Vol. 3 núm. 2 - Sociedad Española de Microbiología

119ocoÜJcoca>ocoO2 h1 2 3 4Tiempo (dios)Fig. 1. Variación de la concentración de etanol en medio basal con S04(NH4)2 0,15% (p/v); etanol 2,7% (v/v) yTween 80 0,7% (v/v).La utilización de compuestos de dos átomos de carbono como única fuente de carbonoy energía está ligada generalmente al funcionamiento anaplerótico del ciclo del glioxilato.Pese a que en nuestro estudio no se detectó variación en la concentración de etanol(Fig. 1 ), es posible que hubiera habido consumo suficiente com para modificar la actividadde las enzimas implicadas en su utilización, aunque no para producir cambios apreciablesen dicha concentración. En consecuencia, creímos interesante estudiar las enzimascaracterísticas del ciclo del glioxilato y del de los ácidos tricarboxílicos en los distintostipos morfológicos. En la Tabla 2 se puede apreciar cómo en las células de tres díasse produce un aumento de casi todas las actividades enzimáticas determinadas, respectoa las células levaduriformes del inoculo. Tras la adición de glucosa el cuarto día, al menostres de las enzimas estudiadas —MDH, ICL y CS— mostraron un descenso en suactividad, registrándose valores próximos a los encontrados en las levaduras del inoculo.Estas variaciones pueden ser debidas a i) desrepresión de las enzimas del ciclo de Krebsy del glioxilato por ausencia de glucosa, o ii) inducción de dichas rutas metabólicas porla presencia de etanol y posterior represión debida a la acción de glucosa. En efecto, estosdatos son comparables con los obtenidos por Duntze et al. (8) para Saccharomycescerevisiae en medio sin glucosa, por Gosling y Duggan (9) durante la adaptación de lalevadura de panadería a la utilización de acetato, y por O'Connell y Paznokas (17) relativosa la utilización de acetato como única fuente de carbono por Mucor racemosus.Con el fin de establecer el papel del etanol en las variaciones enzimáticas de A. pullulans,detectadas en este estudio, se midió la actividad de las enzimas MDH, CS e ICL,en células levaduriformes de 3, 5 y 5,6 días, procedentes de los cultivos control; la elecciónde estas tres enzimas se debió al hecho de ser las que más claramente respondían ala presencia de etanol primero y glucosa después. Como puede observarse en la Figura2, en la que se comparan los datos procedentes del medio control y del medio de in-