Informe actividad Prontosan® frente a bacterias multiresistentes nosocomiales

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Se tomaron alícuotas a diferentes tiempos (0, 5´, 10´, 15´, 30´, 1h, 2h, 4h, 8h y 24h), que fueron neutralizadas e inoculadas en placas Mueller-Hinton agar para el recuento bacteriano. Se consideró que Prontosan® tenia actividad bactericida cuando a la concentración ensayada, se conseguía una reducción 3 log UFC/mL. Con el fin de complementar estos estudios, se realizaron curvas de crecimiento bacteriano monitorizando la turbidez (DO a 595 nm) del medio con un lector automático de microplacas (Infinite F200PRO, TECAN). Los experimentos se realizaron en ausencia y presencia de diferentes concentraciones de Prontosan® (0,25, 1, 2, 4 y 8 x CMI) utilizando un inoculo bacteriano de 5x10 5 UFC/mL. Adicionalmente, la actividad bactericida de Prontosan® se determinó mediante el test de dilución-neutralización siguiendo el Estándar Europeo PrEN 12054 3 . Brevemente, un inóculo bacteriano inicial de 10 6 UFC/mL fue incubado durante 1 minuto con el producto sin diluir, y seguido de un proceso de neutralización, se contaron las UFC mediante diluciones seriadas en placas de Mueller-Hinton agar. 2.4 Selección de Cepas con sensibilidad reducida in vitro a Prontosan® La selección de cepas con sensibilidad reducida a Prontosan® se llevó a cabo por dos métodos distintos: 1) difusión en agar utilizando discos impregnados con diferentes concentraciones de Prontosan®;; y 2) Pases seriados en placas con concentraciones crecientes de Prontosan®, desde 0.5xCMI de cada cepa y crecientes en Log 2 . Todos estos experimentos se realizaron por triplicado en 3 días distintos.
3. RESULTADOS 3.1 Microdilución en caldo Como se muestra en la tabla 1, los valores de CMI y CMB obtenidos con la colección de cepas ATCC fueron variables (0.5-4 mg/L). Las cepas más sensibles a Prontosan® fueron S. aureus, K pneuumoniae y E. cloacae. Los valores de CMB fueron iguales a los de CMI para todas las cepas testadas, con excepción de E. cloacae, la cual fue una dilución superior (Tabla 1). Tabla 1. Valores de CMI/CMB de Prontosan® frente a cepas estándar. CEPA CMI (mg/L) CMB (mg/L) 1 Enterococcus faecium ATCC 35667 2 2 2 Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,5 0,5 3 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 0,5 0,5 4 Escherichia coli ATCC 25922 1 1 5 Acinetobacter baumannii ATCC 19606 4 4 6 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 4 4 7 Enterobacter cloacae ATCC 13047 0,5 1 8 Enterococcus faecalis ATCC 29212 1 1
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