VPH: Aspectos Relacionados a Laboratorio

Family Community Health/Immunization Unit
VPH: Aspectos Relacionados a Laboratorio
Simposio Subregional de Nuevas Vacunas: Neumococo, Rotavirusy HPV
Caracas, Venezuela, 29 y 30 de Enero de 2008

Epidemiología del Virus del Papiloma Humano
Familia: Papillomaviridae
> 100 tipos (40 transm. sexual)
Vírus: DNA
Alvo principal las células epiteliales y la mucosa: tracto anogenital, el oral
(boca, garganta) y respiratorio
Características generales: VPHs están relacionados con varios tipos
de cáncer : cáncer del cuello del útero (cervicouterino) y cáncer de varios
órganos ( amígdala, faringe, esófago, mama, próstata, ovario, uretra y de
piel)
• El tiempo transcurrido entre la infección por el VPH la aparición de
cáncer de cervix o pene es de aproximadamente unos 10 a 15 años. En
conjunto se considera que un 80-90% de las infecciones se resuelven
espontáneamente y de un 10-20% persisten y evolucionan a cáncer.

Caracteristicas: Las infecciones por VPH se pueden expresar en
forma clínica, subclínica o latente. La manifestación clínica habitual de
la infección son los condilomas acuminados, verrugas genitales,
papilomas venéreos o verrugas venéreas
• Las infecciones por VPH pueden ser por múltiplos tipos ocurriendo al
mismo tiempo o al longo de la vida
Modo de Transmisión: Contacto sexual
• hasta 75% de las personas sexualmente activas ya se infectaran en
algún momento de sus vidas, generalmente en los primeros años de
actividad sexual
• La mayoría de las infecciones genitales por VPH tienen resolución
espontánea sin síntomas en 2-18 meses, las que persisten pueden causar
cáncer cervical

Clasificación del Virus del Papiloma Humano
Los virus de papiloma humano se dividen en dos grandes grupos:
Alto y Bajo riesgo (de provocar cancer).
VPH de Bajo Riesgo: VPH 6, 11, 40, 42, 53, 54 y 57 ( provocan
verrugas genitales, también llamado condiloma acuminado y cresta de
gallo, están en este grupo)
VPH de Alto Riesgo: VPH 16, 18, 31, 35, 39, 45, 51, 52, 56 y 58
(mayor frecuencia asociados en los casos de cáncer de cuello uterino)
VPH 16 y el 18 los más importantes dado que se encuentran con más
frecuencia vinculados al cáncer cervicouterino

Distribución continental del cáncer cervical asociado
con los tipos HPV-16 y HPV-18
Fuente: Agosti et all, 2007 NEJM
Globocan 2002
Annual Estimate in THE AMERICAS
•86,532 NEW CASES
• 38,435 DEATHS
Source: Ferlay, , 2002

Diez más frecuentes tipos de VPH en mujeres con
cáncer cervical, Américas
Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer

Diez más frecuentes tipos de VPH en mujeres con
citología normal, Américas
Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer

Diez más frecuentes tipos de VPH en mujeres con
citología normal por sub-región, Américas
HPV type
Datos no disponibles para Región del Caribe
Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer

Función del laboratorio en la vigilancia del VPH
1. Definir la carga de la enfermedad causado por diferentes genotipos de
VPH para la toma de decisión de introducción de la vacuna
- determinar el predominio das diferentes fases da enfermedad (cáncer
cervical invasivo, displasia cervical, etc) y los tipos de VPH asociados y
en diferentes áreas geográficas
2. Obtener datos epidemiológicos de la incidencia (edad-específica) y
predominio del VPH para el diseño de programa eficaces de vacunación
- establecer seroprevalencia de VPH en la populación para la introducción
de la vacuna
3. Monitorear la eficacia de la vacuna a través de la reducción del
predominio y incidencia de la infección y la enfermedad por los VPH
contenidos en la vacuna
4. Determinar la protección inmune de la populación pos vacunación

Papel do laboratorio en apoyo a la vigilancia del VPH
Acciones: armonización y la estandardización internacionales de
los procedimientos del laboratorio para apoyar la introducción y
medir el impacto de la de las vacunas en poblaciones
En andamiento:
• Desarrollo de los reactivos estándard internacionales para el uso en
análisis de la detección de DNA y de anticuerpo anti-HPV para
facilitar la evaluación de los datos virológicos y de la
inmunogeneticidad.
• Desarrollo de los SOPs para uso de los reactivos estándardizados
internacionales en análisis de la detección de DNA y de anticuerpo
anti-HPV.
• Crear una red internacional de laboratorios de HPV para mejora y
armonización de los métodos de detección de HPV en los estudios
de investigación y de vacunación por todo el mundo - laboratorios
globales, regionales y nacionales

Establecer Red global de laboratorios de HPV
Laboratórios
Globales
Laboratórios
Regionales &
Sub-regionales
Laboratórios
Nacionales/Sub-nacionales

Red de Laboratorios de VPH, Americas
?
?
CDC
*
?
?
?
?
?
?
*
1
*
Global Specialized Lab
2 Regional Reference Lab
6-8 National Laboratories
?
?
?

Métodos de Laboratorio para el diagnostico del VPH
Métodos principales:
• in situ hybridization
• signal amplification (Hibrid capture second generation [HC2] assay
• target amplification (PCR variants)
•serología
In situ hybridization – sondas de DNA aplicadas directamente al tejido
(similar “inmunoistoquímica”)
Obs. Método tipo específico pero trabajoso, permite la visualización del
vírus en un “contexto” morfológico
Signal amplification [HC2]- sondas de RNA específicas para algunos
VPH de alto riesgo (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59 y 68) y algunos
VPH de bajo riesgo (6,11,42,43 y 44)
Obs. excelente comparación inter-laboratorio, resultados no tipo
específico pero confirma la presencia de los VPHs de alto y bajo riesgo, el
único método aprobado por el FDA para teste de VPH cervical.

Métodos de Laboratorio para el diagnostico del VPH cont
Target amplification
PCR – método más utilizado pero con más variables que en el
método de HC2, la sensibilidad y especificidad pueden variar
dependiendo de varios factores
Real time PCR – cuantifica el numero de partículas de VPH,
importante marcador para medir el factor riesgo de desarrollar
cáncer cervical (alta viremia)
Serología- IgM y IgG ELISA utilizando L1 virus like particle –
VLPs). Tipo específico y indica infección pasada o actual
Prueba de Neutralización

Retos para el diagnostico de VPH
• Falta de algoritmo estandardizado
• Falta de conocimiento de la asociación entre VPH x
cáncer cervical
• Alto costo de las pruebas de DNA de VPH
• Falta de una prueba comercial de bajo costo
• Falta de pruebas estandardizadas validadas y de bajo
costo para VPH
• Falta de recursos para apoyar la implementación de la
vigilancia del VPH

GRACIAS!!

Cumulative cervical cancer cases due to the most
frequent HPV types in Latin America
16 55.7%
16+ 18 65.0%
16+18+31 72.2%
16+18+31+45
16+18+31+45+33
16+18+31+45+33+35
16+18+31+45+33+35+52
16+18+31+45+33+35+52+58
77.1%
80.0%
82.7%
85.4%
87.6%
0 20 40 60 80 100
MUÑOZ et al: 2004