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PRACTICA 4

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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA<br />

“Calidad Pertinencia y Calidez”<br />

D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969<br />

PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR<br />

UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD<br />

LABORATORIO DE TOXICOLOGIA<br />

PRÁCTICA N° 4<br />

Profesor: Bioq. Farm. Carlos Garcia Msc.<br />

Alumno: Villacis Villacis Anny<br />

Curso: Quinto<br />

Año: ´´A´´<br />

Grupo: 4<br />

/10<br />

Fecha de elaboración de la práctica: martes 21 de junio del 2016<br />

Fecha de presentación de la práctica: martes, 28 de junio del 2016<br />

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL<br />

Animal de Experimentación: Rata Wistar<br />

Vía de administración: Vía intraperitoneal<br />

Volumen administrado: 10 mk de alcohol metílico<br />

SINTOMATOLOGIA DEL COBAYO<br />

Convulsiones<br />

Ceguera<br />

Vomito<br />

Cefaleas<br />

1. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:<br />

<br />

<br />

<br />

Observar la reacción que presenta el cobayo ante la intoxicación por<br />

etanol<br />

Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en<br />

que actúa el toxico<br />

Reconocer mediante la observación de los colores característicos, la<br />

presencia de material indicativo de la presencia de etanol<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1


2. FUNDAMENTO TEÓRICO:<br />

El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de<br />

euforia. Al mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas<br />

ralentiza los movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc.<br />

Finalmente conduce al coma y puede provocar la muerte.<br />

Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una<br />

destilación con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas<br />

anteriormente.<br />

Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega<br />

a una solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico<br />

puro en condiciones que se formen 2 capas; en caso de existir alcohol se debe<br />

producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las 2 capas; en<br />

caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto<br />

de unión de las dos capas.<br />

3. MATERIALES<br />

• Jeringuilla de 10 cc.<br />

• Varilla<br />

• Espátula<br />

• Probeta<br />

• Panema<br />

• Perlas de vidrio<br />

• Bureta<br />

• Soporte universal<br />

• Cinta plástica<br />

• Lámpara de alcohol<br />

• Fosforo<br />

• Pinzas<br />

• Porta tubo<br />

• Tubos de ensayo<br />

• Tabla de disección<br />

• Cronómetro<br />

• Equipo de disección<br />

• Bisturí<br />

• Vasos de precipitación 200 y 500 ml.<br />

• Erlenmeyer<br />

• Equipo de destilación.<br />

• Pipetas<br />

• Guantes de látex<br />

• Mascarilla<br />

• Mandil<br />

• Gorro<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

REACTIVOS:<br />

fenilhidracina<br />

Nitroprusiato sódico<br />

Hidróxido de sodio<br />

HCl<br />

Cloruro de fenil hidracina<br />

Ferricianuro de potasio Ácido sulfúrico<br />

Leche<br />

Cloruro férrico<br />

Sulfato ferroso<br />

Ácido sulfúrico<br />

Ácido clorhídrico<br />

EQUIPOS<br />

Balanza<br />

Cocineta<br />

Baño maria<br />

Aparato de destilación<br />

4. PROCEDIMIENTO<br />

• Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de<br />

implementos de bioseguridad.<br />

• Administrar 10 ml de etanol por vía intraperitoneal<br />

• Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del<br />

cobayo.<br />

• Atamos el cobayo a una tabla de disección.<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2


• Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.<br />

• Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los<br />

cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.<br />

• Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas<br />

lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación).<br />

• A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico.<br />

• Esto lo llevamos a un balón.<br />

• Procedemos a destilar.<br />

• El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo<br />

recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N.<br />

• Al balón que contiene el destilado del alcohol se le agregan 10 g de dicromato<br />

de potasio, se le deja caer lentamente 10 – 20 ml de ácido sulfúrico concentrado<br />

hasta observar que la mezcla que tenía color amarillo del dicromato se vuelve<br />

negra, lo que significa que el etanol ha sido oxidado a etanal.<br />

• De esta forma, las reacciones que se practican para el alcohol etílico, son las<br />

mismas que se hicieron para el metanal. En consecuencia, las reacciones que<br />

se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de<br />

formaldehído<br />

5. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO<br />

Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de<br />

permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de<br />

ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de<br />

solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla<br />

adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle<br />

nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml<br />

de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color<br />

violeta en caso de positivo.<br />

Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de<br />

fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién<br />

preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul<br />

intensa.<br />

Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico<br />

a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil<br />

hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas<br />

gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella.<br />

Reacción de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido<br />

sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 3


de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene<br />

enseguida o después de algún tiempo un color violeta.<br />

Con el Ácido Cromotrópico: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado<br />

con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de<br />

calentarla ligeramente.<br />

Reacción de Hehner : Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de<br />

leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado<br />

trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico);<br />

en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.<br />

6. GRAFICOS<br />

1. Escogemos el<br />

animal de<br />

experimentación.<br />

2. Aplicamos el<br />

toxico.<br />

+<br />

3. Observamos los<br />

síntomas que<br />

presenta la Rata<br />

wistar hasta su<br />

muerte.<br />

4. Con ayuda de un<br />

bisturí sacamos las<br />

vísceras.<br />

5. Trituramos las<br />

vísceras para<br />

llevarlas a<br />

destilación.<br />

6. Después de la<br />

destilación<br />

obtenemos la<br />

solución madre que<br />

la que haremos<br />

reacciones de<br />

identificación.<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 4


7. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS.<br />

Patrón: color oscuro, por<br />

oxidación del etanol a<br />

etanal.<br />

REACCIÓN DE SCHIFF<br />

Resultado: Positivo no<br />

característico<br />

Coloración violeta en la capa<br />

superficial.<br />

REACCIÓN DE RIMINI<br />

Resultado: Reacción positiva<br />

característica.<br />

Coloración azul intensa<br />

REACCIÓN CON LA<br />

FENILHIDRACINA.<br />

resultado: Positivo no<br />

característico<br />

Coloración rojiza grosella<br />

REACCIÓN CON ÁCIDO<br />

CROMOTRÓPICO.<br />

Resultado: positiva<br />

Coloración roja.<br />

REACCIÓN DE HEHNER<br />

Resultado: Reacción postivo<br />

coloración violeta.<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 5


8. CONCLUSIONES:<br />

Se llevó a cabo la administración de alcohol etílico en el animal de<br />

experimentación (rata wistar) y se observó los movimientos acelerados y<br />

torpes (nistagmos) de sus glóbulos oculares, tras este síntoma convulsiona y<br />

muere. Así mismo por medio de las reacciones de identificación de identifico<br />

el etanol proveniente del destilado de las vísceras del animal.<br />

9. RECOMENDACIONES:<br />

Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de<br />

accidente que ponga en riesgo nuestra salud.<br />

CUESTIONARIO<br />

¿CUALES SON LOS USOS DEL ETANOL?<br />

El etanol tiene muchos usos en la industria, pero los principales usos y los más<br />

conocidos actualmente son los del etanol como combustible de los vehículos<br />

automotores y como ingrediente para las bebidas alcohólicas. Además se usa también<br />

en el sector farmacéutico como excipiente de algunos medicamentos y cosméticos (es<br />

el caso del alcohol antiséptico 70º GL y en la elaboración de ambientadores y<br />

perfumes).<br />

¿COMO SE OBTIENE EL ETANOL?<br />

La obtención del etanol por medio de la fermentación de azucares es la más utilizada<br />

actualmente y esta se hace principalmente para que el etanol sea utilizado como<br />

combustible, solo si está mezclado con una cantidad suficiente de gasolina. Hoy en día<br />

se utilizan varios tipos de materias primas para la producción a gran escala de etanol de<br />

origen biológico (bioetanol), tales como las sustancias con alto contenido de sacarosa<br />

(dulces-caña de azúcar), almidón (maíz) y celulosa (madera-cítricos).<br />

¿EN QUIENES PARACE SER MAYOR LA CAPACIDAD METABOLICA DEL ETANOL<br />

Y DE QUE DEPENDE?<br />

La capacidad metabólica de bebedores habituales parece ser mayor que la de personas<br />

con un menor contacto con esta sustancia. Esta diferencia parece depender de una<br />

inducción del MEOS en los primeros, como respuesta a la presencia crónica de sustrato<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 6


GLOSARIO<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

coma : es un estado severo de pérdida de consciencia, que puede resultar de<br />

una gran variedad de condiciones incluyendo<br />

las intoxicaciones (drogas, alcohol o tóxicos), anomalías metabólicas<br />

(hipoglucemia, hiperglucemias, cetosis), enfermedades del sistema nervioso<br />

central, ACV, traumatismo cráneo-encefálico, convulsiones e hipoxia. Las<br />

causas metabólicas son las más frecuentes.<br />

El licor adulterado: licor de garrafa, licor de garrafón o simplemente garrafón es<br />

un licor o una bebida es pirituosa adulterados de manera intencionada o natural,<br />

convirtiéndolos generalmente en nocivos para el consumo.<br />

ESTUPOR: Disminución de la actividad de las funciones intelectuales,<br />

acompañada de cierto aire o aspecto de asombro o de indiferencia.<br />

Frenética: que muestra una exaltación violenta del animo<br />

Sidra: bebida alcohólica de baja graduación, fabricada con el zumo fermentado<br />

de la manzana<br />

Bibliografía<br />

SOUSA G. Etanol 2009. Consultado 25 de junio del 2016<br />

Cardona C. simulación de los procesos de obtención de Etanol a partir de caña<br />

de azúcar y maíz 2000<br />

AUTORIA Bioq. Farm. Carlos García MSc.<br />

http://www.aibarra.org/apuntes/criticos/guias/intoxicaciones/intoxicacion_por_etanol.pd<br />

f<br />

FIRMA DEL RESPONSABLE.<br />

VILLACIS VILLACIS ANNY<br />

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 7

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