DiVERSiDAD DE honGoS MiCoRRíziCoS ... - Interciencia

molecular, se ha comenzado a caracterizar
las diversas especies de HMA presentes en
las raíces de las plantas en base a la comparación
de sus secuencias de ADN (Helgason
et al., 1998), pero el problema de la
significación estadística del muestreo en el
campo con estas técnicas aún dista mucho
de estar resuelto, por lo que la cuantificación
de esporas, aún con sus limitaciones,
sigue siendo la medida de diversidad de
HMA más utilizada.
En trabajos anteriores se
ha mostrado que la diversidad de HMA
sufre un impacto severo con las perturbaciones
y algunas especies parecen ser más
susceptibles que otras frente a las actividades
humanas, como es el caso de Scutellospora
spp. (Cuenca et al., 1998; Picone,
2000; Siqueira et al., 1989). En particular,
en La Gran Sabana, al sureste de Venezuela,
algunas zonas seriamente perturbadas
(préstamos) que fueron resembradas con
Brachiaria decumbens además de fertilizadas
y encaladas, presentaron un incremento
en cuanto al número de esporas de HMA
luego de la resiembra (Cuenca y Lovera,
1992). Sin embargo, su diversidad no se
recuperó al nivel de los ecosistemas naturales
aún después de 7 años de ocurrida la
perturbación (Cuenca et al., 1998).
En la actualidad, en muchos
préstamos este intento de recuperación
ha sido infructuoso, siendo prácticamente
nula su cobertura vegetal. El objetivo del
presente trabajo es contrastar el componente
micorrízico de estas sabanas perturbadas
(préstamos), en las que prácticamente no
se ha recuperado la cobertura vegetal, con
el de la sabana natural adyacente, determinando
el potencial infectivo y la diversidad
de HMA en ambas situaciones. Para evaluar
la composición de especies de HMA
se realizó un inventario exhaustivo en
distintas épocas del año (curso anual) y a
distintas profundidades en el perfil del suelo,
bajo la premisa que los cambios en la
dinámica de las comunidades de los HMA
que se presentan en la sabana perturbada
podrían estar relacionados con su escasa
capacidad de recuperación.
Materiales y Métodos
Sitio de estudio
En las cercanías del aeropuerto
de Luepa (5°47’N y 61°27’O), a
los bordes de la carretera que va desde la
Troncal 10 hasta la Estación Científica de
Parupa (ECP), en La Gran Sabana, estado
Bolívar, Velezuela, se demarcaron un total
de 6 parcelas de 10×30m cada una. De estas
parcelas, tres se marcaron en una sabana
perturbada (préstamo), en la cual los
primeros 50cm de suelo fueron removidos
para la construcción de la carretera aproxi-
madamente 10 años antes
de la realización de este
trabajo. Las otras tres parcelas
se demarcaron en un
área de sabana natural adyacente
dominada por Axonopus
pruinosus y Bulbostylis
paradoxa, entre otras
especies. La precipitación
mensual y la evapotranspiración
para el año de
mediciones se muestra en
la Figura 1, donde se evidencia
un clima estacional
con un período de sequía
de diciembre a marzo.
Análisis de Suelos
Se realizaron análisis de
los suelos tanto de la sabana natural como
del préstamo a distintas profundidades en el
perfil. La materia orgánica fue determinada
por el método de Walkey y Black (Jackson,
1976), los cationes intercambiables (Ca ++ ,
K + , Mg ++ y Na + ) fueron extraídos con una
solución de NH 4 OAc 1M (Thomas, 1982) y
determinados por espectrofotometría de absorción
atómica. La acidez intercambiable
(Al +++ +H + ) fue obtenida utilizando como
solución extractora KCl 1M y determinada
por titulación con NaOH (McLean, 1965).
La textura fue determinada por el método
de Bouyucos (Day, 1965). El P intercambiable
fue extraído por el método de membranas
según Tiessen y Moir (1993) y medido
en el extracto de acuerdo a Murphy y Riley
(1962). El N total fue obtenido por digestión
de la muestra en ácido sulfúrico concentrado
y peróxido de hidrógeno y determinado
posteriormente en un autoanalizador Technicon.
Mediciones realizadas
a- Bioensayo para determinar el potencial
micorrízico (infectividad) de los suelos.
Para realizar este bioensayo se siguió la
metodología propuesta por Plenchette et al.
(1989). Se pregerminaron un total de 100
plántulas de Vigna luteola para cada tipo
de suelo, las cuales se sembraron en conos
plásticos de 80cm 3 llenos con el suelo
a evaluar diluido al 1, 3, 10, 30 y 100%
con el mismo suelo previamente esterilizado
(8kGy). Se sembraron 10 plantas en
cada dilución para cada tipo de suelo para
un total de 200 plantas en todo el bioensayo.
Este procedimiento se llevó a cabo con
los suelos de las parcelas seleccionadas, en
cuatro momentos del año a saber: julio, octubre,
enero y abril, entre 1997 y 1998.
Las plantas se cosecharon
20 días después de la siembra, evaluando
la presencia de colonización micorrízica
mediante la tinción de Phillips y Hayman
Figura 1. Precipitación mensual y evapotranspiración de la Estación
de Kavanayén en La Gran Sabana, durante el período de estudio.
(1970). La presencia de al menos un punto
de entrada o inicio de colonización micorrízica
en la raíz se consideró como un
registro positivo. Los datos se expresaron
como MSI 50 por 100g de suelo seco y están
correlacionados positivamente con el
potencial micorrízico de los suelos.
b- Variaciones anuales de las poblaciones
de esporas de HM. Para inventariar los
HMA presentes se colectaron a lo largo
del año muestras superficiales de suelo (0-
15cm) en cada una de las 6 parcelas demarcadas.
Cada muestra se obtuvo al colectar
al menos 15 paladas de suelo al azar
a través de cada parcela. Las muestras se
guardaron en bolsas plásticas cerradas hasta
su traslado al laboratorio. Transcurridos
menos de 15 días después de la colección
en el campo, las muestras fueron homogeneizadas
cuidadosamente y las esporas
aisladas a partir de 50g de suelo por el
método de tamizado húmedo y decantado
seguido de centrifugación en sacarosa (Sieverding,
1991). Las esporas aisladas fueron
preservadas en azida sódica 0,05% (Morton
et al., 1993) hasta su análisis microscópico.
Se hicieron tres aislamientos de
50g c/u de cada una de las parcelas estudiadas.
Para el estudio de las variaciones
estacionales en las poblaciones de HMA se
colectaron muestras en cuatro épocas del
año, las mismas que para el bioensayo.
Solo las esporas que lucían
intactas y saludables se contaron y
separaron en distintos grupos morfológicos
bajo el microscopio estereoscópico (60×).
De cada morfotipo se preparó una lámina
permanente utilizando alcohol polivinílico
en lactoglicerina (PVLG) como medio
de montaje o PVLG + reactivo de Melzer,
de acuerdo a la metodología sugerida por
Morton et al. (1993). Las esporas fueron
identificadas hasta género y cuando fue
posible hasta especie, utilizando la literatura
especializada. De cada morfotipo se
prepararon láminas de referencia, y se ingresaron
en el herbario de HMA del IVIC.
c- Distribución de las esporas de HMA en
el perfil del suelo. Se estudió la presencia
FEB 2007, VOL. 32 Nº 2 109