Informe actividad Prontosan® frente a bacterias multiresistentes nosocomiales

19 Klebsiella pneumoniae OXA-48 y CTX-M-15
20 Klebsiella pneumoniae TEM-4
21 Enterococcus faecalis Complejo Clonal 2
22 Enterococcus faecalis Complejo Clonal 9
23 Enterobacter cloacae SHV-12 y CTX-M-9
24 Enterobacter cloacae CTX-M-15
25 Enterobacter cloacae CTX-M-9
26 Enterococcus faecium VanB2
27 Enterococcus faecium VanA
28 Enterococcus faecium VanA
29 Enterococcus faecium VanB
2.2 Tests de sensibilidad
Con el fin de determinar la sensibilidad de las cepas bacterianas a Prontosan®, se utilizaron dos
métodos: microdilución en caldo y difusión con discos. Ambos se llevaron a cabo siguiendo
las recomendaciones del CLSI 1 para antimicrobianos. Para cada cepa se determinaron: i)
concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB)
(microdilución en caldo) y ii) diámetro del halo de inhibición (difusión con disco).
2.3 Actividad bactericida de Prontosan®
Para el resto de los experimentos, se seleccionaron las 8 cepas ATCC y las 8 cepas clínicas que
presentaron mayor CMI dentro de cada especie.
Para el estudio de la actividad bactericida de Prontosan®, se utilizaron curvas de tiempo-muerte
bacteriana, siguiendo la metodología descrita en la normativa de los Estándares Europeos
EN1040 2 y PrEN12054 3 (EN 1040,1997. PrEN 12054, 1995) y Kawamura-Sato et al. 4
Previamente a realizar las curvas de tiempo-muerte, se comprobó que la solución de
neutralización (8% v/v Tween 80, 6% w/V saponina, 0.8% w/v lecitina, 2% w/v docedil sulfato
sódico, PBS) no inhibía el crecimiento bacteriano a las concentraciones utilizadas en el ensayo,
y que una dilución 1:10 de la solución de neutralización era capaz de neutralizar la actividad
bactericida de Prontosan®. Para las curvas de tiempo-muerte, con un inoculo inicial de 5x10 5
UFC/mL, se utilizaron concentraciones de Prontosan® equivalentes a 0.25, 1, 4 y 8xCMI.