Producción y control de tuberculina bovina y aviar - Senasa
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Diluciones <strong>de</strong> la <strong>tuberculina</strong> D PP Aviar:<br />
2,5 mL <strong>de</strong> P.P.D. 250 mL diluyente buffer 1/100<br />
20 mL (1/200) 100 mL diluyente buffer 1/500<br />
20 mL (1/1000) 100 mL diluyente buffer 1/2500<br />
Mezclar bien los matraces aforados, pasar a tubo <strong>de</strong> ensayo con tapón <strong>de</strong><br />
goma reversible para po<strong>de</strong>r llenar las jeringas. Enjuagar cada jeringa con<br />
la dilución 2 ó 3 veces antes <strong>de</strong> llenarlas, fi nalmente enrasarlas y colocarlas<br />
numeradas en una ban<strong>de</strong>ja. Se inyecta 0,2 mL por dilución, tres diluciones<br />
a cada lado <strong>de</strong>l cobayo. Se numeran <strong>de</strong> 1 a 3 para la preparación <strong>de</strong> referencia<br />
y <strong>de</strong> 4 a 6 para la <strong>tuberculina</strong> <strong>de</strong> prueba.<br />
Ensayo <strong>de</strong> las <strong>tuberculina</strong>s <strong>de</strong> referencia y en prueba<br />
Distribución al azar<br />
Los seis sitios a usar en cada cobayo (tres en cada fl anco) son <strong>de</strong>nominados,<br />
en sentido oral a caudal, con las letras a, b, c para el costado izquierdo<br />
y e, f, g para el <strong>de</strong>recho. La dilución <strong>de</strong> la <strong>tuberculina</strong> a ser aplicada en cada<br />
sitio se <strong>de</strong>termina mediante el empleo <strong>de</strong> números aleatorios. Este procedimiento<br />
se sigue para cada animal y se preparará el protocolo <strong>de</strong> trabajo<br />
(Tabla I, pág. 20) <strong>de</strong>jando un espacio al lado <strong>de</strong>l número <strong>de</strong> la dilución para<br />
anotar la respuesta. En un ensayo <strong>de</strong> seis puntos usando nueve cobayos,<br />
las diluciones son asignadas en forma conveniente en los sitios <strong>de</strong> inyección,<br />
empleando dos cuadrados latinos <strong>de</strong> seis puntos por lado (6 x 6). Esta<br />
distribución asegura que cada dilución tiene el mismo sitio en solo dos cobayos.<br />
Transcurridas 24 horas se realiza la lectura <strong>de</strong> la pápula, induración<br />
y eritema, mediante una plantilla plástica (pág. 21).<br />
Los datos consignados en la Tabla I se vuelcan a un programa informático<br />
<strong>de</strong> Cálculo producido por el sistema WINDOWS.<br />
A los fi nes <strong>de</strong> uniformar la metodología, se adjuntan al Manual <strong>de</strong> Procedimiento:<br />
una plantilla plástica con circunferencias grabadas <strong>de</strong> los diámetros<br />
entre 6 mm y 27 mm y un C.D. con el programa informático <strong>de</strong> cálculo.