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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA<br />
“Calidad Pertinencia y Calidez”<br />
D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969<br />
PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR<br />
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD<br />
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA<br />
PRÁCTICA N° 4<br />
Profesor: Bioq. Farm. Carlos Garcia Msc.<br />
Alumno: Villacis Villacis Anny<br />
Curso: Quinto<br />
Año: ´´A´´<br />
Grupo: 4<br />
/10<br />
Fecha de elaboración de la práctica: martes 21 de junio del 2016<br />
Fecha de presentación de la práctica: martes, 28 de junio del 2016<br />
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL<br />
Animal de Experimentación: Rata Wistar<br />
Vía de administración: Vía intraperitoneal<br />
Volumen administrado: 10 mk de alcohol metílico<br />
SINTOMATOLOGIA DEL COBAYO<br />
Convulsiones<br />
Ceguera<br />
Vomito<br />
Cefaleas<br />
1. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:<br />
<br />
<br />
<br />
Observar la reacción que presenta el cobayo ante la intoxicación por<br />
etanol<br />
Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en<br />
que actúa el toxico<br />
Reconocer mediante la observación de los colores característicos, la<br />
presencia de material indicativo de la presencia de etanol<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
2. FUNDAMENTO TEÓRICO:<br />
El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de<br />
euforia. Al mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas<br />
ralentiza los movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc.<br />
Finalmente conduce al coma y puede provocar la muerte.<br />
Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una<br />
destilación con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas<br />
anteriormente.<br />
Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega<br />
a una solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico<br />
puro en condiciones que se formen 2 capas; en caso de existir alcohol se debe<br />
producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las 2 capas; en<br />
caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto<br />
de unión de las dos capas.<br />
3. MATERIALES<br />
• Jeringuilla de 10 cc.<br />
• Varilla<br />
• Espátula<br />
• Probeta<br />
• Panema<br />
• Perlas de vidrio<br />
• Bureta<br />
• Soporte universal<br />
• Cinta plástica<br />
• Lámpara de alcohol<br />
• Fosforo<br />
• Pinzas<br />
• Porta tubo<br />
• Tubos de ensayo<br />
• Tabla de disección<br />
• Cronómetro<br />
• Equipo de disección<br />
• Bisturí<br />
• Vasos de precipitación 200 y 500 ml.<br />
• Erlenmeyer<br />
• Equipo de destilación.<br />
• Pipetas<br />
• Guantes de látex<br />
• Mascarilla<br />
• Mandil<br />
• Gorro<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
REACTIVOS:<br />
fenilhidracina<br />
Nitroprusiato sódico<br />
Hidróxido de sodio<br />
HCl<br />
Cloruro de fenil hidracina<br />
Ferricianuro de potasio Ácido sulfúrico<br />
Leche<br />
Cloruro férrico<br />
Sulfato ferroso<br />
Ácido sulfúrico<br />
Ácido clorhídrico<br />
EQUIPOS<br />
Balanza<br />
Cocineta<br />
Baño maria<br />
Aparato de destilación<br />
4. PROCEDIMIENTO<br />
• Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de<br />
implementos de bioseguridad.<br />
• Administrar 10 ml de etanol por vía intraperitoneal<br />
• Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del<br />
cobayo.<br />
• Atamos el cobayo a una tabla de disección.<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2
• Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.<br />
• Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los<br />
cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.<br />
• Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas<br />
lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación).<br />
• A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico.<br />
• Esto lo llevamos a un balón.<br />
• Procedemos a destilar.<br />
• El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo<br />
recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N.<br />
• Al balón que contiene el destilado del alcohol se le agregan 10 g de dicromato<br />
de potasio, se le deja caer lentamente 10 – 20 ml de ácido sulfúrico concentrado<br />
hasta observar que la mezcla que tenía color amarillo del dicromato se vuelve<br />
negra, lo que significa que el etanol ha sido oxidado a etanal.<br />
• De esta forma, las reacciones que se practican para el alcohol etílico, son las<br />
mismas que se hicieron para el metanal. En consecuencia, las reacciones que<br />
se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de<br />
formaldehído<br />
5. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO<br />
Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de<br />
permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de<br />
ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de<br />
solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla<br />
adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle<br />
nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml<br />
de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color<br />
violeta en caso de positivo.<br />
Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de<br />
fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién<br />
preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul<br />
intensa.<br />
Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico<br />
a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil<br />
hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas<br />
gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella.<br />
Reacción de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido<br />
sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 3
de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene<br />
enseguida o después de algún tiempo un color violeta.<br />
Con el Ácido Cromotrópico: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado<br />
con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de<br />
calentarla ligeramente.<br />
Reacción de Hehner : Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de<br />
leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado<br />
trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico);<br />
en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.<br />
6. GRAFICOS<br />
1. Escogemos el<br />
animal de<br />
experimentación.<br />
2. Aplicamos el<br />
toxico.<br />
+<br />
3. Observamos los<br />
síntomas que<br />
presenta la Rata<br />
wistar hasta su<br />
muerte.<br />
4. Con ayuda de un<br />
bisturí sacamos las<br />
vísceras.<br />
5. Trituramos las<br />
vísceras para<br />
llevarlas a<br />
destilación.<br />
6. Después de la<br />
destilación<br />
obtenemos la<br />
solución madre que<br />
la que haremos<br />
reacciones de<br />
identificación.<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 4
7. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS.<br />
Patrón: color oscuro, por<br />
oxidación del etanol a<br />
etanal.<br />
REACCIÓN DE SCHIFF<br />
Resultado: Positivo no<br />
característico<br />
Coloración violeta en la capa<br />
superficial.<br />
REACCIÓN DE RIMINI<br />
Resultado: Reacción positiva<br />
característica.<br />
Coloración azul intensa<br />
REACCIÓN CON LA<br />
FENILHIDRACINA.<br />
resultado: Positivo no<br />
característico<br />
Coloración rojiza grosella<br />
REACCIÓN CON ÁCIDO<br />
CROMOTRÓPICO.<br />
Resultado: positiva<br />
Coloración roja.<br />
REACCIÓN DE HEHNER<br />
Resultado: Reacción postivo<br />
coloración violeta.<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 5
8. CONCLUSIONES:<br />
Se llevó a cabo la administración de alcohol etílico en el animal de<br />
experimentación (rata wistar) y se observó los movimientos acelerados y<br />
torpes (nistagmos) de sus glóbulos oculares, tras este síntoma convulsiona y<br />
muere. Así mismo por medio de las reacciones de identificación de identifico<br />
el etanol proveniente del destilado de las vísceras del animal.<br />
9. RECOMENDACIONES:<br />
Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de<br />
accidente que ponga en riesgo nuestra salud.<br />
CUESTIONARIO<br />
¿CUALES SON LOS USOS DEL ETANOL?<br />
El etanol tiene muchos usos en la industria, pero los principales usos y los más<br />
conocidos actualmente son los del etanol como combustible de los vehículos<br />
automotores y como ingrediente para las bebidas alcohólicas. Además se usa también<br />
en el sector farmacéutico como excipiente de algunos medicamentos y cosméticos (es<br />
el caso del alcohol antiséptico 70º GL y en la elaboración de ambientadores y<br />
perfumes).<br />
¿COMO SE OBTIENE EL ETANOL?<br />
La obtención del etanol por medio de la fermentación de azucares es la más utilizada<br />
actualmente y esta se hace principalmente para que el etanol sea utilizado como<br />
combustible, solo si está mezclado con una cantidad suficiente de gasolina. Hoy en día<br />
se utilizan varios tipos de materias primas para la producción a gran escala de etanol de<br />
origen biológico (bioetanol), tales como las sustancias con alto contenido de sacarosa<br />
(dulces-caña de azúcar), almidón (maíz) y celulosa (madera-cítricos).<br />
¿EN QUIENES PARACE SER MAYOR LA CAPACIDAD METABOLICA DEL ETANOL<br />
Y DE QUE DEPENDE?<br />
La capacidad metabólica de bebedores habituales parece ser mayor que la de personas<br />
con un menor contacto con esta sustancia. Esta diferencia parece depender de una<br />
inducción del MEOS en los primeros, como respuesta a la presencia crónica de sustrato<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 6
GLOSARIO<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
coma : es un estado severo de pérdida de consciencia, que puede resultar de<br />
una gran variedad de condiciones incluyendo<br />
las intoxicaciones (drogas, alcohol o tóxicos), anomalías metabólicas<br />
(hipoglucemia, hiperglucemias, cetosis), enfermedades del sistema nervioso<br />
central, ACV, traumatismo cráneo-encefálico, convulsiones e hipoxia. Las<br />
causas metabólicas son las más frecuentes.<br />
El licor adulterado: licor de garrafa, licor de garrafón o simplemente garrafón es<br />
un licor o una bebida es pirituosa adulterados de manera intencionada o natural,<br />
convirtiéndolos generalmente en nocivos para el consumo.<br />
ESTUPOR: Disminución de la actividad de las funciones intelectuales,<br />
acompañada de cierto aire o aspecto de asombro o de indiferencia.<br />
Frenética: que muestra una exaltación violenta del animo<br />
Sidra: bebida alcohólica de baja graduación, fabricada con el zumo fermentado<br />
de la manzana<br />
Bibliografía<br />
SOUSA G. Etanol 2009. Consultado 25 de junio del 2016<br />
Cardona C. simulación de los procesos de obtención de Etanol a partir de caña<br />
de azúcar y maíz 2000<br />
AUTORIA Bioq. Farm. Carlos García MSc.<br />
http://www.aibarra.org/apuntes/criticos/guias/intoxicaciones/intoxicacion_por_etanol.pd<br />
f<br />
FIRMA DEL RESPONSABLE.<br />
VILLACIS VILLACIS ANNY<br />
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 7