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3.) El calculo de la eficiencia de atrapamiento de la TA. Las lecturas obtenidas en el lector son promediadas y se analizan en una prueba de regre- sión lineal simple. III Aplicación del preparado toxina-liposomas (L-TA) Para la aplicación de la L-TA se tomo como referencia el esquema utilizado por Logan y colaboradores en 1991 con algunas adecuaciones. Phillips y Emili en 1992 describen en su trabajo la importancia de la vía intramuscular para estimular predominantemente anticuerpos de la clase IgG y del isotipo IgGl en liposomas compuestos de fosfatidilcolina y colesterol, motivo para utilizar esta via de administración. A.- Estrategia de inmunización. Se aplicó una dosis inicial £ ng/ ratón del preparado L-TA en el grupo de músculos del fémur de cada animal (Fig. 3) seguido de una segunda y tercera aplicaciones iguales a la prime- ra, con intervalo de 7 días entre cada una de ellas. B.- Modelo animal. Para esta parte se utilizaron ratones (Fig. 3) Balb/c. de 10 a 14 g de peso. Un grupo placebo inmunizado con liposomas sin TA y otro grupo inmunizado con L-TA. Cada grupo constó de 6 elementos y la prueba se realizó por duplicado.
Fig.- 3 La suspensión de L-TA fue aplicada en cada ratón de la cepa Balb/c en el miembro pos- terior derecho inicialmente e intercambiando de lado en cada subsiguiente aplicación. IV.- Desafío de animales. 7 días después de finalizar el esquema de inmunización se realizo el desafío por vía in- travenosa en la base de la cola con 5 LD50 / ratón (12.7 ng). Los ratones fueron observados por 24 h para fines de medición de la prueba, sin embargo los sobrevivientes se conservaron en ob- servación por 6 semanas.
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