sistemas de secuenciación masiva

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- Secuenciadores a) Secuenciación. b) Análisis de fragmentos (tamaño o semicuantitativo) - I/D (pequeñas), STRs y VNTRs - I/D (grandes alteraciones) - TÉCNICAS CONVENCIONALES - Termocicladores cuantitativos a tiempo real a) Cuantificación de la expresión b) Cuantificación del número de copias (I/D) c) Identificación de mutaciones
TÉCNICAS BASADAS EN TERMOCICLADORES CUANTITATIVOS A TIEMPO REAL Principales características: Basados en la detección de fluorescencia en cada ciclo de amplificación. Analizan hasta 384 muestras simultáneamente. Aplicaciones: Cuantificación de ADN: - Identificación de la presencia de mutaciones de I/D. - Presencia de ADN de patógenos. Cuantificación de ARN: - Determinación de la presencia de patógenos (virus de ARN o expresión de genes) y su cuantificación. - Niveles de ARNm: variaciones de la expresión génica en función de una variación. Detección de mutaciones o polimorfismos Limitaciones: Necesidad de conocer la secuencia. Solo permiten detectar una o unas pocas mutaciones por reacción. Análisis de enfermedades causadas por una o unas pocas mutaciones. Normalización (cuantifiación de expresión o ARNm).
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