landivar giovana-201.. - Facultad de Ciencias Veterinarias - UAGRM ...

Las condiciones para la elaborac ión del método de PCR fueron las
condiciones utilizadas en el LIDIVET, empleando los Pr imers TWJ ½
a una concentración de 2 micromolar y los Primers TBR1/2 a una
concentración final de 0,4 um de volumen. Se preparó la solución de
PCR, adicionando a los ready To Go -beads, agua, los Primers y la
muestra extraída de ADN y se adicionaron las muestras a
temperatura de 4 °C. Se llevaron los tubos de PCR al termociclador
con los respectivos programas:
Para el T. vivax
T° Tiempo(min.)
94 °C 3 Incubación inicial
94 °C 1 Desnaturalización
55 °C 2 Hibridación
72 °C 2 Extensión
72 °C 5 Incubación final
Para el T. evansi
T° Tiempo(min.)
94 °C 3 Incubación inicial
94 °C 1 Desnaturalización
55 °C 1 Hibridación
72 °C 1 Extensión
72 °C 5 Incubación final
4.2.2.2.3. ELECTROFORESIS
Procedimientos:
Se prepago gel agarosa al 1.5%, con Tris Acetate EDTA (TAE 10x)