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ÍNDICE GENERAL Portada I Comisión de Tesis H Dirección de tesis UI Área de trabajo Créditos y Dedicatoria yi Agradecimientos \j\ \ índice general IX índice de figuras y tablas X Abreviaturas XI Resumen XII Introducción 1 Antecedentes 2 I. La bacteria y la toxina alfa (fosfolipasa C) 2 n. Vacunas para clostridios en animales 5 ni. Adyuvantes para vacunas y los liposomas. 6 Hipótesis 11 Objetivos 11 Material y Métodos 12 I. Calculo de la dosis letal media LD50 13 A.- Preparado de la toxina 13 B.-Ratones 13 C.- Aplicación de la toxina 13 D.- Método de calculo de dosis media letal 13 n. Elaboración de liposomas y eficiencia de atrapamiento 15 A.- Diseño de liposomas 15 B.- Extracción de la toxina de los liposomas 17 C.- Actividad hemolítica de la toxina alfa ] 8 m. Aplicación del preparado toxina-liposomas (L-TA) 19 A.- Estrategia de inmunización 19 B.- Modelo Animal 19 IV. Desafío de animales 20 Resultados 21 I. Calculo de la dosis letal media 21 A.- Llenado cuadro Reed y Muench 21 B.- Calculo de datos del cuadro a la formula 22 II. Liposomas y eficiencia de atrapamiento 23 A.-Calculo para la proporción masa peso volumen 23 B.- Medición de la actividad hemolítica de las diferentes preparaciones 23 C.- Fotografías y descripción de liposomas 24 m. Desafío de animales inmunizados 28 Discusión 32 Conclusiones 35 Perspectivas 36 Bibliografía 37
INDICE DE FIGURAS Y TABLAS Tabla 1 Condiciones clínicas por Clostridium y sus principales toxinas Tabla 2 Antígenos atrapados en liposomas de-importancia Médica o veterinaria (resumen) Tabla 3 Dosis inicial para calculo de LD50 Tabla 4 Dosis alta para calculo de LDso Tabla 5 Dosis baja para calculo de LD50 Tabla 6 Dosis para la cual se aplica el método de Reed y Muench Tabla 7 Concentrado comparativo de la actividad Hemolítica de la TA Tabla 8 Sobrevivencia de ratones después del desafío con 5 LD50 Figura 1 Conformación de la toxina Alfa Figura 2 Esquema de un liposoma Figura 3 Aplicación de liposomas Figura 4 Fotografía de microscopio electrónico de liposomas con tamaño similar Figura 5 Fotografía de microscopio electrónico de liposomas con diferente tamaño Figura 6 Fotografía de microscopio electrónico de liposomas acercamiento Figura 7 Fotografía de lesión en ratón Figura 8 Fotografía de lesión en zona de aplicación Figura 9 Fotografía de lesión en ratón después de 2 semanas Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página Página 9 21 21 22 22 24 28 3 8 20 25 26 27 29 30 31
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