DETECCION SEROLOGICA DE Neospora caninum EN ... - Ibero Vet

UNIVERSIDAD IBEROAMERICANA
DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA
Facultad de Medicina Veterinaria,
Ciencias Agrarias y Forestales
Departamento de Patología Profesor Guía:
Dr. Flavio Briones Silva
Médico Veterinario
Profesor Colaborador:
Angel Patitucci Muscolini
Médico Veterinario
Detección serológica de Neospora caninum en
perros procedentes de tres diferentes grupos
periféricos de la Región Metropolitana.
Carla Francisca Flores Yánez
Santiago de Chile
2006
Trabajo de Investigación
para optar al título de
Médico Veterinario

Índice
Resumen………………………………………………………………………. 4
Summary………………………………………………………………………. 5
Introducción…………………………………………………………………… 6
Ciclo de vida…………………………………………………………………... 7
Página
Signos clínicos………………………………………………………………… 10
Diagnostico……………………………………………………………………. 12
Tratamiento……………………………………………………………………. 14
Importancia económica……………………………………………………….. 15
Zoonosis………………………………………………………………………. 16
Objetivos………………………………………………………………………. 17
Materiales y Método…………………………………………………………... 18
Resultados……………………………………………………………………... 22
Discusión……………………………………………………………………… 26
Conclusiones…………………………………………………………………... 28
Bibliografía……………………………………………………………………... 29
Anexo I…………………………………………………………………………. 34
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Agradecimientos
Llegó rubia y suave como la noche naciente y en sus esferas de niño vi nacer,
incondicional, el amor. Llegó con una fina cadena atada al corcel de mi alma y traía la risa
y el canto en sus antenas de piel. Llegó suave y rubia. Como un beso escondido. Como
huella en el universo. Y se quedó a nuestro lado identificando amores y descubriendo las 15
llaves para quince alegrías. Era lo urgente, lo caudaloso. Era la magia azul en un ladrido.
Era un gemido y una lágrima entumecida. Era una pregunta sin respuestas. Un árbol que no
daría frutos. Era como una hoja, como la vuelta eterna de la vida. Iba y venía en ese paraíso
de sombras que ella iluminaba tan solo con su existencia canina. Y se fue un día, tuvo que
irse. Y tuve que ayudarla a partir y en mis brazos húmedos llegó silenciosa la muerte.
Como un ladrón que nadie quiere Y se llevó la última mirada, el último suspiro y con ellos
se llevó arrastrando mi dolor sin medida.
(Maria Cristina Aliaga Luna)
Gracias Victoria Trinidad por los 15 maravillosos años que compartiste junto a nosotros.
Todo este esfuerzo te lo dedico a ti.
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Resumen
En la actualidad ha adquirido importancia una enfermedad infecciosa que afecta a una serie
de animales mamíferos, dentro de estos a los perros llamada Neosporosis canina, la cual ha
sido subdiagnosticada y confundida con otras enfermedades de signología nerviosa.
En los caninos clínicamente se afectan tanto cachorros como perros de más edad y la
infección puede transmitirse de forma intrauterina. En la mayoría de los casos los signos
son una parálisis ascendente de los miembros posteriores, flácida o espástica, siendo más
afectados cachorros menores a 6 meses. La infección puede diseminarse en todo el
organismo y afectar diversos órganos hasta provocar la muerte.
El objetivo del trabajo fue la detección serológica de Neospora caninum en perros sanos y
con signología compatible para evaluar el ambiente y posibles formas de contagio de los
perros positivos.
Se obtuvo muestras de suero de 110 perros, distribuidos en tres grupos; los que fueron
analizados mediante prueba de inmunofluorescencia indirecta. Además mediante encuestas
se evaluó ambiente y formas de vida. Se detecto un 35,5% reaccionaron positivos y
sugieren como factores importantes de riesgo, la edad, tipo de alimentación y uso de
glucocorticoides.
El presente estudio es el primero realizado en perros rurales y urbanos en la Región
Metropolitana.
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Summary
At the present time an infectiuos desease has begun to take importance. This desease which
affects a series of mammalian animals, within these, the dogs.Is called Canine Neosporosis
and it has been subdiagnosed and confused with other deseases of nervous signology.
In the canine ones, either puppies and older dogs have been clinically affected. The
infection can be transmited by an intrauterine form. In the most of the cases the symptoms
are an ascending paralysis of the later members, or a spasmodic flacidity, which mainly
affectes puppies of about six months. This infection can scatter itself throughout the whole
organism, finally causing death.
The objective of the work was the serologic detection of Neospora caninum in healthy
dogs, with a compatible signology, in order to evaluate the possible ways or forms of
infections, among positive dogs.
110 separate dogs were studyed in three different groups; they have to analyse by means
indirect inmunihistoquimic. Also by means inquiry to evaluate the enviroment and life
form. To detect an 35,5% positive reaction and with important factors of risk, such as the
age, the feeding types and the use of glucocorticoids.
The present study, is the first one made among rural and urban dogs of the Metropolitan
Region.
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Introducción
En la práctica clínica de la Medicina Veterinaria de animales menores a diario se
encuentran una serie de enfermedades de tipo infeccioso que son tratadas sin realizar
exámenes complementarios que ayuden a identificar la causa primaria y que por lo tanto
llevan a un mal resultado de estos tratamientos incluso a la muerte del paciente.
Una de estas enfermedades que se considera como emergente y que puede estar siendo
subdiagnosticada es la Neosporosis canina, la cual es confundida con problemas
principalmente de tipo nervioso como son en algunos casos el Distemper y
Toxoplasmosis.
La Neosporosis es producida por un protozoo de ubicación intracelular del philum
Apicomplexa (Ellis y col., 1994; Holmdahl y col., 1994) llamado Neospora caninum
(Figura nº1) identificado por primera vez en perros noruegos en 1984 con signos
neurológicos que se confundía con toxoplasmosis. Posteriormente el parásito se aisló e
identifico como causante de signos tales como encefalitis y miositis (Dubey y col.,
1988). Sin embargo estudios retrospectivos sugieren que este organismo ha infectado
perros por muchos más periodos de tiempo (Dubey, 1992).
Figura Nº 1: Neospora caninum
(Upton S. J, 2006)
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Ciclo de Vida
Se desconoce el ciclo de vida completo de este microorganismo, pero se sabe que el
perro es el huésped definitivo del parásito (Mcallister y col., 1998; Lindsay y col., 1999).
El ciclo de vida es tipificado por tres estados infecciosos: Taquizoito, Quiste, y
ooquistes. Los taquizoitos y los quistes (figura nº2) son los estados encontrados en los
huésped intermediario y son intracelulares (Dubey y col., 2002).
Figura Nº 2: Taquizoitos de Neospora caninum
(USDA, 2006)
El ciclo del protozoo (figura nº3) infecta caninos domésticos y salvajes, rumiantes y
caballos, donde el perro se comporta tanto como huésped definitivo como intermediario.
Los carnívoros adquieren el parásito por ingesta de tejido infectado (McAllister y col.,
1998; Lindsay y col., 1999a, 1999b; Dijkstra y col., 2001; Schares y col., 2001; Gondim
y col., 2002), y eliminan ooquistes que esporulan en el medio, formándose en su interior
4 esporozoitos cada uno, lo que a su vez contaminarían el alimento y agua de bebida de
los animales de producción (Lindsay y col., 1995,Mcallister y col., 1998).
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Potencialmente, las especies no domesticadas pueden jugar un rol de hospederos
definitivos y/o intermediarios en el ciclo de transmisión de esta enfermedad. Las
encuestas serológicas detectaron la presencia de anticuerpos contra Neospora caninum en
animales silvestres capturados como coyotes, zorros, búfalos de agua y camélidos.
Experimentalmente, ratones, ratas, patos, zorros, coyotes, cerdos, conejos, monos y
palomas han sido infectados con Neospora caninum (Barling., 2000).
Figura Nº 3: Ciclo de vida de Neospora caninum
(Dubey, 2003)
Neospora caninum se reproduce mediante endogenia. Taquizoitos y Quistes titulares que
contienen bradizoitos son la única forma de Neospora caninum que han sido encontrados
en animales con infección natural (Wouda y col., 1999).
Dependiendo del estado de división en el tracto intestinal Neospora caninum penetra en
las células y cambia a taquizoito. Los taquizoitos se dividen rápidamente, causando daño
tisular, y se disemina la infección a los tejidos del huésped. Los taquizoitos (figura nº4)
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son ovoides, semilunares o globulares de 3 – 7 x 1 um. Los quistes son ovoides sobre
110 µ de largo y se encuentran solo en tejido nerviosos. La pared del quiste es suave y
mide sobre 4 µ, dependiendo de la cronicidad de la infección. Los bradizoitos se dividen
lentamente y tienen estados de latencia, miden de 6 a 8 x 1 a 2 um (Lindsay y col., 1999).
Figura Nº 4: Estructura de un Taquizoito
(Imbiomed, 2004)
Los ooquistes de Neospora caninum esporulan fuera del hospedador y son
morfológicamente similares a Toxoplasma gondii encontrados en heces caninas (Dubey y
col., 2002).
Los quistes tisulares sobreviven sobre 14 días a temperatura de 4ºC pero no son
infectantes a -20ºC. Casos de neosporosis han sido reportados en la mayoría de los países
desarrollados (Dubey and Lindsay, 1993; Morales y col., 1995) abarcando los cinco
continentes.
Cuando los ooquistes son ingeridos por el huésped intermediario, se desenquistan y se
libera el esporozoito infectante en el tracto intestinal. Los taquizoitos se dividen
rápidamente, causando daño tisular y diseminando la infección a otros órganos como
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hígado, pulmones, corazón, piel, páncreas, estomago, nódulos linfáticos, bazo, ojos y
suprarrenales (Lindsay y col., 1999).
Signos Clínicos
En los caninos clínicamente se afectan tanto cachorros como perros de mayor edad y la
infección puede transmitirse de forma intrauterina (Dubey y col., 1988, Cole y col.,
1995).En la mayoría de los casos los signos son una parálisis ascendente de los
miembros posteriores, que puede ser flácida o espastica, siendo más afectados perros
menores a 6 meses de edad. También dentro de los signos clínicos se incluyen dificultad
para tragar, miocarditis, dermatitis y neumonía. Una infección diseminada es más
común en perros de mayor edad (Reichel., 2000).
Los casos más severos ocurren en animales jóvenes infectados de forma congénita, los
signos clínicos pueden presentarse desde los primeros días después de nacer pero la
mayoría de los casos son observados entre la 4º y 10º semana (Guillot y col., 2000).
La parálisis ascendente de algunos cachorros termina en una hiperextensión donde son
mas afectados los miembros posteriores que los anteriores. Los perros se encuentran
alertas y sobreviven por meses. La causa de la hiperextensión de los miembros
posteriores no esta bien determinada aún, pero se asocia a una combinación de miositis
y parálisis de motoneurona superior que conlleva a una rápida fibrosis de los músculos
y una fijación de las articulaciones, la sensibilidad dolorosa es siempre conservada
(Guillot y col., 2000).
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Figura Nº 5: Perro con Neosporosis, hiperextensión de miembros posteriores.
(Veterinary Information for Dogs, Julio 2006)
La enfermedad puede ser localizada o generalizada y puede involucrar a todos los
órganos. En perros más adultos la neosporosis se ha detectado hasta en animales mayores
a 15 años de edad pero la presentación clínica es mas variada, no se sabe si los casos
corresponden a una primo-infección o a una reactivación de los quistes bradizoitos. La
mayoría tiene signos neurológicos, también mueren o presentan problemas dérmicos
similares al de los cachorros (Lindsay y col., 1999).
Perras infectadas subclinicamente pueden transmitir el parásito en sucesivas camadas,
donde cachorros de una misma camada pueden nacer infectados y no infectados. No se
ha registrado susceptibilidad por raza ni sexo pero si se ha visto que ciertas razas
principalmente de trabajo son mas infectadas como el Labrador retriever, Bóxer,
Greyhound, Golden retrievers y Basset hound (Lindsay y col., 1999).
Neospora caninum causa muerte celular por multiplicación activa de los taquizoitos. Es
capaz de producir lesiones necróticas visibles en unos pocos días. Parece ser un patógeno
primario ya que no hay otra etiología o agente que se haya identificado en una infección
natural de un perro con consecuencias fatales (Lindsay y col., 1999). Puede destruir una
gran variedad de células nerviosas, incluyendo nervios craneales y espinales, la presencia
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de una gran cantidad de estos organismos puede alterar la conductividad de las células
afectadas (Lindsay y col., 1999).
La administración de glucocorticoides ha sido la responsable de la aparición de signos
clínicos de neosporosis experimentalmente, una terapia inmunosupresiva es suficiente
para inducir una afección generalizada mortal en el perro (Guillot y col., 2000).
Diagnóstico
Se sospecha de Neosporosis en perros con paresia o ataxia de los miembros posteriores.
Una historia de enfermedad neuromuscular neonatal en más de un cachorro o más de una
camada de la misma perra también sugiere Neosporosis (Lindsay y col., 1999).La
Toxoplasmosis se presenta con sinología similar pero una prueba serológica determinará
la diferencia (Reichel y col .2000).
La detección de títulos de anticuerpos séricos mediante inmunofluorescencia indirecta
(IFA Test) es el primer método diagnóstico desarrollado para caninos y es aun el más
usado. En el se sugiere que títulos de anticuerpos de 1:800 o superiores se considera una
infección reciente o reactivación, sin embargo algunos cachorros infectados
congénitamente pueden presentar títulos tan bajos como 1:100 (Lindsay y col., 1999).
Figura Nº 6: Microfotografia electrónica de taquizoitos de Neospora caninum.
(Electronic Journal of Polish Agricultural Universities, 2003)
12

Los ooquistes nunca han sido observados en infecciones sistémicas activas de Neospora
caninum. Esto indica que el examen coprológico es probablemente poco valorable en la
detección de la enfermedad. Algunas pruebas Inmunohistoquímica pueden confirma
infecciones en cachorros que fueron examinados a la necropsia (Lindsay y col., 1999).
Para la identificación directa se pueden utilizar taquizoitos o quistes con bradizoitos. Los
taquizoitos pueden ser examinados directamente a partir de un lavado bronco alveolar, de
una citopunción (pulmonar, cutánea, etc.…) y en ocasiones en el fluído cerebro espinal.
El examen histológico de una biopsia muscular también puede revelar la presencia de
taquizoitos, asociada a lesiones necroticas y de mineralización (Guilliot y col., 2000).
Figura Nº 7: Morfología de un Taquizooito y Ooquiste
(Cordero del Campillo, 1999)
La identificación de los quistes requiere de un examen histológico y no puede realizarse
sino a la muerte del animal ya que los quistes se localizan exclusivamente en células
nerviosas (encéfalo, medula espinal, retina). Las lesiones de los tejidos nerviosos son
multifocales y no supuradas (Guilliot y col., 2000).
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Figura Nº 8: Morfología de un Quiste y Bradizoito
(Cordero del Campillo, 1999)
Tratamiento
El tratamiento de la Neosporosis ha sido definido por analogía con el de un parásito muy
cercano, el Toxoplasma. Unos cuarenta principios activos han sido probados sobre
cultivo celular como el trimetoprim y algunos ionóforos como el iasalocid y monensin
(Guillot y col., 2000).
Valoraciones in vitro demuestran actividad de macrólidos (acitromicina, claritromicina y
eritromicina), tetraciclinas (Doxiciclina y minociclina) y lincosamidas (Clindamicina).
Para el tratamiento de la neosporosis canina se han administrado clindamicina (11 a 32
mg/kg dos a tres veces al día), asociación sulfatrimetropin (15 mg/kg dos veces al día por
4 a 6 semanas (Dubey y col., 2000).
La clindamicina parece ser la molécula de elección para el tratamiento. Este antibiótico
es generalmente bien tolerado. Las sulfamidas potencializadas son empleadas como
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segunda elección. Una suplementacion con ácido fólico (5mg día) es útil para prevenir
los riesgos de anemia (Guillot y col., 2000).
Sin embargo no es probable la mejoría clínica cuando hay contractura muscular o
parálisis que avanza con rapidez. A fin de reducir la posibilidad de enfermedad, es
necesario tratar a todos los perros de una camada afectada (Lindsay y col., 2000).
Importancia Económica
Uno de los aspectos más importantes de la Neosporosis canina es el hecho de ser
potencialmente el principal responsable de la Neosporosis bovina.
Pérdidas significativas de producción que resulta de la Neosporosis bovina han sido
descritas en la industria lechera e incluyen, tanto perdidas relacionadas directamente con
el aborto como las perdidas fetales, aumento del intervalo servicio/concepción, aumento
de los días abiertos, aumento de la tasa de reemplazo y eliminación (Trees y col.,1999;
Barling, 2000).
En el año 2004 la inspección realizada por el Servicio Agrícola y Ganadero arroja que se
realizaron 6 denuncias de Neosporosis dentro de las cuales existieron 2087 vacas
expuestas de las cuales 38 estaban afectadas.
Los perros juegan un rol importante en la epidemiología debido a que es el huésped
definitivo. No es conocido en la actualidad cuanto tiempo el perro puede eliminar
ooquistes en sus fecas durante su vida, o cuan sólida es la inmunidad intestinal para la
reinfeccion. Es muy probable que los abortos bovinos por Neosporosis sean causados por
la ingesta de ooquistes de Neospora caninum en fecas contaminadas (Lindsay y col.,
1999).
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Costos indirectos incluyen ayuda profesional y costos asociados a establecer el
diagnóstico, reencaste, posibles pérdidas de leche y los abortos (Thurmond y Hietala,
1996, 1997; Hernández y col., 2001).
Poco se sabe sobre las pérdidas de producción en la industria del ganado de carne. Un
estudio en Canadá indicó que pérdidas significativas en vacas de carne seropositivas
incluyen el aumento de riesgo a mortinatos y de eliminación (Waldner y col., 2001).
Zoonosis
El potencial zoonótico de Toxoplasma goondii es bien conocido, en contraste el potencial
zoonotico de Neospora caninum es desconocido. Como sea es conocido que es capaz de
infectar un gran rango de especies (Dubey y Lindsay, 1966), incluyendo primates. Barr y
otros en 1994 infecto exitosamente macacos (Macaca mulatta) inoculando fetos
intrauterinamente y transplacentariamente, seguido de inoculación intramuscular e
intravenosa de hembras preñadas. Las consecuencias de una infección humana pueden
ser serias considerando la infección congénita sucesiva de caninos y bovinos, estudios
serológicos negativos post exposición a Neospora caninum en humanos sugiere que no
es una zoonosis bajo condiciones naturales (Graham y col., 1999).
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General
Objetivos
Detección serológica de Neospora caninum en perros sanos y con signología
Específicos
compatible provenientes de consultorios Médicos Veterinarios, lecherías y un
refugio de la Región Metropolitana.
Asociar la distribución de serotipos según sexo, edad y de ingestión de carne
bovina.
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Materiales
Materiales y Método
Se trabajó con 110 perros de distinto sexo, edad, alimentación y condiciones de vida, 60
de estos presentaban signología compatible a Neosporosis provenientes de consultorios
Médico Veterinario periféricos, 34 de un refugio de animales en la comuna de la Pintana
y 16 de tres lecherías Noviciado, Padre Hurtado y Paine. Se seleccionaron mediante una
encuesta realizada a los propietarios desde agosto hasta octubre del año 2005. Los
animales de los consultorios que presentaran a lo menos un signo compatible entraron al
estudio, los del refugio y lechería fueron escogidos al azar.
Se les extrajo sangre para la obtención de suero, el que fue mantenido a -20ºC hasta su
procesamiento en el Laboratorio de la Facultad de Medicina Veterinaria de la
Universidad Católica de Temuco.
Los animales de signos compatibles fueron pacientes de tres consultorios de la
Universidad Iberoamericana donde recurrían por posible Distemper u otra afección con
signología neurológica no especificada. Los perros que convivían en el refugio eran 180
aproximadamente, y eran recogidos por la dueña y mantenidos sueltos en un amplio
espacio con comida y refugio, todas las hembras eran ovariohisterectomizadas, los
manejos en salud eran básicos donde se trataban las enfermedades particulares y
colectivas como la sarna, se desparasitan cuando se podía. Los perros de las lecherías los
mantenían principalmente como seguridad para los predios donde tenían acceso a todas
las instalaciones y no tenían un mayor cuidado sanitario.
La información específica de cada paciente se obtuvo mediante una encuesta que se le
realizó a cada dueño donde se especifican antecedentes tales como manejo sanitario, tipo
de alimentación, ambiente y enfermedades (Anexo I).
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Los materiales utilizados para la recolección de muestras fueron:
Tubos estériles sin anticoagulante
Tubos eppendorf
Algodón y Alcohol yodado
Jeringas 3 ml estériles
Los materiales utilizados en laboratorio fueron:
Tubos eppendorf de 2 ml
Micropipeta
Guantes
Cubre objeto
Placa
Papel alusa
Kit “IFA Test” Neospora caninum
IFA Test corresponde a un Kit (figura nº 7) que consta de 10 placas para 10 muestras
cada una más un control positivo y otro negativo. Un envase de control positivo y
uno negativo, un envase de conjugado y otro de medio de montaje. Más un manual de
instrucciones.
Figura Nº 9: Kit Neospora caninum
(Adams, 2006)
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Método
La recolección de muestras sanguíneas se realizó entre agosto y octubre del año 2005 y
los animales estudiados se separaron en tres grupos. Primero los con signología nerviosa
compatible, luego los de lechería y del refugio sin signología. De estos tres grupos se
recaudó información relevante para el estudio mediante la encuesta (Anexo I) realizada a
los dueños. Cada animal ingresado al estudio fue sometido a un examen clínico previo a
la toma de la muestra.
La toma de muestras se realizó de la arteria radial y fueron identificadas con los datos del
paciente y dejadas en reposo 24 horas a temperatura ambiente para la obtención de suero
el cual se extrajo y colocó en tubos eppendorf, manteniendose a – 20ºC hasta su
procesamiento.
Para el análisis serológico los sueros congelados se dejaron a temperatura ambiente.
Luego se diluyeron 1µ de suero en 15 µ de PBS a pH 7,2. De la dilución obtenida se
colocó 10 µ en cada ranilla de la placa del kit, esta se colocó en una placa húmeda y se
llevó a la estufa a 37ºC por 30 minutos. Pasado este tiempo se enjuagó la placa y se
agregó el conjugado y se volvió a llevar a la estufa por 30 minutos más. Posteriormente
se enjuagó y se agregó el medio de montaje para cubrir la placa con un cubre objeto y se
envolvió en papel aluminio para ser refrigerado.
Procesadas todas las muestras se leyeron en un Microscopio de Inmunofluorescencia,
sistema epifluorescente a 40X y se interpretaron las lecturas en cinco grupos:
1. Negativos: Los que no presentaron taquizoitos.
2. Apicomplexa (AP): Los que presentaban taquizoitos pero con fluorescencia
apical, lo que corresponde a otro género de protozoo.
3. Positivos Leves: Poca cantidad de taquizoitos, leve fluorescencia.
4. Positivos Moderados: Moderada cantidad de taquizoitos, fluorescencia media.
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5. Positivos Severos: Muchos taquizoitos con mucha fluorescencia.
Esta clasificación es solo útil en el caso de que se quisieran realizar más diluciones para
determinar el momento de la infección pero, en este estudio la lectura fue cualitativa.
Para análisis estadístico se utilizaron dos métodos la prueba exacta de Fisher, la que
permite analizar si dos variables están asociadas cuando la muestra a estudiar es
demasiado pequeña; y la prueba de Mann – Whitney. Ambas fueron realizadas utilizando
GraphPad Prism versión 4.0 para Windows, GraphPad software San Diego, California,
USA. Esta última se utiliza para valorar si existen diferencias en las proporciones de cada
categoría observada entre grupos diferentes.
Por último los resultados se expresaran en Tablas y Gráficos.
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Resultados
Los perros del Grupo Nº1, con signología compatible, (60) fueron animales en su
mayoría mestizos, con hogares estables donde se les da cuidados básicos, comen “pellet”
y comida casera, sus dueños los llevan al consultorio por que ya están días o meses
enfermos, generalmente con escasos recursos para su tratamiento, y en estados avanzados
de enfermedad. Todos presentaban alguna sintomatología nerviosa de las señaladas en el
Anexo I, prediagnosticados como Distemper y fueron tratados con los medicamentos
adecuados para la enfermedad.
El Grupo Nº 2, pertenecientes al refugio La Pintana, (34) eran perros callejeros recogidos
por presentar algún trastorno físico evidente (atropello, herida, enfermedad), los cuales
habian sido tratados y, las hembras, ovariohisterectomizadas. Viven todos libres en un
amplio espacio y tienen acceso a comida (“pellet”) día por medio, agua fresca varias
veces al día, camas para dormir y techo para resguardarse de inclemencias. No se permite
la reproducción dentro del refugio. Se realiza solo medicina curativa y no preventiva.
El Grupo Nº 3, de lechería, (16) eran perros que viven dentro del predio y cumplen la
tarea de cuidadores y mascota, se alimentan con comida casera, “pellet” y restos
animales. Tienen contacto directo con los bovinos, algunas hembras son
ovariohisterectomizadas. En el plantel se mantienen a los perros externos controlados.
Solo se les realiza medicina curativa.
Del total de 110 perros de los tres grupos, 39 (35,5%) resultó seropositivo a Neospora
caninum. Dentro de los positivos 8 (13,3%) eran de consultorio; 21 (6,8%) provenian del
refugio y 10 (62,5%) de lechería (ver tabla Nº1).
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Tabla Nº 1: Grupos analizados para Neospora caninum
Grupo n Positivos % de positivos por grupo Negativos
Consultorios 60 8 13,3 52
Refugio 34 21 61,8 13
Lechería 16 10 62,5 6
TOTAL 110 39 35,5 71
La edad promedio de los animales seropositivos fue de 4 años 11 meses (Gráfico nº1),
siendo el promedio de edad de los perros seropositivos de consultorio de 3 años 11
meses, de los perros de refugio 4 años 6 meses y de los perros de lechería 6 años 3
meses. Mientras que en el caso de los perros negativos la edad promedio fue de 3 años , 2
años 3 meses en el grupo nº1, 4 años 1 mes en el grupo nº2 y 2 años 9 meses en el grupo
nº3. En los tres grupos se encontró diferencias significativas entre positivos y negativos
para la variable edad.
Edad en Años
Gráfico Nº 1 Promedio de edad en animales seropositivos y seronegativos.
7
6
5
4
3
2
1
0
3,11
2,3
4,6
4,1
6,3
2,9
Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3
Grupos
Animales Positivos
Animales Negativos
23

Respecto de la distribución de los seropositivos según sexo, del total de 59 machos 17
(28,8%) fueron positivos y del total de 51 hembras, 22 (43,1%) fueron positivas no
encontrándose diferencias significativa entre sexos.
Los signos más comúnmente registrados en los animales seropositivos pertenecientes a
consultorios fueron: dolor al caminar (37,7%), convulsiones (25%), ataxia e hiperestesia
(12,5%), en los negativos fueron cojera (34,6%), dolor al caminar (21,1%) e
incontinencia y convulsiones (19,2%). En el segundo y tercer grupo no se registraron
signos al momento de la anamnesis y examen clínico.
De los perros positivos con signología compatible (Grupo n°1), uno (12,5%) fue tratado
anteriormente con glucocorticoides mientras que los perros negativos 13 (25%) les
fueron administradas estas sustancias. Los animales de refugio y lechería no fueron
tratados con estos medicamentos. Existe diferencia significativa entre positivos y
negativos tratados con glucocorticoides.
De los animales seropositivos del primer Grupo, tres (37,5%) tuvo contacto con partos
de perras en el lugar donde vivían, y de los negativos 16 (30,7%). En el Grupo nº 2, de
refugio, no hay partos y en el Grupo nº 3 hubo cinco (50 %) de seropositivos y dos
(33,3%) de los negativos habia tenido este tipo de contacto.
En cuanto al tipo de alimentación, siete animales (87,5 %) del Grupo nº 1 (seropositivos)
habían ingerido algún tipo de sobras de bovino crudas o cocidas, mientras que 33
animales (63,4%) negativos se alimentó con este tipo de carne. Del refugio, 34 perros
(100%) comieron de esta carne y de lechería seis perros (60%) del grupo positivo y tres
(50%) del grupo negativo.
24

Grafico Nº 2 Distribución de positivos y negativos según antecedentes de ingestión
% Carne de Bovino
120,00%
100,00%
80,00%
60,00%
40,00%
20,00%
0,00%
87,50%
63,40%
de carne de bovino.
100%
0%
60%
50%
Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3
Grupo
Animales Positivos
Animales Negativos
25

Discusión
La Neosporosis canina es una infección muy contagiosa que está según estos hallazgos,
presente en la Región Metropolitana, tanto en perros rurales como urbanos. Muy
probablemente está siendo subdiagnosticada por los Médicos Veterinarios debido, quizás
al desconocimiento de la patología y por la similitud de los signos clínicos con
enfermedades más comunes como Distemper. Fue detectada por primera vez en Chile en
la IX Región por Patitucci y col., 2001 encontrando un 18% de seropositividad, mientras
que en este estudio se detectó un 35,5% de positivos en caninos.
Es el primer estudio para detección de Neospora canis en la Región Metropolitana y los
resultados revelan gran actividad de este protozoo. Posiblemente esto se deba a que estos
eran perros provenientes de consultorio Medico Veterinarios periféricos, los cuales,
tenían más posibilidades de tener contacto con factores de riesgo.
El primer factor a analizar en el estudio fue la edad donde los perros seropositivos fueron
de mayor edad que los negativos, debido principalmente a que la enfermedad en los
cachorros es altamente mortal incluso con tratamiento y con mayor razón si no es
detectada correctamente. Mientras que en los perros adultos la afección es más
diseminada y hay más posibilidades de recuperación con un diagnóstico certero y
tratamiento adecuado. La hipótesis de una inmunosupresión ligada a la edad existe, pero
no se sabe si los casos observados en el adulto corresponden a una primo- infección o a
una simple reactivación de los quistes bradizoitos (Guillot y col., 2000).
El sexo no parece ser un factor de predisposición para la neosporosis canina. Se cree que
se produce mas en hembras debido a que es una enfermedad que hace latencia y
manifiesta signos clínicos luego de una inmunosupresion que en este caso podría ser
producida por el estrés del parto y la lactancia.
26

Los signos clínicos detectados en su mayoría son de tipo neurológico tanto en animales
positivos como negativos, ya que estos signos fueron condición para el ingreso en el
primer grupo estudiado y los dueños acuden al veterinario por sospecha de Distemper.
Los más registrados fueron signos poco específicos como cojera o dolor al caminar ya
que a los dueños les cuesta expresar el tipo de conducta que adquieren sus mascotas al
momento de enfermar y muchos no saben datos más especificos. Menos observados
fueron ataxia, hiperestesia y convulsiones ya que muchos dueños que se dirigen a estos
centros no cuenta con lo medios para seguir terapias medicas por largos periodos y optan
por la eutanasia.
En el presente estudio un alto porcentaje de animales fue tratado con glucocorticoides
debido a que este tipo de medicamentos es uno de los principales utilizados en la terapia
contra el Distemper en los recintos analizados. Estudios anteriores sugieren que terapias
prolongadas o inmunosupresoras con estas sustancias son causales de la aparición de
signos clínicos tanto en cachorros como en adultos.
Los perros seropositivos tuvieron mas contacto con partos de perras que los negativos lo
que es un factor a considerar ya que el alimentarse de restos de cachorros es parte del
ciclo de infección. Aun cuando la transmisión vertical no afecta a todos los cachorros de
la camada, persiste por varias generaciones.
Finalmente un alto porcentaje de animales de los tres grupos fueron alimentados con
carne de bovino ya sea cruda o cocida la cual es la principal forma de transmisión de la
enfermedad. Las regiones del mundo donde la explotación de bovinos es más difundida
corresponde a aquellas donde la seroprevalencia en los perros es más elevada.
27

Conclusiones
Neospora caninum está presente en perros sanos y con signología compatible,
urbanos y rurales de la Región Metropolitana.
El ambiente donde viven y se desarrollan los perros rurales seropositivos, es un
factor importante al momento de la infección, ya que al estar más expuestos a
factores de riesgo como son los bovinos aumentan los casos positivos.
El consumo de carne de bovino ya sea cruda o cocida aumenta el riesgo de
infección de Neosporosis en perros.
28

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34

Anexo I
Encuesta para Estudio de Neospora
Clínica: Fecha: Nº:
Información general
Nombre Propietario: Fono:
Dirección:
Nombre Paciente: Raza: Sexo:
Edad:
Examen Clínico
Condición Corporal (escala de 1-5): Tº: Fr: Fc:
Vacunas: si□ no□ Antiparasitario: si□ no□
Cuales: _____________ Cuales: ___________________
Cuando: ____________ Cuando: ___________________
Observaciones:
Información Específica
1.- Su mascota ha presentado alguno de estos signos:
Neospora
• Deformación articular si □ no□
• Dolor al camina si□ no□
• Rigidez de algún miembro o cuello si □ no□
• Incontinenta urinaria si □ no□
• Convulsiones si □ no □
• Inclinación de la cabeza si □ no□
• Cambios de conducta si □ no□
35

• Parálisis si□ no□
• Atrofia muscular si□ no□
• Disfagia si□ no□
• Cojera si□ no□
• Ataxia si□ no□
• Hiperestesia si□ no□
• Hiperextensión si□ no□
2.- ¿Su mascota ha sido sometido a algún tratamiento con glucocorticoides? si□ no□
3.- ¿Su mascota ha presentado signos de enfermedad anteriormente? si□ no□
4.-¿Dónde vive su mascota? Patio___ Dentro casa __ Calle ___ Otros___
5.- ¿Convive su mascota con otros animales? si□ no□
Gato___ Perros __ Aves___ Bovinos___ Equinos___ Ovinos___ Cerdos___ Roedor__
6.-¿Estos han presentado signos de esta enfermedad? si□ no□
7.-¿Conoce a los padres de su mascota? si□ no□
8.- ¿Ha habido partos de parras en la casa? si□ no□
9.- ¿La perra se ha comido alguna cría de ella u otra hembra? si □ no□
10.- ¿La perra ha presentado signos de esta enfermedad? si□ no□
11.- ¿Los cachorros de esta camada u otra han muerto? si □ no□
12.- ¿Ha ido su mascota al campo? si□ no□
13.- ¿Ha comido algún tipo de sobras de bovino? si□ no□
14.- ¿Estas sobras estaban crudas o cosidas? crudas □ cocidas □
Notas:
36