Manual method for producing liquid-based cell preparations - BD
Manual method for producing liquid-based cell preparations - BD
Manual method for producing liquid-based cell preparations - BD
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
РУЧНОЙ МЕТОД<br />
Процесс подготовки клеток для гинекологических<br />
исследований<br />
REF 490529 REF 490635<br />
НАЗНАЧЕНИЕ<br />
Для диагностики in vitro<br />
Ручной метод представляет собой процесс приготовления<br />
клеточных препаратов на жидкой основе. Ручной метод призван<br />
заменить традиционный метод приготовления микропрепаратов<br />
мазков по Папаниколау, применяющихся в скрининговом<br />
исследовании для выявления рака шейки матки.<br />
SUREPATH ® Preservative Fluid (жидкий консервант) является<br />
средой для сбора и транспортировки гинекологических<br />
образцов, тестируемых в анализах амплифицированных ДНК <strong>BD</strong><br />
ProbeTec Chlamydia trachomatis (CT) Q x и Neisseria<br />
gonorrhoeae (GC) Q x . Инструкции по использованию SurePath ®<br />
Preservative Fluid (жидкого консерванта) для подготовки<br />
образцов, используемых в этих анализах, см. на листкахвкладышах<br />
в упаковках наборов для анализа.<br />
КРАТКИЙ ОБЗОР И ОПИСАНИЕ<br />
Скрининговое исследование для выявления рака шейки матки с<br />
использованием метода Папаниколау (Pap) включает<br />
микроскопическое исследование экто- и эндоцервикальных<br />
клеточных образцов, нанесенных на предметные стекла и<br />
окрашенных по методу Папаниколау 1,2,3 . Цервикальное<br />
цитологическое скрининговое исследование с помощью мазка по<br />
Папаниколау позволило сократить уровень смертности от<br />
инвазивной карциномы шейки матки на 50 – 70 % 4 . Поскольку<br />
цервикальное цитологическое исследование представляет собой<br />
скрининговое исследование, все обнаруженные патологии<br />
должны подтверждаться гистологическим исследованием.<br />
Для точности диагноза по мазкам Папаниколау крайне важно<br />
соблюдать процедуры отбора и приготовления образцов. Для<br />
полной точности чрезвычайно важна рандомизация и<br />
равномерный отбор части образца. Традиционная процедура<br />
взятия мазка по Папаниколау не предусматривает<br />
перемешивания образца перед приготовлением микропрепарата.<br />
Поскольку клетки на устройстве для взятия проб погружены в<br />
слизь, те клетки, которые переносятся на микропрепарат, могут<br />
не быть репрезентативной выборкой всех клеток взятого мазка.<br />
Клетки переносятся на предметное стекло в зависимости от того,<br />
в каком месте устройства для взятия проб они находились.<br />
Много клеток остается на устройстве для забора проб 5 .<br />
Неоднородность типичного образца цервикального мазка ведет к<br />
тому, что мазки, приготовленные традиционным способом,<br />
трудно готовить, исследовать и интерпретировать. Часто<br />
большие области микропрепаратов, приготовленных<br />
традиционным способом, покрыты примесями, клетками<br />
воспаления и пластинами эпителиальных клеток, которые могут<br />
скрывать ценный диагностический материал. Кроме того, если<br />
мазок не зафиксирован немедленно после приготовления,<br />
клеточная морфология может исказиться по мере высыхания<br />
(воздушные артефакты).<br />
Ручной метод представляет собой метод для превращения<br />
жидкой суспензии взятого мазка цервикальных клеток в<br />
равномерно окрашенный гомогенный микропрепарат<br />
SUREPATH ® без разрушения скоплений клеток, необходимых для<br />
диагностики 6,7,8,9 . Процесс включает консервацию клеток, их<br />
рандомизацию, обогащение диагностического материала,<br />
пипетирование и осаждение для создания клеточного препарата.<br />
Полученный в результате этого процесса микропрепарат<br />
SurePath ® может использоваться для обычного цитологического<br />
скринингового исследования и категоризации по классификации<br />
Бетесда 10 .<br />
ПРИНЦИПЫ МЕТОДИКИ<br />
Ручной метод представляет собой процесс приготовления<br />
клеточных препаратов цервикальных клеток на жидкой основе.<br />
Гинекологические образцы собираются квалифицированным<br />
медицинским персоналом с помощью приспособления типа<br />
«метелка» (например, Cervex Brush ® ) или эндоцервикального<br />
комбинированного устройства типа щеточки-шпателя<br />
(например, Cytobrush ® Plus GT или Pap Perfect ® компании<br />
MedScand (USA) Inc.) со съемными головками. Головку<br />
устройства снимают с ручки и помещают во флакон с SUREPATH ®<br />
Preservative Fluid (жидким консервантом). Флакон закрывают<br />
пробкой, прикрепляют этикетку и отправляют в сопровождении<br />
соответствующих документов в лабораторию для обработки.<br />
В лаборатории законсервированный образец перемешивают<br />
путем встряхивания, а затем переносят в пробирку с PREPSTAIN ®<br />
Density Reagent (плотным реагентом). Стадия обогащения,<br />
состоящая из осаждения препарата на центрифуге через<br />
PREPSTAIN ® Density Reagent (плотный реагент), частично удаляет<br />
из препарата ненужные для диагностики примеси и избыточные<br />
клетки воспаления. После центрифугирования пробирку с<br />
обогащенным клеточным компонентом восстанавливают<br />
деионизированной водой, и клеточный материал<br />
ресуспендируют с помощью пипеточного дозатора путем<br />
последовательного отбора и выпуска жидкости. Затем материал<br />
образца переносится в PREPSTAIN ® Settling Chamber (осадочную<br />
камеру), помещенную на предметное стекло SUREPATH ® PreCoat.<br />
Клетки осаждаются под действием силы тяжести в течение<br />
короткого периода инкубации. Избыточный материал сливают.<br />
Микропрепарат SUREPATH ® PreCoat окрашивают, осветляют и<br />
накрывают покровным стеклом. Клетки располагаются в круге<br />
диаметром 13 мм. Микропрепарат SUREPATH ® изучается под<br />
микроскопом квалифицированным цитотехнологом или<br />
патологом, с учетом другой информации о пациенте.<br />
ОГРАНИЧЕНИЯ<br />
• Гинекологические образцы для приготовления препаратов,<br />
получаемых с помощью ручного метода, должны<br />
собираться с помощью одобренного устройства типа<br />
«метелка» в соответствии со стандартной процедурой<br />
взятия мазка, определенной производителем.<br />
• Приготовлением и исследованием препаратов<br />
TRIPATH Imaging ® , Inc на жидкой основе могут заниматься<br />
только лица, прошедшие обучение в компании TRIPATH<br />
или иных организациях, уполномоченных компанией<br />
TRIPATH на проведение подобного обучения.<br />
• Для обеспечения требуемой эффективности устройства<br />
следует использовать только материалы, поставляемые или<br />
рекомендуемые компанией TRIPATH Imaging ® , Inc.<br />
Использованные материалы должны быть надлежащим<br />
образом утилизированы в соответствии с нормативами<br />
организации и действующим законодательством.<br />
• Все материалы предназначены для одноразового<br />
использования и не могут быть использованы повторно.<br />
• Для выполнения цитологического исследования<br />
SUREPATH ® на жидкостной основе требуется 8,0 ± 0,5 мл<br />
образца, собранного в SUREPATH ® Preservative Fluid<br />
Collection Vial (флакон для забора мазка с жидким<br />
консервантом).<br />
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ<br />
• SUREPATH ® Preservative Fluid (жидкий консервант)<br />
содержит водный раствор денатурированного этилового<br />
спирта и не предназначен для употребления внутрь. Смесь<br />
содержит небольшие доли метилового и изопропилового<br />
спиртов, которые при приеме внутрь могут быть опасны<br />
для здоровья и привести к слепоте.<br />
• PREPSTAIN ® Density Reagent (плотный реагент) содержит<br />
азид натрия. Азид натрия может реагировать с медными и<br />
свинцовыми трубами, образуя высоковзрывчатые азиды<br />
металлов. При утилизации смойте большим количеством<br />
воды, чтобы предотвратить накопление азида.<br />
Дополнительную информацию см. в руководстве,<br />
выпускаемом Центрами контроля заболеваний 11 .<br />
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ<br />
• Следует соблюдать указания по надлежащей лабораторной<br />
практике, а также все процедуры, рекомендованные при<br />
использовании ручного метода.<br />
• Все реагенты стабильны до истечения указанного срока<br />
годности при условии соблюдения рекомендованных<br />
условий хранения.<br />
• Бактериальная контаминация реагентов может привести к<br />
неправильным результатам.<br />
• Замена SUREPATH ® PreCoat Slides (предметных стекол<br />
PreCoat) на другие может привести к неоптимальным<br />
результатам.<br />
• Избегайте расплескивания и распыления жидкостей.<br />
Используйте соответствующие средства защиты рук и глаз,<br />
а также защитную одежду.<br />
• SUREPATH ® Preservative Fluid (жидкий консервант)<br />
обладает бактерицидным действием и был проверен на<br />
действие против следующих микробов: Escherichia coli,<br />
Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida<br />
albicans, Mycobacterium tuberculosis и Aspergillus niger.<br />
Однако следует постоянно соблюдать универсальные меры<br />
предосторожности по обращению с биологическими<br />
жидкостями.<br />
779-07083-00 Rev G Русский Page 34
Change language