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Articulo 10 - Actaf

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78<br />

CUBA TABACO Vol. 12, No. 2, 2011<br />

cia adicional del movimiento de la fase mó<br />

vil permite la separación, identificación y<br />

cuantificación del analito de interés en cada<br />

caso. Las condiciones de trabajo del<br />

cromatógrafo se resumen en la tabla 2. Los<br />

pasos de preparación de la muestra (ver 2.2)<br />

deben efectuarse en paralelo tanto a los filtros<br />

donde se fumaron muestras problema,<br />

como a soluciones preparadas con concentraciones<br />

conocidas de nicotina y agua con<br />

su respectivo estándar interno según el caso<br />

(tabla 3) (ISO <strong>10</strong> 362-1, 1999; ISO <strong>10</strong> 315,<br />

2000; CRM 66, 2005; CRM 67, 2005).<br />

Los cromatogramas brindados por el equipo<br />

de cromatografía (figura 3) se utilizan<br />

para calcular las áreas de los picos de cada<br />

compuesto y para ajustar las ecuaciones de<br />

calibración correspondientes. Con los promedios<br />

de cada una de las razones de área<br />

de las muestras problema (analizadas al<br />

menos por duplicado), se efectúa el cálculo<br />

de la concentración en mg/ml del compuesto<br />

a determinar, empleando las ecuaciones<br />

de calibración desarrolladas con soluciones<br />

patrones que contienen los estándares internos<br />

(tabla 3, figura 3). Es necesario asegurarse<br />

de que las concentraciones en mg/<br />

ml están en el intervalo de las soluciones<br />

estándard previamente preparadas.<br />

Para el CO resulta necesaria una calibra-<br />

Tabla 3. Curvas de calibración e intervalos de concentración (en mg/cigarrillo)<br />

de cada analito problema (ISO <strong>10</strong> 315, 2000; ISO <strong>10</strong> 362-1, 1999)<br />

Figura 3. Representación esquemática de un cromatograma donde se observa el pico del compuesto<br />

de interés y el del estándar interno. En la representación de las curvas de calibración se indican<br />

puntos con concentraciones ascendentes de nicotina o agua que se corresponden con incrementos<br />

de los cocientes: área del compuesto/ área del estándar interno.

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