PRACTICA 4

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2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de euforia. Al mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas ralentiza los movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc. Finalmente conduce al coma y puede provocar la muerte. Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una destilación con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas anteriormente. Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega a una solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico puro en condiciones que se formen 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las dos capas. 3. MATERIALES • Jeringuilla de 10 cc. • Varilla • Espátula • Probeta • Panema • Perlas de vidrio • Bureta • Soporte universal • Cinta plástica • Lámpara de alcohol • Fosforo • Pinzas • Porta tubo • Tubos de ensayo • Tabla de disección • Cronómetro • Equipo de disección • Bisturí • Vasos de precipitación 200 y 500 ml. • Erlenmeyer • Equipo de destilación. • Pipetas • Guantes de látex • Mascarilla • Mandil • Gorro REACTIVOS: fenilhidracina Nitroprusiato sódico Hidróxido de sodio HCl Cloruro de fenil hidracina Ferricianuro de potasio Ácido sulfúrico Leche Cloruro férrico Sulfato ferroso Ácido sulfúrico Ácido clorhídrico EQUIPOS Balanza Cocineta Baño maria Aparato de destilación 4. PROCEDIMIENTO • Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de implementos de bioseguridad. • Administrar 10 ml de etanol por vía intraperitoneal • Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo. • Atamos el cobayo a una tabla de disección. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2
• Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte. • Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos. • Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación). • A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico. • Esto lo llevamos a un balón. • Procedemos a destilar. • El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N. • Al balón que contiene el destilado del alcohol se le agregan 10 g de dicromato de potasio, se le deja caer lentamente 10 – 20 ml de ácido sulfúrico concentrado hasta observar que la mezcla que tenía color amarillo del dicromato se vuelve negra, lo que significa que el etanol ha sido oxidado a etanal. • De esta forma, las reacciones que se practican para el alcohol etílico, son las mismas que se hicieron para el metanal. En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de formaldehído 5. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. Reacción de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 3
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