper buffer to the upper buffer chamber.5. Place the entire Model 175 Tube Cell on a magnetic stirrer.2.4 Sample Preparation and ApplicationNote: During sample preparation and loading the lower buffer may be chilled to a presettemperature by connecting a circulating cooler to the ports on the central cooling core.1. Prepare the sample in an appropriate sample buffer. In general, the sample buffer shouldcontain 5-10% sucrose or glycerol to make the sample denser than the upper buffer. Inmost buffer systems, a tracking dye is added to the sample buffer to indicate when electrophoreticrun is complete.2. Carefully apply each sample to the top of the gel using a syringe and needle, or, for largediameter gels (≥ 3 mm I.D.), using an automatic pipettor. The sample should be appliedas close to the gel surface as possible, and in a careful manner so that no air bubbles areintroduced.3

2.5 Sample Electrophoresis1. Place the lid on the Model 175 Tube Cell and connect the electrical leads to a suitableDC power supply such as Bio-Rad's PowerPac 3000 or PowerPac 1000 power supply.2. If cooling is desired, connect the cooling core ports to a circulating cooler or to a tapwater line. The core may also be filled with any common anti-freeze or methanol: water(20:80) to act as a heat sink.3 Turn on the power supply and set the power conditions recommended for that application.2.6 Extruding Tube Gels1. After electrophoresis, shut off the power supply, disconnect the leads, and remove thelid of the tube cell.2. Lift out the upper chamber/cooling core and pour off the upper buffer. Remove the geltubes from the upper chamber and place them in the tube gel casting stand to preventmix-up.3. Attach a long, fine, beveled needle (catalog number 165-1944) to a 1 or 3 ml plasticsyringe filled with distilled water. Rim the upper and lower few millimeters of each gelby inserting the needle between the gel and the glass tube (point against the glass wall)while forcing distilled water through the syringe and needle. Turn the gel tube so that theentire circumference is rimmed.4. Attach a piece of tubing to a 1 or 3 ml syringe and to the outside wall of the glass tube onthe top end of the tube gel to be extruded. Using the syringe filled with distilled water,apply a firm, even pressure to start the gel extruding from the tubes. As the gel moves furtherout of the tube, apply less pressure so that the rate of extrusion remains constant. Donot extrude to quickly. Only slight pressure is required to remove the last 1-2 cm of gelfrom the tube.5. Extrude the gels into plastic or glass storage tubes or into small beakers for equilibration,fixation, etc. Bio-Rad's Incubation Tray (catalog number 170-4037) makes a convenientcontainer for the gels.Section 3Maintenance of Equipment3.1 Model 175 Cell Chamber, Stoppers, GrommetsRinse with distilled water after every use. Clean with a laboratory detergent (catalog number161-0722), and rinse with dH 2O.3.2 Glass TubesAfter use, rinse with laboratory detergent solution, scrub out if possible, then rinse withdistilled H 2O. For a more stringent cleaning, soak the tubes in a chromic/sulfuric acid solutionovernight and then rinse with distilled water. Dry in a forced air or vacuum oven beforeuse.Warning: Exercise extreme caution for acid cleaning: wear safety glasses, a lab coat,and rubber gloves. Keep a container of NaCO 3nearby to neutralize spills.4

Section 4Protocols4.1 Reagents and Gel Preparation of SDS-PAGE Slab Gels(Laemmli buffer system*)Stock SolutionsA. Acrylamide/bis (30% T, 2.67% C)146 g acrylamide (29.2 g/100 ml)4 g N' N'-bis-methylene-acrylamide (0.8 g/100 ml)Make to 500 ml with distilled water. Filter and store at 4 °C in the dark (30 days maximum).Or substitute Bio-Rad's preweighed acrylamide/bis.37.5:1 mixture (catalog number 161-0112, 30 g)(catalog number 161-0106, 200 g)150 g acrylamide/bis 930 g/100 ml) to 500 ml with dH 2O.B. 1.5 M Tris-HC1, pH 8.854.45 g Tris base (18.15 g/100 ml)~150 ml distilled waterAdjust to pH 8.8 with 1 N HC1. Make to 300 ml with distilled water and store at 4 °C.C. 0.5 M Tris-HC1, pH 6.86 g Tris base~60 ml distilled waterAdjust to pH 6.8 with 5-10 N HC1. Make to 100 ml with distilled water and store at 4° C.D. 10% SDSDissolve 10 g SDS in water with gentle stirring and bring to 100 ml with dH 2O.*Laemmli, U. K., Nature, 227, 680 (1970)5

E. Sample buffer (store at room temperature)Distilled water4.0 ml0.5 M Tris-HC1, pH 6.8 1.0 mlGlycerol0.80 ml10% (w/v) SDS 1.6 ml2-mercaptoethanol 0.4 ml0.4 ml0.05% (w/v) bromophenol blue 0.2 ml8.0 mlDilute the sample at least 1:4 with sample buffer, and heat at 95 °C for 4 minutes.F. 5x electrode (running) buffer, pH 8.3 (enough for 10 runs)Tris base 45 g (15 g/l)Glycine 216 g (72 g/l)SDS 15 g (5 g/l)to 3 liters with dH2OStore at 4 °C. Warm to 37 °C before use if precipitation occurs.Dilute stock solution 1:5 with distilled water for electrophoresis run.4.2 Separating Gel Preparation--0.375 M Tris, pH 8.8ab12% a 7.5% bDistilled water 33.5 ml 48.5 ml1.5 M Tris-HCI, pH 8.8 25.0 ml 25 ml10% (w/v) SDS stock 1.0 ml 1.0 ml(store at room temperature)Acrylamide/bis (30% stock) 40.0 m 25.0 ml*10% ammonium persulfate 500 µl 500 µl (0.05%)TEMED 50 µl 50 µl (0.05%)TOTAL MONOMER + 100 ml 100 ml* To make the 10% ammonium persulfate solution dissolve 100 mg APS in 1 ml dH 2O.+ One can prepare any desired volume of monomer solution by using multiples or fractionsof the 100 ml recipes.For SDS treated proteins in the approximate molecular weight range between 10-100 Kdaltons. Use Bio-Rad's Low MW Standards (catalog number 161-0304) for 12% separatinggel.For SDS treated proteins in the approximate molecular weight range between 10-100 Kdaltons. Use in conjunction with Bio-Rad's High MW SDS-PAGE Standards (catalognumber 161-0303).6

To calculate the amount of monomer needed, use the following formula:[(tube diameter in cm) 2 x 3.14 x height in cm needed to fill] X number of tubes2For example, to cast ten 1.5 mm diameter tubes to a height of 14 cm, calculate asfollows:[(.15) 2 x 3.14 x 14 cm] X 10 = 4.9 ml2It is advisable to add an additional 2-5 ml to the calculated volume.4.3 Stacking Gel Preparation--4.0% gel, 0.125 M Tris, pH 6.8Distilled water 6.1 ml 12.2 ml0.5 M Tris-HCI, pH 6.8 2.5 ml 5 ml10% (w/w) SDS 100 µl 200 µlAcrylamide/bis 1.3 ml 2.6 ml(30% stock)(Degas for 15 minutesat room temperature)10% ammonium persulfate 50 µl 100 µl (0.05%)(fresh daily)TEMED 10 µl 20 µl (0.1%)TOTAL STOCK MONOMER 10 ml 20 ml1. To prepare the monomer solutions, combine all reagents, except the APS and TEMED,and deaerate under vacuum for ≥ 15 minutes. To initiate polymerization add the APS andTEMED, and swirl gently to mix.2. Follow the instructions in Section 2.1-2.4 for setup and casting of the gels.4.4 Running Conditions*We recommend that the gels be run under constant current conditions with an appropriatepower supply, such as Bio-Rad's PowerPac 3000 or Model 1000/500 power supply. (SeeSection 5.6 for ordering information.)Run time is 4 to 5 hours, depending on the length of the gel.Tube Gel Diameter (i. D.) mmCurrent Setting m/A gel2 mm 0.4 mA/gel2.5 mm 0.6mA/gel3 mm 0.9 mA/gel5 mm 2.5 mA/gel6 mm 3.6 mA/gel* Recommended power conditions for optimal resolution with minimal distortion.Conditions can be varied by user.Note: 1.0 and 1.5 mm tube gels are used primarily for capillary isoelectric focusing.7

4.5 2-D Stock SolutionsNote: The pH gradient in these protocols is expanded in the pH 5-7 range. The gradientmay be expanded in any range by substituting a Bio-Lyte ® ampholyte, with a differentrange for the ampholyte, in the protocol.First Dimension IEF Tube Gels10% Triton X-100Triton X-10010 mlH 2O90 mlStir in a beaker with 5 g AG ® 501-X8 mixed bed ion exchange resin (catalog number142-6424). Store in brown glass bottle at room temperature.Overlay Buffer10% Triton X-100, 2.0 mlBio-Lyte ampholyte, 5/7, 0.45 mlBio-Lyte ampholyte, 3/10, 0.05 mlddH 2O up to 10.0 mlStore at 4 °C in capped tube.IEF Sample Concentrate10% SDS, 0.1 ml (for certain applications. SDS may be omitted)Bio-Lyte ampholyte, 3/10, 0.02 mlBio-Lyte ampholyte, 5/7, 0.18 ml2-Mercaptoethanol, 0.1 mlTriton X-100 (undiluted), 0.2 mlMix well and store at 4 °C in capped tube.Be sure to vortex well before each use.IEF Gel SolutionUrea, 48.6 gddH 2O, 28.8 mlAcrylamide/bis acrylamide (30% stock), 11.8 ml10% Triton X-100, 20.3 mlBio-Lyte ampholyte, 5/7, 0.45 mlBio-Lyte ampholyte, 3/10, 0.05 mlStore in 5.5 ml aliquots at -80 °CElectrolytesCatholyte __ NaOH 2.4 gH 2O to 600 ml (0.1 N NaOH)Anolyte __ 85% phosphoric acid, 2.4 mlH 2O to 3.5 liters (0.06%)These solutions should be freshly degassed before use.8

4.6 Preparation of First Dimension IEF GelsThe recommended tube diameter for this procedure is 1.5 mm. If larger diameter tubes areused, more gel solution will be required, e.g., 2 aliquots of IEF gel solution if 3.0 mm I. D. tubesare used.Warning: Always wear gloves when performing this procedure to prevent exposure toacrylamide.Thaw an aliquot (5.5 ml) of IEF gel solution and bring it to room temperature. Degasfor 15 minutes under vacuum. To the IEF gel solution add:TEMED 5.5 µlFresh 10% ammonium persulfate 7.25 µlThis will be enough gel solution to prepare eighteen 15 cm x 1.5 mm gels.To calculate the exact volume necessary to cast tube gels, refer to Section 4.2.4.7 Running Conditions for Capillary (1.0 and 1.5 mm) IEF TubeGelsIEF is carried out at 400 volts constant voltage for 12-15 hours, followed by 2 hours at 800volts constant voltage.Section 5Equipment and Accessories5.1 CellCatalogNumber Product Description165-1980 Model 175 Tube Cell, 4-8 mm OD tubesThe cell includes the combination upper buffer chamber/cooling core, lower buffer chamber,cell lid with power cables, a complete set of grommets and stoppers (to fit all compatiblesizes of glass tubes), a leveling bubble, and instructions. Glass tubes are not includedand must be ordered separately.5.2 AccessoriesCatalogNumber Product Description165-1984 Grommets and Stoppers, 4-5 mm OD tubes (12), 1 set165-1985 Grommets and Stoppers, 6-7 mm OD tubes (12), 1 set165-1986 Grommets and Stoppers, 8 mm OD tubes (12), 1 set165-1943 Gel Tube Loading Needle, 18 cm, 22 gauge, blunt tip, Luer hub (forcasting monomer in small diameter tubes)165-1944 Tube Gel Extrusion Needle, 26 gauge, beveled tip, Luer hub (forremoving gels from tubes)165-2020 Model 225 Tube Gel Casting Stand9

5.3 Glass TubesProduct DescriptionCatalog ID OD Length PackageNumber mm mm mm Quantity165-3136 1.0 5.0 180 24165-3137 1.5 6.0 150 24165-3138 1.5 6.0 180 24165-3139 2.0 6.5 180 24165-3155 2.4 4.0 160 24165-3150 3.0 5.0 125 24165-3122 5.0 7.0 125 245.4 Electrophoresis ChemicalsCatalogNumber Product Description Quantity per Package161-0100 Acrylamide, 99.9% 100 g161-0101 Acrylamide, 99.9% 500 g161-0170 Acrylamide, 99.9% 1 kg161-0103 Acrylamide, 99.9% 2 kg161-0122 Preweighted Acrylamide/Bis, 37.5:1 mixture 30 g161-0125 Preweighted Acrylamide/Bis, 37.5:1 mixture 150 g161-0121 Preweighted Acrylamide/Bis, 29:1 mixture 30 g161-0124 Preweighted Acrylamide/Bis, 29:1 mixture 150 g161-0200 Bis (N, N'-Methylene-bis acrylamide) 5 g161-0201 Bis (N, N'-Methylene-bis acrylamide) 50 g161-0716 Tris 500 g161-0719 Tris 1 kg161-0717 Glycine 250 g161-0718 Glycine 1 kg161-0300 SDS (sodium dodecylsulfate) 25 g161-0301 SDS (sodium dodecylsulfate) 100 g161-0302 SDS (sodium dodecylsulfate) 1 kg161-0700 Ammonium Persulfate 10 g161-0610 Dithiothreitol 1 g161-0611 Dithiothreitol 5 g161-0710 2-mercaptoethanol 25 ml161-0800 TEMED 5 ml161-0801 TEMED 50 ml162-0100 Agarose, Standard Low -m r100 g162-0102 Agarose, Standard Low -m r500 g161-0304 SDS-PAGE Standards, 10,000-100,000 MW10

CatalogNumber Product Description Quantity per Package161-0303 SDS-PAGE Standards, 40,000-250,000 MW161-0310 IEF Standards161-0443 Silver Stain Kit, includes 1 bottle oxidizer concentrate, 1 bottle silverreagent concentrate, and 4 bottles developer. Enough to stain approximately48 (8 x 7 cm) gels.161-0400 Coomassie Blue R-250 10 g161-0404 Bromophenol Blue 10 g161-0407 Triton X-100 500 ml161-0730 Urea 250 g161-0731 Urea 1 g161-0722 Cleaning Concentrate (50x) 1 kgBio-Lyte ® Ampholytes163-1112 Bio-Lyte Ampholytes, 3/10, 40% 10 ml163-1132 Bio-Lyte Ampholytes, 3/5, 20% 10 ml163-1142 Bio-Lyte Ampholytes, 4/6, 40% 10 ml163-1152 Bio-Lyte Ampholytes, 5/7 40% 10 ml163-1162 Bio-Lyte Ampholytes, 6/8, 40% 10 ml163-1172 Bio-Lyte Ampholytes, 7/9, 40% 10 ml163-1182 Bio-Lyte Ampholytes, 8/10, 20% 10 ml142-6424 AG ® 501-X8 Mixed Bed Ion Exchange Resin 500 g5.5 Power Supplies165-5056 PowerPac 3000 Power Supply, 100/120 VAC165-5057 PowerPac 3000 Power Supply, 220/240 VAC165-4710 Model 1000/500 Power Supply, 110/120 VAC165-4711 Model 1000/500 Power Supply, 220/240 VAC11

Section 6References6.1 General References1. Gordon, A. H., "Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology," Vol. 1, Part1,Work, T.S. and Work, E., eds. North Holland Publishing Co., Amsterdam-London (1975).2. Maurer, H. R., "Disk Electrophoresis and Related Techniques of Polyacrylamide GelElectrophoresis," Walter de Gruyter, Berlin-New York (1971).6.2 Native Gel Systems References1. Ritchie, R. F., Harter, J. G. and Bayles, T. B., J. Lab. Clin. Med., 68, 842 (1966).2. Margolis, J. and Kendrick, K. G., Anal Biochem., 25, 347 (1968).3. Ornstein, L. and Davis, B. J., Ann. N. Y. Acad. Sci., 121, 321 (1964).4. Reisfeld, R. A., Lewis, U. J. and William, D. E., Nature, 195, 281 (1962).5. Blattler, D.P., Garner, F., Van Slkye, K. and Bradley, A., J. Chromatog., 64, 147 (1972).6. Jeppesen, P. G. N., Anal. Biochem., 58, 195 (1974).6.3 SDS Gel System References1. Shapiro, A. L., Vinuela, E. and Maizel, J. V., Biochem. Biophys. Res. Commun., 28, 815 (1967).2. Laemmli, U. K., Nature, 227, 680 (1970).3. Fairbanks, G., Steck, T. L. and Wallace, D. F. H., Biochemistry, 10, 2606 (1971).4. Weber, K. and Osborn, M., J. Biol. Chem., 224, 4406 (1969).5. Yamada, K. M. and Weston, J. A., Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., 71, 3492 (1974).6. Neville, D. M., J. Biol. Chem., 246, 6328 (1971).7. O'Farrell, P. Z., Gold, L. M. and Hauang, W. M., J. Biol. Chem., 248, 5499 (1973).8. Studier, F. W., J. Mol. Biol., 79, 237 (1973).9. Ferro-Luzzi Ames, G., J. Biol. Chem., 249, 634 (1974).6.4 Urea Gel Systems References1. Kaltschmidt, E. and Wittmann, H. G., Anal. Biochem., 36, 401 (1970).2. Swank, R. W. and Muckers, K. D., Anal. Biochem., 39, 462 (1971).3. Jakes, K., Zinder, N. D. and Boon, T., J. Biol. Chem., 249, 438 (1974).4. Mets, L. J. and Bogorad, L., Anal. Biochem., 57, 200 (1974).5. Sherton, C. C. and Wool, I. G., J. Biol. Chem., 249, 2258 (1974).6.5 Two-Dimensional IEF/SDS-PAGE Gel Systems References1. O'Farrell, P. H., J. Biol. Chem., 250, 4007 (1975).2. Ferro-Luzzi Ames, G., and Nikaido, K., Biochem., 15, 616 (1976).3. Anderson, L. and Anderson, N. G., Proc. Nat. Acad. Sci U.S.A., 74, 5421 (1977).4. O'Farrell, P. Z., Goodman, H. M. and O'Farrell, P. H., Cell, 12, 1133 (1977).5. Garrels, J. I., J. Biol. Chem., 254, 7961 (1979).6. Dunn, M. J. and Burghes, A. H. M., Electrophoresis, 4: 97-116 and 4: 173-189 (1983).Parafilm is a registered trademark of American Can Company.12

Bio-RadLaboratoriesLife ScienceGroup2000 Alfred Nobel DriveHercules, California 94547Telephone (510) 741-1000Fax: (510) 741-1060Eastern Regional Office, 85A Marcus Dr., Melville, New York 11747 • Phone (516) 756-2575 • Fax (516) 756-2594European Headquarters, Bio-Rad Laboratories, Dreve du Sénéchal, 19, B-1180 Brussels • Phone 02 375 59 70 • Fax 02 374 61 62Australia, Bio-Rad Laboratories Pty Limited, Unit 11, 112-118 Talavera Rd P.O. Box 371, North Ryde, N.S.W. 2113 • Phone 02-805-5000 • Fax 02-805-1920Austria, Bio-Rad Laboratories Ges.m.b.H., Auhofstrasse 78D, A-1130 Wien • Phone 0222-877 89 01 • Fax 0222-876 56 29Belgium, Bio-Rad Laboratories S.A./N.V., Begoniastraat 5, B-9810 Nazareth Eke • Phone 091-85 55 11 • Fax 091-85 65 54Canada, Bio-Rad Laboratories (Canada) Ltd., 5149 Bradco Boulevard, Mississauga, Ontario L4W 2A6 • Phone (416) 624-0713 • Fax (416) 624-3019China, Bio-Rad Laboratories, Yanshan Hotel Office Tower, #1307, 138A Haidian Road, Beijing • Phone 2563146 • Fax 2564308France, Bio-Rad S.A., 94/96 rue Victor Hugo, B.P. 220, 94203 Ivry Sur Seine Cedex • Phone 01-49 60 68 34 • Fax 01-46 71 24 67Germany, Bio-Rad Laboratories GmbH, Heidemannstraße 164, Postfach 45 01 33, D-8000 München 45 • Phone 089-318 84-0 • Fax 089-318 84 100Italy, Bio-Rad Laboratories S.r.l.,Via Cellini, 18A, 20090 Segrate Milano • Phone 02-21609.1 • Fax 02-21609-399Japan, Nippon Bio-Rad Laboratories, K. K., Sumitomo Seimei Kachidoki Bldg 5-3-6 Kachidoki, Chuo-Ku, Tokyo 104 • Phone 03-3534-7515 • Fax 03-3534-8027The Netherlands, Bio-Rad Laboratories B. V., Fokkerstraat 10, 3905 KV Veenendaal • Phone 08385-40666 • Fax 08385-42216New Zealand, Bio-Rad Laboratories, Pty Ltd., P. O. Box 100-051, North Shore Mail Centre, Auckland 10 • Phone 09-443 3099 • Fax 09-443 3097Pacific, Bio-Rad Laboratories, Unit 1111, 11/F., New Kowloon Plaza, 38, Tai Kok Tsui Road, Tai Kok Tsui, Kowloon, Hong Kong • Phone 7893300 • Fax 7891257Scandinavia, Bio-Rad Laboratories, Kanalvägen 10C, 19461 Upplands Väsby, Sweden • Phone 46 (0) 8 590-73489 • Fax 46 (0) 8 590-71781Spain, Bio-Rad Laboratories, S. A. Avda Valdelaparra 3, Pol. Ind. Alcobendas, E-28100 Alcobendas, Madrid • Phone (91) 661 70 85 • Fax (91) 661 96 98Switzerland, Bio-Rad Laboratories AG, Kanalstrasse, 17, 8152 Glattbrugg • Phone 01-810 16 77 • Fax 01-810 19 33United Kingdom, Bio-Rad Laboratories Ltd., Bio-Rad House, Maylands Avenue, Hemel Hempstead, Herts HP2 7TD • Phone 0800 181134 • Fax 0442 259118Printed in USAM1651980 Rev B