VPH: Aspectos Relacionados a Laboratorio
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Family Community Health/Immunization Unit<br />
<strong>VPH</strong>: <strong>Aspectos</strong> <strong>Relacionados</strong> a <strong>Laboratorio</strong><br />
Simposio Subregional de Nuevas Vacunas: Neumococo, Rotavirusy HPV<br />
Caracas, Venezuela, 29 y 30 de Enero de 2008
Epidemiología del Virus del Papiloma Humano<br />
Familia: Papillomaviridae<br />
> 100 tipos (40 transm. sexual)<br />
Vírus: DNA<br />
Alvo principal las células epiteliales y la mucosa: tracto anogenital, el oral<br />
(boca, garganta) y respiratorio<br />
Características generales: <strong>VPH</strong>s están relacionados con varios tipos<br />
de cáncer : cáncer del cuello del útero (cervicouterino) y cáncer de varios<br />
órganos ( amígdala, faringe, esófago, mama, próstata, ovario, uretra y de<br />
piel)<br />
• El tiempo transcurrido entre la infección por el <strong>VPH</strong> la aparición de<br />
cáncer de cervix o pene es de aproximadamente unos 10 a 15 años. En<br />
conjunto se considera que un 80-90% de las infecciones se resuelven<br />
espontáneamente y de un 10-20% persisten y evolucionan a cáncer.
Caracteristicas: Las infecciones por <strong>VPH</strong> se pueden expresar en<br />
forma clínica, subclínica o latente. La manifestación clínica habitual de<br />
la infección son los condilomas acuminados, verrugas genitales,<br />
papilomas venéreos o verrugas venéreas<br />
• Las infecciones por <strong>VPH</strong> pueden ser por múltiplos tipos ocurriendo al<br />
mismo tiempo o al longo de la vida<br />
Modo de Transmisión: Contacto sexual<br />
• hasta 75% de las personas sexualmente activas ya se infectaran en<br />
algún momento de sus vidas, generalmente en los primeros años de<br />
actividad sexual<br />
• La mayoría de las infecciones genitales por <strong>VPH</strong> tienen resolución<br />
espontánea sin síntomas en 2-18 meses, las que persisten pueden causar<br />
cáncer cervical
Clasificación del Virus del Papiloma Humano<br />
Los virus de papiloma humano se dividen en dos grandes grupos:<br />
Alto y Bajo riesgo (de provocar cancer).<br />
<strong>VPH</strong> de Bajo Riesgo: <strong>VPH</strong> 6, 11, 40, 42, 53, 54 y 57 ( provocan<br />
verrugas genitales, también llamado condiloma acuminado y cresta de<br />
gallo, están en este grupo)<br />
<strong>VPH</strong> de Alto Riesgo: <strong>VPH</strong> 16, 18, 31, 35, 39, 45, 51, 52, 56 y 58<br />
(mayor frecuencia asociados en los casos de cáncer de cuello uterino)<br />
<strong>VPH</strong> 16 y el 18 los más importantes dado que se encuentran con más<br />
frecuencia vinculados al cáncer cervicouterino
Distribución continental del cáncer cervical asociado<br />
con los tipos HPV-16 y HPV-18<br />
Fuente: Agosti et all, 2007 NEJM<br />
Globocan 2002<br />
Annual Estimate in THE AMERICAS<br />
•86,532 NEW CASES<br />
• 38,435 DEATHS<br />
Source: Ferlay, , 2002
Diez más frecuentes tipos de <strong>VPH</strong> en mujeres con<br />
cáncer cervical, Américas<br />
Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer
Diez más frecuentes tipos de <strong>VPH</strong> en mujeres con<br />
citología normal, Américas<br />
Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer
Diez más frecuentes tipos de <strong>VPH</strong> en mujeres con<br />
citología normal por sub-región, Américas<br />
HPV type<br />
Datos no disponibles para Región del Caribe<br />
Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer
Función del laboratorio en la vigilancia del <strong>VPH</strong><br />
1. Definir la carga de la enfermedad causado por diferentes genotipos de<br />
<strong>VPH</strong> para la toma de decisión de introducción de la vacuna<br />
- determinar el predominio das diferentes fases da enfermedad (cáncer<br />
cervical invasivo, displasia cervical, etc) y los tipos de <strong>VPH</strong> asociados y<br />
en diferentes áreas geográficas<br />
2. Obtener datos epidemiológicos de la incidencia (edad-específica) y<br />
predominio del <strong>VPH</strong> para el diseño de programa eficaces de vacunación<br />
- establecer seroprevalencia de <strong>VPH</strong> en la populación para la introducción<br />
de la vacuna<br />
3. Monitorear la eficacia de la vacuna a través de la reducción del<br />
predominio y incidencia de la infección y la enfermedad por los <strong>VPH</strong><br />
contenidos en la vacuna<br />
4. Determinar la protección inmune de la populación pos vacunación
Papel do laboratorio en apoyo a la vigilancia del <strong>VPH</strong><br />
Acciones: armonización y la estandardización internacionales de<br />
los procedimientos del laboratorio para apoyar la introducción y<br />
medir el impacto de la de las vacunas en poblaciones<br />
En andamiento:<br />
• Desarrollo de los reactivos estándard internacionales para el uso en<br />
análisis de la detección de DNA y de anticuerpo anti-HPV para<br />
facilitar la evaluación de los datos virológicos y de la<br />
inmunogeneticidad.<br />
• Desarrollo de los SOPs para uso de los reactivos estándardizados<br />
internacionales en análisis de la detección de DNA y de anticuerpo<br />
anti-HPV.<br />
• Crear una red internacional de laboratorios de HPV para mejora y<br />
armonización de los métodos de detección de HPV en los estudios<br />
de investigación y de vacunación por todo el mundo - laboratorios<br />
globales, regionales y nacionales
Establecer Red global de laboratorios de HPV<br />
Laboratórios<br />
Globales<br />
Laboratórios<br />
Regionales &<br />
Sub-regionales<br />
Laboratórios<br />
Nacionales/Sub-nacionales
Red de <strong>Laboratorio</strong>s de <strong>VPH</strong>, Americas<br />
?<br />
?<br />
CDC<br />
*<br />
?<br />
?<br />
?<br />
?<br />
?<br />
?<br />
*<br />
1<br />
*<br />
Global Specialized Lab<br />
2 Regional Reference Lab<br />
6-8 National Laboratories<br />
?<br />
?<br />
?
Métodos de <strong>Laboratorio</strong> para el diagnostico del <strong>VPH</strong><br />
Métodos principales:<br />
• in situ hybridization<br />
• signal amplification (Hibrid capture second generation [HC2] assay<br />
• target amplification (PCR variants)<br />
•serología<br />
In situ hybridization – sondas de DNA aplicadas directamente al tejido<br />
(similar “inmunoistoquímica”)<br />
Obs. Método tipo específico pero trabajoso, permite la visualización del<br />
vírus en un “contexto” morfológico<br />
Signal amplification [HC2]- sondas de RNA específicas para algunos<br />
<strong>VPH</strong> de alto riesgo (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59 y 68) y algunos<br />
<strong>VPH</strong> de bajo riesgo (6,11,42,43 y 44)<br />
Obs. excelente comparación inter-laboratorio, resultados no tipo<br />
específico pero confirma la presencia de los <strong>VPH</strong>s de alto y bajo riesgo, el<br />
único método aprobado por el FDA para teste de <strong>VPH</strong> cervical.
Métodos de <strong>Laboratorio</strong> para el diagnostico del <strong>VPH</strong> cont<br />
Target amplification<br />
PCR – método más utilizado pero con más variables que en el<br />
método de HC2, la sensibilidad y especificidad pueden variar<br />
dependiendo de varios factores<br />
Real time PCR – cuantifica el numero de partículas de <strong>VPH</strong>,<br />
importante marcador para medir el factor riesgo de desarrollar<br />
cáncer cervical (alta viremia)<br />
Serología- IgM y IgG ELISA utilizando L1 virus like particle –<br />
VLPs). Tipo específico y indica infección pasada o actual<br />
Prueba de Neutralización
Retos para el diagnostico de <strong>VPH</strong><br />
• Falta de algoritmo estandardizado<br />
• Falta de conocimiento de la asociación entre <strong>VPH</strong> x<br />
cáncer cervical<br />
• Alto costo de las pruebas de DNA de <strong>VPH</strong><br />
• Falta de una prueba comercial de bajo costo<br />
• Falta de pruebas estandardizadas validadas y de bajo<br />
costo para <strong>VPH</strong><br />
• Falta de recursos para apoyar la implementación de la<br />
vigilancia del <strong>VPH</strong>
GRACIAS!!
Cumulative cervical cancer cases due to the most<br />
frequent HPV types in Latin America<br />
16 55.7%<br />
16+ 18 65.0%<br />
16+18+31 72.2%<br />
16+18+31+45<br />
16+18+31+45+33<br />
16+18+31+45+33+35<br />
16+18+31+45+33+35+52<br />
16+18+31+45+33+35+52+58<br />
77.1%<br />
80.0%<br />
82.7%<br />
85.4%<br />
87.6%<br />
0 20 40 60 80 100<br />
MUÑOZ et al: 2004