Cahier des Résumés

ÉCOLE DOCTORALE BIOLOGIE SANTÉ DE LILLE 

Cahier des Résumés 

6ème Journée André VERBERT 

Colloque Annuel des Doctorants 

27 septembre 2006 

Polytech'Lille (USTL - Lille 1) 

Programme détaillé sur http://www.edbsl.net/JAV2006 

Résumés sur http://www.edbsl.net/JAV2006/resumes

Les Journées André Verbert entrent dans leur sixième édition. Depuis 

l’ouverture de l’Ecole Doctorale Biologie santé de Lille elles constituent un 

moment privilégié. Elles se veulent avant tout un lieu d’échange 

scientifique et intellectuel, mais sont aussi un lieu d’échange informel pour 

nos étudiants, l’occasion de partager ses propres expériences dans 

l’apprentissage du passionnant métier de chercheur. Nous voudrions aussi 

qu’elles puissent créer un esprit de « Grande Ecole » et celui 

d’appartenance à une communauté scientifique lilloise unique et 

pluridisciplinaire. Elles sont l’occasion pour tous ceux qui participent à la vie 

de notre ED d’apprécier la qualité et la diversité des recherches menées au sein de nos deux 

universités de Lille 1 et Lille 2. 

Cette sixième édition coïncide avec le renouvellement quadriennal de notre ED. Le travail de tous a 

permis de franchir avec succès cet « examen ». Les changements imposés par la réforme LMD ont 

été pleinement assimilés, des efforts restent néanmoins à accomplir dans l’ouverture à la mobilité des 

différents thèmes de recherche proposés par les équipes, ainsi que pour ramener la durée de la thèse 

à trois ans. Ce dernier point passe par la mise en place d’entretiens avec les étudiants et leurs tuteurs 

lors des inscriptions de première et troisième année. Le phasage et le mode d’attribution des 

allocations et bourses (bourses établissements, bourses INSERM-Region, BDI CNRS-Region …) 

permet d’assurer un nombre croissant de financements de thèses. Les politiques de chaque 

établissement s’affirment en outre par l’attribution des allocations « Président » visant à assurer la 

pluridisciplinarité de notre ED en maintenant un équilibre entre les différents masters , en favorisant 

aussi le soutien aux jeunes équipes , l’interdisciplinarité et l’ouverture européenne . Cette année a 

notamment vu la mise en place du Collège Doctoral Européen (CDE) rassemblant toutes les ED 

régionales .Le CDE s’inscrit pleinement dans le processus de Bologne et confirme l’engagement des 

EDs dans la construction d’une architecture commune des systèmes de formation de l’enseignement 

supérieur. Le CDE a pour but de favoriser la mobilité européenne de nos doctorants en leur 

permettant d’effectuer leur thèse dans deux institutions différentes .Ces étudiants peuvent bénéficier 

d’allocations spécifiques après audition et sélection de leur projet par le grand jury. Dés cette année 

l’EDBSL , deux étudiants des universités belges de Gand et de Leuven ont été sélectionnés 

.Rappelons enfin que l’ED se veut un outil essentiel dans le renforcement du potentiel recherche 

régional , et qu’elle continue à ouvrir 3 allocations de recherche à la mobilité fléchées vers les 

différents IFR . 

Rappelons enfin que l’ED a mis en place un dispositif d’appui à l’insertion professionnelle des 

docteurs, tant dans les établissements publics que dans le secteur privé en proposant aux doctorants 

des formations utiles à leur projet de recherche et à leur projet professionnel, ainsi que des formations 

nécessaires à l’acquisition d’une culture scientifique élargie. Nous sommes à l’écoute des doctorants 

pour diversifier ces formations, en les mutualisant pour certaines avec d’autres ED. Il appartient 

également au doctorant de justifier du suivi de ces formations pour être autorisé à présenter son 

dossier de thèse. 

Jean-Paul Dessaint se joint à moi pour remercier, au nom de tous , les doctorants du comité 

d’organisation de ses sixième JAV qui aux côtés de Maud Collyn d’Hooghe et de Jean-Jacques 

Hauser ont œuvré tout au long de cette année pour assurer le succès de ce colloque . 

Merci également à tous les sponsors, et à Jean-Louis Bonte, Directeur de Polytech, pour avoir mis à 

notre disposition ses locaux. 

Et maintenant place à l’échange, place à la convivialité, place à la science. 

Jean-Claude Michalski 

Co-responsable EDSBL

08h30 : Accueil par le directeur de l'ED 

09h00 - 10h00 : Session orale "PHYSIOLOGIE" 

modérateurs : Sophie ROGEE et Mathieu FLOURAKIS 

Ecole polytechnique universitaire de Lille 

mercredi 27 septembre 2006 

• MOLENDI-COSTE OLIVIER (EA2701 - directeur de thèse : Christophe BRETON) 

Effets d'une dénutrition maternelle périnatale sur la différenciation neuronale et neuroendocrine dans la médullosurrénale chez le rat mâle 

• VENNA VENUGOPAL REDDY (EA1046 - directeur de thèse : Dominique DEPLANQUE) 

Les effets anti-immobilité en nage forcée de l'acide alpha-linolénique peuvent être potentialisés par l'administration unique d'une faible dose de clonidine ou d'imipramine. 

• HOUDAYER ELISE (EA2683 - directeur de thèse : Philippe DERAMBURE) 

Etude de l'excitabilité corticale liée au mouvement: rôle du contrôle moteur inhibiteur et implications physiopathologiques 

• CLASADONTE JÉRÔME (U422 - directeur de thèse : Pierre POULAIN) 

Effets du Monoxyde d'Azote et de la Prostaglandine E2 sur le neurone à Gonadolibérine chez la souris. 

Pause - café 

10h00 - 11h00 : Session Poster 1 

11h00 - 12h00 : Session orale "NEUROPATHOLOGIES" 

modérateurs : Chrystelle LE DANVIC et Paul PEIXOTO 

• DOURLEN PIERRE (U422 - directeur de thèse : Luc BUÉE) 

Rôle de Pin1 dans les cellules neuronales et la maladie d'Alzheimer 

• BRETTEVILLE ALEXIS (U422 - directeur de thèse : Claude-Alain MAURAGE) 

Développement et Caractérisation d'un modèle in vivo de Dégénérescence Neurofibrillaire : Un outil de choix pour comprendre les mécanismes d'une mort neuronale liée a Tau. 

• LARVOR LYDIE (EA2683 - directeur de thèse : Marie-Christine CHARTIER-HARLIN) 

Variations d'expression du gène de l'a-synucléine, cause et conséquences sur la physiopathologie de la maladie de Parkinson 

• BENSEMAIN FAÏZA (U508 - directeur de thèse : Nicole HELBECQUE) 

Induction de l'expression de l'ornithine transcarbamylase dans la maladie d'Alzheimer. 

Pause - déjeuner 

13h00 - 14h00 : Session Poster 2

14h00 - 15h00 : Session orale "TRANSPORTEURS SIGNALISATION" 

modérateurs : Maria KATSOGIANNOU et Maxime CULOT 

• FLOURAKIS MATTHIEU (EMI0228 - directeur de thèse : Natacha PREVARSKAYA) 

Mise en évidence du rôle du translocon dans la fuite passive de calcium et dans l'activation des canaux calciques de type SOC. 

• PLAISIER FABRICE (EA1046 - directeur de thèse : Michèle BASTIDE) 

Implication des canaux potassiques de l'unité neurogliovasculaire dans la plasticité cérébrale suite à l'ischémie-reperfusion. 

• FOVEAU BENEDICTE (UMR8117 - directeur de thèse : David TULASNE) 

Amplification de l'apoptose par le clivage séquentiel du récepteur tyrosine kinase MET par les caspases. 

• RUCKTOOA PRAKASH (UMR8525 - directeur de thèse : Vincent VILLERET) 

Études structurales de transporteurs périplasmiques potentiellement liés à la virulence de Bordetella pertussis 

15h00 - 16h30 : Session orale "REGULATION GENETIQUE" 

modérateurs : Valérie FAUQUETTE et Gabriel BIDAUX 

• MARTIEN SEBASTIEN (UMR8117 - directeur de thèse : Corinne ABBADIE) 

Rôle du stress oxydant induit par les facteurs NF-kB dans la sénescence et l'émergence tumorale des cellules épithéliales 

• VINCENT AUDREY (U560 - directeur de thèse : Isabelle VAN SEUNINGEN) 

Régulation épigénétique des gènes de mucines 11p15 (MUC2, MUC5AC, MUC5B, MUC6) dans les cancers épithéliaux 

• DEGERNY CINDY (UMR8117 - directeur de thèse : Jean-Luc BAERT) 

Sumoylation et répression de l'activité transcriptionnelle de ERM 

• ROGEE SOPHIE (U524 - directeur de thèse : Jean-Claude D'HALLUIN) 

Biodistribution et mécanisme d'infection d'un vecteur adénoviral portant des fibres chimériques 

• PEIXOTO PAUL (U524 - directeur de thèse : Amélie LANSIAUX) 

Ciblage de l'ADN par des petites molécules et modulation de la fixation des partenaires protéiques 

• PENEL NICOLAS (EA2694 - directeur de thèse : Yazdan YAZDANPANAH) 

Infections nosocomiales en cancérologie: évaluation de l'incidence, des facteurs de risque, des conséquences économiques et mise en place d'action préventive. 

16h30 - 18h00 : Conférence Plénière 

• Ronald MELKI 

Le repliement alternatif des protéines et l'hérédité structurale qui y est associée. Illustration à l'aide des prions de levure 

Cocktail de clôture


Session 

P H Y S I O L O G I E

MOLENDI-COSTE Olivier EA2701 - Christophe BRETON 

Effets d'une dénutrition maternelle périnatale sur la différenciation neuronale et neuroendocrine dans la 

médullosurrénale chez le rat mâle 

Un nombre croissant de données épidémiologiques et cliniques suggère que certaines pathologies métaboliques et cardiovasculaires pourraient être 

programmées de façon précoce durant la vie fœtale et postnatale. Même si les mécanismes sont encore mal documentés, l’altération de la mise en 

place et de la fonctionnalité de l’axe corticotrope semble jouer un rôle prépondérant dans cette programmation. A l’aide d’un modèle de restriction 

alimentaire maternelle périnatale de 50% chez le rat (FR50), nous avons montré que la malnutrition maternelle altère non seulement les taux 

plasmatiques des glucocorticoïdes mais également ceux des catécholamines. Afin de déterminer si le système sympathosurrénalien pourrait participer, 

au moins en partie, à la programmation des pathologies observées chez l’adulte, nous avons décidé d’étudier la mise en place de la médullosurrénale 

ainsi que son activité de la naissance à l’âge adulte chez les animaux FR50. 

Le développement de la médullosurrénale se caractérise par la prolifération et la différenciation des précurseurs sympathosurrénaliens en cellules 

chromaffines neuroendocrines et s’accompagne de la mise en place de l’innervation splanchnique. Des études morphologiques par immunocytochimie 

et microscopie électronique montrent que la dénutrition maternelle affecte l’organisation et l’ultrastructure des cellules chromaffines ainsi que 

l’architecture des fibres innervant la glande. Sur le plan fonctionnel, ces altérations morphologiques s’accompagnent d’une sécrétion accrue des 

catécholamines dosées par HPLC. De plus, la prolifération cellulaire observée dans la médulla des animaux FR50 au sevrage par incorporations de 

BrdU est fortement réduite, tandis que le nombre de cellules en apoptose détectées à l’aide de la méthode TUNEL est augmenté. Parallèlement, une 

approche moléculaire complémentaire d’analyse d’expression différentielle utilisant des biopuces à ADN montre des modifications de l’expression de 

plusieurs gènes impliqués dans la différenciation neuronale et neuroendocrine ainsi que dans la prolifération cellulaire et l’apoptose dans la surrénale 

de animaux FR50 au sevrage. Les altérations anatomo-fonctionnelles de la médullosurrénale perdurent chez les rats FR50 de 8 mois et sont 

accompagnées d’une hypertension artérielle. 

L’ensemble de ces résultats indique que la dénutrition maternelle périnatale perturbe la maturation de la médullosurrénale au cours de la période 

postnatale et modifie l’activité des cellules chromaffines à long terme chez l’adulte. Ces altérations constitueraient une réponse adaptative de la glande 

surrénale à l’environnement délétère et pourraient participer à la programmation des maladies chroniques de l’adulte. 

Mot(s)-clé(s) : Cellules chromaffines & Dénutrition & Programmation & Catécholamines 

VENNA Venugopal Reddy EA1046 - Dominique DEPLANQUE 

Les effets anti-immobilité en nage forcée de l’acide alpha-linolénique peuvent être potentialisés par 

l’administration unique d’une faible dose de clonidine ou d’imipramine. 

Introduction: Les acides gras poly-insaturés de type oméga-3 pourraient jouer un rôle dans la pathogenèse et le traitement des troubles de l’humeur, en 

particulier de la dépression. Dans cette étude, nous avons d'abord évalué dans quelle mesure un traitement chronique avec un acide gras poly-insaturé 

oméga-3, l’acide alpha-linolénique (AAL), pouvait avoir un effet anti-immobilité (anti-dépresseur) au test de nage forcée chez la souris. Dans un 

deuxième temps, nous avons évalué l’impact de l’administration unique d’une faible dose de clonidine (un agoniste des récepteurs alpha2 centraux) ou 

d’imipramine (un anti-dépresseur tricyclique) chez des souris traitées par AAL pendant une durée insuffisante à elle seule à produire un effet antidépresseur. 

Méthodes : Des souris mâles de souche Swiss (20-25g) ont reçu un traitement par AAL (250 mg/kg/j en gavage) ou un placebo pendant une période de 

2 à 6 semaines. Pour évaluer les éventuels effets anti-dépresseurs de ce traitement, les souris étaient soumises au test de Porsolt, un test de nage 

forcée couramment utilisé pour évaluer les modifications comportementales consécutives à l'administration de médicaments anti-dépresseurs. En 

pratique, les souris sont plongées dans un récipient de taille calibrée, rempli d'eau à une température de 23-24 C. Le test, d'une durée de 6 minutes est 

entiérement filmé pour permettre une analyse du comportement de nage en aveugle. L'effet de type anti-dépresseur est notamment définie par la 

diminution de l'immobilité de l'animal au cours des 240 dernières secondes du test. Dans cette étude, nous avions par ailleurs évalué les effets de 

l’administration d’une dose unique de clonidine (0,06 mg/kg) ou d’imipramine (10 mg/kg), injectées par voie intra-péritonéale, 30 minutes avant le test 

de nage forcée, chez des souris préalablement traitées par AAL pendant une durée insuffisante à produire un effet anti-dépresseur. 

Résultats : Un traitement chronique par AAL pendant une durée d’au moins 5 semaines permettait d’induire, au test de nage forcée, un effet antidépresseur 

(Immobilité : Placebo, 231 ± 1 sec ; AAL 2 sem., 215 ± 4 sec ; AAL 3 sem., 219 ± 4 sec ; AAL 4 sem., 214 ± 6 sec ; AAL 5 sem., 201 ± 7 sec 

; AAL 6 sem., 194 ± 15 sec ; ANOVA, p < 0.005). De plus, l’administration unique d’une faible dose de clonidine ou d’imipramine, 30 minutes avant le 

test de nage forcée, permettait de révéler l’effet anti-dépresseur d’un traitement préalable par AAL d’une durée de 3 semaines, durée de traitement pour 

laquelle aucun effet n’avait préalablement été montré (% de diminution de l’immobilité au cours des 240 sec. : Placebo, 4 ± 1 ; AAL 3 sem., 9 ± 2 ; AAL 

3 sem. et clonidine, 21 ± 4 ; AAL 3 sem. et imipramine, 34 ± 6 ; p < 0.005). En revanche, l’administration à faible dose de clonidine ou d’imipramine ne 

permettait pas à elle seule d’induire un effet anti-dépresseur (% de diminution de l’immobilité au cours des 240 sec.: Placebo, 4 ± 1 ; clonidine, 6 ± 1 ; 

imipramine, 10 ± 3 ; p > 0.05). 

Conclusion : Notre étude apporte des arguments en faveur de l’existence d’effets anti-dépresseurs des oméga-3 en traitement chronique chez la souris. 

Ces effets pourraient par ailleurs être révélés ou potentialisés par la modulation pharmacologique des voies plus classiquement impliquées dans le 

traitement de la dépression. Les mécanismes sous-jacents, en particulier les processus impliqués dans la plasticité du système nerveux central, 

demeurent à explorer. 

Mot(s)-clé(s) : dépression & omega 3 & comportement & plasticité du système nerveux 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Physiologie" (2) - 9h00 à 10h

HOUDAYER Elise EA2683 - Philippe DERAMBURE 

Etude de l’excitabilité corticale liée au mouvement: rôle du contrôle moteur inhibiteur et implications 

physiopathologiques 

Tout mouvement volontaire doit être en permanence régulé par des structures corticales et sous corticales. C’est ce qu’on appelle le contrôle moteur. 

Le contrôle moteur inhibiteur, intervenant notamment dans la phase d’arrêt du mouvement, nécessite l’activation de mécanismes inhibiteurs corticaux et 

est en relation étroite avec le traitement cortical des informations sensorielles ou intégration sensorimotrice. Ces phénomènes cérébraux peuvent être 

étudiés au moyen de deux techniques électrophysiologiques : l’ElectroEncéphaloGraphie (EEG) et la Stimulation Magnétique Transcrânienne (SMT). 

L’EEG permet de quantifier les variations d’amplitude des rythmes électrocorticaux par la méthode des Désynchronisations et Synchronisations Liées à 

l’Evénement (DLE/SLE). La SLE des rythmes bêta reflète une augmentation de la puissance du signal qui survient à la fin d’un mouvement. Initialement 

interprétée comme le reflet de l’inhibition corticale ou de la mise au repos des neurones corticaux après le mouvement, elle serait également liée à 

l’intégration des afférences sensorielles. La SMT quant à elle permet de mesurer l’état d’excitabilité du cortex moteur primaire. Cela consiste à activer 

focalement les neurones du cortex en délivrant un stimulus magnétique à la surface du scalp. Appliquée en regard du cortex moteur, la SMT évoque un 

potentiel évoqué moteur dans un ou plusieurs muscles en fonction du site de stimulation. Différents paradigmes permettent d’étudier l’excitabilité 

corticale, les mécanismes inhibiteurs et facilitateurs intracorticaux ou encore l’intégration sensorimotrice. La SMT répétitive (SMTr), délivrée sous forme 

de trains, permet de moduler l’excitabilité corticale en fonction des paramètres de stimulation. 

L’objectif de ce travail est d’approfondir nos connaissances sur le contrôle moteur cortical en évaluant le rôle de l’intégration sensorimotrice et de 

l’inhibition intracorticale grâce à l’EEG et la SMT. Ceci nous permettra de mieux caractériser les anomalies d’excitabilité corticale qui sous-tendent des 

pathologies telles que les myoclonies corticales, la maladie de Parkinson, les dystonies ou l’épilepsie. L’objectif secondaire est d’identifier de nouvelles 

cibles de stimulation par SMTr, en vue d’améliorer le traitement de certaines de ces pathologies. 

La première partie de ce travail s’est portée sur l’analyse de la SLE bêta chez des sujets sains. Cette étude a permis de montrer que les paramètres de 

la SLE (amplitude et durée) dépendent du type de fibres sensitives stimulées (Houdayer et al, 2006). Dans un deuxième temps, nous avons analysé 

cette SLE bêta chez des patients souffrant de myoclonies corticales. Les myoclonies sont de brèves secousses musculaires involontaires et 

incontrôlables, générées par une population de neurones corticaux hyperexcitables. Cette hyperexcitabilité corticale serait associée à une anomalie de 

l’intégration sensorimotrice. Les premiers résultats tendent à montrer une anomalie de la SLE bêta chez ces patients. Par ailleurs, tous bénéficièrent 

d’une exploration par SMT qui permit de mettre en évidence des anomalies des systèmes inhibiteurs intracorticaux ainsi que des défauts d’intégration 

sensorimotrice. Les effets de la SMTr furent évalués à trois reprises chez une de ces patients. Une amélioration de son tremblement fut observée 

excepté après la troisième séance. Par conséquent, la dernière partie de ce travail de thèse est destinée à mieux comprendre les effets de la SMTr 

basse et haute fréquence chez le sujet sain. Pour cela, nous comparons les effets de la SMTr basse et haute fréquence appliquée en regard du cortex 

moteur primaire et du cortex prémoteur. Nous évaluons les effets de cette stimulation sur l’hémisphère cérébral stimulé et sur l’hémisphère opposé et 

sur différents muscles. L’objectif est de mieux comprendre les mécanismes d’action de la SMTr ainsi que ses conséquences sur l’activité corticale afin 

d’obtenir une plus grande maîtrise de ce nouvel outil thérapeutique 

Mot(s)-clé(s) : Intégration sensorimotrice & Inhibition corticale & EEG & Stimulation Magnétique Transcrânienne 

CLASADONTE Jérôme U422 - Pierre POULAIN 

Effets du Monoxyde d’Azote et de la Prostaglandine E2 sur le neurone à Gonadolibérine chez la souris. 

Chez les mammifères, la fertilité est sous le contrôle direct des neurones à gonadolibérine (GnRH), localisés dans le septum et l’aire préoptique. Ces 

neurones permettent la libération des hormones gonadotropes par l’hypophyse antérieure grâce à la sécrétion de GnRH au niveau de leurs 

terminaisons axonales et ce processus dépend principalement de leur activité électrique. L’activité électrique du neurone à GnRH est soumise à des 

contrôles modulateurs exercés par les neurones qui les contactent. Toutefois, des facteurs « non synaptiques » comme le monoxyde d’azote (NO : un 

neuromédiateur gazeux) et la Prostaglandine E2 (PGE2), sont reconnus pour faciliter la cession des hormones gonadotropes. Ils pourraient agir 

directement sur le corps cellulaire du neurone à GnRH mais cela n’est pas démontré. De plus, ces deux facteurs interagissent car, dans certains 

modèles, la PGE2 peut être produite sous l’action du NO. 

J’ai développé une méthodologie pour visualiser et enregistrer en patch-clamp les neurones à GnRH chez des souris transgéniques GnRH-GFP des 

deux sexes. A partir de tranches de cerveau adulte perfusées, j’ai étudié l’action du NO et de la PGE2 sur les neurones à GnRH. Les substances ont 

été appliquées dans le milieu de perfusion. 

Le NO amené dans la tranche par application d’un donneur, le DEA-NONOate (30-100 µM), exerce des effets inhibiteurs sur 11 parmi 17 neurones 

testés. Il n’a pas d’effet sur les autres neurones. Les effets se manifestent par une hyperpolarisation membranaire de 2,5 à 17,5 mV d’où une diminution 

de la fréquence de décharge. L’hyperpolarisation s’accompagne d’une baisse de la résistance membranaire. Elle persiste sous tétrodotoxine 0,5 µM 

(pour bloquer la transmission synaptique dépendante des potentiels d’action), démontrant ainsi que le NO agit directement sur le corps cellulaire du 

neurone enregistré. Le NO produit de manière endogène par l’application d’un précurseur de sa synthèse, la L-Arginine (10-20 mM), provoque aussi 

une inhibition de la décharge pour 9 neurones. Cette inhibition est réduite par l’application préalable d’un inhibiteur de la NO synthétase, la L-NAME (1 

mM). 

L’action de la PGE2 a été étudiée sur 110 neurones. La substance exerce des effets excitateurs sur 86 neurones (78%). Elle n’a pas d’effet sur les 

autres neurones. Les effets se manifestent par une dépolarisation membranaire moyenne de 8 mV (1µM), déclenchant une décharge de potentiels 

d’action. La dépolarisation s’accompagne d’une baisse de la résistance membranaire. Le maintien de l’effet sous tétrodotoxine démontre que le 

mécanisme d’action de la PGE2 est direct. Le courant entrant responsable de la dépolarisation membranaire a une valeur moyenne de - 23 pA et 

s’annule pour une valeur du potentiel de membrane qui suggère son appartenance à la famille des courants cationiques non sélectifs. La PGE2 peut se 

lier à quatre types distincts de récepteurs. Seul le Butaprost 10 µM, un agoniste sélectif du récepteur EP2, mime l’effet de la PGE2, alors que les 

agonistes pour les récepteurs EP1/3 et EP3 sont sans effet. 

Ces résultats démontrent que le NO et la PGE2 sont des modulateurs directs de l’activité du neurone à GnRH. Le NO est inhibiteur, bien que 

l’hypothèse couramment admise propose un effet facilitateur. La PGE2 est ici excitatrice, bien que la production de PGE2 puisse être reliée à l’activité 

NO. 

En conclusion, le NO et la PGE2 exercent des actions opposées sur l’activité électrique du neurone à GnRH et peuvent ainsi influencer différemment la 

libération des hormones gonadotropes. Des expériences en cours tentent de démontrer l’origine astrocytaire de la PGE2, pour confirmer l’hypothèse 

selon laquelle la PGE2 est un « gliotransmetteur » qui agit sur la fertilité suite à l’activation des récepteurs erbB présents sur l’astrocyte. 

Mot(s)-clé(s) : GnRH-GFP & Monoxyde d’azote & Prostaglandine E2 & Patch-clamp 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Physiologie" (4) - 9h00 à 10h


Session 

NEUROPATHOLOGIES

DOURLEN Pierre U422 - Luc BUÉE 

Rôle de Pin1 dans les cellules neuronales et la maladie d’Alzheimer 

La peptidyl prolyl cis-trans isomérase Pin1 facilite l’isomérisation de la liaison peptidique reliant une Sérine ou une Thréonine à une Proline (motifs 

Ser/Thr-Pro) entre les conformations cis et trans. La particularité de cette PPIase est d’être spécifique de motifs phosphorylés. La phosphorylation 

inhibe l’isomérisation spontanée de la liaison ce qui rend nécessaire l’action de cette enzyme. Elle prend une place croissante dans la biologie cellulaire 

sachant que de nombreuses kinases (cdk, MAPK, GSK3…) et phosphatases (PP2A, Fcp1…) ciblent ces motifs. En régulant leur conformation, Pin1 

pourrait faciliter la déphosphorylation des protéines. De tels mécanismes sont fondamentaux dans la régulation du cycle cellulaire. Ainsi, il a été montré 

que dans les cellules en prolifération, Pin1 contrôlerait le cycle cellulaire, notamment la transition G2/M, et faciliterait l’apoptose. Ces mécanismes ont 

été impliqués dans une pathologie cérébrale, la maladie d’Alzheimer. L’une des deux lésions de cette maladie, la dégénérescence neurofibrillaire, est 

caractérisée par l’agrégation de la protéine Tau hyper phosphorylée et anormalement phosphorylée. Or dans la dégénérescence neurofibrillaire, des 

marqueurs des phases G1, S et G2-M sont exprimés anormalement dans les neurones. Un défaut d’activité de Pin1 dans ces cellules différenciées 

pourrait faciliter cette reprise du cycle cellulaire. Par ailleurs, il a été décrit in vitro que Pin1 faciliterait la déphosphorylation de la protéine Tau en 

favorisant l’accès des phosphatases (PP2A) à certains sites pSer/Thr-Pro. En effet, cette phosphatase est spécifique de motifs en conformation trans et 

en facilitant l’échange des conformations, Pin1 faciliterait l’activité de cette enzyme. Au total Pin1 pourrait avoir un rôle clé dans la dégénérescence 

neurofibrillaire. Cependant, le rôle physiologique de Pin1 reste inconnu dans les cellules neuronales. 

Dans le cadre de ce travail, nous avons évalué le rôle de Pin1 sur la phosphorylation de tau et la régulation du cycle cellulaire dans des cellules de type 

neuronal. 

Nous avons étudié le rôle de Pin1 dans la déphosphorylation de tau dans deux modèles cellulaires, un modèle de lignée SY5Y issue de neuroblastome 

et un modèle de culture primaire mixte de neurones. Nos résultats ont montré que parmi 9 des 17 motifs Ser/Thr-Pro que possède Tau, seule la 

phosphorylation d’un site, la Thr231, est régulée par Pin1. Dans le contexte de la maladie d’Alzheimer, la phosphorylation à ce site est considérée 

comme pathologique. En facilitant la déphosphorylation de Tau, la protéine Pin1 semble avoir un rôle neuroprotecteur. Ceci a été confirmé tout d’abord, 

par le phénotype des souris invalidées pour Pin1 qui montre une pathologie Tau mais aussi par un défaut d’activité de Pin1 observé dans la maladie 

d’Alzheimer. 

Le rôle de Pin1 a été évalué dans le cycle des cellules SY5Y, différenciables en neurones. Les résultats montrent que la surexpression de Pin1 altère la 

croissance des cellules et la répartition de ces cellules dans les phases du cycle. Ils diffèrent de ceux publiés pour d’autres lignées cellulaires ce qui 

laisse envisager un rôle original de Pin1 dans ces cellules ainsi qu’une interaction avec de nouveaux partenaires moléculaires. 

CONCLUSION 

Au total, nos résultats montrent un rôle de Pin1 dans la régulation de la phosphorylation de tau et potentiellement dans la réactivation du cycle cellulaire 

observée dans la maladie d’Alzheimer. 

Mot(s)-clé(s) : PPIase & Phosphorylation & Tau & cycle cellulaire 

BRETTEVILLE Alexis U422 - Claude-Alain MAURAGE 

Développement et Caractérisation d’un modèle in vivo de Dégénérescence Neurofibrillaire : Un outil de choix 

pour comprendre les mécanismes d’une mort neuronale liée a Tau. 

Les maladies neurodégénératives se caractérisent par une perte neuronale qui, suivant les pathologies, affecte des populations neuronales spécifiques 

expliquant en partie la diversité des signes cliniques observés. Parmi ces pathologies, la maladie d’Alzheimer et certaines démences familiales 

présentent une lésion neurohistopathologique spécifique appelée Dégénérescence NeuroFibrillaire (DNF). Cette lésion est définie par une agrégation 

intraneuronale de protéines Tau qui sont retrouvées hyperphosphorylées, anormalement phosphorylées et agrégées sous la forme de filaments 

appariés en hélice (PHF). Cependant, si cette dérégulation de phosphorylation semble être au cœur du processus dégénératif de ces pathologies, le 

rôle exact de celle-ci et les mécanismes mis en jeu, plus généralement, au cours de la mort neuronale sont encore mal connus. En 1998, la découverte 

de mutations dans le gène de Tau associées à des démences héréditaires (mutations DFTP-17) a permis d’élaborer des modèles murins qui 

reproduisent des caractéristiques de la DNF. Néanmoins, ces modèles présentent des troubles moteurs qui constituent un handicap majeur pour 

évaluer les capacités mnésiques de ces souris à l’aide des tests comportementaux usuels. Dans ce contexte, notre laboratoire a entrepris de 

développer un nouveau modèle murin de DNF ne présentant pas ces troubles moteurs. Ce modèle transgénique est basé sur la surexpression d’une 

protéine Tau comportant deux mutations pathologiques. De plus, la séquence codante du transgène a été placée sous le contrôle d’un promoteur 

neuronal afin de cibler l’expression au niveau des neurones. L’étude de ce modèle a révélé la présence, au cours du vieillissement, des caractéristiques 

majeures de la DNF avec une hyperphosphorylation de Tau, une phosphorylation anormale de Tau et une agrégation de Tau qui précèdent la mort 

neuronale. De plus, l’absence de troubles moteurs au cours de la fenêtre d’étude, a permis de mettre en évidence l’existence de troubles 

d’apprentissages et de mémoire spatiale chez ces souris. En conclusion, nous disposons d’un modèle physiopathologique pertinent pour approfondir la 

compréhension des mécanismes impliqués dans la DNF et qui représentera un outil de choix pour l’évaluation de stratégies pharmacologiques. 

Mot(s)-clé(s) : Maladie d’Alzheimer & mutations DFTP-17 & agrégation & phosphorylation 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Neuropathologies" (2) - 11h00 à 12h

LARVOR Lydie EA2683 - Marie-Christine CHARTIER-HARLIN 

Variations d’expression du gène de l’α-synucléine, cause et conséquences sur la physiopathologie de la 

maladie de Parkinson 

La maladie de Parkinson est l’atteinte neurodégénérative motrice la plus courante dans la population âgée. Sa prévalence est d’environ 1,8 % après 65 

ans (de Rijk et al, 2000). Quatre signes cliniques majeurs caractérisent cette maladie: un tremblement de repos, une bradykinésie, une rigidité 

musculaire et une instabilité posturale. Des problèmes neuropsychologiques, des perturbations du sommeil ou encore des dysautonomies peuvent être 

observés et dépendent de l’étendue de l’atteinte du système dopaminergique (pour revue voir: Chaudhuri et al, 2006). 

L’étude de cas familiaux et sporadiques a permis l’identification de plusieurs gènes délétères menant ainsi à une meilleure compréhension de la 

physiopathologie de la maladie. En particulier, pour le gène de l’α-synucléine (SNCA), l’identification d’une multiplication du locus de ce gène 

(Farrer et al, 2004) a souligné l’importance de son niveau d’expression. L’augmentation d’expression résultante semble suffisante au développement 

d’un syndrome parkinsonien chez les porteurs de la mutation (Singleton et al, 2003; Chartier-Harlin et al, 2004; Ibanez et al, 2004). Certains allèles du 

polymorphisme de répétition REP1 sont associés à la maladie (Chiba-Falek et al, 2005) et induisent également une augmentation d’expression de 

SNCA en système rapporteur (Chiba-Falek and Nussbaum, 2001; Chiba-Falek et al, 2003). D’autre part, la surexpression de l’α-synucléine 

humaine chez des animaux transgéniques provoque l’apparition d’un syndrome parkinsonien (Hashimoto et al, 2003). Dans des modèles cellulaires, 

elle entraîne l’activation des voies de l’apoptose et de l’inflammation, ainsi que l’altération de l’adhésion cellulaire (Seo et al, 2002; Takenouchi et al, 

2001). L’augmentation du taux en α-synucléine semble donc être un des promoteurs de la cascade d’évènements menant au développement de 

la maladie de Parkinson. 

Au vu de ces données, nous nous sommes intéressés aux conséquences pathogéniques des variations du taux d’expression de l’α-synucléine. 

Nous avons ainsi identifié une duplication du locus de SNCA par PCR semi-quantitative, confirmé par hybridation in situ (FISH), dans la famille P59 

(Chartier-Harlin et al, 2004). En parallèle, l’examen clinique a été approfondi par une évaluation neuropsychologique et un DaTScan® (analyse par 

imagerie cérébrale) pour déterminer l’impact du taux d’expression sur les symptômes non moteurs chez les porteurs de multiplications géniques. 

Ensuite, nous avons analysé des cas familiaux ne présentant pas de mutations de SNCA, des porteurs d’une duplication et des porteurs d’une 

triplication. Nous avons observé que l’augmentation du taux d’ARNm de SNCA est corrélée au nombre de copies du gène mais également à des 

phénotypes cliniques différents. Afin de déterminer l’impact pathogénique du taux d’expression de SNCA, nous avons mesuré l’expression de 360 

gènes des voies de l’apoptose, de l’inflammation et de l’adhésion cellulaire chez les membres de la famille P59 en comparaison avec des contrôles 

sans altérations du gène SNCA. Nous avons ainsi identifié deux gènes différentiellement exprimés chez les porteurs de duplication de SNCA, SDF1 

(Stromal cell Derived Factor-1) et TIMP2 (Tissue Inhibitor of MetalloProteinase 2), potentiellement impliqués dans un mécanisme de 

neurodégénérescence. Nous avons mesuré leur taux d’expression chez les malades précédemment cités. Nous avons ainsi observé que les niveaux en 

SDF1 et TIMP2 corrèlent avec le taux d’α-synucléine. Enfin, nous analysons actuellement les conséquences moléculaires et cellulaires de 

l'invalidation et de la surexpression (respectivement par transfection de siRNA et de vecteurs d'expression) du gène SNCA dans une lignée de 

neuroblastome (SK-N-SH SY5Y). Nos résultats préliminaires suggèrent que SDF1 et TIMP2 sont modulés par le taux d'α-synucléine et les 

conséquences phénotypiques (survie, prolifération et différenciation cellulaire) sont en cours d'étude. 

Mot(s)-clé(s) : Parkinson & Synucléine & Expression 

BENSEMAIN Faïza U508 - Nicole HELBECQUE 

Induction de l’expression de l’ornithine transcarbamylase dans la maladie d’Alzheimer. 

Afin de caractériser de nouveaux déterminants génétiques localisés dans des régions chromosomiques d’intérêt définies par criblage génomique dans 

la maladie d’Alzheimer, nous avons développé une biopuce thématique nous permettant d’étudier 2741 gènes localisés dans ces régions. Cette étude 

nous a permis de mettre en évidence 106 gènes différentiellement exprimés dans le tissu cérébral de 12 malades par rapport à celui de 12 témoins. Sur 

11 gènes localisés sur le chromosome X et différentiellement exprimés, nous nous sommes plus particulièrement intéressés au gène de l’ornithine 

transcarbamylase (OTC), enzyme clé du cycle de l’urée. Ce gène s’est avéré être exprimé dans le tissu cérébral des patients mais pas celui des 

témoins, observation confirmée par RT-PCR. Par ailleurs, nous avons détecté l’ARNm des autres enzymes du cycle de l’urée. Ceci suggère donc que 

ce cycle est actif dans le tissu cérébral pathologique, alors que celui-ci est normalement restreint au tissu hépatique. En complément de cette analyse 

transcriptomique, des expériences d’immunohistochimie ont permis de confirmer la présence spécifique de la protéine dans le tissu cérébral des 

malades et de la localiser au niveau des cellules endothéliales vasculaires. 

Finalement, nous avons analysé l’association avec le risque de développer la MA, de 2 polymorphismes localisés dans le promoteur du gène de l’OTC. 

Des combinaisons spécifiques de ces deux polymorphismes ont été significativement associées au risque de développer la MA, ces combinaisons 

correspondant potentiellement à des niveaux de méthylation différents du promoteur de l’OTC. 

En conclusion, cette approche nous a permis d’identifier une nouvelle voie métabolique dans le cerveau des malades pouvant être associée au risque 

de développer la MA. 

Mot(s)-clé(s) : Maladie d'Alzheimer & Ornithine transcarbamylase & Expression 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Neuropathologies" (4) - 11h00 à 12h


Session 

T R A N S P O R T E U R S 

S I G N A L I S A T I O N

FLOURAKIS Matthieu U 800 - Natacha PREVARSKAYA 

Mise en évidence du rôle du translocon dans la fuite passive de calcium et dans l’activation des canaux 

calciques de type SOC. 

L’ion calcium est considéré comme un second messager ubiquitaire utilisé par tous les types cellulaires. C’est un facteur essentiel impliqué dans de 

nombreux processus aussi divers que l’apoptose, la prolifération, la différenciation, la fécondation et la sécrétion. 

Le Réticulum Endoplasmique (RE), principale source de calcium mobilisable pour la cellule, est un acteur important pour la régulation de la signalisation 

calcique. L’homéostasie calcique du RE est donc finement régulée. L’un des mécanismes les plus énigmatique responsable de la régulation de la 

concentration de calcium dans le RE est la « fuite passive » de calcium : en effet la nature moléculaire des canaux responsables de cette fuite est 

inconnue. Des études récentes ont démontré que le translocon, un complexe multiprotéique présent sur la membrane du RE et jouant un rôle dans la 

traduction, serait perméable au calcium. Cependant le rôle de ce complexe dans la fuite passive de calcium n’a jamais été clairement démontré. 

Par ailleurs, il est connu que la fuite passive de calcium peut stimuler les canaux calciques de type SOC (Store Operated Channels). Ces canaux sont 

activés suite à la libération du calcium contenu dans le RE. Ils assurent, après la déplétion, le remplissage des stocks calciques jusqu'à leurs 

concentrations physiologiques et jouent donc un rôle important dans la physiologie de la cellule. Dans ce cadre, il était tout particulièrement intéressant 

de savoir si la fuite passive transitant par le translocon peut activer les canaux SOC. 

Dans ce cadre, notre travail nous a permis de démontrer que le translocon est le canal de fuite majoritaire des cellules cancéreuses prostatiques 

humaines. Cette fuite de calcium via le translocon serait responsable de l’activation des canaux calciques de type SOC. Nos résultats suggèrent ainsi 

que la fuite de calcium par le translocon pourrait être un processus ubiquitaire dans la physiologie cellulaire et serait un élément majeur de la 

signalisation calcique en régulant la concentration de calcium dans le RE. 

Mot(s)-clé(s) : CALCIUM & RETICULUM ENDOPLASMIQUE & TRANSLOCON & STORE OPERATED CHANNELS 

PLAISIER Fabrice EA1046 - Michèle BASTIDE 

Implication des canaux potassiques de l’unité neurogliovasculaire dans la plasticité cérébrale suite à l’ischémiereperfusion. 

Au sein du tissu cérébral, les cellules neuronales, astrocytaires et vasculaires forment une unité fonctionnelle permettant le couplage entre l’activité 

neuronale et le débit sanguin. Suite à un accident vasculaire cérébral, un important découplage fonctionnel apparaît au sein de cette unité en particulier 

au niveau des mouvements ioniques. 

L’objectif de mon étude est de mettre en évidence les altérations des conductances potassiques (Kir, Kv, …) au sein de l’unité neurogliovasculaire suite 

à l’ischémie/reperfusion et leur plasticité au cours de la période post-ischémique. Mes travaux sont réalisés sur un modèle d’ischémie-reperfusion focale 

chez le rat et par l’utilisation de différentes techniques, électrophysiologiques (patch-clamp) et biochimiques (western blot et immunohistochimie). En 

parallèle, le déficit sensorimoteur est évalué par des tests comportementaux sur l’animal afin de reproduire le handicap fonctionnel des patients 

consécutif à un accident vasculaire cérébral. 

Il a d’abord été mis en évidence au niveau vasculaire une réduction significative de la densité de courant Kir2.1du muscle lisse après 24h de 

reperfusion. La relaxation potassium dépendante qui lui est associée ainsi que la relaxation dépendante de l’endothélium sont également altérées. 

Après 7 jours de reperfusion, la récupération progressive au cours du temps de la densité de courant est totale et montre une aptitude intrinsèque du 

canal à retrouver son activité. Une étude de l’expression de celui-ci au décours de l’ischémie est en réalisation dans le but de confirmer si ces résultats 

sont dus à une variation de l’expression de la protéine. Les études de vasoréactivité menées au cours de cette même période montre de façon similaire 

une récupération spontanée de la relaxation potassium-dépendante contrairement à la relaxation endothélium-dépendante. D’un point de vue moteur, 

l’ischémie-reperfusion entraîne un déficit sensorimoteur qui est caractérisé par l’utilisation de deux tests (test du ruban adhésif et test de traction). Les 

résultats montrent que suite à l’ischémie-reperfusion une phase de récupération spontanée intervient reflétée par une amélioration partielle et 

progressive des performances de l’animal. 

L’administration d’un agent antioxydant tel que la stobadine (2 mg/kg) induit une neuroprotection qui se traduit par des volumes d’infarctus plus faibles. 

En parallèle, la stobadine induit une protection du courant Kir2.1 dès 24h sous-tendant une protection du canal vis-à vis des radicaux libres générés lors 

de la phase de reperfusion. Alors que la stobadine protège dès 24h la relaxation endothélium-dépendante, elle ne semble pas accélérer la récupération 

potassium-dépendante montrant que d’autres mécanismes délétères doivent ainsi être mis en jeu. Néanmoins, d’un point de vue comportemental, elle 

permet une accélération significative de la récupération motrice des animaux. 

Mes travaux se poursuivent actuellement selon deux axes distincts. D’une part, les conductances potassiques voltage dépendantes qui sont elles aussi 

impliquées dans la réactivité vasculaire ainsi que leur régulation (NO) sont étudiées afin d’évaluer l’étendue des perturbations ioniques au niveau 

vasculaire suite à l’ischémie. D’autre part, la technique de patch-clamp sur tranche de cerveau est actuellement en phase de mise au point. Celle-ci 

permettra l’étude des conductances potassiques des autres compartiments cellulaires (notamment neuronal) situés dans la zone de pénombre 

ischémique et dans la zone homotopique contralatérale pouvant intervenir lors des mécanismes de plasticité observés après ischémie-reperfusion. 

Mot(s)-clé(s) : Ischémie cérébrale & Canaux ioniques & Antioxydant & Plasticité cérébrale 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Transporteurs signalisation" (2) - 14h00 à 15h

FOVEAU Benedicte UMR8117 - David TULASNE 

Amplification de l’apoptose par le clivage séquentiel du récepteur tyrosine kinase MET par les caspases. 

L’Hepatocyte Growth Factor / Scatter Factor (HGF/SF) est un facteur de croissance pléïotropique qui agit via le récepteur tyrosine kinase MET dans 

divers types cellulaires. Suite à la liaison de l’HGF/SF, le récepteur MET se dimérise et son activité tyrosine kinase est stimulée par 

autophosphorylation, permettant l’activation de voies de signalisation. MET activé par son ligand induit la prolifération, la dispersion, l’invasion et la 

morphogenèse de cellules épithéliales. L’HGF/SF est également un facteur de survie qui protège de nombreux types cellulaires contre la toxicité et 

l’apoptose induites par divers stimuli. 

Néanmoins, nous avons montré que MET est une cible fonctionnelle des caspases. En effet, des stress induisent le clivage de MET par les 

caspases dans sa région juxtamembranaire, générant un fragment pro-apoptotique de 40 kDa (p40 MET). 

Nous avons récemment découvert l’existence d’un autre clivage de MET par les caspases, situé dans son extrémité C-terminale. De façon intéressante, 

nous avons mis en évidence une organisation hiérarchique de ces clivages, celui en C-terminal favorisant celui en juxtamembranaire. De plus, la 

délétion des derniers acides aminés de MET, suite au clivage C-terminal, augmente les capacités apoptotiques de p40 MET. Enfin, des cellules 

exprimant stablement un récepteur MET muté sur le site caspase C-terminal génèrent moins de fragment p40 MET et sont plus résistantes à 

l’apoptose, indiquant que la génération de ce fragment amplifie la mort cellulaire. 

Ces résultats révèlent un clivage du récepteur MET par les caspases en deux étapes séquentielles réorientant ses activités biologiques de 

récepteur de survie vers une activité pro-apoptotique. 

Mot(s)-clé(s) : récepteur tyrosine kinase MET - Hepatocyte Growth Factor - apoptose - caspase 

RUCKTOOA Prakash UMR8525 - Vincent VILLERET 

Études structurales de transporteurs périplasmiques potentiellement liés à la virulence de Bordetella pertussis 

Les systèmes de transport des bactéries sont généralement reliés à leur métabolisme d'une part, et à la niche écologique dans laquelle elles évoluent 

d'autre part. Chez les bactéries à Gram négatif, le passage de solutés du périplasme vers le cytoplasme est en partie dévolu aux transporteurs 

périplasmiques ATP-indépendants à trois partenaires (TRAP). Ce mode de transport fait intervenir deux protéines situées dans la membrane interne 

ainsi qu'un composant périplasmique, DctP. 

Bordetella pertussis, l'agent étiologique de la coqueluche, possède une quinzaine de transporteurs de type TRAP. Les gènes codant pour deux de ces 

transporteurs (TRAP6 et TRAP7), sont situés dans une région adjacente au locus de trois facteurs de virulence (FhaC, FHA et Fim) régulés au niveau 

transcriptionnel par le système à deux composants BvgAS. La proximité des gènes de TRAP6 et TRAP7 avec ce locus de virulence pourrait suggérer 

que les substrats qu'ils transportent, seraient impliqués dans la modulation de la réponse du couple BvgA/S. Une étude structurale des composants 

périplasmiques respectifs des TRAP6 et TRAP7 (DctP6 et DctP7) a donc été initiée afin d'identifier ces substrats. 

DctP6 et DctP7 ont été cristallisés et leur structure tridimensionnelle a été déterminée à une résolution de 1,9 Å. Le repliement de ces deux DctP est 

similaire à celui des transporteurs périplasmiques. L'analyse de la structure a montré que le substrat transporté par DctP6 et DctP7 serait 

vraisemblablement l'acide pyroglutamique. 

Cette identification du substrat de DctP6 et DctP7 servira de base de départ pour l'étude des effets potentiels de l'acide pyroglutamique sur la 

modulation du système à deux composants BvgAS de même que sur le métabolisme de B. pertussis. 

Mot(s)-clé(s) : Structure & Cristallographie & Transporteur périplasmique 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Transporteurs signalisation" (4) - 14h00 à 15h

6 ème Journée André VERBERT 

Session 

R E G U L A T I O N 

G E N E T I Q U E

MARTIEN Sebastien UMR-CNRS 8161 - Corinne ABBADIE 

Rôle du stress oxydant induit par les facteurs NF-kB dans la sénescence et l’émergence tumorale des cellules 

épithéliales 

Au fur et à mesure du temps et des divisions successives, les cellules primaires en culture entrent en sénescence. Deux mécanismes concourent à 

l’établissement du phénotype sénescent : le raccourcissement des télomères et l’accumulation de dommages oxydants. Il a été montré au laboratoire 

que les facteurs Rel/NF-kB étaient impliqués dans la survenue de la sénescence des cellules épithéliales via l’induction de la MnSOD. Cette enzyme 

dégrade les anions superoxydes (O2 -) en peroxyde d’hydrogène (H2O2), dont l’accumulation induit un stress oxydant qui contribue à l’établissement 

du phénotype sénescent. 

La sénescence est généralement considérée comme une barrière au développement tumoral, principalement parce qu’il a été décrit qu’au plateau de 

sénescence les cellules sont arrêtées dans le cycle cellulaire de façon irréversible. Cependant, il a été observé, notamment au laboratoire avec des 

cultures de kératinocytes et de cellules épithéliales mammaires, qu’un petit nombre de cellules présentant des caractères transformés est capable 

d’émerger spontanément à partir de cellules sénescentes. Cette émergence in vitro pourrait constituer un modèle d’étude des mécanismes initiaux de 

tumorigenèse. En effet, contrairement aux cellules épithéliales, les fibroblastes sont incapables d’une telle émergence, ce que l’on peut corréler avec le 

fait que les carcinomes ont une incidence élevée et liée à l’âge, alors que les sarcomes sont beaucoup plus rares et surviennent à un âge moins 

avancé. 

Notre objectif est d’étudier les mécanismes moléculaires à l’origine de cette émergence prétumorale et en particulier l’implication des activités Rel/NFkB 

et MnSOD. Nous avons d’ores et déjà montré que le stress oxydant résultant de l’augmentation de ces activités Rel/NF-kB et MnSOD au cours de la 

sénescence était impliquée dans l’émergence. En effet, dans les kératinocytes, l’inhibition de l’activité Rel/NF-kB ainsi que l’addition de catalase, 

destinée à empêcher l’accumulation de H2O2, diminuent la fréquence d’émergence. Dans les fibroblastes, malgré une activité Rel/NF-kB stable au 

cours du temps, l’activité MnSOD et le niveau d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) augmentent à la sénescence. Cependant, la culture de 

fibroblastes en présence de catalase ou d’autres antioxydants ne retarde pas la survenue de la sénescence des fibroblastes. Dans les kératinocytes, 

certains dommages oxydants (ponts amino-imino-propènes) sont accumulés principalement au niveau des noyaux ; dans les fibroblastes, ces 

dommages sont principalement observés au niveau cytoplasmique. A l’inverse, des micronoyaux (un signe d’altérations chromosomiques) et des foyers 

d’histones H2AX phosphorylées (réponse aux cassures double brin de l’ADN) sont beaucoup plus fréquemment observés dans des fibroblastes 

sénescents que dans des kératinocytes. De même, à l’aide d’une technique de FISH utilisant une sonde spécifique des télomères, nous avons pu 

montrer une érosion importante des télomères lors de la sénescence des fibroblastes, alors que dans les kératinocytes, cette érosion est beaucoup 

moins importante. 

Ainsi, lors de la sénescence des kératinocytes, les facteurs Rel/NF-kB, via la MnSOD, induiraient des dommages oxydants, en particulier au niveau du 

noyau, qui pourraient avoir des effets mutagènes favorisant l’émergence de cellules transformées à partir de cellules possédant des télomères encore 

assez longs pour autoriser une reprise de prolifération. Dans les fibroblastes, les dommages oxydants à l’ADN seraient insuffisants pour être 

mutagènes et l’important raccourcissement des télomères induirait des altérations chromosomiques et un arrêt irréversible dans le cycle, incompatible 

avec une émergence. 

Mot(s)-clé(s) : sénescence & stress oxydant & NF-kappaB & tumorigenèse 

VINCENT Audrey U560 - Isabelle VAN SEUNINGEN 

Régulation épigénétique des gènes de mucines 11p15 (MUC2, MUC5AC, MUC5B, MUC6) dans les cancers 

épithéliaux 

Les gènes de mucines humaines 11p15 (MUC2, MUC5AC, MUC5B, MUC6) sont organisés en un cluster sur le chromosome 11 dans une région riche 

en CpG et soumise à de nombreux phénomènes de régulation par méthylation dans les cancers. Les gènes de mucines codent des protéines sécrétées 

de haute masse moléculaire fortement glycosylées qui participent à la formation du mucus. Le mucus est indispensable à une protection efficace de 

l’épithélium sous-jacent face à des agressions variées selon la muqueuse considérée (trachéobronche, œsophage, estomac, intestin, voies génitales). 

La composition du mucus est d’ailleurs spécifique de chacune de ces muqueuses, ce qui implique une régulation fine des gènes de mucines. 

La répression de l’expression des gènes MUCs dans certains cancers épithéliaux nous a amenée à étudier leur profil d’expression dans un large panel 

de lignées cellulaires cancéreuses d’origines épithéliales variées. Nous avons évalué le taux de méthylation des gènes et l’état chromatinien (degré 

d’acétylation des histones) par l’utilisation d’agents chimiques spécifiques (5-aza-2’-désoxycytidine, trichostatine A) dans les cellules en phase 

proliférative et en phase stationnaire. Nous avons ensuite étudié le degré de méthylation des sites CpG au sein des promoteurs des quatre gènes du 

cluster par les techniques de « Methylation specific-PCR » et de séquençage d’ADN traité par le bisulfite. Les modifications des histones (acétylation, 

méthylation) ont été analysées par immunoprécipitation de chromatine (ChIP). 

Les résultats montrent que MUC2 et MUC5B sont les deux gènes les plus soumis à régulation par méthylation et désacétylation des histones. 

L’inhibition de l’expression de MUC2 par méthylation est cytosine-spécifique tandis que la répression de MUC5B dépend de l’hyperméthylation d’une 

vaste région distale de son promoteur. Cette régulation par méthylation est cellule-spécifique, dépend de l’état de différenciation de la cellule et, dans la 

plupart des cas, est étroitement associée à la désacétylation des histones. En revanche, les phénomènes épigénétiques n’interviennent que 

partiellement, ou indirectement, dans la régulation de MUC5AC et ne semble pas intervenir pour MUC6. Enfin, malgré leur regroupement en cluster, les 

quatre gènes de mucines 11p15 ne semblent pas régulés de manière concertée. 

Mot(s)-clé(s) : Mucines, méthylation, acétylation, cancer 

6 ème Journée André VERBERT session orale "Régulation génétique" (2) - 15h00 à 16h

DEGERNY Cindy UMR8117 - Jean-Luc BAERT 

Sumoylation et répression de l’activité transcriptionnelle de ERM 

ERM est un facteur de transcription de la famille ETS appartenant au groupe PEA3. Ce groupe est composé de trois protéines apparentées (ERM, 

ER81 et PEA3) qui sont impliquées dans la morphogenèse des organes se développant via des interactions épithélio-mésenchymateuses et jouent un 

rôle dans le cancer mammaire, principalement dans le processus métastatique. En particulier, ces facteurs de transcription activent l’expression de 

gènes codant certaines métalloprotéases et molécules d’adhérence intervenant dans le processus invasif. Ces protéines sont de faibles activateurs 

transcriptionnels. Leur activation dépend de l’assemblage avec des co-facteurs transcriptionnels et de modifications post-traductionnelles telles que la 

phosphorylation et l'acétylation. D’autres modifications post-traductionnelles affectent ERM. Ainsi, la mise en évidence récente d’une interaction entre 

ERM et Ubc9, la seule enzyme connue de conjugaison de SUMO, a suggéré que ERM pouvait être sumoylé. La sumoylation est en fait la conjugaison 

d’une protéine SUMO (Small Ubiquitin-related MOdifier) sur des lysines de la protéine cible. Les lysines cibles appartiennent à une séquence 

consensus YKXE (Y acide aminé hydrophobe). Cette modification post-traductionnelle emprunte une voie enzymatique analogue à celle de 

l’ubiquitination. Toutefois, à la différence de celle-ci, la conjugaison de SUMO ne conduit pas à la dégradation de la protéine modifiée mais influence 

certaines de ses propriétés comme sa localisation subcellulaire, la stabilité de ses interactions et son activité transcriptionnelle. La sumoylation joue 

donc un rôle clé dans la régulation de l'activité des facteurs de transcription qui en sont la cible. 

ERM interagit avec Ubc9 et possède en outre cinq lysines situées dans une séquence consensus de sumoylation. Les expériences que nous avons 

menées in vitro et ex vivo ont montré que la protéine est sumoylée sur 4 de ces sites. Pour évaluer l’impact de la sumoylation sur l’activité 

transcriptionnelle de ERM, nous avons muté les lysines cibles de la sumoylation ou l’acide glutamique du site consensus afin de générer des formes 

non sumoylables du facteur de transcription. Sur des promoteurs répondant à ERM, ces mutants non sumoylables ont une activité supérieure à celle de 

la protéine sauvage, suggérant un rôle inhibiteur de la sumoylation. De plus, la surexpression de protéines inhibant la voie de conjugaison de SUMO 

endogène conduit à une augmentation de l’activité transcriptionnelle de ERM. L’ensemble de ces résultats démontre que la sumoylation conduit à la 

répression de l’activité transcriptionnelle du facteur de transcription. Cette répression n’est liée ni à un défaut de localisation cellulaire, ni à une 

diminution de la fixation à l’ADN de la protéine. Nous recherchons actuellement les mécanismes de répression mis en jeu par la sumoylation ainsi que 

les voies de signalisation impliquées dans la régulation de la sumoylation de ERM. 

Mot(s)-clé(s) : sumoylation, transcription, famille ETS 

ROGEE Sophie U 817 - Jean-Claude d'HALLUIN 

Biodistribution et mécanisme d'infection d'un vecteur adénoviral portant des fibres chimériques 

Les vecteurs dérivés des adénovirus du sous-groupe C sont largement utilisés en thérapie génique. Néanmoins, ceux-ci provoquent chez l'Homme une 

importante toxicité hépatique et induisent une forte réponse immune. Un moyen pour pallier ces problèmes consiste à modifier le tropisme des 

adénovirus. Pour cela, un vecteur portant des fibres chimériques constituées de l'extrémité Nterminale d'un adénovirus humain et l'extrémité Cterminale 

d'un adénovirus bovin : HAdV2/BAdV-4 a été construit au sein de notre équipe. La biodistribution de ce vecteur chez la souris et la réponse immune ont 

été étudiées. In vivo, la présence réduite de ce vecteur au niveau du foie à 24 heures post-injection, suppose une élimination plus rapide par cet 

organe. De plus, le dosage d'IL6 ou d'IFNgamma montre une induction amoindrie de la réponse inflammatoire par HAdV2/BAdV-4 par rapport au virus 

sauvage. De même, la neutralisation de l'adénovirus chimérique par des sérums humains est plus faible. 

Parallèlement, la voie d'endocytose de HAdV2/BAdV-4 a été étudiée sur des cellules permissives à ce vecteur : les CHO hCAR négatives. Notre 

analyse montre que le virus modifié utilise principalement la voie des cavéoles pour infecter la lignée cellulaire CHO. L'utilisation de cette voie permet 

probablement à HAdV2/BAdV-4, comme cela a été démontré pour le SV40, de transférer son génome directement vers le noyau évitant ainsi sa 

dégradation par les lysosomes. 

En réduisant l'induction de la réponse inflammatoire et en empruntant la voie des cavéoles, le transfert du vecteur adénoviral vers des cellules cibles 

sera amélioré et ainsi permettre une meilleure expression du transgène. Par conséquence, HAdV2/BAdV-4 pourrait servir de modèle à l'élaboration de 

nouveaux vecteurs chimériques ciblant des récepteurs spécifiquement internalisés par la voie des cavéoles. 

Mot(s)-clé(s) : adénovirus modifié & biodistribution & endocytose & réponse immune 


PEIXOTO Paul U 817 - Amélie LANSIAUX 

Ciblage de l'ADN par des petites molécules et modulation de la fixation des partenaires protéiques 

L’éventail thérapeutique utilisé actuellement en chimiothérapie anti-tumorale fait appel à des molécules qui possèdent un indice thérapeutique limité dû 

tout particulièrement à leur faible sélectivité d’action. C’est pourquoi nous souhaitons développer au laboratoire de nouvelles approches qui guideraient 

la conception de nouveaux agents anti-tumoraux plus sélectifs. Cette approche s’intègre dans un « design » rationnel de ligands de l’ADN qui 

inhiberaient l’expression de certains gènes. Les dérivés DB, que nous avons retenus pour cette étude, sont des molécules se fixant sur des séquences 

spécifiques riches en paires de bases AT, tandis que d’autres reconnaissent des séquences beaucoup plus originales contenant des paires de 

bases GC comme la séquence ATGA. 

C’est à la fin des années 70 que six oncogènes parmi les premiers décrits ont été identifiés comme étant des facteurs de transcription. Leur 

dysfonctionnement est impliqué dans de nombreux cancers. La compréhension des mécanismes de régulation des facteurs de transcription apparaît 

donc essentielle pour le traitement de ce type de pathologie. Certains facteurs de transcription sont surexprimés ou exprimés sous forme d’une protéine 

de fusion dans de nombreux cancers. C’est notamment le cas du facteur de transcription Hox-A9, une protéine à homéodomaine, responsable de la 

diversité morphogénétique et dont la surexpression est associée à de nombreuses leucémies. Il a été montré que ce facteur de transcription est 

impliqué dans des translocations comme la t(7;11) aboutissant à l’expression de la protéine chimérique Nup98/Hox-A9 responsable de certaines 

leucémies myéloïdes aiguës et chroniques. L’activité de liaison à l’ADN constitutive de cette protéine de fusion est responsable du phénotype 

transformant. Au niveau fonctionnel la protéine Hox-A9 se dimérise avec la protéine PBX pour former un hétérodimère reconnaissant une séquence 

contenant le motif ATGA. 

Ainsi, le ciblage spécifique de la séquence consensus de fixation de Hox-A9 à l’ADN permettrait de lever son pouvoir transformant. Le site consensus 

de liaison à l’ADN de Hox-A9 comportant un site ATGA, nous avons envisagé l’inhibition de la reconnaissance de ce facteur de transcription à sa cible 

par nos petites molécules. 

Pour cela, la sélection de dérivés les plus intéressants en terme de sélectivité de séquence et d’affinité pour l’ADN à été effectuée par différentes 

approches physicochimiques et biochimiques. Par la suite, l’utilisation de protéines exprimées en lysats de réticulocytes a montré l’inhibition de la 

fixation de la protéine par nos dérivés. Pour terminer, les conséquences cellulaires de cette inhibition ont été abordées en utilisant pour modèle des 

cellules progénitrices de moelle osseuse transformées par le gène Hox-A9. Le traitement de ces cellules par notre composé a montré une forte action 

cytotoxique, probablement liée à la levée de la capacité de liaison à l’ADN de la protéine Hox-A9. 

Mot(s)-clé(s) : petites molécules & DNA binding & modulation & facteurs de transcription 

PENEL Nicolas EA 2694 - Yazdan YAZDANPANAH 

Infections nosocomiales en cancérologie: évaluation de l’incidence, des facteurs de risque, des conséquences 

économiques et mise en place d’action préventive. 

Introduction : Les infections nosocomiales les plus fréquentes en cancérologie sont : les infections de voies veineuses centrales (ILC) et les infections 

du site opératoire (ISO). Dans la population générale, leurs caractéristiques sont bien connues. En revanche, en cancérologie, la littérature est pauvre. 

Notre objectif est de mieux connaître leurs caractéristiques épidémiologiques (incidence, facteurs de risque) et leurs conséquences économiques afin 

de mettre en place des mesures préventives adaptées. 

Méthodes : Nous avons choisi 3 modèles : ISO après chirurgie carcinologique mammaire (classée chirurgie propre), ISO après chirurgie carcinologique 

cervico-faciale « lourde » (classée propre contaminée) et ILC précoces. 

Pour chacun de ces modèles, des études prospectives unicentriques (Centre Oscar Lambret) ont été réalisées (1421 patients différents). 

L’incidence puis les facteurs de risque sont identifiés par des régressions logistiques multivariés. 

Pour les ISO en chirurgie carcinologique cervico-faciale lourde, étant donné leur fréquence, nous avons évalué leur impact économique en terme de 

coût médical direct (méthode de macro-costing réalisé de point de vue de l’hôpital) puis analyser à partir d’un modèle de Cox l’impact de ces infections 

sur la durée d’hospitalisation. 

Concernant les ISO en chirurgie carcinologique mammaire, les facteurs de risque étant identifiés, nous avons mis en place une mesure prophylactique 

puis évalué son impact par une étude avant après. 

Résultats : Infections précoces des voies veineuses centrales. 

L’incidence estimée est de 14/371 (3.7% 95%-IC 1.8-5.7). Les deux facteurs de risque observés le jour de la pose sont, en analyse multivariée : age 

inférieur à 18 ans (OR 14.4 [1.9-106.7]) et difficultés durée l’insertion (OR 25.6 [4.2-106.0]). Un arbre de décision permet de présenter les incidences 

observées en fonction de ces facteurs de risque. Une stratégie préventive est proposée selon le risque. 

Infections du site opératoire en chirurgie carcinologique mammaire. 

Deux études prospectives sont réalisées successivement. La première permet d’estimer l’incidence des ISO à 19/542 (3.5% [1.9-5.05]) et d’identifier en 

analyse multivariée 2 facteurs de risque : antécédents de chimiothérapie (OR = 3.5 [1.4-8.7]) et reconstruction immédiate (OR= 4.4 [1.8-11]). De fait, 

nous avons mis en place une mesure prophylactique (antibioprophylaxie) sur la population à haut risque. L’impact de cette intervention a été mesurée 

dans la seconde étude, où le taux d’ISO observé est de 2/247 (0.8% [0.0-1.8]). Le risque d’ISO est réduit de 87%. Ce bénéfice est conservé après prise 

en compte des facteurs de confusion (paramètres significativement différents au sein des 2 cohortes de patients) dans un modèle de régression 

logistique. 

Infections du site opératoire en chirurgie carcinologique cervico-faciale lourde. 

Leur incidence est estimée à 95/261 (36.4%). Le seul facteur de risque apparaissant en analyse multivariée est la laryngectomie (OR=1.9 IC95% [1.4- 

2.2]). Etant donné l’importance de l'incidence, nous avons mesuré l’impact économique de ces ISO. Les patients avec ISO ont une durée médiane 

d’hospitalisation de 35 jours (±26) contre 19 jours (±9) pour ceux sans ISO (p=6.2 10-8) ; ceci entraîne un surcoût médical direct moyen évalué à 17 

000€. Nous avons donc analysé les paramètres influençant la durée de séjour en chirurgie carcinologique cervico-faciale lourde. L’analyse de Cox a 

identifié 3 paramètres : le mauvais état général (1.68 [1.53-1.83]), les ISO (2.59 [2.44-2.74]) et les pneumopathies post-opératoires (1.60 [1.40-1.80]). 

Conclusions : Ce travail a permis d’établir l’incidence et les facteurs de risque des infections nosocomiales en cancérologie dans 3 modèles. Il a 

permis d’estimer les surcoûts induits et de proposer des stratégies préventives. 

Mot(s)-clé(s) : Cancer & Epidémiologie analytique et évaluative & Evaluation économique & Infections nosocomiales 



Sessions 

POSTERS

ADAM Estelle U416 - Philippe LASSALLE 

Endocan, ou ESM-1 (Endothelial cell Specific Molecule-1) est surexprimé dans des cellules humaines de 

glioblastomes 

Les glioblastomes sont des tumeurs de très mauvais prognostic et sont caractérisés par une très forte vascularisation VEGF dépendante. Endocan, ou 

ESM-1 (Endothelial cell Specific Molecule-1), est un protéoglycane circulant de type dermatan sulfate, initialement décrit dans des cellules 

endothéliales. Dans ce travail, nous avons étudié l’expression d’Endocan dans des lignées cellulaires de glioblastomes humains ainsi que sur des 

coupes de tissus issues de tumeurs cérébrales. Les deux isoformes connues d’Endocan ont été identifiées dans ces lignées cellulaires par RT-PCR, et 

la sécrétion de la protéine a été démontrée par dosage ELISA. Nous avons également montré que la sécrétion d’Endocan était régulée in vitro par des 

facteurs pro-inflammatoires tels que le TNF-a, et par des facteurs angiogéniques comme le FGF-2. Nous avons également montré que la sécrétion 

d’Endocan pouvait être corrélée avec le grade de la tumeur, puisque Endocan est exprimé dans des cellules de glioblastomes U118MG (haut grade) 

mais n’est pas exprimé dans des cellules d’astrocytomes CCF-STTG1 (bas grade). Ces résultats ont été confortés par l’étude de coupes de tumeurs 

cérébrales par immunohistologie à l’aide d’anticorps monoclonaux anti-Endocan. Nos résultats montrent qu’Endocan est exprimé au niveau des 

vaisseaux sanguins localisés dans la zone corticale péri-tumorale mais pas du tout au niveau des vaisseaux sanguins du cortex sain. Endocan a 

également été détecté dans le cytoplasme des cellules tumorales, et ceci dans tous les cas étudiés de glioblastomes de haut grade. Par contre, aucun 

astrocytome étudié n’a présenté de marquage anti-Endocan. En conclusion, nous avons montré pour la première fois que l’expression d’Endocan n’est 

pas seulement limitée au compartiment endothélial. Elle apparaît également liée à la progression tumorale dans les cas de glioblastomes. 

Mot(s)-clé(s) : Endocan & glioblastomes & angiogenèse 

ALLART Laurent EA3614 - Mohamed LEMDANI 

Mise au point d'une station d'acquisition et de gestion de connaissances. 

La médecine, à l'instar des la bio-informatique, devient un domaine où le recueil de données gènère une quantité de plus en plus importantes 

d'informations qu'il est nécessaire d'une part de stocker et d'autre part de manipuler. Dans le cadre du projet ISIS débuté en avril 2005, nous mettons 

au point un outil d'aide à la décision dans le domaine des soins intensifs. Ce projet est une collaboration entre notre laboratoire et le service de 

réanimation polyvalente du CHR de Fort de France. 

Cet outil, nommé Aiddiag, n'est pas qu'une simple station de recueil mais également un outil de gestion de base de connaissances et d'évaluation de la 

pratique médicale (permettant notamment une évaluation du coût total de la prise en charge). 

Les connaissances sont issues de l'expertise médicale et contribuent à l'amélioration de l'aide au diagnostic. L'élaboration d'une connaissance implique 

plusieurs étapes : la modélisation, la validation et l'exploitation. Pour la modélisation, nous utilisons le formalisme Think! développé, en interne, par 

notre équipe de recherche. Une fois modélisée, la connaissance est validée par son application sur des données précédement recueillies (offline) ainsi 

que sur des patients actuellement hospitalisés (phase de pré-exploitation). Si la connaissance se comporte correctement face aux données réelles, elle 

est alors incorporée à la station Aiddiag. Dans le cas contraire, elle est modifiée pour être à nouveau validée. L'utilisation de base de connaissances 

permet, par exemple, la mise au point d'alarmes plus évoluées que celles disponibles sur les appareils bio-médicaux actuellement utilisés par les 

équipes soignantes. 

Le station essaie, dans la mesure du possible, d'acquirir un maximun d'informations sans l'intervention du personnel soignant. Elle utilise les protocoles 

de communication propre à chaque appareil bio-médical. Cependant, cela n'est pas toujours possible. Aiddiag offre donc un ensemble d'interfaces 

graphiques destinées à la saisie des informations telles que les soins pratiqués sur le patient. L'ensemble de ces données va permettre d'effectuer un 

suivi de protocoles de soins dont les implications sont autant médicales que médico-économiques. 

Notre travail s'est actuellement axé sur la partie acquisition des informations : données issues des appareils bio-médicaux, développement des 

interfaces graphiques de visualisation des données et de saisie des informations non disponibles sur les appareils bio-médicaux. Nous travaillons 

maintenant sur l'élaboration des bases de connaissances qui vont, dans un proche avenir, faire évoluer la station vers un outil de surveillance du patient 

et d'aide à la décision. 

Enfin, le dernier objectif de notre travail, et plus généralement du projet ISIS, est de mettre à la disposition des communautés scientifique et médicale 

une base d'informations de données médicales documentées. 

Mot(s)-clé(s) : gestion de connaissances & recueil de données & suivi de protocole 

6 ème Journée André VERBERT sessions poster - 10h00 à 11h00 et 13h00 à 14h00

AMNIAI Latiffa U416 - Benoît WALLAERT 

INHIBITION D’UNE REACTION PULMONAIRE ALLERGIQUE ETABLIE PAR UN BCG PRODUISANT DE L’IL-18 

Ces dernières années ont vu l’augmentation de la prévalence des pathologies allergiques en même temps qu’une diminution des infections 

microbiennes dans les pays industrialisés. L’hypothèse de l’hygiène suggère que ces deux phénomènes sont liés : la stimulation microbienne au cours 

de la petite enfance permettrait le développement de mécanismes de régulation conduisant à un état de tolérance vis-à-vis d’antigènes inoffensifs de 

l’environnement. Dans ce contexte il a été montré que des mycobactéries comme le Bacille de Calmette et Guérin (BCG) et Mycobacterium vaccae 

étaient capables de moduler la réponse pulmonaire allergique dans des modèles murins. Afin d’augmenter les propriétés immunomodulatrices du BCG, 

nous avons construit un BCG recombinant produisant de l’IL-18 (BCG-IL-18). L’IL-18 est une cytokine dont le rôle dans la réaction allergique est 

complexe : activateur ou inhibiteur selon l’environnement en cytokines. 

Le but de notre travail a été d’évaluer l’effet curatif du BCG-IL-18 sur la réaction allergique pulmonaire dans un modèle murin. 

Les souris ont été sensibilisées à l’ovalbumine (OVA) par deux injections intrapéritonéales d’OVA et d’alum (jours (J) 0 et 10). Pour que la réaction 

allergique s’installe au niveau pulmonaire, ces souris ont ensuite été soumises à des aérosols d’OVA (J21 à 23). Pour évaluer l’effet du BCG-IL-18, 

celui-ci a été administré par voie intra-trachéale, en comparaison du BCG non recombinant (J24). L’effet du traitement a été analysé sur différents 

paramètres de la réaction allergique : l’hyperréactivité bronchique (HRB), l’inflammation pulmonaire dans le tissu et le lavage broncho-alvéolaire (LBA), 

la production de cytokines dans le LBA et les taux d’IgE sériques. 

Nous avons montré que les souris sensibilisées n’ayant reçu aucun traitement développaient une HRB qui était inhibée par le traitement par le BCG ou 

le BCG-IL-18 ; cependant, seule l’inhibition par le BCG-IL-18 était significative. Au niveau du LBA, la sensibilisation à l’OVA entraîne une augmentation 

du nombre d’éosinophiles et du taux d’IL-5. Comme pour l’HRB, cette inflammation était inhibée par le BCG et le BCG-IL-18. Du point de vue 

histologique, au niveau du poumon, les souris non sensibilisées et non traitées avaient une production de mucus augmentée et présentaient des 

infiltrats cellulaires. Le BCG et le BCG-IL-18 inhibaient la production de mucus mais on a observé une persistance de l’infiltrat bien que sa nature n’ait 

pas été déterminée. Enfin les taux sériques d’IgE totales, IgE, IgG1 et IgG2a spécifiques de l’OVA étaient augmentés par rapport aux souris non 

sensibilisées. Le traitement par le BCG ou le BCG-IL-18 ne modifiait pas ces taux. 

Cette étude montre que le BCG-IL-18 peut inhiber une réaction pulmonaire allergique établie et semble avoir un potentiel immuno-modulateur plus 

important que le BCG. Ce modèle d’inhibition pourrait se révéler intéressant pour étudier les mécanismes de régulation induits par un agent microbien. 

Plus particulièrement, nous analyserons les populations cellulaires impliquées dans cette régulation. 

Mot(s)-clé(s) : asthme & modèle murin & régulation 

ANDO Kunie U422 - Luc BUÉE 

Isovariants de la prolyl isomerase Pin1 dans les cerveaux de la madadie d’Alzheimer. Modification anormale 

dans les cerveaux de la maladie d’Alzheimer? 

Au cours de la maladie d’Alzheimer (MA), on retrouve une lésion caractéristique appelée Dégénérescence Neurofibrillaire (DNF). Celle-ci est 

caractérisée par la présence de protéines Tau hyper- et anormalement phosphorylées. Actuellement, les mécanismes qui conduisent à la DNF sont 

encore mal connus. Parmi les candidats qui pourraient jouer un rôle dans ces mécanismes, Pin1 semble être un candidat intéressant. En effet, des 

travaux récents sur un modèle de souris transgéniques invalidées pour le gène PIN1 ont montré qu’une absence de Pin1 était associée au 

développement d’une DNF. Pin1 est une peptidyl prolyl cis/trans isomérase qui régule ses cibles par isomérisation de sites phospho Thr / phospho Ser 

suivies d’une Proline. Pin1 elle-même est régulée par certaines modifications post-traductionnelles (oxydation ou phosphorylation). Des études récentes 

ont montré dans la MA que la fonction de Pin1 était diminuée par des modifications post-traductionnelles comme l’oxydation. 

Nous avons cherché à étudier la présence d’éventuelles variations des modifications post-traductionnelles de Pin1 qui seraient associées à la maladie 

d’Alzheimer. Et, en particulier voir s’il existait des modifications de phosphorylation de Pin1 dans la MA. 

Deux sites de phosphorylation, la Ser16 et la Ser 65 ont été décrits pour réguler sa fonction. Nous avons donc cherché à savoir si la Ser16 et Ser65 

sont ses seuls sites de phosphorylation ou si Pin1 est régulée par phosphorylation en plusieurs sites. Nous avons trouvé que la Ser16 et la Ser65 ne 

sont pas les deux seules sites de phosphorylation. Pin1 serait phosphorylée sur au moins 6 sites, comme le suggère nos analyses par electrophorèse 

bidimensionnelle. Dans des conditions pathologiques telles que la maladie d’Alzheimer, nous avons observé une augmentation de l’isoforme monophosphorylée 

au niveau d’extraits cérébraux de patients malades par rapport aux cas témoins. 

Nous avons également analysé les isovariants de Pin1 de souris transgéniques qui expriment la Tau humaine mutée en G272V et P301S sous le 

promoteur neurospécifique Thy1. Ce modèle surexprime Tau qui s’agrège dès l’âge de 6 mois. On observe que Pin1 est hypophosphorylée dans les 

cerveaux des souris transgéniques par rapport aux souris sauvages à l’âge de 10 mois. Comme dans les cerveaux de la MA, on a également observé 

une augmentation de l’isoforme mono-phosphorylée dans les extraits cérébraux de souris Tau transgéniques par rapport aux souris sauvages. 

Par ces travaux, nous mettons en évidence que la protéine Pin1 est régulée par phosphorylation en de nombreux sites. Or, si les modifications posttraductionnelles 

régulent la fonction de la protéine Pin1, une dérégulation de ces modifications serait associée à une perte de fonction de Pin1 et 

pourrait avoir un rôle dans le développement de la DNF. 

Mot(s)-clé(s) : Maladie d’Alzheimer & Pin1 & tau & phosphorylation 


ARAFAH Sonia EMI364 - Michael MARCEAU 

Induction de la résistance de Yersinia pseudotuberculosis aux peptides antimicrobiens par une carence en fer 

Les peptides anti-microbiens sont largement distribués dans le monde vivant et à ce jour, plusieurs centaines de représentants ont été identifiés. 

Agissant sur les procaryotes, certains mycètes, virus et protozoaires, ces composés sont produits chez les mammifères par les phagocytes et des 

cellules spécialisées des muqueuses, lieux d'entrée des microorganismes pathogènes. Ces molécules constituent donc un des premiers obstacles que 

doivent surmonter les agents infectieux pour coloniser un hôte. Ainsi, au cours de leur évolution, les microorganismes, en particulier ceux qui sont 

pathogènes pour le monde animal, ont développé des mécanismes défensifs à l'égard de ces effecteurs de l'immunité innée. 

Nous avons montré que lorsque Y.pseudotuberculosis - une bactérie pathogène pour le tractus digestif de l'homme et de nombreux animaux- est 

cultivée dans un milieu carencé en ions ferriques, sa survie en présence d'un peptide anti-bactérien, la polymyxine B, est significativement augmentée. 

A l'opposé, celle de Y. enterocolitica, une espèce phylogénétiquement proche, reste inchangée dans les mêmes conditions expérimentales. Nous avons 

donc émis l'hypothèse que des gènes, présents uniquement chez Y. pseudotuberculosis, conféreraient à la bactérie la capacité de résister à la 

polymyxine B. Afin de les caractériser, nous avons construit une banque contenant dix mille fragments génomiques (obtenus aléatoirement) de Y. 

pseudotuberculosis, puis recherché le(s)quel(s) d'entre eux permettai(en)t l'induction d'une résistance à la polymyxine B chez Y. enterocolitica privée de 

fer. Par cette approche de complémentation fonctionnelle, nous avons isolé un clone recombinant de Y. enterocolitica, dont la résistance à la 

polymyxine B est effectivement accrue lorsque les bactéries ont été cultivées dans un environnement appauvri en fer. L'analyse de la région génomique 

clonée a montré l'existence de plusieurs gènes, dont trois sont nécessaires à Y.enterocolitica pour développer une résistance induite par la carence 

martiale : or0242 et or0243 sont organisés en opéron et codent des protéines de fonction inconnue tandis que or4966 spécifie un régulateur 

transcriptionnel de la famille LysR. L'implication de ces gènes a été confirmée après mutagenèse chez Y. pseudotuberculosis. Aucun gène homologue 

à or4966 n'a été retrouvé chez Y. enterocolitica ni même chez les autres espèces bactériennes dont la séquence génomique est actuellement 

accessible : ce fait tend à confirmer l'originalité du phénotype étudié. Des études seront menées afin de modéliser le mode intime de résistance à la 

polymyxine B régi par le produit de ces gènes et d 'éprouver la contribution des mécanismes étudiés dans le pouvoir pathogène de Y. 

pseudotuberculosis. 

Mot(s)-clé(s) : Yersinia pseudotuberculosis & résistance aux peptides antimicrobiens 

BALLY Julia UMR 2847 CNRS/BAYER Cropsciences - Dominique JOB 

Etude du repliement des protéines dans le chloroplaste pour l’optimisation de la surexpression de protéines 

exogènes complexes. 

Les avancées récentes en ingénierie génétique ont permis l’expression dans les plantes de protéines exogènes à valeurs industrielles ou 

pharmaceutiques. Cette méthodologie autorise désormais un usage nouveau des plantes, pour la production de molécules à usage thérapeutique, se 

substituant ainsi à d’autres systèmes d’expression, aux synthèses chimiques ou à l’extraction de substances issues d’organes humain ou animaux. La 

production de protéines dans les plantes représente une alternative attractive par rapport à d’autres systèmes d’expression, notamment grâce à la 

transformation chloroplastique. Cette dernière technique permet la production de protéines en quantités importantes, et contourne aussi des problèmes 

tels que la pollinisation croisée avec l’environnement végétal non génétiquement modifié. 

Cependant, la plupart des protéines recombinantes nécessitent des modifications post-traductionnelles qui peuvent faire défaut dans les chloroplastes, 

système d’expression de type bactérien, comme la glycosylation ou potentiellement la formation de ponts disulfures. Ces mécanismes sont très bien 

décrits pour les levures, les bactéries et les cellules animales, mais les connaissances relatives au repliement des protéines dans les cellules végétales 

sont assez pauvres et spécialement en ce qui concerne les chloroplastes. 

La transformation du génome chloroplastique a été achevée seulement pour un petit nombre d’espèces, ainsi, il y a actuellement dans la littérature peu 

d’exemples de protéines contenant des ponts disulfures qui aient été exprimées avec succès dans les chloroplastes. Toutefois, même pour ces 

exemples, il n’est toujours pas démontré si les ponts disulfures sont correctement formés, et si ces ponts se sont formés in planta ou spontanément 

durant l’extraction. Aussi, le réel potentiel du chloroplaste pour l’expression et l’accumulation des protéines contenants des ponts disulfures mérite d’être 

clarifié. 

Pour étudier le mécanisme de conformation des protéines exogènes au sein du chloroplaste, nous avons choisi d’exprimer dans cet organite 

la phosphatase alcaline bactérienne (PhoA), une protéine contenant des ponts disulfures nécessaires pour sa stabilité et son activité et originellement 

exprimée chez les bactéries dans le périplasme. Pour obtenir une expression élevée de l’enzyme cible, son gène a été introduit directement dans le 

génome chloroplastique de plantes de tabacs. Nous montrerons à travers cette étude que la phosphatase alcaline peut-être correctement formée et 

active dans le chloroplaste. Les travaux effectués seront discutés en regard avec ceux obtenus lors de l’expression de la protéine dans les systèmes 

bactériens. 

De telles études pourraient clarifier les mécanismes de repliement de protéines recombinantes exprimées dans les chloroplastes utilisés comme outils 

de production, ce qui pourrait être un intérêt majeur pour les applications du « molecular farming ». 

Mot(s)-clé(s) : transformation chloroplastique & repliement des protéines 


BIGGIO Valeria U524 - Claude PREUDHOMME 

La quantification de l’expression de certains gènes comme facteur de pronostic dans la LAM à caryotype normal 

de l’adulte 

Les patients LAM à caryotype normal représentent un groupe hétérogène, considéré comme à risque intermédiaire. Des anomalies génétiques comme 

les mutations de certains gènes (CEBPa, FLT3/ITD, MLL/PTD) ou la différenciation d’expression d’autres gènes (EVI1, BAALC) nous permet de mieux 

préciser le pronostic de ce type de leucémie. Dans une étude rétrospective incluant 120 patients LAM à caryotype normal, on a évalué la contribution 

globale au pronostic de l’expression de 7 gènes, tous individuellement déjà rapportés associés à la survie des patients : BAALC, EVI1, FLT3, HOXA9, 

TGIF1 et TRIM16. La quantification de l’expression de ces gènes a été réalisée par real-time PCR, (TBP étant le gène de référence). 

FLT3/ITD a été retrouvé chez 38/120 patients (32%), Les mutations de CEBPa chez 20/120 patients (17%) et MLL/PTD chez 3/120 patients (3%). La 

récente mutation de NPM a été mise en évidence chez 47% des patients examinés (50/106). Un premier cluster hiérarchique non supervisé a mise en 

évidence 4 subgroupes de patients : 1) un groupe (n=13) avec une faible expression de HOXA9, composé en majorité de patients muté CEBPa (66%) 

avec un pronostic favorable; 2) un second groupe (n=18) avec une forte expression de EVI1, un faible pourcentage de mutation récurrent et un 

pronostic défavorable ; 3-4) deux groupes (n=29 et 60) avec une haute fréquence de mutations NPM (70 et 56%) et un pronostic intermédiaire. La 

survie globale est significativement différente dans les 4 groupes (p=.03). Dans un deuxième approche, on a considéré l’apport pronostic individuelle 

de chaque gène comme aient le même pois. L’analyse du meilleur cut-off pour chaque gène, par rapport à l’OS et l’EFS, nous a permis de construire 

un index de risque moléculaire (MRI). Les trois class qui composent cet index (risque favorable n=31 ; risque intermédiaire, n=58 ; haute risque n=31) 

sont fortement prédictives sur la RC (100%, 86%, et 77% ; p=.02), l’OS (6y-OS : 70%, 40%, 14% ; p

BOISSE Thomas EA2692 - Benoît RIGO 

Synthèse de nouveaux analogues de luotonine A, potentiels inhibiteurs de topoisomérase I 

Le nombre croissant de cancers diagnostiqués ainsi que le manque de sélectivité des agents anticancéreux utilisés actuellement nécessitent la 

recherche de nouvelles molécules plus actives et plus sélectives. 

Isolée à la fin des années 1960, la camptothécine possède une activité antitumorale puissante.(1) Depuis, de nombreux analogues structuraux ont été 

synthétisés afin d’augmenter sa solubilité et de diminuer sa toxicité. En particulier, deux composés sont actuellement utilisés en clinique dans le 

traitement du cancer de l’ovaire, du colon ou du poumon (Irinotécan, Topotécan). 

Découvert dans les années 1980, le mécanisme d’action des camptothécines s’appuie sur l’inhibition de la topoisomérase de type I en se liant avec le 

complexe binaire ADN-enzyme.(2) Toute modification du cycle E de la molécule a longtemps conduit à des composés inactifs, rendant cette partie de la 

molécuule intouchable. Cependant, l’efficacité des homocamptothécines, où le cycle lactone est à sept chaînons, a fait tomber ce dogme. Récemment, 

il a été décrit que la luotonine A, qui présente un atome d’azote en position 14 et un cycle benzénique comme cycle E, inhibe la topoisomérase I.(3) 

Bien que dix fois moins active que la camptothécine, cette structure représente un nouveau lead pour le design de nouveaux inhibiteurs de l’enzyme. 

Plusieurs études se sont intéressées à établir des relations structure-activité en substituant les postions aromatiques de la molécule.(4) Cependant, 

presque aucune substitution de la position 5 n’a été décrite. L’objectif de ce travail est donc la synthèse de dérivés de la luotonine substitués en 5, 

notamment par des fonctions esters et amides. 

La voie de synthèse de ces molécules a été mise au point à partir de l’acide pyroglutamique en utilisant une condensation de Friedländer comme étape 

finale. Nous avons ensuite validé cette synthèse par des produits également substitués sur les cycles A, B et E. Nous présenterons les différentes 

étapes de cette synthèse ainsi que les composés obtenus. 

1. Wall, M. E., et al., J. Am. Chem. Soc. 1966, 88, 3888-3890. 

2. Hertzberg, R. P., et al., Biochemistry 1989, 28, 4629-4638. 

3. Cagir, A., et al., J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 13628-13629. 

4. Ma, Z.-Z., et al., Heterocycles 2005, 65, 2203-2219. 

Mot(s)-clé(s) : Anticancéreux & Topoisomérase & Camptothécine & Luotonine 

BOUHLEL Mohamed Amine U545 - Giulia CHINETTI 

La régulation de l’enzyme 11b-HSD1 par les récepteurs nucléaires PPARs et son rôle dans la réponse 

inflammatoire. 

L’athérosclérose est une pathologie inflammatoire chronique à l’origine de la plupart des maladies cardiovasculaires. Elle correspond à une réaction 

inflammatoire de la paroi artérielle initiée par l’activation des cellules endothéliales responsables du recrutement massif de monocytes circulant. Ces 

monocytes se différencient en macrophages qui se chargent en lipides, se transforment en cellules spumeuses et s’accumulent dans la paroi artérielle 

en formant des stries lipidiques. Ces lésions artérielles peuvent être aggravées par des facteurs de risque parmi lesquels les dyslipidémies et le diabète. 

Des molécules, telles que les glitazones, sont utilisées dans le traitement du diabète de type 2. Les glitazones sont des agonistes du récepteur 

nucléaire PPARg (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor). La famille des récepteurs nucléaires PPAR comporte trois membres : PPARa, PPARb/d 

et PPARg. Les agonistes de PPARg jouent un rôle anti-inflammatoire local, notamment au niveau des macrophages dérivés des monocytes en inhibant 

la production de molécules pro-inflammatoires telles que IL-6, TNF-a, IL-1... 

Grâce à une analyse du génome entier par la technique de DNA Array Affymetrix, notre laboratoire a identifié un nouveau gène régulé positivement par 

des agonistes synthétiques de PPARg au niveau des macrophages primaires humains différenciés, la 11b-HydroxyStéroïde Déshydrogénase1 (11b- 

HSD1). Ce gène code l’enzyme responsable de la conversion de la cortisone cellulaire en cortisol. Le cortisol cellulaire active les récepteurs nucléaires 

aux glucocorticoïdes qui figurent parmi les principaux médiateurs de la réponse anti-inflammatoire. La régulation de cette enzyme exprimée par les 

macrophages pourraient alors contribuer à l’atténuation de la réponse inflammatoire locale et diminuer la progression des lésions d’athérosclérose. 

Nos travaux montrent que les agonistes synthétiques de PPARg activent l’expression génique et protéique de la 11b-HSD1 au niveau des 

macrophages différenciés à partir de monocytes primaires humains. Cependant, l’effet des agonistes de PPARg sur l’activité enzymatique de la 11b- 

HSD1 ne s’est pas révélé significatif. Les monocytes primaires humains exprimant également l’enzyme 11b-HSD1, nous avons ainsi décidé d’étudier la 

régulation de la 11b-HSD1 par les récepteurs nucléaires au niveau des monocytes non différenciés. Les agonistes de PPARg ainsi que les agonistes de 

PPARa, PPARd et LXR (Liver X Receptor, un autre récepteur nucléaire activé par les oxystérols et ayant des propriétés anti-inflammatoires) se sont 

alors révélés des inhibiteurs efficaces de l’expression de l’ARN de la 11b-HSD1 ainsi que de son activité enzymatique au niveau des monocytes. Cette 

régulation devrait naturellement se traduire par une atténuation de la réponse anti-inflammatoire. Cependant, une étude récente réalisée sur des 

monocytes humains montre que dans certaines conditions les corticostéroïdes sont également dotés d’un effet pro-inflammatoire. Ainsi, l’inhibition de la 

11b-HSD1 pourrait se traduire par des réponses anti-inflammatoires. 

Les données bibliographiques montrent que les corticostéroïdes perturbent la différenciation des monocytes en cellules dendritiques myéloïdes. Ces 

cellules dendritiques sont essentiellement impliquées dans la réponse inflammatoire immune puisqu’elles constituent les principales cellules 

présentatrices d’antigènes. 

L’intérêt de cette étude réside dans l’identification d’un nouvelle voie de modulation de la réponse inflammatoire au niveau des cellules sanguine à 

travers la régulation de l’enzymes 11b-HSD1 par les récepteurs nucléaires. Enfin, les agonistes des PPARs auraient un champ d’action très large 

puisqu’ils pourraient être utilisés aussi bien dans les traitements de l’athérosclérose que dans certaines pathologies associées à des désordres 

immunitaires. 

Mot(s)-clé(s) : Inflammation - Récepteurs Nucléaires - Monocytes - Cellules dendritiques 


BRUANDET Amelie U508 - Philippe AMOUYEL 

Histoire naturelle des démences vasculaires : comparaison avec la maladie d’Alzheimer et les démences mixtes. 

Objectifs: La démence vasculaire (VaD) est la deuxième cause de démence après la maladie d’Alzheimer (AD) mais son histoire naturelle est mal 

connue. L’objectif de cette étude était de comparer les caractéristiques démographiques, le déclin du MMSE et la survie chez des patients ayant une 

VaD, une AD ou une démence mixte (MD). 

Méthodes : 1290 patients consécutifs ayant consulté à la clinique de la mémoire de Lille – Bailleul entre 1995 et 2001, et examinés au moins 2 fois, ont 

été inclus. Le statut cognitif a été mesuré avec le MMSE. Les changements du MMSE au cours du temps ont été analysés avec un modèle mixte à effet 

aléatoire. La survie a été étudiée avec un modèle de Cox. Les analyses ont été ajustées sur l’age, le sexe, l’éducation, le traitement par inhibiteur de 

l’acétylcholinesterase et le MMSE à l’inclusion. Résultats : La série était constituée de 1290 patients dont 141 VaD, 1004 AD et 145 MD. L’âge de début 

de la maladie et l’âge au diagnostic différaient de manière significative selon la démence (respectivement p=0,05 et p=0,006) : ils étaient plus jeunes 

pour les VaD (69 ±8 et 73 ±8 ans), intermédiaires pour les AD (70±8 et 74 ±8 ans) et plus âgés pour les MD (71±7 et 75±6 ans). A la première visite, la 

durée de la maladie (3,3±2,8 ans) ne différait pas selon la démence. Le MMSE à l’inclusion était plus élevé dans le groupe VaD (23±5, p=0,0004). Le 

déclin du MMSE au cours des 4 années de suivi était plus lent chez les patients VaD comparés aux patients AD ou MD (p=0,003). Le risque de décès 

était similaire quelque soit la démence. Conclusion: Au sein de notre série, les patients ayant une VaD, AD ou MD présentent des caractéristiques 

cliniques à l’inclusion et des évolutions différentes. 

Mot(s)-clé(s) : demence vasculaire & declin cognitif & mortalite & maladie d'Alzheimer 

BUYCK Julien EA 2689 - Régis MATRAN 

Effets de l’Exotoxine A et du LPS de Pseudomonas aeruginosa sur le calcium intracellulaire et la sécrétion de 

chlore des cellules épithéliale bronchique. 

Pseudomonas aeruginosa (PA) est un pathogène fréquemment retrouvé dans les pathologies pulmonaires qu’elles soient chroniques (mucoviscidose, 

CF) ou aiguës (sepsis). Il est souvent lié à l’aggravation de la pathologie pulmonaire. Ce bacille Gram– possède de nombreux mécanismes de virulence 

et plusieurs études ont montrés que PA est capable d’induire des lésions au niveau de l’épithélium respiratoire mais aussi des modifications au niveau 

des voies de signalisation cellulaire, au niveau génomique et au niveau des transports ioniques (Kunzelmann et al, 2004). Les lipopolysaccharides 

(LPS) qui sont connus pour avoir des effets pro-inflammatoires sont présent sur la membrane de PA et peuvent diminuer l’absorption de sodium 

(Tamaoki, 1991) et l’exotoxine A, un facteur de virulence secrété, a aussi des effets sur l’absorption de fluide au niveau des bronches de rats (Pittet JF, 

1996). En utilisant des techniques d’imagerie de fluorescence calcique nous avons montré que le LPS (10 a 50µg/ml) stimule une augmentation 

maintenue du calcium intracellulaire de façon dose dépendante sur des cellules épithéliales des bronches humaines (16HBE14o-). Des 

expérimentations en milieu externe dépourvu de calcium indiquent que l’augmentation de calcium induite par le LPS est provoquée par une entrée 

massive du calcium externe. Le calcium ayant un rôle majeur dans la régulation des transports ioniques épithéliaux, nous avons étudié le rôle du LPS 

sur la sécrétion de chlore en utilisant la technique de chambres de Ussing en courant de court circuit (Isc). Lorsqu’on crée un gradient de chlore du coté 

basolatéral vers le coté apical, l’Isc basal moyen est de 37,24 +/- 2,67 µA/cm² (N=24). Nous avons montré que le LPS (50µg/ml) du coté apical était 

capable d’induire une augmentation transitoire de l’Isc de 7,59 +/- 1.97 µA/cm² (N=10). Cet effet du LPS n’est pas modifié par l’amiloride (Inhibiteur 

ENaC) ni par le NPPB, par contre le DPC et le Glybenclamide, 2 inhibiteurs des canaux chlore CFTR, abolissent totalement la réponse au LPS. 

Ces résultats montrent que l’effet du LPS sur le courant de court circuit serait dû à une activation du canal chlore CFTR. L’ExoA induit une 

augmentation transitoire de l’Isc, mais les effets des différents inhibiteurs n’ont pas encore été étudiés. 

Mot(s)-clé(s) : epithelium & pseudomonas aeruginosa 

CERTAD Gabriela EA3609 - Thérèse DURIEZ 

Epidémiologie moléculaire de la cryptosporidiose humaine et animale au Venezuela: caractérisation moléculaire 

et phénotypique des espèces et variétés infra-spécifiques du genre Cryptosporidium 

Introduction: Le genre Cryptosporidium comprend des espèces qui infectent l’intestin d’un grand nombre de vertébrés, y compris l'homme. Ils sont la 

cause de la cryptosporidiose, maladie opportuniste émergente avec un impact considérable chez les patients immunodéprimés, notamment sidéens. 

Ces protistes infectent aussi des sujets immunocompétents dans toutes les latitudes, et peuvent provoquer des diarrhées en général autorésolutives. 

De plus, la morphologie étant insuffisante à la distinction des espèces de ce genre, leur identification, qui fait appel à des méthodes moléculaires, est 

rarement pratiquée. Cependant, elle constitue le seul moyen de déterminer les sources, les voies et les mécanismes de l'infection, informations 

essentielles au développement de stratégies rationnelles de prévention. Les buts de cette étude sont de déterminer le génotype ainsi que les 

caractéristiques phénotypiques des populations parasitaires de Cryptosporidium sp. au Venezuela. Rien à propos de ces facteurs n’est connu au 

Venezuela où la prévalence de l'infection symptomatique ou asymptomatique par Cryptosporidium dans les écoles primaires peut dépasser 50% 

d'après des données récentes. Matériel et méthodes: Pour l’étude génotypique des prélèvements fécaux d’origine humaine diagnostiqués positifs pour 

Cryptosporidium par microscopie, une PCR-RFLP ciblant l’ADNr 18S a permis la caractérisation au niveau de l’espèce de l’isolat parasitaire, puis un 

génotypage à des loci mini- et microsatellites, plus polymorphes, a autorisé une résolution à un niveau infra-spécifique. L’évaluation phénotypique des 

isolats se fait d’une part in vivo, avec l’utilisation de modèles murins (inoculation de différentes espèces Cryptosporidium à des souris SCID), et d’autre 

part in vitro, avec des cellules épithéliales intestinales humaines (co-culture de différentes espèces de Cryptosporidium dans un système de cellules 

HCT-8). Résultats: Trois espèces de Cryptosporidium ont été identifiées parmi les échantillons fécaux de 10 patients vénézuéliens VIH+: 8 C. hominis, 

1 C. parvum, 1 C. canis. L’analyse avec les marqueurs mini- et microsatellites a révélé que les échantillons de C. hominis présentaient la même 

combinaison d’allèles. Ces résultats s’étoffent au fur et à mesure de l’arrivée de nouveaux échantillons du Venezuela. Les résultats des études 

phénotypiques sont actuellement en cours et seront développés le jour de la communication. 

Mot(s)-clé(s) : Cryptosporidium & caractérisation moléculaire et phénotypique & Venezuela 


COQUART Jeremy EA3608 - Murielle GARCIN 

Influence de la durée ou de la distance attendue sur l’échelle de perception de l’effort et d’estimation du temps 

limite 

INTRODUCTION :: De nos jours, la perception de l’effort est utilisée dans des domaines aussi variés que la réhabilitation, l’entraînement ou l’éducation 

physique. L’échelle de cotations de la perception de l’effort (RPE), construite par Borg (1970), est l’outil le plus fréquemment utilisé pour évaluer la 

pénibilité de l’effort. Cependant, pour avoir des renseignements complémentaires sur le temps de maintien estimé de l’exercice, Garcin et Billat (2001) 

recommandent d’associer à l’échelle RPE une seconde échelle basée sur l’estimation subjective du temps limite (ETL, Garcin et al., 1999). Les valeurs 

de perception de l’effort, mesurées à l’aide de ces échelles, proviennent de l’interprétation de la combinaison de multiples facteurs d’ordres 

physiologiques, cognitifs, psychologiques ou sociologiques. Plusieurs études ont déjà étudié l’influence de ces facteurs sur les valeurs de RPE. Par 

exemple, il a été montré que la durée d’exercice attendue influençait les valeurs de RPE (Rejeski et Ribisl, 1980 ; Baden et al., 2004 ; Baden et al., 

2005). Cependant, aucune étude n’a analysé l’influence de la durée ou distance attendue sur le temps limite estimé (ETL). En conséquence, l’objectif 

de cette étude est d’examiner l’influence de la durée ou distance de course attendues sur les valeurs de RPE et d’ETL lors de test de terrain. 

SUJETS : 39 hommes (âge = 24,4 ± 3,8 ans ; masse = 73,9 ± 9,1 kg ; taille = 180 ± 6,2 cm) qui courraient régulièrement ont été recrutés. 

MATERIEL : Les perceptions de l’effort étaient relevées grâce à l’échelle RPE (Borg, 1970) et l’échelle ETL (Garcin et al., 1999). La fréquence 

cardiaque (FC) était enregistrée à l’aide d’un cardio-fréquence-mètres (Accurex +, Polar®). 

METHODES : Chaque sujet a réalisé un test progressif et exhaustif afin de mesurer sa vitesse maximale aérobie (VMA). Ensuite, un test exhaustif à 

vitesse constante (90% VMA) a été réalisé pour déterminer le temps limite (Tlim) et la distance limite (Dlim) à cette intensité. A la suite de ces tests, 3 

groupes homogènes ont été formés. Ensuite tous les sujets ont réalisé 2 tests avec une intensité (90% VMA) et un volume (80% Tlim ou Dlim) relatifs 

similaires. Cependant, le volume de ces tests était exprimé soit en terme de durée soit en terme de distance. De plus, les groupes avaient des 

consignes différentes. En effet, le groupe 1 (G1) pensait maintenir la vitesse imposée durant 60% Tlim (ou Dlim), tandis que le groupe 2 (G2) et le 

groupe 3 (G3) s’attendaient à maintenir leur effort pendant 80 et 100% Tlim (ou Dlim), respectivement. Durant chaque test, les valeurs de RPE, ETL et 

FC étaient relevées. Tous les tests ont été réalisés dans les mêmes conditions. 

ANALYSE STATISTIQUE : Les valeurs de RPE, ETL et FC étaient comparées à l’aide d’une analyse de la variance à 3 facteurs (Temps × Groupes × 

Tests). De plus, lorsque des différences étaient obtenues, un test post-hoc de Bonferroni était réalisé. 

RESULTATS : Les résultats ont révélé : 1) un effet du temps sur les valeurs de RPE, ETL et FC (p < 0,01) ; 2) aucune différence significative entre les 

groupes pour RPE et ETL (p > 0,05) mais un effet significatif entre G1-G2 pour la FC (p < 0,02) ; 3) aucun effet du type de test (80% Tlim ou Dlim) (p > 

0,05). 

DISCUSSION : Notre étude a montré que : 1) les valeurs de RPE, d’ETL et de FC augmentaient avec la durée d’exercice ; 2) une tendance (non 

significative) suggérant que les sujets (G1) qui s’attendaient à une plus faible durée (ou distance) d’exercice cotent des valeurs de RPE et d’ETL plus 

élevées que les autres sujets (G2 et G3) (i.e., les sujets percevaient l’exercice comme étant plus dur et pensaient être moins endurants) ; 3) un effet de 

la consigne sur les valeurs de FC ; 4) les valeurs de perception ne semblent pas être influencées par le type de test (volume exprimé en terme de durée 

ou distance). 

Mot(s)-clé(s) : durée et distance attendue & cotations de perception de l’effort (RPE) & cotations du temps limite estimé (ETL) & 

téléoanticipation 

CORDONNIER Charlotte EA2691 - Hilde HENON 

Pronostic des hémorragies cérébrales parenchymateuses non malformatives (PITCH) 

Contexte : Les accidents vasculaires cérébraux (AVC) occupent une place importante en matière de santé publique. Les AVC sont fréquents: dans une 

population occidentale d'un million d'habitants, 2400 nouveaux AVC surviennent chaque année. Ils sont graves: les AVC représentent la 1ère cause de 

handicap physique chez l’adulte, la 2ème cause de démence et la 3ème cause de mortalité chez les adultes des pays industrialisés. Les accidents 

ischémiques représentent environ 80% des AVC et les hémorragies cérébrales 20%. 

Une meilleure connaissance de la physiopathologie et l’avènement de nouveaux traitements pour la phase aiguë ont changé la prise en charge des 

AVC. L’AVC est aujourd’hui reconnu comme une urgence. La prise en charge des AVC dans des unités spécialisées (unités neurovasculaires) a prouvé 

son efficacité et le traitement thrombolytique offre une option thérapeutique supplémentaire pour les infarctus cérébraux. Jusqu’à présent, la recherche 

sur les AVC a principalement concerné les infarctus cérébraux et les hémorragies malformatives. Peu de données sont disponibles concernant les 

hémorragies non malformatives. Alors que le pronostic vital et fonctionnel des infarctus cérébraux s’améliore, le pronostic des hémorragies cérébrales 

reste grevé d’une lourde mortalité (40 à 50%) et morbidité. L’identification précise des étiologies des hémorragies cérébrales primitives, l’identification 

des facteurs de risque, dont certains pourraient être modifiables, et la définition de nouvelles stratégies thérapeutiques sont indispensables. Les 

résultats récents de STICH, suggérant que la prise en charge des HIC est essentiellement médicale et le développement de nouveaux agents 

hémostatiques, potentiellement efficaces mais non dénués d’effets indésirables et extrêmement coûteux, justifient une meilleure connaissance des 

données pronostics des HIC. 

Objectifs : Au sein d’une population de patients ayant eu une HIC non malformative, déterminer l'histoire naturelle des HIC non malformatives (mortalité, 

récidive, pronostic cognitif et épilepsie). Les objectifs secondaires sont de déterminer: les facteurs pronostics en phase aiguë avec un suivi à moyen et 

long terme, les mécanismes d’aggravation de l’hémorragie et la chronologie, la prévalence des microhémorragies et leur influence sur le pronostic et le 

risque de récidive hémorragique. 

Méthodes : Inclusions consécutives de tous les patients de plus de 18 ans admis au CHRU de Lille pour une HIC non malformative, le diagnostic 

d’hémorragie cérébrale étant posé sur l’imagerie cérébrale réalisée à l’admission. Sont exclus les patients porteurs d’hémorragie liée à une 

malformation vasculaire ou à une tumeur. Sont également exclus les patients transférés au CHRU en deuxième intention afin d’éviter les biais de 

sélection. L’étude est purement observationnelle. Les patients sont ensuite suivis en consultation pendant 3 ans, comme le sont habituellement les 

patients ayant eu une HIC. 

Résultats attendus : Entre Novembre 2004 et Mai 2006, 235 patients ont été admis au CHU de Lille en 1ère intention pour une hémorragie cérébrale 

d’allure non malformative. Les inclusions se poursuivent avec un objectif d’une cohorte de 400 patients. L’ensemble des données recueillies devrait 

permettre de préciser l’étiologie des HIC non malformatives, d’en préciser les facteurs de risque et le pronostic, aidant ainsi à définir de nouvelles 

stratégies de prise en charge multidisciplinaire. Des données relatives au risque de démence, d’épilepsie seront également disponibles. 

Mot(s)-clé(s) : accident vasculaire cérébral & hémorragie cérébrale & démence & pronostic 


DELANGLE Aurelie UMR-CNRS 8576 - Jean-Marie LACROIX 

Analyse protéomique d’un mutant non virulent d’Erwinia chrysanthemi, une bactérie phytopathogène : l’absence 

de glucanes périplasmiques osmorégulés induit des réarrangements de l’enveloppe et la réponse générale au 

stress. 

Les glucanes périplasmiques osmorégulés (OPG) sont des constituants généraux de l’enveloppe des bactéries à Gram négatif. L’absence d’OPG chez 

de nombreuses bactéries pathogènes pour les plantes et/ou les animaux aboutit à une forte réduction ou une perte totale de leur virulence. Erwinia 

chrysanthemi est une bactérie phytopathogène provoquant la pourriture molle chez un large spectre d’espèces végétales. En plus de l’absence totale 

de virulence, les mutants dépourvus d’OPG chez E. chrysanthemi présentent un phénotype pléiotrope incluant une diminution de la motilité et une 

surproduction des exopolysaccharides traduisant une forte perturbation de l’enveloppe. Une analyse protéomique comparative en électrophorèse 

bidimensionnelle des protéines solubles a été entreprise entre la souche sauvage et un mutant opgG. Des protéines dont l’expression est modifiée chez 

le mutant ont été identifiées par spectrométrie de masse. En absence d’OPG, la biosynthèse des constituants de l’enveloppe est modifiée, les protéines 

du métabolisme énergétique et celles nécessaires à la conformation et la dégradation des protéines sont surexprimées. Ces nouveaux phénotypes 

indiquent que l’absence d’OPG induit la réponse générale au stress. 

Mot(s)-clé(s) : bactérie phytopathogène & glucanes périplasmiques osmorégulés & enveloppe & réponse au stress 

DESAILLOUD Rachel EA3610 - Alain DUBREUIL 

Infection persistante à coxsackievirus B4E2 dans une lignée de thyrocytes 

Le rôle des entérovirus et notamment celui des coxsackievirus B4, virus nus à ARN positif, dans la pathogenèse du diabète de type 1 est suspecté. Il 

est fréquent d’observer chez les patients diabétiques de type 1 une thyroïdite lymphocytaire chronique. Dans ce contexte, nous avons émis l’hypothèse 

du rôle des virus dans la survenue de l’auto-immunité thyroïdienne associée au diabète de type 1 

Objectifs : etudier in vitro l’infection de thyrocytes par coxsackievirus B4E2 (souche diabétogène) et évaluer les conséquences de l’infection sur la 

viabilité et la fonctionnalité des cellules. 

Méthodes : la culture des thyrocytes de la lignée de carcinome papillaire K1 est réalisée en plaques de 24 puits à raison de 5.105 cellules par puits. A 

24 h, les thyrocytes sont infectés avec la souche CVB4E2. Les virus sont laissés en contact 3 jours au-delà desquels le milieu est régulièrement 

renouvelé. L’infection des cellules est étudiée par la recherche d’ARN viral positif (+) et négatif (-) (intermédiaire de réplication) à l’aide de la RT-PCR et 

par la recherche de la protéine de capside VP1 par immunofluorescence indirecte. La viabilité des cultures est évaluée à l’aide d’une méthode reposant 

sur l’incorporation de MTT. Des cellules K1 non infectées servent de contrôle. 

Résultats : Il n’y a pas d’effet cytopathogène spécifique visible au microscope optique dans les cultures de cellules K1 infectées cependant l’aspect des 

tapis cellulaire est différent par rapport aux contrôles. La détection d'ARN + et d'ARN – est positive avec une prédominance d’ARN- détecté pendant 

toute la durée de la culture jusque J21 post-infection. Le nombre de cellules VP1+ diminue rapidement de J1 à J6 (280 cellules par puits à 110 cellules 

à J3 11 cellules à J6 dans une expérience représentative. Les viabilités à J3 J6 J14 J21 des cultures de cellules contrôles et de cellules infectées sont 

comparables 

Conclusion : Le virus se multiplie dans notre modèle de thyrocytes (lignée K1) dans les premiers jours de culture (ARN+/ARN- et VP1) puis persiste 

dans les cellules pendant toute la durée de l’étude (21 jours) sous forme ARN. Le virus n’altère pas la viabilité de la culture. Dans ce modèle de 

thyrocytes infectés par CVB4E2, des travaux sont en cours pour déterminer les conséquences de l’infection virale persistante sur la fonction des 

cellules. Nous montrons pour la première fois que l’infection à CVB4 de thyrocytes est possible. Il est important d’approfondir l’étude de l’infection et de 

ses effets dans les cellules thyroïdiennes car ils pourraient jouer un rôle dans les pathologies autoimmunes. 

Mot(s)-clé(s) : enterovirus & thyrocytes K1 

DESSEIN Rodrigue EMI364 - Michel SIMONET 

L’immunité de la muqueuse intestinale face à l’agression par Yersinia pseudotuberculosis 

Les cryptidines sont des peptides anti-microbiens produits par la muqueuse de l’intestin grêle de la souris. Ces effecteurs solubles de l’immunité innée, 

apparentés aux défensines humaines, regroupent à ce jour six représentants qui sont tous synthétisés par les cellules de Paneth des glandes de 

Lieberkühn et stockés dans leurs granules zymogènes. Formées d’une trentaine d’acides aminés, les cryptidines comportent six résidus cystéyl et 

adoptent une structure en feuillet plissé b. Pour une concentration d’environ 1 mg/ml, ces courts peptides lysent les bactéries en perméabilisant, tel un 

détergent, leur membrane avec éventuellement formation de pores. Près de 400 pg de cryptidines peuvent être produits par une crypte ce qui, rapporté 

à la taille et au volume de celle-ci, correspond à une concentration approximative de 100 mg/ml de peptides! La biogenèse des cryptidines implique une 

protéase la matrilysine MMP-7, qui est requise pour l’activation des précurseurs des cryptidines. La régulation génique de ces défensines reste à l’heure 

actuelle inconnue. 

Yersinia pseudotuberculosis est bactérie entéropathogène pour l’homme et l’animal, dont la virulence s’exerce à l’égard de l’hôte via des protéines 

dénommées Yop (Yersinia outer proteins). Elles interfèrent avec différentes voies de signalisation cellulaire, bloquant notamment l’activation de NF-kB 

et, par conséquent, la production de cytokines pro-inflammatoires par les macrophages ainsi que les cellules épithéliales et endothéliales. Nous avons 

étudié chez la souris C57Bl6/J infectée per os par Ypst l’expression dans la muqueuse de l’iléon terminal de gènes codant deux défensines alpha, la 

cryptidine-1 et -4, et celle de la matrilysine. Les taux tissulaires d’ARNm spécifiques ont été mesurés par PCR en temps réel (chimie SYBR GREEN). 

Après 24 heures d’infection, la quantité de transcrits est significativement diminuée. Cette interaction favoriserait ainsi l’implantation bactérienne dans la 

muqueuse iléale. Les perspectives à court terme sont d’établir la dépendance éventuelle du plasmide de virulence dans le phénomène obtenu et de voir 

si des résultats semblables sont observés lorsque le gène myd88 qui code l’un des facteurs de la voie de signalisation cellulaire initiée par les 

récepteurs homologues de Toll, a été inactivé chez la souris. 

Mot(s)-clé(s) : Défensine & Yersinia pseudotuberculosis 


DILLY Sebastien EA1043 - Philippe CHAVATTE 

MODELISATION DU RECEPTEUR SEROTONINERGIQUE 5HT2C PAR HOMOLOGIE COMPARATIVE 

La sérotonine ou 5-hydroxytryptamine (5-HT) exerce sa fonction d’hormone et de neuromédiateur en se liant à une quinzaine de récepteurs distincts 

regroupés en 7 familles (5-HT1 à 5-HT7). Elle est présente dans la muqueuse intestinale, dans les plaquettes sanguines et au niveau du système 

nerveux central où elle est plus particulièrement impliquée dans la régulation du sommeil, de l’appétit et de l’humeur. 

Ses propriétés ont été mises à profit dans le traitement de nombreuses pathologies, telles que la migraine, l’allergie ou l’hyperacidité gastrique. Elle 

présente également de très intéressantes potentialités thérapeutiques dans les pathologies du système nerveux central, comme l’anxiété ou la 

dépression. 

L’agomélatine est le chef de file d’une nouvelle classe thérapeutique d’antidépresseurs qui possède des propriétés pharmacologiques originales 

agoniste mélatoninergique et antagoniste sélectif 5HT2C (concept MASSA : Melatonin Agonist and Selective Serotonin Antagonist). Afin d’étudier les 

interactions de l’agomélatine avec le récepteur 5HT2C, nous avons entrepris sa construction par homologie comparative en nous basant sur la structure 

tridimensionnelle de la rhodopsine bovine qui est le seul récepteur couplé à une protéine G dont la structure ait été déterminée expérimentalement par 

diffraction des rayons X. 

NB: Mes travaux de thése étant confidentiels pour des raisons de protection industrielle, ce poster concerne des travaux annexes également réalisés au 

cours de cette thèse. 

Mot(s)-clé(s) : récepteur 5HT2c & RCPGs & homologie comparative & agomelatine 

DINON Jean-Francois UMR8160 - Muriel BOUCART 

Perception des expressions faciales chez les patients atteints de Dégénérescence Maculaire Liée à l’Age (DMLA). 

La Dégénérescence Maculaire Liée à l’Age (DMLA) est actuellement la première cause de cécité légale (acuité visuelle inférieure à 1/20ème) dans les 

pays industrialisés chez les personnes de plus de 50 ans. La DMLA affecte la macula, la zone de la rétine dévolue à la vision centrale. Elle est 

caractérisée par une disparition massive des photorécepteurs entraînant une diminution de la sensibilité aux contrastes et aux détails fins. L’une des 

plaintes majeures des patients atteints de DMLA porte sur des difficultés dans la reconnaissance des visages et des expressions faciales. C’est sur ce 

dernier aspect que notre étude s'est intéressée. 

La reconnaissance des visages est basée sur des mécanismes cérébraux mettant en jeu la perception des composantes faciales (e.g. les yeux, le nez 

et la bouche) et la perception des interactions géométriques existantes entre eux. Ces informations sont portées par les contours, les plages d'ombre et 

de lumière, et les textures ; données physiques véhiculées par différentes gammes de fréquences spatiales. Les fréquences spatiales (FS) constituent 

la base du traitement de l’information visuelle. En effet, nous percevons le monde selon un large spectre de FS allant des plus basses aux plus hautes. 

Ainsi, les contours et les détails fin d’un visage sont véhiculés par les fréquences spatiales hautes (FSH) tandis que la pigmentation et la forme globale 

du visage sont véhiculées par les fréquences spatiales basses (FSB). La reconnaissance d’un visage nécessitera l’analyse des différentes gammes de 

FS. 

Schyns et Oliva (Schyns & Oliva, 1998 Cognition 69, 243-265) ont montré que selon la tâche, relative à la perception de l’expression du visage, des 

sujets sains pouvaient utiliser soit les FSH, soit les FSB. Ainsi une tâche qu’ils ont qualifiée de CATEX (pour CATégorisation de l’EXpression) nécessite 

l’utilisation des FSB tandis qu’une tâche appelée EXNEX (pour EXpressif/Non-EXpressif) nécessite l’utilisation des FSH. 

L’objectif de cette étude est de déterminer l’influence d’une perte de sensibilité aux contrastes et aux FSH sur la perception des expressions faciales 

chez des patients atteints de DMLA. Pour cela, nous leur avons proposé d’effectuer des tâches d’EXNEX et de CATEX. Nous leur avons présenté des 

visages (soit expressifs soit non expressifs) pendant 300ms. Selon la tâche, ils devaient soit discriminer l’expressivité du visage soit catégoriser 

l’expression du visage. Les visages pouvaient être soit très expressifs soit peu expressifs. En outre, nous avons demandé à des participants sains 

d’effectuer le même type de tâche. Les images étaient présentées pendant 35ms et pouvaient avoir un contraste d’origine abaissé. Cette manipulation 

des images ayant pour but de simuler la perte de sensibilité aux contrastes observée chez les patients. En faisant cela, on élimine une partie des 

canaux portant les FSH. 

Les résultats obtenus auprès des patients montrent une performance significativement meilleure dans la tâche de CATEX par rapport à EXNEX. De 

plus, la performance obtenue avec des visages peu expressifs est significativement meilleure en CATEX qu’en EXNEX. 

La DMLA se caractérise par une perte de la sensibilité aux contrastes et aux FSH. Les patients conservent cependant une bonne perception des FSB. 

Les résultats obtenus auprès des patients montrent que la tâche de CATEX peut être effectuée en ne percevant que des FSB, ce qui n’est pas le cas 

pour la tâche d’EXNEX. Cela est en adéquation avec les résultats obtenus par Schyns et Oliva. En outre, il semblerait que les patients atteints de DMLA 

soit tout a fait capables de reconnaître les expressions faciales. Les difficultés évoquées par ces patients seraient donc plutôt liées à des facteurs 

environnementaux (e.g. luminosité ambiante, taille du visage) qui gêneraient la reconnaissance des expressions faciales. 

Les tests effectués auprès des participants sains étant en cours, nous présenterons les résultats obtenus lors de la Journée André VERBERT. 

Mot(s)-clé(s) : DMLA & Expression faciale & Fréquences spatiales 

EL BEYROUTHY Marc EA2692 - Annick DELELIS 

Etude ethnopharmacologique des plantes médicinales du Liban Nord 

Une étude ethnopharmacologique a été effectuée au Liban Nord sur les plantes (indigènes, endémiques, naturalisées ou importées) qui sont réputées 

médicinales et utilisées par les différentes populations rurales, les herboristes et tradipraticiens qui pratiquent la médecine traditionnelle. 

Dans ce travail de recherche 50 espèces sont reportées, basé sur la fréquence d’utilisation et la sélection des données obtenues du travail du terrain. 

Les usages médicinaux les plus courants, aussi bien que les méthodes de préparation et d’administration sont décrits et comparés avec la littérature 

citée. 

Mot(s)-clé(s) : Ethnopharmacologie & Liban & Plantes médicinales 


FAID Valegh UMR-CNRS 8576 - Jean-Claude MICHALSKI 

Approches glycomique et glycoprotéomique de l'urine humaine applicables à l'étude des anomalies de 

glycosylation 

La glycosylation est une modification post-traductionnelle majeure chez les eucaryotes si bien qu’elle confère aux glycoprotéines diverses propriétés 

physicochimiques (solubilité, stabilité…) et biologiques (reconnaissance moléculaire, adhésion, trafic intracellulaire…). L’importance de cette 

glycosylation a notamment été démontrée au cours de nombreuses pathologies (acquises ou congénitales) pour lesquelles sont associées des 

anomalies de glycosylation. En clinique, l’urine constitue une source importante de biomarqueurs d’intérêts diagnostics et/ou pronostics. Parmi ces 

biomarqueurs, les glycoprotéines, d’origines tissulaires diverses (hépatique, splénique et urogénitale), forment le groupe le plus important. La 

détermination de leur profil de glycosylation et d’expression constitue une étape essentielle pour la mise en évidence des anomalies de glycosylation 

lors de pathologies. Pour ces raisons, l’objectif de notre étude consiste en la mise au point de méthodologies sensibles de glycomique et de 

protéomique applicables à l’étude des anomalies de glycosylation de glycoprotéines totales, isolées de l’urine. Pour ce faire, les profils de glycosylation 

des glycoprotéines urinaires totales seront, dans un premier temps, déterminés par des microméthodes chimiques, enzymatiques et spectrométriques. 

Les abondances relatives des glycanes seront alors déterminées après couplage à un fluorophore aromatique par Chromatographie Liquide Haute 

Performance (CLHP) en phase normale. Dans un second temps, l’analyse protéomique des glycoprotéines urinaires sera envisagée, après 

enrichissement par chromatographie sur colonne de lectines immobilisées, par électrophorèse d’acrylamide bidimensionnelle (2-DE). A terme, 

appliquées à l’étude de pathologies de glycosylation, ces méthodologies pourraient permettre de déterminer : (1) la nature des voies métaboliques 

potentiellement affectées au cours de ces pathologies ; (2) les marqueurs glycoprotéiniques associées à la pathogénèse ; et (3) le degré d’atteinte ainsi 

que la spécificité cellulaire éventuelle de ces pathologies. 

Mot(s)-clé(s) : Glycomique & Glycoprotéomique & Glycopathologies & Spectrométrie de masse 

FAVORY Raphael EA2689 - Rémy NEVIÈRE 

Effets cardiocirculatoires bénéfiques de la protéine C activée dans un modèle de choc endotoxinique chez le rat. 

Dans le choc septique, l’apparition d’une dysfonction myocardique et d’une hypotension artérielle réfractaire sont des éléments pronostiques 

défavorables. Il a été récemment montré que la protéine C activée améliore la mortalité des patients en choc septique (1). Nous étudions les propriétés 

cardiovasculaires et les mécanismes d’action de la protéine C activée dans un modèle de choc endotoxinique chez le rat. 

MATERIEL ET METHODES 

1. Préparation des animaux : 

Un cathéter carotidien et un cathéter jugulaire sont tunnelisés chez des rats. 

Quatre groupes sont étudiés : 

-rats contrôles (perfusion de sérum salé (SSI) à 2ml/h) 

-rats contrôles PCA (protéine C activée 240μg/kg/min à 2ml/h) 

-rats LPS (injection IV en bolus de 10mg/kg d’endotoxine d’E.coli et SSI 2ml/h) 

-rats LPS-PCA (PCA 30 minutes avant LPS) 

2. Etudes cardiovasculaires : 

a. Cœur isolé-perfusé avec mesure des paramètres de contractilité LVEDP, dP/dtmax 

b. Mesure de la pression artérielle et vasoréactivité à la noradrénaline 

c. Microscopie intravitale avec quantification du « rolling » et de l’adhésion leucocytaire et de la densité capillaire, 

3. Etudes biologiques : 

a. Dosage des nitrates/nitrites plasmatiques par réaction de Griess 

b. Taux plasmatiques de TNF-α et de MIF (macrophage migration inhibiting factor) par méthode ELISA 

c. Mesure de l’activité myéloperoxydase (spectrophotométrie) 

4. Analyse statistique ANOVA avec post-hoc Bonferroni. 

RESULTATS 

1. Au niveau cardiaque, la protéine C activée prévient la baisse de LVEDP 82 ± 4 mmHg par rapport au rat LPS 60 ± 3 mmHg (p

FREALLE Emilie EA3609 - Daniel CAMUS 

Place de la MnSOD dans la défense antioxydante d’Aspergillus fumigatus 

Les superoxyde dismutases (SODs) sont indispensables pour la survie des cellules fongiques, en particulier au cours des phases de colonisation puis 

d’invasion des voies respiratoires, où leur capacité de détoxification des anions superoxyde joue un rôle primordial dans la résistance au stress oxydatif 

induit par les cellules phagocytaires (neutrophiles et macrophages alvéolaires). Elles peuvent être classées en 3 isoformes en fonction de leur métal 

cofacteur : les Cu/ZnSODs (cuivre et zinc), les MnSODs (manganèse) et les FeSODs (fer). Les champignons, comme la plupart des eucaryotes, 

possèdent classiquement une Cu/ZnSOD cytosolique et une MnSOD mitochondriale. 

Etant donné le rôle important de ces enzymes, ainsi que l’intérêt de la MnSOD comme marqueur phylogénétique, nous avons réalisé une 

analyse phylogénétique des champignons d’intérêt médical basée sur le gène de la MnSOD. Nous avons ainsi démontré que de nombreux 

champignons possédaient, en plus d’une MnSOD mitochondriale classique, une MnSOD de localisation cytosolique. La présence du second gène de la 

MnSOD pourrait résulter de duplications successives, ancestrales ou tardives, au cours de l’évolution, suivies ou non de la perte d’un des 2 gènes. La 

conservation de 2 gènes de MnSOD chez les Euascomycetes, et notamment chez Aspergillus fumigatus, le champignon filamenteux le plus 

fréquemment isolé au cours de mycoses opportunistes systémiques, pose la question du rôle respectif de ces 2 enzymes dans la défense antioxydante 

de ce champignon, et de leur implication dans les mécanismes de pathogénicité. 

Nous avons donc exploré le rôle de ces 2 isoenzymes (i) en testant leur capacité à restaurer la résistance aux agents oxydants (ménadione 

ou H2O2) d’une souche de Saccharomyces cerevisiae déficiente en MnSOD mitochondriale, et (ii) en étudiant par RT-PCR la régulation de leur 

transcription, ainsi que celle des principales autres enzymes antioxydantes (Cu/ZnSOD, Glutathion transférase, Catalases 1 et 2) chez A. fumigatus au 

cours de chocs oxydatifs induits in vitro par la ménadione ou par H2O2. 

Nos premiers résultats montrent que la transcription des MnSODs cytosolique et mitochondriale d’A. fumigatus semble ne pas être induite par la 

ménadione, contrairement à celle de la Cu/ZnSOD et de la catalase 1. De façon intéressante, nous avons observé une induction importante de la 

transcription de la MnSOD cytosolique au cours de la phase stationnaire de croissance du champignon, alors que le niveau de transcription de la 

MnSOD mitochondriale reste stable. 

Cette première approche montre la complexité des mécanismes de régulation du système antioxydant chez A. fumigatus. Elle sera complétée 

par une étude transcriptomique par microarrays visant non seulement à aborder en détail les mécanismes de défense anti-radicalaire chez A. fumigatus 

mais également à identifier des métabolismes pouvant être reliés à l'expression de pathogénicité. 

Mot(s)-clé(s) : Aspergillus fumigatus & MnSOD & Phylogénie & Choc oxydatif 

GACKIERE Florian EMI0228 - Pascal MARIOT 

Couplage fonctionnel entre canaux calciques de type T alpha1H et canaux potassiques calcium-activés dans les 

cellules cancéreuses prostatiques humaines. 

Des canaux calciques voltage-dépendants activés par de faibles dépolarisations membranaires sont surexprimés lors de la différenciation 

neuroendocrine des cellules cancéreuses prostatiques humaines. Nos travaux précédents montrent que la sous-unité alpha1H (CaV3.2) est 

responsable du courant de type T observé dans les cellules épithéliales prostatiques humaines LNCaP (Lymph Node Carcinoma of the Prostate). En 

utilisant la technique électrophysiologique de patch-clamp, nous avons mis en évidence ici que l’entrée de calcium à travers les canaux de type T 

alpha1H active des canaux potassiques. Les cellules LNCaP expriment trois familles de canaux potassiques activés par le calcium : SK (smallconductance 

potassium channels), IK (intermediate) et BK (big). Nous avons utilisé des outils pharmacologiques (tels que : apamine, clotrimazole, 

slotoxine et tetra ethyl ammonium) pour identifier la nature du courant potassique induit par les canaux calciques alpha1H. La sensibilité du courant 

potassique aux agents pharmacologiques suggère que les canaux BK sont couplés fonctionnellement aux canaux calciques de type T alpha1H dans les 

cellules LNCaP. Nous avons effectué des expériences pour étudier si ce couplage fonctionnel était dû à la colocalisation moléculaire des deux canaux. 

Nos données obtenues en configuration « single channel » montrent que bien que les canaux alpha1H et les canaux potassiques soient présents dans 

les mêmes fragments membranaires, ces canaux ne colocalisent pas dans des rafts lipidiques étant donné que ni la méthyl-béta-cyclodextrine ni la 

filipine inhibent l’activation des canaux potassiques induite par le calcium. Finalement, nous démontrons que le courant de fenêtre calcique occasionné 

par les canaux calciques de type T est capable de réguler le potentiel de repos membranaire en permettant l’hyperpolarisation de la membrane des 

cellules LNCaP. 

Mot(s)-clé(s) : canal calcique de type T alpha1H & cancer & prostate humaine & cellules neuroendocrines 


GARCIA Frederic EA2694 - Paul FRIMAT 

Dimensions collectives du travail et santé des soignants dans les Etablissements Publics de Santé Mentale en 

restructuration 

L’Ergonomie se heurte aux lacunes des modélisations des dimensions collectives du travail, pour comprendre les situations de travail et agir 

efficacement dessus. De plus, l’objectif central de l’Ergonomie de compromis entre santé et efficacité, et la variabilité et la complexité du réel, 

nécessitent des études relatives à chaque secteur professionnel. La précision d’écueils théoriques et d’interventions, est nécessaire pour le secteur 

hospitalier en général et le personnel soignant en particulier, notamment dans le milieu psychiatrique en restructuration et aux conditions de travail 

spécifiques. 

Plusieurs disciplines exploitables ont développé des théories et méthodologies sur les dimensions collectives du travail (Ergonomie, Psychologie…). 

Classiquement, on appréhende en Ergonomie une réalité à trois facettes aux interactions complexes : l’agent (opérateur - sujet), la tâche (but, moyens 

et conditions) et l’activité (processus et réalisation). En fonction des marges de manœuvres, représentations et compétences de l’opérateur, celui-ci 

établit un compromis entre atteinte des objectifs / performance, et impacts sur la santé (immédiats ou dans la durée). Ce compromis se situe toujours 

par rapport aux autres. De plus, le modèle de l’activité peut être considéré comme un modèle pour analyser et comprendre la structuration des collectifs 

de travail, de l’activité collective et des liens entre travail et santé psychique. 

L’objectif théorique majeur est la compréhension de la dynamique de la confrontation « individu – collectif – organisation » et de ses conséquences sur 

le travail et la santé psychique des soignants. Cet objectif se décline en deux points. Premièrement, nous étudions la diversité et la coordination des 

collectifs, des activités collectives et individuelles, et des organisations. Deuxièmement, nous étudions l’impact différentiel des modalités de 

transformation et de réorganisation du travail, sur la re- conception des dimensions collectives de l’activité, en lien avec la santé psychique des 

soignants. Diverses interrogations en découlent : liens entre modèles d’activité et de santé, rapport à la conception des situations et à la conduite de 

projet, lien entre recherche et intervention… 

Les restructurations organisationnelles d’Etablissements Publics de Santé Mentale (EPSM) nous ont offert des terrains de recherche et d’intervention 

(encore en cours) propices, pour exploiter l’Analyse Ergonomique du Travail. Celle-ci semble pertinente pour concilier d’une part les acquis de diverses 

disciplines, d’autre part les approches théorique et empirique. Les besoins, temporalités et méthodologies varient selon le temps et le lieu, mais vont de 

l’analyse des projets de restructuration à l’analyse des traces spontanées et provoquées de l’activité soignante. Le va et vient entre recherche et 

intervention est constant pour modéliser les activités collectives soignantes. Le processus de recherche, évolue de l’approche empirique vers l’approche 

analytique, des processus en jeu et des interrelations entre le travail des agents, leur santé psychique et la prise en charge des patients. 

Mot(s)-clé(s) : activité individuelle et collective & EPSM & travail soignant 

GARENAUX Estelle UMR8576 - Jean-Claude MICHALSKI 

Etude de la biodiversité structurale des glycoconjugués. 

Le terme glycosylation renvoie à des molécules très diverses : glycoprotéines, glycolipides, polysaccharides ou oligosaccharides libres. Ces molécules 

sont impliquées dans de nombreuses fonctions biologiques : réserve, structure (parois des bactéries et des végétaux ou matrice extracellulaire des 

cellules eucaryotes), interactions intercellulaires. 

L’analyse de ces molécules apparaît relativement difficile du fait de l’incroyable diversité des structures existantes. En effet, la nature des 

monosaccharides les composant (anomérie, conformation, configuration), leur séquence, la position des liaisons (branchement) et les éventuelles 

substitutions (sulfates, phosphates…) sont autant de facteurs permettant de générer un nombre extraordinaires d’isomères. 

Ces glycannes sont synthétisés après ajout séquentiel par des enzymes particulières : les glycosyltransférases. Chacune de ces enzymes présente une 

spécificité de substrats (donneurs et accepteurs), ainsi qu’une spécificité de liaison (anomérie et position). Or l’équipement enzymatique est fonction à 

la fois de l’espèce, de l’individu, du type cellulaire ou tissulaire, et de l’état physio-pathologique considéré. Il est donc impossible de prédire quelles 

seront les structures glycanniques présentes dans un échantillon sans effectuer une analyse structurale fine. 

La stratégie développée dans notre laboratoire afin d’effectuer cette étude structurale consiste à utiliser les méthodes classiques de la chimie des 

sucres (-élimination, hydrazinolyse, méthanolyse, perméthylation…) et de les associer à une analyse en spectrométrie de masse après 

séparation des glycannes par des méthodes chromatographiques usuelles (échange d’ions, tamisage moléculaire, HPLC, GC, colonnes d’affinité avec 

des lectines…). En particulier, une étude combinant l’analyse des glycannes natifs et perméthylés par spectrométrie de masse en tandem permet 

d’accéder à la structure fine des glycannes. Les produits natifs nous informent sur l’aspect global de la molécule, alors que l’observation de clivages 

préférentiels sur les produits perméthylés permet un séquençage fin, discriminant ainsi d’éventuels isomères. Complétée dans la mesure du possible 

par une analyse RMN rendue plus sensible depuis le développement des très hauts champs et des cryosondes, cette stratégie globale permet 

d’accéder sans ambiguïté à toutes les informations structurales relatives au mélange de glycannes étudié. 

Mot(s)-clé(s) : biodiversité 


GARGOURI Imed EA2690 - Daniel MARZIN 

Repérage des expositions professionnelles aux solvants organiques dans l’industrie de la fabrication des colles 

et chaussures dans la ville de Sfax (Tunisie) 

Objectifs : L’utilisation de solvants industriels constitue un problème de santé au travail dans la ville de Sfax dans la mesure où environ 6000 artisans de 

fabrication de chaussures et de colles sont implantés dans la région. L’objectif de notre étude est de repérer les différentes expositions professionnelles 

aux solvants et/ou aux colles en tenant compte du secteur d’activité et du poste de travail. 

Méthodes : Pour le repérage des entreprises de fabrication de colles et chaussures nous avons fait appel aux listes fournies par la Chambre Régionale 

du Commerce, de l’Industrie et de l’Artisanat et par le Centre Régional des Cuirs et Chaussures à Sfax. Cette liste a été complétée par la recherche 

des autres entreprises concernées par porte à porte dans les 4 zones industrielles de Sfax et dans la vieille ville (médina). A l’aide d’un questionnaire, 

les informations suivantes ont été recherchées : 1) le procédé de fabrication : industriel, semi-industriel ou artisanal ; 2) le nombre total des salariés 

dans l’entreprise et l’effectif concerné par l’exposition aux solvants et/ou aux colles ; 3) la liste des solvants et des colles manipulés ainsi que les 

quantités annuelles ; 4) un descriptif global de l’ambiance générale de travail et de la ventilation des ateliers. 

Résultats : Au total, 96 entreprises ont pu être repérées : 4 de fabrication de colles (2 industrielles et 2 semi-industrielles) et 92 de fabrication de 

chaussures (26 industrielles, 6 semi-industrielles et 60 artisanales). Le nombre total de salariés concernés est de 1248 : 99 dans la fabrication des 

colles et 1149 dans la fabrication des chaussures. Différents solvants sont utilisés dans les 2 secteurs, tels que l’hexane, le toluène, le trichloroéthylène, 

l’acétone, … ; dans 10 % des cas le solvant n’est pas défini. Dans la fabrication de chaussures nous avons noté un éventail de colles utilisées avec un 

approvisionnement essentiellement régional. Les quantités d’utilisation de colles varient de 100 à 9000 l/an. Si les entreprises de fabrications de colles 

sont bien entretenues, disposent d’une ventilation générale et/ou à la source et sont toutes installées dans les zones industrielles, celles de la 

fabrication de chaussures sont préférentiellement installées dans des habitations dans la vieille ville, ne sont pas bien entretenues et dans 25% des cas 

la porte d’entrée est la seule aération. 

Conclusions : Suite à cette phase préliminaire, une identification plus spécifique des colles et solvants est nécessaire afin d’identifier et prévenir les 

risques professionnels dans la fabrication des colles et chaussures. 

Mot(s)-clé(s) : Solvants & Fabrication de chaussure & Impact sanitaire 

GINESTE Romain U545 - Jean-Charles FRUCHART 

Protein Kinase C pathway promotes the farnesoid X receptor transcriptional activity 

The farnesoid X receptor (FXR, NR1H4) belongs to nuclear receptor superfamily and is activated by bile acids such as chenodeoxycholic acid (CDCA) 

or synthetic ligand as GW4064. FXR is implicated in the modulation of bile acids, lipid and carbohydrate metabolism. Although its mechanism of action 

is well characterized, post-translational modifications regulating its activity have not yet been investigated. Here, we demonstrate for the first time that 

calcium dependant PKC inhibitor prevents the ligand-mediated regulation of FXR target gene. Additionally, using transactivation assay, we show that 

the FXR transcriptional activity is modulated by calcium dependant protein kinase C (PKC) and particularly the PKCa isoform. Furthermore, in HepG2, 

the phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), a PKC activator, induces the phosphorylation of endogenous FXR and, in vitro, PKCa phosphorylates FXR 

in its ligand binding domain (LBD). Finally, by using two mammalian hybrid assay and GST pull-down, we show that phosphorylation of the LBD 

promotes the recruitment of the steroid receptor coactivator 1 (SRC1). These results demonstrate, for the first time, a link between FXR activity and the 

PKC phosphorylation pathway. 

Mot(s)-clé(s) : Farnesoid X receptor & Protein kinase C (PKC) & phosphorylation & SRC1 recruitment 

GLUSZOK Sébastien EA2692 - Patrick DEPREUX 

Conception, synthèse et évaluation pharmacologique de nouveaux dérivés pyrroliques 

potentiellement inhibiteurs de PDK-1 

Le manque de sélectivité et d’efficacité à long terme des traitements anticancéreux actuels impose la recherche de nouvelles stratégies thérapeutiques. 

Dans le cas du cancer de la prostate, les acteurs de la voie de transduction PI3K/Akt sont fréquemment mutés, conduisant à une activation constante 

de la cascade enzymatique. Plusieurs études ont montré que cette voie de transduction intervenait de façon majeure dans certaines fonctions 

cellulaires telles que le métabolisme, la transcription, la croissance cellulaire, ou encore l’apoptose et constituait donc une cible de choix pour la 

conception de nouvelles molécules anticancéreuses. La kinase PDK-1 (phosphoinositide dependant kinase-1) joue un rôle de relais au sein de cette 

voie de transduction en activant Akt ; on peut donc espérer limiter les effets carcinogènes de la suractivation de la voie de transduction en inhibant cette 

enzyme. 

En tenant compte du pharmacophore issu de nouveaux inhibiteurs PDK-1 dérivés du Célécoxib comme le OSU-02067, nous avons réalisé par 

synthèse parallèle en phase solide sur synthétiseur Quest 205® une série de dérivés pyrroliques. 

Les mesures d’inhibition de prolifération cellulaire des composés synthétisés réalisées sur la lignée cancéreuse prostatique PC3 (métastases osseuses) 

ont fait apparaître plusieurs composés présentant de très bonnes activités antiprolifératives. Quatre composés présentent ainsi des IC50 inférieures à 

10 µM. Les tests sur l’enzyme PDK-1 recombinante sont en cours. 

Mot(s)-clé(s) : PDK-1 & voie PI3K/Akt & dérivés pyrroliques 


GUTIERREZ-AGUILAR Ruth UMR8090 - Philippe FROGUEL 

Le variant AS–1659 G>C de KLF11, associé au Diabète de Type 2, modifie la transcription de KLF11 

Introduction: KLF11 est un facteur de transcription induit par le TGF b et capable de réguler l’expression du gène de l’insuline. Il a été précédemment 

montré que les variants Q62R, ainsi que AS–1659 G>C du promoteur putatif de KLF11 (SNP1) sont associés avec la susceptibilité au diabète de type 2 

(DT2). SNP1 se situe dans un site d’accrochage putatif du facteur RBP-Jk ou STAT3 ((G>C)TGGGAA). La transition de l’allèle G en C entraîne la 

disparition de cette prédiction. RBP-Jk joue un rôle clé dans la voie de signalisation de Notch, permettant la différenciation des cellules pancréatiques 

endocrines. D’ailleurs, STAT3 est indispensable à la régulation de la gluconéogenèse des hépatocytes. Dans cette étude, nous analyserons le facteur 

qui s’accroche au SNP1 de KLF11 et son effet sur la transcription du gène, pour évaluer l’implication de cette régulation dans la susceptibilité au DT2. 

Méthodes: Nous avons analysé les protéines nucléaires qui s’accrochent aux sondes du SNP1, dans les cellules β pancréatiques et dans les 

hépatocytes, par des expériences de retard sur gel. Ensuite, nous avons cloné la région promotrice de KLF11, contenant SNP1 sauvage ou muté pour 

étudier l’induction de l’activité de la luciférase dans des cellules transfectées. Résultats: Nous avons mis en évidence la fixation d’un complexe 

protéique sur la séquence sauvage, qui est absent sur la séquence mutée du SNP1. Nos résultats montrent que le facteur STAT3 est présent dans ce 

complexe. L’analyse de la région promotrice de KLF11 montre qu’il existe une différence de régulation transcriptionnelle entre la forme sauvage et la 

forme mutée. Cette régulation est en cours de caractérisation pour différentes concentrations de glucose et de stimulation de STAT3. Conclusion: Nous 

avons montré que STAT3 s’accrochait à la forme sauvage du SNP1 situé dans la région promotrice de KLF11. Cette fixation pourrait expliquer la 

différence d’activation observée entre la forme sauvage et mutée du promoteur de KLF11. Ces résultats suggèrent que AS–1659 G>C, associé avec le 

DT2, régule l’expression de KLF11 via STAT3, qui joue un rôle important dans la sensibilité au glucose au niveau du foie. 

Mot(s)-clé(s) : KLF11 

HELLE Francois UPR2511 - Jean DUBUISSON 

La cyanovirin-N inhibe l’entrée du Virus de l’Hépatite C en interagissant avec les glycannes associés aux 

protéines d’enveloppe 

Plus de 170 millions de personnes dans le monde sont chroniquement infectées par le virus de l’hépatite C (VHC). Ce virus est responsable de la 

majorité des hépatites chroniques, des cirrhoses et des hépatocarcinomes. De plus, les infections chroniques par le VHC sont la cause majeure des 

transplantations du foie. Le traitement actuel consiste en une bithérapie composée d’interféron-? pégylé et de ribavirine. Cependant, ce traitement est 

très coûteux, relativement toxique et n’est efficace que chez la moitié des patients traités. Par ailleurs, aucun vaccin contre le VHC n’est disponible à ce 

jour. Le développement de traitements anti-VHC plus efficaces et mieux tolérés est donc nécessaire pour combattre cet agent pathogène majeur. 

Le VHC est un virus enveloppé qui appartient au genre Hepacivirus dans la famille des Flaviviridae. Le cycle viral du VHC reste encore mal 

connu en raison des difficultés à propager ce virus dans un système de culture cellulaire. Le développement de particules rétrovirales pseudotypées par 

les glycoprotéines d’enveloppe, E1 et E2, du VHC (VHCpp) a été une avancée majeure dans la recherche sur l’entrée du virus (1). Ce système est très 

utile pour l’identification et la caractérisation de molécules qui bloquent l’entrée du VHC. Par ailleurs, les données obtenues avec les VHCpp peuvent 

aujourd’hui être confirmées à l’aide d’un système de culture cellulaire récemment développé qui permet une amplification efficace du VHC (VHCcc) (2). 

Durant leur biogenèse, les deux glycoprotéines d’enveloppe du VHC, E1 et E2, s’assemblent sous forme d’hétérodimères non-covalents qui 

sont retenus dans le réticulum endoplasmique. Dans ce compartiment, 4 ou 5 sites de glycosylation sur E1 et 11 sites de glycosylation sur E2 sont 

modifiés par N-glycosylation. L’analyse des glycannes liés aux formes intracellulaires des glycoprotéines d’enveloppe a montré que les glycannes 

associés étaient de type oligomannosidique. Néanmoins, certains de ces glycannes sont très probablement modifiés après l’assemblage et le relargage 

des particules virales. Les sites de glycosylation présents sur E1 et E2 sont très conservés et certains glycannes associés jouent un rôle majeur dans le 

repliement de ces protéines et dans l’entrée du VHC (3). Pour ces raisons, les glycannes présents sur les glycoprotéines d’enveloppe du VHC semblent 

être une cible intéressante pour le développement de nouvelles molécules antivirales efficaces contre le VHC. 

La cyanovirin-N (CV-N) est une protéine de 101 acides aminés (11 kDa) qui a été isolée à partir d’extraits de cyanobactéries Nostoc 

ellipsosporum (4). Cette lectine a été identifiée comme un agent actif contre le VIH ainsi que d’autres virus enveloppés. L’activité antivirale de la CV-N 

implique des interactions spécifiques avec les glycannes oligomannosidiques présents sur les protéines d’enveloppe virales, ce qui empêche l’entrée du 

virus dans la cellule. Les glycoprotéines d’enveloppe du VHC étant très glycosylées et contenant probablement des glycannes oligomannosidiques, 

nous avons testé si la CV-N avait une activité antivirale contre ce virus. Nous avons ainsi montré que la CV-N inhibait l’entrée des VHCpp et VHCcc 

dans des cellules cibles, à des concentrations nanomolaires. Cette inhibition est due à une interaction spécifique de la CV-N avec les glycannes 

associés aux protéines E1 et E2, ce qui empêche l’interaction de E2 avec CD81, une protéine cellulaire de surface impliquée dans l’entrée du VHC. 

En conclusion, nos données montrent que les glycannes présents sur les protéines d’enveloppe du VHC sont une cible prometteuse pour le 

développement de nouvelles stratégies thérapeutiques. 

1 – Bartosch, B., & al., J. Exp. Med. (2003) 

2 – Wakita, T., & al., Nat. Med. (2005) 

3 – Goffard, A., & al., J. Virol. (2005) 

4 – Boyd, M.R., & al., Antimicrob. Agents Chemother. (1997) 

Mot(s)-clé(s) : Virus de l’Hépatite C & cyanovirin-N & entrée virale & N-glycosylation 


JARDIN-MATHE Olivia FRE 2933 - Michel SALZET 

Développement d’un logiciel de reconstruction d’images en vue d’une application à l’imagerie par spectrométrie 

de masse 

Grâce au principe de production d’ions par Désorption/Ionisation Laser Assistée par Matrice en spectrométrie de masse, il devient possible de 

développer des techniques d’imagerie moléculaire pour la détection de peptides et de protéines sur des sections fines de tissus. Des informations 

spécifiques sur la composition moléculaire locale, l’abondance relative et la distribution spatiale sont ainsi obtenues. 

L’intensité du courant mesuré, en fonction du rapport m/z, est reportée sur le spectre de masse. A un point de l’échantillon correspond un spectre qui 

sera représentatif de la composition en ce point. Il est aussi possible d’enregistrer plusieurs spectres en différents points de l’échantillon car la plaque 

métallique (ou porte échantillon) sur laquelle est déposé l’analyte est montée sur un plateau xy piloté par deux moteurs pas à pas permettant un 

déplacement précis dans les deux dimensions du plan. Par exemple, pour une coupe de tissu, une zone rectangulaire à étudier peut être définie. Un 

balayage de cette zone par laser en mode automatique donnera des spectres représentatifs de chacun des points. En enregistrant pour chaque spectre 

les coordonnées spatiales localisant le point où l’analyse à été effectuée, une collection de données est obtenue. 

Cependant l’analyse MALDI est limitée spatialement au diamètre du faisceau laser et la distance entre deux positions (le pas) du balayage, l'image sera 

donc plus ou moins précise. 

Une fois l’acquisition des spectres terminée, la sélection d’un pic sur les spectres, correspondant à un composé d’intérêt, puis la mesure de ce pic, 

permet de reconstruire une image de la répartition de ce composé au sein de la coupe. Pour cela, le logiciel va rechercher la présence ou non de ce pic 

dans chaque spectre enregistré lors du balayage : parcours des fichiers obtenus. Il faut ensuite choisir la méthode à utiliser pour parcourir les pics. La 

recherche peut se faire soit selon l’intensité maximum du pic, soit selon l’aire du pic. Il faudra aussi définir un seuil d’intensité en dessous duquel le 

signal ne sera pas considéré comme significatif. Puis le parcours des spectres pourra se faire. Pour chaque couple de coordonnées (désignant un 

spectre, ou un point sur la plaque) une valeur sera attribuée puis utilisée pour la reconstruction de l’image. L’intensité des couleurs sur l’image obtenue 

dépend donc de l’intensité de présence du peptide. La reconstitution de l’image se fera avec 1 pixel par point (spectre). 

De nombreuses applications peuvent déboucher de cette technologie. L’une des principales est la recherche de biomarqueurs et en particulier de 

biomarqueurs de pathologies. Pour l’instant l’Imaging Mass Spectrometry donne des images de coupes planes. Une équipe a récemment montré qu’il 

était possible, à partir de la cartographie de coupes de cerveau de rat, de reconstituer une image en 3D, ce qui permet de voir la localisation d’une 

protéine cible non plus dans une coupe, mais dans l’organe ou dans l’animal en entier. 

Lemaire R, Tabet JC, Ducoroy P, Hendra JB, Salzet M, Fournier I, Solid ionic matrixes for direct tissue analysis and MALDI imaging. Anal Chem, 

2006,78(3) 

Fournier I, Day R, Salzet M, Direct analysis of neuropeptides by in situ MALDI-TOF mass spectrometry in the rat brain. Neuroendocrinol. Lett, 2003,24 

Caprioli RM, Farmer TB, and Gile J, Molecular imaging of biological samples: localization of peptides and proteins using MALDI-TOF MS. Anal Chem, 

1997,69(23) 

Stoeckli M, Farmer TB, Caprioli RM, Automated mass spectrometry imaging with a matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight instrument. J 

Am Soc Mass Spectrom, 1999;10(1) 

Caprioli RM, Farmer TB, Gile J, Molecular imaging of biological samples: localization of peptides and proteins using MALDI-TOF MS. Anal Chem, 

1997;69(23) 

Mot(s)-clé(s) : bioinformatique & imagerie & spectrométrie de masse 

JEANNE Mathieu EA 1046 - Benoit TAVERNIER 

Etude de l'activité du SNA au cours d'agression cérébrales aigues 

L'activité du système nerveux autonome (SNA) peut être mesurée par l'analyse de la variabilité sinusale du rythme cardiaque (Heart Rate Variability – 

HRV). L'état du SNA est modifié par de nombreuses situations physiologiques et pathologiques ayant fait l’objet d’études essentiellement dans le 

contexte de pathologies chroniques. En cas d'agression aigue, l’intérêt de ce type d’analyse est apparu le plus souvent limité. Nous faisons l’hypothèse 

que l’étude de l’activité du SNA au cours d’agressions cérébrales aigues peut avoir un intérêt diagnostique, pronostique et/ou thérapeutique, à condition 

d’utiliser des méthodes d’analyse et de mesure mises au point spécifiquement dans ce but. 

1- mise au point d'un traitement original du tachogramme : La mise au point d'un logiciel destiné au traitement du tachogramme (suite des intervalles R- 

R d'un électrocardiogramme) a été réalisée en langage Borland® Delphi® 4.0. Le traitement du tachogramme réalisait un rééchantillonage à 8 Hz sur 

64 sec, la mesure de la norme du vecteur ainsi obtenu puis un filtrage entre 0.125 et 1 Hz en utilisant la transformée en Ondelettes (Daubechies 4). Le 

traitement du signal filtré reposait sur le calcul de multiples indices HRV, en utilisant les patterns spécifiques liés à la ventilation ("patterns 

ventilatoires"). Nous avons observé que la normalisation était fondamentale (article original en projet sur ce résultat). L'enveloppe inférieure – reliant les 

minina locaux – et son aire sous la courbe nous a permis de calculer les indices "AUCmax" et "MinRPA", respectivement maximum et minimum des 

quatre aires de 16 sec sous l'enveloppe inférieure de 64 sec. 

2- modèle d’agression cérébrale aigue: douleur chirurgicale sous AG : Un protocole d'étude clinique prospectif réalisé au CHRU de Lille nous a permis 

d'obtenir des enregistrements ECG au cours d'anesthésies générales (AG) à deux niveaux d'analgésie : légère ou profonde. Nous avons observé que 

l'amplitude des "patterns ventilatoires" augmentait en cas d'analgésie profonde et diminuait en cas d'analgésie insuffisante. Plusieurs indices HRV 

présentaient des différences significatives entre ces deux groupes, "MinRPA" et "AUCmax" permettant d'anticiper jusqu'à 12 min la réinjection du 

morphinique (résultats présentés en congrès, article en cours de rédaction). 

3- modèle d’agression aigue : douleur chez le patient conscient : La nécessité de valider ces indices chez des patients conscient, interrogeables sur leur 

douleur nous a conduit à réaliser deux études cliniques prospectives, actuellement en cours au CHRU de Lille : 1) au cours du travail de 

l'accouchement, lors de périodes non douloureuses puis douloureuses et enfin après analgésie péridurale; 2) lors de la douleur post opératoire après 

chirurgie du pied, et après anesthésie loco régionale. 

4- modèle d’agression cérébrale aigue réversible : hémorragie méningée spontanée et traumatisme crânien grave : L'hémorragie méningée par rupture 

d'anévrisme n'altère pas nécessairement la conscience, tandis que le traumatisme crânien grave est, par définition, à l'origine d'un coma (score de 

Glasgow < 8). Les patients hospitalisés pour ces pathologies feront l'objet d'une étude prospective observationnelle à la recherche de corrélations entre 

les indices HRV et les données du monitorage cérébral (pression intra crânienne, oxygénation tissulaire cérébrale), de l'imagerie cérébrale (TDM et 

IRM), et des indices pronostiques cliniques. 

5- modèle d’agression cérébrale aigue irréversible : état de mort encéphalique : Le traumatisé crânien grave peut évoluer vers l'état de mort 

encéphalique. La mesure de l'activité du SNA pourrait permettre d'anticiper cette évolution, afin de tenter d'une part de la prévenir par une prise en 

charge rapide spécifique, ou de permettre, d’autre part, un diagnostic plus précoce de l’état de mort encéphalique en vue d’un prélèvement multi 

organe. Cette recherche fait actuellement l'objet d'une étude observationnelle prospective au CHRU de Lille. 

Mot(s)-clé(s) : systeme nerveux autonome & variabilité sinusale du rythme cardiaque & agression cérébrale aigue & analgesie/douleur 


JEBARA Najate UMR8160 - Delphine PINS 

Préférence pour certaines catégories d’objets chez les sujets sains et chez les patients atteints de maculopathie 

Des études en IRMf suggèrent une influence de la perception visuelle sur l’organisation fonctionnelle cérébrale. En particulier, Levy et al. (2001) 

proposent que nos habitudes d’explorations seraient à l’origine de notre organisation fonctionnelle cérébrale. Ils ont en effet montré que la présentation 

de visages explorés habituellement en vision centrale (VC), générait une activité cérébrale dans une région du cortex visuel correspondant au champ 

visuel central tandis que la présentation de constructions classiquement perçues en vision périphérique (VP) était à l’origine d’une activité dans une 

région du cortex visuel correspondant au champ visuel périphérique. 

Ces travaux nous ont conduit à l’idée que nos habitudes d’exploration de l’environnement pourraient conduire à une préférence en VP pour la 

perception de certaines catégories d’objets. Ainsi, des constructions qui sont vues habituellement en VP devraient conduire à de meilleures 

performances lorsqu’ils sont présentés en VP que des visages que nous avons l’habitude d’explorer en VC. Nous avons testé cette préférence dans 3 

expériences de niveaux de traitement différents: des tâches de catégorisation (présence ou absence), de discrimination (identique ou non), et de 

reconnaissance (connu ou non). Des sujets sains et des patients présentant une maculopathie plus ou moins étendue ont été testés. Nous faisons 

l’hypothèse que des modifications des habitudes perceptives, en particulier, l’usage restrictif de la VP, pourraient moduler les préférences observées. 

Chez les sujets sains, alors qu’aucune différence significative entre les 2 catégories sémantiques n’a été trouvée en VC, une préférence a été mise en 

évidence en VP. Néanmoins, cette préférence dépendait aussi de la tâche à réaliser. En effet, les visages étaient mieux catégorisés que les 

constructions en VP alors que les constructions étaient mieux discriminées et reconnues. Ainsi, le contenu sémantique ne peut être tenu pour seul 

responsable de cette préférence. Des stimuli appartenant à des catégories sémantiques différentes ne requièrent pas le traitement des mêmes 

informations. La structure plus spécifique et homogène des visages comparée aux constructions permettrait d’effectuer une catégorisation sur la seule 

base de leur forme globale (fréquences spatiales –FS- basses). A l’inverse, une analyse plus détaillée serait nécessaire pour discriminer ou reconnaître 

des visages (FS élevées) tandis qu’un traitement global serait suffisant pour discriminer ou reconnaître des constructions. La VP, de part ses propriétés 

anatomiques, favoriserait les situations impliquant le traitement de la forme globale des objets. 

Un profil similaire a été retrouvé chez les patients. Ils montraient une préférence pour les visages dans la tâche de catégorisation et à l’inverse pour les 

constructions dans les tâches de discrimination et de reconnaissance. Néanmoins, ces effets de la catégorie sémantique étaient atténués comparés à 

ceux observés chez les sujets sains. Par ailleurs, la performance en VP semble reliée à la taille du scotome. Les patients ayant des scotomes peu 

étendus avaient de meilleures performances que les sujets sains en VP, alors que ceux ayant des scotomes plus larges avaient des performances 

moindres. Une compensation semble n’être possible en VP que lorsque le déficit visuel reste très localisé en VC. 

Ainsi, nos habitudes perceptives conduiraient à une préférence pour la perception de certains objets, puisque les visages que nous explorons 

habituellement en VC nécessitent un niveau de résolution plus élevé pour être discriminés ou reconnus en VP alors que les constructions qui sont 

classiquement perçues en VP nécessitent un niveau de résolution plus bas. Ces préférences en VP traduiraient alors notre organisation fonctionnelle 

cérébrale (Levy et al., 2001). Modifier nos habitudes perceptives, comme c’est le cas chez les patients étudiés, pourrait alors contribuer à une 

réorganisation fonctionnelle cérébrale. 

Mot(s)-clé(s) : Vision centrale & Vision Périphérique & contenu sémantique & caractéristiques physiques 

LALLET Helene EMI0228 - Natacha PREVARSKAYA 

Implication des canaux potassiques calcium-dépendants dans la prolifération et la cancérogenèse de la prostate 

humaine 

Le cancer de la prostate est la deuxième cause de mortalité par cancer dans la population masculine. Le développement normal et pathologique de la 

prostate est sous la dépendance du taux d’androgènes circulants. Les approches thérapeutiques actuelles (hormonales ou non) consistent à réduire au 

maximum le taux des androgènes circulants. Bien que ces traitements conduisent à une régression tumorale à court terme, ils restent souvent 

inefficaces à long terme où il se produit un échappement thérapeutique des tumeurs qui évoluent vers un cancer androgéno-indépendant. Il est donc 

évident que d'autres facteurs non androgéniques interviennent dans le développement des tumeurs prostatiques. L'étude de nouvelles cibles 

permettrait à long terme de développer de nouvelles stratégies pharmacologiques dans le traitement des cancers de la prostate. 

Des études récentes montrent que les canaux ioniques membranaires (calciques, potassiques,…) et le calcium intracellulaire sont des éléments clés 

des cascades d’événements conduisant à la stimulation de la prolifération ou au déclenchement de l'apoptose. Toutefois, le rôle des canaux ioniques et 

du calcium dans le développement et la croissance normale et pathologique de la prostate humaine reste assez mal connu et aucune approche 

thérapeutique visant les canaux ioniques comme cible pharmacologique n’est actuellement envisagée dans le traitement du cancer de la prostate. 

Ce travail est axé sur l’étude de l’expression, de la fonctionnalité et de l’implication des canaux potassiques activés par une augmentation du 

calcium intracellulaire dans la physiologie et dans la croissance des cellules cancéreuses prostatiques. Les canaux potassiques activés par le calcium 

intracellulaire (IK, BK, SK) font partie de la superfamille multigénique des canaux potassiques. Des études récentes montrent l’implication de ces 

canaux potassiques calcium-dépendants (Kca) et plus particulièrement celui à conductance intermédiaire (IK) dans la modulation de la croissance des 

différents systèmes cellulaires comme notamment les lymphocytes T et les cellules pancréatiques humaines. Une surexpression du canal potassique 

de type IK a été également démontrée dans les cellules cancéreuses humaines. 

Grâce aux techniques de biologie molèculaire, de biologie cellulaire et d’électrophysiologie, nous avons pu identifier les canaux potassiques 

KCa de type IK dans les cellules cancéreuses prostatiques humaines androgéno-dépendantes et indépendantes : en effet, l’expression de ce canal 

paraît être dépendante du phénotype cellulaire . De plus, nous avons démontré l’implication de l’activité de ce canal dans la croissance des cellules 

cancéreuses prostatiques humaines en intervenant dans le cycle cellulaire. L’étude des mécanismes d’action de la fonctionnalité de ce canal montre 

son implication dans le potentiel de membrane et dans l’homéostasie calcique cellulaire et plus particulièrement dans l’entrée capacitive de calcium 

dans les cellules cancéreuses de la prostate. Comme l’entrée capacitive de calcium est connue pour être impliquée dans le contrôle de la croissance 

des cellules cancéreuses, nos résultats sont prometteurs car l’activité de ce canal peut être une nouvelle voie de contrôle de la croissance cellulaire par 

le calcium. 

Mot(s)-clé(s) : Prostate humaine & Cancer & Canaux potassiques & Calcium 


LAUNAY David EA2686 - Lionel PRIN 

Identification par une approche immuno-protéomique de cibles antigéniques dans le neurolupus 

Introduction : la physiopathologie exacte du neurolupus reste à établir. L’analyse du répertoire anticorps vis à vis du tissu cible suivie d’une approche 

protéomique est une méthode reconnue pour l’identification de cibles antigéniques dans certains processus auto-immuns. 

Objectifs : identifier certaines cibles antigéniques cérébrales caractéristiques du répertoire anticorps d’isotype IgG dans le neurolupus par une approche 

immuno-protéomique. 

Méthodes : Le profil de réactivité des autoanticorps d’isotype IgG dirigés contre des antigènes cérébraux a été étudié chez 7 patients ayant un 

neurolupus par western blot. Ces profils ont été comparés à ceux de 12 patients lupiques sans atteinte neurologique, de patients ayant un syndrome de 

Sjögren avec (n=26) ou sans (n=6) atteinte du système nerveux central (SNC), de 82 patients ayant une sclérose en plaque (SEP) et de 27 sujets sains 

par une analyse statistique de type ALD (Analyse Linéaire Discriminante). 

Résultats : 1. Seize réactivités immunitaires singulières permettaient de différencier le répertoire des sujets sains, des patients ayant une SEP et celui 

des connectivites. 2. Cinq réactivités immunitaires particulières permettaient de différencier le profil des connectivites selon qu’il existait une atteinte du 

SNC 3. Quatre réactivités immunitaires différenciaient le profil des neurolupus par rapport aux lupus non neurologiques et aux Sjögren avec atteinte du 

SNC. 4. Une analyse protéomique permettait d’identifier de MAP-2B et de la septin 7 comme 2 de ces 4 antigènes. 

Discussion : L’analyse du répertoire des autoanticorps d’isotype IgG dirigées contre des antigènes cérébraux a permis d’identifier un profil de réactivité 

immunitaire très spécifique du neurolupus. L’analyse protéomique a pu identifier certains de ces antigènes cibles caractéristiques ce qui a d’importantes 

implications diagnostiques et physiopathologiques potentielles. Plusieurs autres cibles antigéniques sont en cours d’identification. 

Conclusion : l’approche immunoprotéomique est une approche efficace qui a permis de caractériser des antigènes cibles du neurolupus dont l’analyse 

fonctionnelle ultérieure pourrait apporter de nouveaux éléments pour la compréhension des mécanismes physiopathologiques. 

Mot(s)-clé(s) : neurolupus & proteomique & autoanticorps & systeme nerveux central 

LE BRAS Alexandra UMR8526 - Fabrice SONCIN 

Analyse in vitro et in vivo du promoteur du gène VE-Statine. 

Notre équipe a identifié un gène, la VE-statine (ou egfl7), qui est impliqué dans l’angiogenèse, la formation de nouveaux vaisseaux sanguins à partir de 

vaisseaux déjà établis (Soncin F. et al EMBO J 2003 22:5700-11). Les rôles physiologiques de la VE-statine et ses mécanismes d’action ne sont pas 

encore bien connus. Le gène VE-statine est spécifiquement exprimé dans les cellules endothéliales très tôt au cours du développement et tout au long 

de la vie embryonnaire. Notre projet consiste à identifier les mécanismes des régulations responsables de cette expression spécifique dans les cellules 

endothéliales. 

Nous avons réalisé une analyse in vitro de l’activité transcriptionnelle du gène VE-statine murin afin de rechercher les régions impliquées. Nous avons 

progressivement découpé l’extrémité 5’ du gène et placé les différents fragments obtenus dans un vecteur rapporteur. L’activité transcriptionnelle de 

ces constructions a alors été comparée dans les cellules endothéliales et dans des fibroblastes. Nous avons ainsi pu mettre en évidence le rôle 

combiné du promoteur minimal et de deux régions régulatrices (enhancer) placées en amont du gène dans la forte expression du gène dans les 

cellules endothéliales. 

En parallèle de cette analyse in vitro, nous menons des expériences de transgénèse chez la souris afin de valider nos résultats. Un premier fragment de 

promoteur comportant l’ensemble des régions régulatrices identifiées a ainsi été placé en amont du gène codant la ß-galactosidase dans un vecteur 

rapporteur et utilisé comme vecteur de transgénèse. L’analyse des embryons obtenus montre que ces régions orientent préférentiellement l’expression 

de la ß-galactosidase dans les cellules endothéliales. Nous avons maintenant créé d’autres vecteurs de transgénèse qui seront testés afin de 

déterminer si l’ensemble des régions nécessaires à l’expression du gène dans les cellules endothéliales ont été identifiées. 

Nous avons également montré que, suite à des traitements par des inhibiteurs de modification des histones, l’expression de la VE-statine était 

inversement régulée dans les fibroblastes et dans les cellules endothéliales. Nous avons établi que les fibroblastes et les cellules endothéliales 

présentent des profils d’acétylation et méthylation des histones différents le long de la région promotrice du gène VE-statine, suggérant une structure 

chromatinienne différente dans les deux types cellulaires. 

L’ensemble de nos résultats suggère donc que l’expression spécifique des cellules endothéliales du gène VE-statine est due à la fois à l’activité d’un 

‘enhancer’ situé en région 5’ du gène et à un ensemble de régulations épigénétiques. 

Mot(s)-clé(s) : Angiogenèse & VE-Statine & Régulation transcriptionnelle & Transgénèse 

LE NAOUR Morgan EA1043 - Pascal BERTHELOT 

Synthèse et évaluation pharmacologique de nouveaux agonistes PPARs alpha/gamma à potentiel antidiabétique. 

Depuis quelques dizaines d’années les pays développés ont vu une importante hausse de la prévalence du diabète de type II et de surcroît de l’obésité 

1. 

Les PPARs (Peroxisome Proliferator-Activated Receptors) sont des facteurs de transcription faisant partie de la superfamille des récepteurs nucléaires2 

qui comprend 3 isoformes alpha, beta, gamma, bien distincts et dont la distribution tissulaire est variée selon les formes. Leurs fonctions biologiques 

sont aussi diverses que la régulation du métabolisme lipidique au niveau hépatique (PPAR alpha), le contrôle de la différentiation adipocytaire (PPAR 

gamma) ou la prolifération cellulaire (PPAR delta).2,3 

La recherche de nouveaux agonistes mixtes alpha/gamma pourrait donc être un axe intéressant dans le traitement de l’insulinorésistance et des 

pathologies associées au diabète de type II ainsi qu’au syndrome métabolique. 

De nombreux composés décrits dans la littérature comme agonistes mixtes alpha/gamma portent un motif alpha-alkoxyacide tel le tésaglitazar4 

(AZ242), aujourd’hui en phase III des essais cliniques en indication pour le traitement du diabète de type 2. 

Ce motif se révèle être très important pour l’activité mixte d’où la nécessité d’une synthèse simple et peu onéreuse. Différentes voies d’accès ont été 

décrites5,6 mais mettent en jeu un nombre important d’étapes ainsi, les travaux effectués au laboratoire ont porté sur une nouvelle méthodologie de 

synthèse en trois étapes et donnant accès à une large variété de motifs alpha-alkoxyacides. 

1 Données OMS 2000. 2 K. Schoonjans, B. Staels, J. Auwerx ; Biochim. Biophys. Acta ; 1996 ; 1302 ;93-109. 3 J. Rieusset, W. Wahli, B. Desvergne ; 

Revue : les récepteurs nucléaires PPARs ; 2001 ; 7/9 ; 656-671. 4 P. Cronet, et al., Structure, 2001, 9, 699-706. 5 D. Haigh, Tetrahedron, 1994, 50, 

3177-3194. 6 D. Lansky, J. Chem. (Slovakian Ed.), 1997, 13, 352-357. 

Mot(s)-clé(s) : agonistes mixtes PPARs 


LEGRAND Fanny U547 - Monique CAPRON 

Etude de la fonction du polynucléaire éosinophile dans les mécanismes de défense antitumorale 

Longtemps considérées comme des cellules principalement dévolues aux réactions allergiques et parasitaires, les éosinophiles se révèlent doués de 

multiples potentialités fonctionnelles. Acteurs importants de l’immunité adaptative, ils sont aussi capables de participer à la réponse immunitaire locale 

en raison de leur localisation tissulaire préférentielle, colonisant spontanément les tissus muqueux. Leur capacité de libération de cytokines, la 

découverte de molécules de co-stimulation et de différents récepteurs de l'immunité innée renforcent l'hypothèse que les éosinophiles puissent 

participer aux processus précoces intervenant dans l'immunité innée. 

Actuellement, la majorité des études sur l’immunité antitumorale porte sur les mécanismes effecteurs des lymphocytes T (immunité adaptative) et des 

cellules natural killer (immunité innée), mais de récentes études in vivo ont suggéré des interactions possibles entre les cellules tumorales et les 

éosinophiles. Il a été observé au cours de nombreux cancers (tumeurs hématologiques ou carcinomes) des éosinophilies sanguines et/ou un 

recrutement péritumoral d’éosinophiles plus ou moins important (appelé TATE : Tumour Associated Tissue Eosinophilia). Bien que chez certains 

patients, ces TATE ont été décrites comme ayant une valeur pronostique positive, peu de choses sont cependant connues sur le rôle exact joué par les 

éosinophiles dans la réponse antitumorale. 

Notre projet de recherche vise à analyser l’activité cytotoxique des éosinophiles vis-à-vis de deux lignées tumorales, un lymphome T et un 

adénocarcinome du côlon, et vise à définir les mécanismes impliqués. Nous avons constaté que les éosinophiles purifiés du sang périphérique 

pouvaient induire in vitro une apoptose plus ou moins importante de ces deux lignées tumorales, ceci grâce à l’intervention d’un récepteur de l’immunité 

innée récemment découvert par notre laboratoire sur l’éosinophile. 

Ce projet de recherche pourra permettre de mieux comprendre le rôle joué par les éosinophiles dans les réactions de défense de notre système 

immunitaire vis à vis du cancer et pourra peut être ainsi ouvrir des perspectives thérapeutiques nouvelles. 

Mot(s)-clé(s) : Tumour Associated Tissue Eosinophilia (TATE) & micro-environnement tumoral & immunité innée 

LY Ousmane EA2694 - Jean-Marc BRUNETAUD 

Apport des technologies de l’information et de la communication dans l’amélioration du système de recueil 

d’information sanitaire au Mali : cas des régions pilotes de Kayes, Koulikoro et Mopti. 

Le système d'information sanitaire du Mali est mis en oeuvre par deux structures du ministère de la santé, qui sont la direction nationale de la santé à 

travers la division prévention et lutte contre la maladie et le centre national d'information et d'éducation en communication pour la santé. La première 

assure la surveillance des maladies transmissibles, les maladies à potentiel épidémique et les maladies cibles du programme élargi de vaccination. A 

cet effet cette division produit un compte rendu hebdomadaire d'information sur la situation des maladies à fort potentiel épidémique à l’attention du 

cabinet du ministre de la santé et publie un bulletin épidémiologique mensuel à l’attention des professionnels de santé. Cette information est récoltée 

auprès de l'ensemble des structures sanitaires périphériques par l'intermédiaire du réseau de rac mis en place à cet effet et pour les besoins de 

référence en cas de complication. Le rac est un système de communication par radiofréquence qui équipe l'ensemble des centres de santé 

communautaire, centres de santé de référence, hôpitaux secondaire et régionaux. 

Les activités de cette division feront l’objet de notre étude. Qui consistent à analyser les données qui proviennent des messages RAC journaliers, des 

enquêtes sur le terrain ainsi que des missions de supervision du personnel impliqué dans les activités de surveillance épidémiologique intégrée et de 

riposte aux épidémies. Les informations remontent progressivement des centres de santé périphériques vers la division en passant par les centres de 

santé de référence de cercle et les directions régionales de la santé. 

Les maladies actuellement sous surveillance sont : la méningite cérébro-spinale, la rougeole, la fièvre jaune, le choléra, les paralysies flasques aiguës, 

le tétanos maternel et néonatal, le paludisme et la dysenterie bacillaire. 

Le dispositif de remontée de l’information utilise classiquement les formulaires papiers et les registres de notification au sein des centres de santé. La 

radiophonie médicale est utilisée pour transmettre quotidiennement, hebdomadairement ou mensuellement les relevés effectués. 

L’une des faiblesses de ce système est la perte d’information lors du recueil sur les supports papiers et lors de la transmission radiophonique des 

données. L’autre faiblesse est l’absence de standard d’exploitation des données entre les différents niveaux du circuit de recueil et de remonté des 

informations. 

Ce système classique peu être améliorer par la proposition d’un modèle standard et on proposera un modèle évolué utilisant les nouvelles technologies 

de l’information et de la communication. Ces deux modèles complémentaires seront mis en service dans une phase test dans les régions de Kayes, 

Koulikoro et Mopti. 

Pour le système classique on procédera à : 

- L’état des lieux du système de recueil d'information sanitaire 

- L’analyse de cet système: force, faiblesse et qualité. 

- Etude des support de recueil de donnée: formulaires et fiches d'investigation 

- Proposition d’un modèle standard pour le système classique 

- Test et mise en exploitation de ce modèle 

Pour le système évolué on procédera à : 

- Proposition de modèle informatique pour les supports du système classique 

- Recueil rétrospectif de donnée sur ces supports 

- Sur les pathologies faisant l'objet d'une surveillance épidémiologiques continues, le choléra sera choisi comme pathologie d'étude 

- Développement de version informatique orientée web service: intégrant des système de calcul automatique des indicateurs statistique (Khi 

carré, Médiane , Ratio etc.) 

- Ajout des fonctionnalités de statscan: permettant de coupler les données statistiques à un système d'information géographique, avec sortie de 

résultats sous forme de cartes et de graphiques. 

- Analyse des bénéfices que peut apporter un tel système en terme de rapidité et de qualité. 

Mot(s)-clé(s) : Informatique Médicale & Système d'information sanitaire & TICs & Statistiques médicales 


MELCHIOR Aurelie UMR8576 - Joël MAZURIER 

Rôle de la cyclophiline B dans la migration des macrophages 

La cyclophiline B (CyPB) est une peptidyl prolyl cis/trans isomérase initialement décrite pour sa propriété à réguler l’activité d’un médicament 

immunosuppresseur, la cyclosporine A. Elle possède une activité chimiotactile pour les lymphocytes T et induit leur adhérence à la fibronectine via 

l’activation des intégrines. Ces réponses sont dépendantes de sa fixation sur son récepteur composé du CD147 et du syndécan-1. Présente dans la 

matrice extracellulaire, elle est libérée en réponse à des stimuli inflammatoires. Les macrophages seraient donc les premières cellules inflammatoires 

susceptibles d’être stimulées par la CyPB. Pour vérifier cette hypothèse, nous utilisons comme modèle cellulaire, la lignée THP1 différenciée en 

macrophage. Comme pour les lymphocytes T, la CyPB induit la migration des cellules THP1 et l’activation des intégrines. L’étude des voies de 

signalisation révèle que l’activité de la CyPB est dépendante de l’activation des MAPK p44/p42, d’une protéine kinase C atypique, la PKC delta, et 

d’une PI-3 kinase. Un traitement des cellules par la CyPB induit la sécrétion de métalloprotéinases (MMP-9), suggérant que la CyPB induit un 

mécanisme impliqué dans la dégradation de la matrice extracellulaire. De plus, l’exposition prolongée des cellules à la CyPB augmente leur sensibilité à 

la chimiokine RANTES (CCL5), ce qui est corrélée à une surexpression de son récepteur membranaire CCR5. Ces données suggèrent que la CyPB 

pourrait intervenir dans la régulation des différents mécanismes favorables à la migration des macrophages vers le site de l’inflammation. 

Mot(s)-clé(s) : Cyclophiline B & macrophage & inflammation 

MEURICE Edwige UMR8576 - Stanislas TOMAVO 

Etude fonctionnelle de deux facteurs de transcription putatifs associés à la TBP chez Plasmodium falciparum : 

pfTAF10 et pfTAF7 

Les mécanismes de régulation de l’expression des gènes sont encore mal connus chez Plasmodium falciparum, l’agent causatif du paludisme. Les 

études transcriptomiques effectuées à ce jour montrent qu’il existe une régulation extrêmement fine de l’expression des gènes au cours du 

développement parasitaire. En revanche, l’analyse du génome de Plasmodium falciparum après son séquençage en 2002, n’a révélé à ce jour que très 

peu de facteurs régulant la transcription chez le parasite y compris les facteurs de transcription généraux tels que ceux associés à l’ARN polymérase II. 

C’est dans ce contexte que la méthode de prédiction HCA (Hydrophobic Cluster Analysis) a été utilisée pour retrouver ces facteurs. Cette méthode de 

reconnaissance des structures secondaires a permis d’éviter le biais en acides aminés introduit par la richesse en AT du génome et d’identifier 

plusieurs facteurs de transcription généraux associés à l’ARN polymérase II (Callebaut et al, 2005) dont 2 TAFs (« TBP-associated factors »), 

composant la TFIID : pfTAF10 et pfTAF7. 

La transcription des 2 gènes a été mise en évidence par RT-PCR dans les stades intra-érythrocytaires de Plasmodium falciparum, éliminant la 

possibilité que les logiciels aient identifié des pseudogènes. Nous avons donc entrepris de caractériser ces deux protéines. 

Le premier facteur, TAF10, est connu pour interagir séparément avec 3 protéines : TAF3, TAF8 et SPT7. Nous avons mis en évidence par GSTpulldown 

que le pfTAF10 interagit avec ses homologues humain TAF8 et SPT7, mais pas avec TAF3. Il semble donc qu’une partie des fonctions de 

TAF10 soient conservées chez Plasmodium. Néanmoins, aucun de ses partenaires n’a pu être identifié dans le génome de Plasmodium, mais il est 

possible qu’une grande divergence ne permette pas de les identifier actuellement par des approches bioinformatiques. Nous envisageons donc de 

purifier les partenaires de pfTAF10, par GST-pulldown ou immunoprécipitation des protéines parasitaires. A ce jour, nous n’avons pu mettre en 

évidence la présence de la protéine pfTAF10 dans le parasite, soit parce que la quantité de protéine est trop faible, soit parce que l’affinité de l’anticorps 

synthétisé à partir de pfTAF10 recombinant n’est pas suffisante. 

Chez Saccharomyces cerevisiae, TAF10 régule l’expression de gènes impliqués dans la progression du cycle cellulaire et chez la drosophile, la souris 

et l’homme, il régule l’expression de gènes de la différenciation. Afin de déterminer si pfTAF10 assure le même genre de régulation et de résoudre les 

difficultés rencontrées avec les anticorps polyclonaux, nous sommes en train de créer des parasites transgéniques sur-exprimant pfTAF10 par la 

transfection d’un vecteur d’expression spécifique de Plasmodium falciparum. Le second facteur de transcription TAF7, qui fait également l’objet de notre 

étude, est connu comme une des clés du démarrage de la transcription par l’ARN polymérase II : la dissociation de TAF7 de son partenaire TAF1, dont 

il inhibe l’activité acétyltransférasique, coïncide avec la mise en mouvement du complexe de transcription. Nous avons produit plusieurs protéines 

recombinantes exprimant pfTAF7, tronquée ou complète, qui serviront à caractériser ce facteur de transcription. L’étude de ces deux TAFs a pour but 

de mieux préciser les mécanismes de la transcription chez Plasmodium falciparum afin de dégager les points de convergence et/ou de divergence par 

rapport à la transcription chez les eucaryotes supérieurs. Ensuite, de part leur rôle de médiateur entre le complexe de transcription basal et les facteurs 

de transcription spécifiques, les TAFs pourraient nous permettre d’isoler des facteurs spécifiques du parasite. 

Callebaut I, Prat K, Meurice E, Mornon JP, Tomavo S. (2005) Prediction of the general transcription factors associated with RNA polymerase II in 

Plasmodium falciparum : conserved features and differences relative to other eukaryotes. BMC Genomics. 6:100. 

Mot(s)-clé(s) : TBP-associated factor (TAF) & Plasmodium falciparum & facteur de transcription 


MORTIER Laurent U459 - Philippe MARCHETTI 

Arguments en faveur de l’engagement précoce d’un processus apoptotique spontané des cellules dendritiques 

matures. 

Introduction : Les essais cliniques de vaccination antitumorale utilisant les cellules dendritiques matures (Dcm) montrent une réponse antitumorale de 

type CTL. Mais ces réponses sont inconstantes et généralement transitoires. Une des hypothèses pour expliquer ces effets limités serait que les Dcm 

meurent rapidement par apoptose après réinjection, avant d’atteindre le ganglion pour stimuler le système immunitaire 72h après. L’apoptose des Dcm 

serait alors un mécanisme d’échappement des tumeurs à la vaccinothérapie par cellules dendritiques (DC). Afin détailler cette hypothèse nous avons 

voulu vérifier si les Dcm humaines étaient douées d’apoptose spontanée et chercher à comprendre les processus mis en œuvre en étudiant de manière 

comparative l’expression d’un panel de gènes intervenant dans l’apoptose à deux temps de la culture : en fin de la maturation (J6) et après 24h 

d’évolution spontanée (j7) (GEArray Q series Human ApoptosisTM (Superarray®)). Enfin, nous avons voulu corréler ces variations d’expression 

génique à l’apparition d’événements précoces de l’apoptose en étudiant, aux mêmes temps, la libération du cytochrome C de la mitochondrie vers le 

cytosol et l’activation de la caspase 3. Résultats : Sur 96 gènes analysés, 1 gène est sur-exprimés (Bim) et 6 gènes sont sous-exprimés dans les mDCs 

à J7 lors de l’analyse Superarray® (C-Flip, Mcl-1, Bcl-X, Ripk2,Fas, TNFR10) . Après RT-PCR, nous avons confirmé que sont sous-exprimés à J7 

significativement Bcl-X (p=0,0313), C-Flip (p=0,0313), Fas (p=0,0313). Il y a donc, 24 h après maturation, une dérégulation de l’expression génique de 

protéines anti-apoptotiques tels qu’un inhibiteur de la voie intrinsèque Bcl-X et un inhibiteur de la voie extrinsèque c-Flip. D’autre part, nous avons 

montré que des manifestations précoces de l’apoptose apparaissent de manière simultanée à ces modifications d’expression génique. En effet, 24h 

après maturation, nous avons mis en évidence, dans une grande majorité des cellules, une libération du cytochrome C de la mitochondrie vers le 

cytosol accompagnée d’une activation de la caspase 3. Conclusion : Nous avons donc démontré que les Dcm entent spontanément en apoptose in 

vitro, rapidement après la maturation, en réponse à un programme génétique comme le suggère la dérégulation des gènes de Bcl-X et c-Flip. Ce 

phénomène, s’il se déroule in vivo après réinjection des Dcm à un patient, pourrait expliquer en partie les échecs à la vaccination antitumorale. Enfin, la 

compréhension des mécanismes impliqués dans l’apoptose spontanée des Dcm pourra, à terme, nous aider à optimiser de manière rationnelle les 

protocoles de préparation des Dcm afin d’améliorer les réponses antitumorales. 

Mot(s)-clé(s) : cellules dendritiques & apoptose & cancer 

NGOUANESAVANH Tra My EA3609 - Jean-Charles CAILLIEZ 

Epidémiologie moléculaire de la cryptosporidiose en France et en Haiti : Caractérisation génétique et 

phénotypique des variétés infra spécifiques de Cryptosporidium (Protiste Apicomplexa). 

Les coccidies du genre Cryptosporidium peuvent infecter le tractus gastro-intestinal de nombreuses espèces de vertébrés dont l’homme. Elles sont 

l’agent étiologique de la cryptosporidiose, maladie émergente et cause reconnue de diarrhée chronique grave chez le patient sidéen. Des diarrhées 

sévères de plus en plus fréquentes chez les individus immunocompétents, soit de façon sporadique, soit en contexte épidémique, ont également été 

reportées, faisant de Cryptosporidium un réel problème de santé publique. Ubiquitaires, persistants et résistants à la désinfection (chloration), ces 

parasites représentent un risque infectieux environnemental non négligeable. L’identification des espèces et génotypes du parasite est essentielle pour 

résoudre les sources, voies et mécanismes de l’infection, mais elle est rendue difficile par l’insuffisance des clés usuelles de la taxonomie (morphologie, 

spécificité d’hôte). 

Dans ce contexte, la stratégie de ce travail est double : Une approche moléculaire basée sur la combinaison de marqueurs mini- et microsatellites, très 

polymorphes, a identifié 34 groupes parmi 117 isolats parasitaires humains et animaux, de France et de Haïti. A partir de ces génotypes multiloci, une 

analyse de génétique des populations a révélé une structure génétique à prédominance clonale, malgré l’existence d’un stade sexuel obligatoire au 

cours du cycle biologique de Cryptosporidium. Il s’agit d’une donnée essentielle pour estimer la stabilité spatio-temporelle des génotypes, dont 

dépendent la possibilité de traçage du pathogène dans les écosystèmes ainsi que les risques de propagation des résistances aux antiparasitaires. 

D’autre part, afin de définir l’impact médical et épidémiologique de ces populations (transmissibilité, pouvoir pathogène, distribution géographique), il est 

nécessaire de les caractériser d’un point de vue phénotypique, in vitro sur culture cellulaire (système de cellules épithéliales intestinales humaines HCT- 

8) et in vivo, grâce à des modèles murins (modèle de souris génétiquement immunodéprimées SCID). De tels systèmes permettront dans un premier 

temps de comparer les différences phénotypiques d’une espèce de Cryptosporidium à une autre. Ils seront ensuite affinés afin de permettre une 

discrimination à un niveau infra spécifique. 

Mot(s)-clé(s) : Cryptosporidium & microsatellite & génétique des populations & modèles d'infection 


OUK Thavarak EA1046 - Régis BORDET 

Conséquences vasculaires des processus d'ischémie-reperfusion cérébrales : approches pharmacologiques des 

phénomènes de plasticité et de récupération fonctionnelle 

A la phase aiguë des accidents vasculaires cérébraux, les stratégies thérapeutiques reposent essentiellement sur l’utilisation d’agents fibrinolytiques à 

usage limitée en raison d’une fenêtre thérapeutique courte et de l’incidence des hémorragies intra-cérébrales. L’échec des traitements neuroprotecteurs 

évalués en thérapeutique humaine explique l’intérêt de la modulation d’autres cibles pharmacologiques, y compris vasculaires. 

Ce travail a pour objectif de déterminer par plusieurs approches pharmacologiques si la paroi vasculaire pourrait représenter une cible pharmacologique 

pertinente à la phase aiguë du processus d’ischémie-reperfusion en testant plusieurs hypothèses : (i) l’induction d’une neutropénie prévient des 

complications hémorragiques induites par la fibrinolyse (ii) l’activation des récepteurs nucléaires PPAR-α (à actions anti-inflammatoire et antioxydante) 

induit une protection cérébro-vasculaire associée à une diminution des hémorragies intra-cérébrales (iii) une stratégie antioxydante permet 

une protection vasculaire et cérébrale parallèlement à une récupération fonctionnelle. 

Nous avons utilisé un modèle d’occlusion intraluminale de l’artère cérébrale moyenne et un modèle de complications hémorragiques par le rtPA chez le 

rat afin de simuler une ischémie cérébrale. Le volume d’infarctus des animaux ischémiés était déterminé par histomorphométrie. Les complications 

hémorragiques ont été quantifiées de façon visuelle, au moment de la coupe des cerveaux. Quant à l’analyse de la réactivité vasculaire, elle se faisait à 

l’aide de l’artériographe d’Halpern : la relaxation endothélum-dépendante ainsi que la relaxation musculaire lisse dépendante des canaux Kir2.1 étaient 

ainsi évaluées. Pour étudier le rôle des polynucléaires neutrophiles, une neutropénie était induite par injection de vinblastine ou d’un anticorps 

monoclonal anti-RP3 avant l’ischémie. Dans un second protocole, le fénofibrate, activateur synthétique des récepteurs nucléaires PPAR-α, était 

administré par gavage bi-quotidien des rats pendant 72 heures après l’ischémie. Enfin dans un dernier protocole, des rats étaient traités par la 

stobadine, antioxydant de synthèse, à 1h et 6h de l’ischémie. Ces rats étaient sacrifiés soit à 24h, 72h ou 7jours de reperfusion. 

L’induction d’une neutropénie par la vinblastine diminuait les complications hémorragiques associées à une prévention de la dysfonction endothéliale 

post-ischémique et à une diminution du volume d’infarctus. Par contre l’inactivation des polynucléaires neutrophiles par un anticorps monoclonal 

prévenait uniquement les altérations vasculaires post-ischémiques en parallèle d’une diminution des complications hémorragiques. 

Le fénofibrate, administré à la phase aiguë de l’ischémie, protégeait des altérations vasculaires post-ischémiques en parallèle d’une diminution des 

lésions ischémiques et des complications hémorragiques. 

Un traitement des rats par la stobadine à la phase aiguë de l’ischémie permettait une récupération fonctionnelle à 7 jours en comparaison des animaux 

traités par le véhicule. La stobadine prévenait la dysfonction endothéliale mais n’accélérait pas la restauration de la relaxation musculaire lisse 

dépendante des canaux Kir2.1. 

En conclusion, la protection des vaisseaux sanguins cérébraux après une ischémie- reperfusion suivie ou non d’une fibrinolyse apparaît 

comme une cible intéressante susceptible de prévenir la maturation de l’ischémie cérébrale et éventuellement les complications hémorragiques. Les 

récepteurs nucléaires PPAR-α représentent expérimentalement une stratégie thérapeutique potentielle de protection de la paroi vasculaire au 

décours du processus d’ischémie-reperfusion et de fibrinolyse, posant la question de la pertinence de cette protection fonctionnelle dans l’installation 

d’une neuroprotection. Des travaux complémentaires seront nécessaires pour déterminer les mécanismes moléculaires de ces protections vasculaire et 

cérébrale. 

Mot(s)-clé(s) : ischémie cérébrale & paroi vasculaire & thrombolyse & PPAR-alpha 

PELAYO Sylvia EA2694 - Paul FRIMAT 

La coopération médecin-infirmier au sein du circuit du médicament à l’hôpital:modalités d’ajustement du 

référentiel commun et conséquences pour l’informatisation des situations de travail 

La publication du rapport « To Err is Human » a bouleversé l’intérêt porté à la gestion des risques en Santé. Il met effectivement l’accent sur les 

nombreuses erreurs qui interviennent lors de la prise en charge médicale d’un patient, notamment au cours du processus de prescription – 

administration des médicaments. Aux Etats Unis, pour la seule année 1997, environ 98000 morts seraient imputables aux erreurs médicales en milieu 

hospitalier. Les erreurs concernant les médicaments seraient responsables de « seulement » 7000 décès. En France, de telles estimations chiffrées ne 

sont pas disponibles, mais l’absence de mesure ne signifie évidemment pas que ce problème de santé publique n’existe pas. 

L’informatisation du processus de prescription thérapeutique en milieu hospitalier est considéré par beaucoup comme LA solution pour améliorer sa 

qualité. De nombreuses études ont confirmé l’impact positif de ces systèmes qui permettent de diminuer significativement les taux d’erreurs 

médicamenteuses et d’accidents iatrogéniques. Toutefois leur implémentation demeure extrêmement difficile. En effet, l’impact de l’introduction d’un tel 

système sur la structuration du travail individuel, mais surtout coopératif est indéniable. Il déstabilise la nature profonde de l’activité coopérative entre le 

médecin et l’infirmier et génère ainsi des erreurs et des risques nouveaux pour le patient. Les objectifs de la thèse sont de (1) modéliser les activités 

coopératives mises en œuvre dans le processus et (2) évaluer l’impact de l’introduction d’un système informatisé sur les situations de travail et au final 

sur le contrôle de processus. Les résultats obtenus permettront de mettre en lumière les facteurs critiques dans une telle situation de travail et ainsi de 

prévenir les nouveaux risques et erreurs non anticipables provoqués par l’introduction d’un système nouveau. 

Globalement, le cadre théorique et la méthode employés ont permis de modéliser les activités coopératives mises en jeu dans les situations de travail « 

traditionnelles », c’est-à-dire avec un dispositif papier et de mettre en lumière les facteurs « déterminants » pour un processus de prescription 

thérapeutique sécurisé et de qualité. L’ajustement des prescriptions thérapeutiques se fait essentiellement pendant le tour médical pour lequel deux 

types d’organisations peuvent exister entre le médecin et l’infirmière : une coopération synchrone lorsque l’infirmière accompagne le médecin lors de 

son tour et une coopération asynchrone lorsque le médecin fait le tour seul. Le partage des informations est facilité lorsqu’il y a une coopération 

synchrone au lit du malade. Les deux acteurs peuvent échanger directement et simultanément les informations, ce qui permet d’obtenir un ordre 

négocié, tenant compte des contraintes de chacun et facilitant l’exécution de la tâche pour chacun des partenaires. Les deux acteurs, en partageant 

leurs connaissances et représentations complémentaires de la situation, peuvent prendre en charge le patient efficacement avec chacun une vision 

globale sur le processus. Dans la situation de coopération asynchrone, l’absence d’échanges synchrones systématiques génère des ordres davantage 

détaillés, mais qui paradoxalement induisent plus d’incertitude et d’anxiété chez les infirmiers. Dans cette situation de coopération asynchrone, les 

acteurs fonctionnent « à l’aveugle » quant aux informations échangées pendant le tour, ce qui fragilise le bon déroulement du processus de prescription 

thérapeutique. Ces résultats doivent maintenant être généralisés aux situations de travail informatisées. Tout au moins, un outil de soutien à cette 

activité ne devrait pas seulement permettre la coordination des actions et la planification des prescriptions thérapeutiques, mais devrait également 

permettre la transmission des informations nécessaires au contrôle du processus pour l’ensemble des acteurs et ainsi leur permettre une vision globale 

sur ce processus. 

Mot(s)-clé(s) : ingénierie des facteurs humains & circuit du médicament & coopération synchrone/asynchrone & Aspects cognitifs 


PHAM Van Minh EA2683 - André THEVENON 

ETUDE DES PRESSIONS APPLIQUEES PAR CORSET DE CHÊNEAU POUR CORRECTION D'UNE SCOLIOSE 

IDIOPATHIQUE DE L'ADOLESCENT 

INTRODUCTION 

Dans les scolioses, les corsets cherchent à réduire les courbures vertébrales par l'application de pressions appliquées sur le tronc. Il existe cependant 

peu d'étude quantitative des pressions effectivement appliquées. Nous avons voulu tester une méthode de mesure des pressions d'interface entre 

corset et peau, apprécier l'effet de la tension des sangles et analyser la variabilité de ces pressions en différentes positions. 

MATERIEL ET METHODE 

Etude prospective portant sur 20 patients (1 garçon et 19 filles) présentant une scoliose idiopathique traitée par corset de Chêneau. L'âge moyen est 

de 13,3 ± 1,9 ans. Douze patients ont des courbures dorsales droites, 8 ont des courbures dorso-lombaires droites. Sans corset l'angle moyen de Cobb 

était de 30,9 ± 6,9 pour les scolioses dorsales droites et 33,6 ± 7,3 pour les scolioses dorso-lombaires droites. Nous avons utilisé le système Tekscan. 

Celui comprend un capteur de pression Clinseat inséré dans une poignée d'interface et relié à un connecteur USB. Deux essais à 15' d'intervalle sont 

réalisés.Lors du premier essai les tensions des sangles sont déterminées de façon empirique par le médecin consultant. Lors du second essai les 

sangles sont resserrées de 2 cm. Pendant chaque essai on demande au patient d'assumer 9 positions correspondant à des tâches ordinaires. 

RESULTATS 

Le matériel permet d'identifier les zones de pression correspondant aux points d'appui du corset. Le resserrement des sangles entraîne dans chaque 

cas une augmentation significative des pressions quelque soit la position étudiée et le type de scoliose. Le décubitus latéral droit augmente 

significativement l'effet correcteur du corset (p

POURCET Benoit U545 - Corine GLINEUR 

Rôle des phosphorylations sur la régulation de l’activité du récepteur nucléaire Peroxisome Proliferator- 

Activated Receptor alpha (PPARα) 

PPARα est un facteur de transcription appartenant à la famille des récepteurs nucléaire. Il régule l’expression de gènes en se liant à des éléments 

de réponse spécifiques sous la forme d’hétérodimères avec le récepteur nucléaire RXRα (Retinoid X Receptor). PPARα joue un rôle 

important dans la régulation du métabolisme des lipides, des lipoprotéines et dans le contrôle de la réponse inflammatoire. Ces différentes fonctions lui 

confèrent donc un rôle protecteur contre l’athérosclérose. 

L’activité de PPARα peut être régulée de différentes manières. Il est activé par des ligands naturels tels que les acides gras ou par des ligands 

synthétiques tels que les fibrates. De plus, différents stimuli comme l’insuline, le glucose peuvent modifier l’expression de cette protéine. PPARα 

est une protéine instable qui peut être dégradée par le système ubiquitine/proteasome. Enfin, les phosphorylations représentent un mécanisme majeur 

impliqué dans la régulation de l’activité de PPARα. Nous avons montré que les Proteines Kinases C/PKC sont capables de phosphoryler 

PPARα au niveau des résidus sérine S179 et S230 du domaine charnière situé entre le domaine de liaison à l’ADN et le domaine de liaison au 

ligand. 

Notre projet consiste à comprendre le mécanisme d’action des PKC sur l’activité de PPARα. Différents mutants de la protéine PPARα ont 

été générés: la protéine mutante PPARα S179,230A dans laquelle les deux résidus cibles des PKC ont été remplacés par des résidus alanine (A) 

non phosphorylables et la protéine mutante PPARα S179,230D dans laquelle les résidus Ser ont été remplacés par des résidus aspartates (D) 

capables de mimer la charge négative du phosphate. La protéine mutante S179,230D pourrait donc agir comme une protéine constitutivement 

phosphorylée. Tandis que PPARα S179,230A a une activité transactivatrice ligand-dépendante significativement réduite suggérant que la 

phosphorylation des S179 et S230 favorisent l’activation par le ligand, la protéine mutante PPARα S179,230D a une activité transactivatrice 

basale et dépendante du ligand réduite. 

Nous avons montré que cette diminution d’activité n’est pas liée à un défaut de conformation ou de localisation cellulaire de la protéine mais à une 

liaison différentielle avec ses cofacteurs. Ainsi, la protéine mutante PPARα S179,230D est plus exprimée dans les cellules que la protéine 

sauvage suggérant une augmentation de sa stabilité. De plus, nous avons montré précédemment que le co-répresseur nucléaire N-CoR stabilise la 

forme sauvage de PPARα. Enfin, nos résultats montrent que la surexpression de la protéine N-CoR stabilise davantage la protéine mutante 

PPARα S179,230D. Le remplacement des S179 et S230 par un acide aspartique favorise donc l’interaction de PPARα avec N-CoR. De 

plus, nous avons montré que la surexpression de la protéine RXRα permet d’augmenter l’activité transcriptionnelle de PPARα S179,230D 

de manière significative suggérant que la phosphorylation des résidus S179 et S230 pourraient moduler l’interaction de PPARα avec RXRα. 

La partie amino terminale de PPARα contient une région d’activation, AF-1, dont la fonction est indépendante du ligand et dépendante de la 

phosphorylation par les MAPKinases (mitogen activated protein kinase). Puisque la protéine PPARα S179,230D a perdu son activité basale, nous 

avons émis l’hypothèse que le remplacement des S179 et S230 par des Asp pourrait bloquer la phosphorylation des sérines cibles des MAPK (S12 et 

S21). Nous allons donc étudier l'activité de mutants de PPARα combinant le remplacement des Ser cibles des MAPK et des PKC par une Ala ou 

un Asp. 

En conclusion, il est probable que la phosphorylation de PPARα par les PKC favorise son interaction avec ses corépresseurs permettant ainsi la 

constitution d’une réserve nucléaire de PPARα rapidement mobilisable et active pour une réponse métabolique immédiate. 

Mot(s)-clé(s) : PPARalpha & PKC & regulations post-traductionnelles 

RZEPKA Marie-Amelie EA2690 - Chantal VAN HALUWYN 

Epuration de l’air intérieur par les plantes : Rendement épuratoire et effets du formaldéhyde, de composés 

organiques volatils, et du monoxyde de carbone observés chez 3 plantes test exposées en laboratoire. 

Diverses études ont montré que la qualité de l'air est, pour de nombreux polluants, moins satisfaisante à l'intérieur qu'à l'extérieur des bâtiments. Or, la 

majorité des citadins passe environ 80 à 90 % de leur temps à l'intérieur d'ouvrages construits ; la maîtrise de la pollution des ambiances intérieures 

apparaît donc essentielle. Pendant les années 80, le Dr Bill WOLVERTON, chercheur à la NASA, a commencé à mettre en évidence le pouvoir 

épurateur de certaines plantes d'intérieur sur des polluants tels que le formaldéhyde, le benzène ou le monoxyde de carbone. Dans le même esprit, en 

association avec le CSTB, nous menons actuellement des travaux sur les capacités épuratoires des plantes d’intérieur et les effets des polluants sur 

celles-ci. 

Les différents gaz étudiés sont introduits dans une enceinte expérimentale étanche de 300L, en verre, qui contient les plantes testées (6 Chlorophytum 

comosum, 6 Dracæna marginata ou 6 Scindapsus aureus). Les paramètres d’exposition (notamment le taux d’humidité relative) sont contrôlés et le 

suivi de la teneur en gaz dans l’enceinte nous permet de déterminer les cinétiques d'élimination sur 24 heures. 

Selon les premiers résultats, la vitesse d’épuration du polluant et la quantité éliminée varient en fonction de sa nature et de l’espèce utilisée. Ainsi le 

monoxyde de carbone est éliminé en totalité en moins de 24 heures, contre 55% pour le formaldéhyde. Au niveau des plantes, Chlorophytum comosum 

semble être l’espèce la plus efficace, suivie de Scindapsus aureus pour l’élimination du formaldéhyde. 

Les polluants se comportent différemment au sein des plantes. En effet, la quantité de toluène dosée dans les feuilles est proportionnelle à la quantité 

injectée, alors que nous n’y retrouvons pas de benzène. Quant au formaldéhyde, il est utilisé dans le métabolisme de la plante. 

Nous n’observons pas d’effet macroscopique des polluants sur les végétaux. En revanche, le test comètes, pratiqué sur des plantes exposées sous 

cloche à différentes concentrations de benzène a permis de mettre en évidence un effet génotoxique de ce polluant proportionnel à sa concentration. 

Les dosages de glutathion montrent une tendance à la diminution de la forme réduite en fonction de la concentration en polluant, ce qui étaye 

l’hypothèse d’un stress oxydant subi par la plante, mais aussi, dans le cas du benzène, de l’existence possible de mécanismes de conjugaison. 

Actuellement, nous complétons ces résultats par le dosage de marqueurs de stress oxydant enzymatiques tels que l’ascorbate peroxydase et la 

guaiacol peroxydase. En outre, d’autres paramètres physiologiques, tels que la photosynthèse seront étudiés. 

Mot(s)-clé(s) : épuration de l'air intérieur & plante & génotoxicité & stress oxydant 


SABAOUNI Ahmed EA1043 - Said YOUS 

Conception et synthèse de dérivés benzofuraniques, ligands potentiels des récepteurs mélatoninergiques 

La mélatonine (1) est une neurohormone synthétisée la nuit, principalement par la glande pinéale. Son intervention dans de nombreux processus 

physiologiques ne fait plus aucun doute et justifie les recherches intenses qui lui sont consacrées. Ses perspectives thérapeutiques essentielles 

concernent la resynchronisation des rythmes biologiques comme par exemple le cycle veille-sommeil dans les cas du décalage horaire, du travail posté 

et des désordres affectifs saisonniers. Toutefois l’intérêt thérapeutique de la mélatonine se trouve limité par un certain nombre d’inconvénients : temps 

de demi-vie court et action ubiquitaire, due notamment à sa lipophilie et à la pluralité de ses récepteurs. Chez l’homme, deux sous-types réceptoriels 

MT1 et MT2 ont été clonés et séquencés mais leur rôle physiologique et leur mécanisme d’action restent à clarifier. L’objectif de ce travail réside dans la 

conception et la synthèse de nouveaux ligands mélatoninergiques qui serviraient d’outils pharmacologiques et qui, en outre, pourraient conduire à la 

découverte de nouvelles approches thérapeutiques. 

Mot(s)-clé(s) : mélatonine & agomélatine 

SCHIKORSKI David FRE 2933 - Michel SALZET 

Peptides intervenant dans les phénomènes de neuroprotection/régénération du système nerveux central chez la 

sangsue Hirudo medicinalis 

Lorsqu’il est endommagé et/ou infecté, le système nerveux central (SNC) des vertébrés est capable de mettre en place une réponse immunitaire innée 

puis une réponse adaptative bien organisée. Une certaine dualité existe en ce qui concerne les effets des molécules et des cellules de l’immunité 

engagées dans ces processus. Certaines seraient bénéfiques en participant à la réparation et/ou la protection alors que d’autres seraient néfastes en 

prenant part à la dégénérescence neuronale caractéristique des neurones de SNC lésé ou infecté de vertébrés. 

Chez les invertébrés, très peu de données nous renseignent sur l’immunité du SNC. Nos premiers résultats suggèrent l’existence d’une réponse 

immunitaire au sein du SNC de notre modèle la sangsue Hirudo medicinalis. Contrairement à ce que l’on observe chez les vertébrés, la réponse 

immunitaire chez la sangsue ne semble pas développer d’effets délétères puisqu’elle est capable de régénérer entièrement son SNC après lésion. Sur 

ces bases, nos objectifs sont de déterminer par une approche ciblée le rôle des molécules et des cellules « immunitaires » du SNC de la sangsue 

impliquées lors des phénomènes de neuroprotection/réparation. 

A l’heure actuelle, différentes approches à la fois biochimiques et moléculaires ont permis de caractériser des peptides pouvant intervenir dans les 

phénomènes de protection et/ou de réparation du SNC de la sangsue Hirudo medicinalis. Ainsi des cultures différentielles de chaînes nerveuses lésées 

nous ont permis d’isoler par HPLC un nouveau peptide antimicrobien particulièrement intéressant car exprimé au sein du SNC. Ce peptide joue un rôle 

important dans la protection du site de lésion vis-à-vis des pathogènes. En ce qui concerne la réparation, tout comme chez les vertébrés, un 

recrutement des cellules microgliales est observé après lésion du SNC chez la sangsue. La cytokine proinflammatoire EMAP-II (endothélial monocyte 

activating factor II) bien connue chez les vertébrés pour son rôle dans le recrutement des cellules microgliales au site de lésion du SNC, a été retrouvée 

chez la sangsue Hirudo medicinalis grâce aux banques d’EST embryonnaires. 

La caractérisation de ces molécules mais également l’étude combinée de leurs rôles fonctionnels dans un système biologique simple nous permettra 

peut-être de mieux comprendre les processus liés à la régénération totale du SNC chez la sangsue Hirudo medicinalis. 

Mot(s)-clé(s) : Peptide antimicrobien & immunité & régénération & sangsue 


SIMERABET Malika EA1046 - Benoit VALLET 

les premieres minutes de reperfusion une autre fenêtre de protection 

L’accident vasculaire cérébral constitue l’un des problèmes majeurs de santé publique dans les pays industrialisés. Les possibilités thérapeutiques étant 

limitées, la reperfusion reste le traitement de choix à la phase aigue de l’infarctus. Un nouveau concept baptisé récemment « postconditionnement », 

s’est avéré capable de protéger le cœur et de réduire la taille de l’infarctus, il s’agit de succession de brèves occlusion-reperfusion au décours 

immédiat d’une occlusion nécrosante, cette manœuvre correspond à une modulation de la reperfusion. 

L'objectif de ce travail était de tester si cette nouvelle approche de modulation de la reperfusion à la phase aigue d’une ischémie cérébrale 

expérimentale, permet l’installation d’un effet neuroprotecteur. Et ensuite étudier les mécanismes mis en jeu dans cette cytoprotection, notamment 

l’implication du canal potassique mitochondrial ATP dépendant mito K ATP, le monoxyde d’azote NO, les espèces réactives de l’oxygène ROS et le 

pore de transition de la perméabilité membranaire mitochondriale mptp. 

L’ischémie cérébrale est induite par occlusion endoluminale de l’artère cérébrale moyenne chez le rat pendant 60 minutes suivie de 24 heures de 

reperfusion. Le postconditionnement ischémique (postC) est réalisé après la période de l’ischémie, par l’application de 3 cycles de 30 sec d’ischémiereperfusion 

I/R à partir de la première minute de la reperfusion. Un troisième groupe le postconditionnement retardé pour lequel les séquences I/R de 

30 sec sont décalées de 5 minutes de reperfusion. 

L’implication du canal potassique était vérifiée par l’administration de diazoxide (10 mg/kg), un agoniste sélectif du mito K ATP, et de 5hydroxydécanoate 

5-HD (40 mg/kg), un antagoniste spécifique du mito K ATP. Le N (oméga)-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME), un inhibiteur de 

toutes les isoformes de la NO synthétase a été administré pour démontrer le rôle du NO. Pour caractériser la relation entre le mito K ATP et le NO, 

nous avons administré le nitroprussiate de sodium snp (3mg/kg/min), un donneur de NO avec le 5-HD, un deuxième groupe a été traité par (diazoxide 

+L NAME). La ciclosporine A (10mg/kg, i.v) a été administrée pour mettre en évidence le rôle du mptp dans l’effet du postC 

le postC induit une neuroprotection qui se traduit par une diminution de 41% de la taille de l’infarctus, cet effet est perdu quand les séquences sont 

décalées. 

L’administration de diazoxide en lieu et place du postC mime l’effet neuroprotecteur, alors que l’administration de 5-HD abolit cette protection. 

L’inhibition de la synthèse de NO bloque cette protection également 

Le NO est impliqué en amont et en aval du mito K ATP 

Le blocage de l’ouverture du pore de transition de perméabilité membranaire, par la ciclosporine A induit une protection. 

Les premières minutes de la reperfusion sont critiques et constituent une autre fenêtre de protection. Ce nouveau concept réactive le débat sur la 

nécrose liée à la reperfusion. 

Deux directions principales sont envisageables, la première est la poursuite des travaux sur la voie de signalisation intracellulaire convergeant vers la 

mitochondrie, à l'origine de la limitation de la mort cellulaire. Et la deuxième, l’étude de l’impact de la modulation de la reperfusion dans la limitation du 

stress oxydant suite à l’ischémie-reperfusion analysée par la technique de fluorescence à l’hydroéthidine. 

Mot(s)-clé(s) : ischemie_ reperfusion & mito K-ATP & NO & ROS 

STANDAERT Annie EMI360 - Daniel POULAIN 

Candida albicans est un immunogène potentiel des anticorps anti-Saccharomyces cerevisiae (ASCA) marqueurs 

de la maladie de Crohn. 

La maladie de Crohn (MC) est, avec la rectocolite hémorragique (RCH), une maladie inflammatoire chronique de l’intestin. Les mécanismes 

physiopathologiques de la MC reposent sur des facteurs environnementaux et de susceptibilité génétique, associés à une dérégulation de la réponse 

immunitaire intestinale, notamment vis-à-vis de la flore endogène. Parallèlement au processus inflammatoire responsable des lésions, les patients 

développent une réponse humorale dirigée contre divers antigènes microbiens. Parmi eux, des anticorps (Acs) anti-levures sont fréquemment rapportés 

chez les patients atteints de MC. Il s’agit des anticorps anti-Saccharomyces cerevisiae. Le laboratoire est à l’origine du test immuno-enzymatique de 

détection de ces Acs, qui utilise le mannane d’une souche de S. cerevisiae (SU1) et qui ont été dénommés ASCA. Les études séro-épidémiologiques 

issues du laboratoire ont montré que les ASCA sont présents chez 60% des patients MC, 10% des patients RCH mais qu’ils sont également présents 

chez 20% des parents sains du premier degré de patients MC, contre 7% dans la population témoin. Les ASCA sont maintenant largement utilisés pour 

le diagnostic et la stratification phénotypique des patients MC. Le laboratoire a également montré que les ASCA sont dirigés principalement contre un 

épitope de structure Man α-1,3 (Man α-1,2 Man)n [n=1 ou 2], mais l’immunogène à l’origine des Acs contre cet haptène restait inconnu. 

Ces dernières années les études structurales et génétiques ont établi que C. albicans possédait les mannosyltransférases impliquées dans la synthèse 

des structures oligomannosidiques « ASCA » et que leur expression était modulée par les conditions de milieu. Ce travail a pour objectif de déterminer 

si C. albicans peut être un immunogène des ASCA. 

L’étude humaine a concerné l’analyse sérologique de patients atteints de MC ou de candidose systémique. L’étude expérimentale a concerné des 

lapins infectés par C. albicans. Les réponses humorales ont été déterminées avec les test ASCA et Platelia Candida Ac®. Les Acs ont été purifiés par 

affinité sur des analogues de synthèse des épitopes majeurs ASCA. Ils ont ensuite été utilisés pour analyser l’expression des épitopes ASCA sur 

différentes molécules, ainsi qu’à la surface des cellules de C. albicans et de S. cerevisiae obtenues dans diverses conditions environnementales. 

Nous avons montré que chez l’homme et les lapins, l’infection par C. albicans pouvait être à l’origine d’une réponse humorale ASCA. L’utilisation d’Acs 

purifiés a permis de montrer que C. albicans était capable d’exprimer les épitopes majeurs ASCA sur une mannoprotéine, similaire à une 

mannoprotéine de S. cerevisiae. En modifiant les conditions de croissance, le mannane de C. albicans était capable de mimer les caractéristiques 

antigéniques du mannane de S. cerevisiae dans sa capacité à détecter des ASCA chez les patients MC. Cette surexpression des épitopes ASCA par C. 

albicans a été observée dans les tissus humains infectés. 

L’ensemble des éléments expérimentaux et cliniques de cette étude démontre donc que C. albicans peut être un immunogène des ASCA, suggérant 

que cette levure endogène pourrait être l’un des micro-organismes vis-à-vis desquels se manifeste une rupture de tolérance du système immunitaire 

lors de la MC. 

Les travaux actuels concernent l’analyse des relations entre la colonisation intestinale par C. albicans et les ASCA dans le cadre des études familiales 

sur la MC conduites en France et en Belgique. Parallèlement, nous participons avec le CIC à la mise en place d’un essai thérapeutique chez des 

patients opérés pour une MC, dont l’objectif est d’évaluer l’effet d’un traitement antifongique sur les taux d’ASCA et sur la survenue des récidives postopératoires. 

Ces travaux menés avec le service de gastroentérologie du CHRU, devrait nous permettre de confirmer ou non l'implication de C. albicans 

dans la production des ASCA et, par la suite, dans la physiopathologie de la MC. 

Mot(s)-clé(s) : Maladie de Crohn & Candida albicans & Saccharomyces cerevisiae 


STAUBER Jonathan UMR8017 - Michel SALZET 

NOUVELLE APPROCHE D’IMAGERIE SPECIFIQUE PAR SPECTROMETRIE DE MASSE ET PROTEOMIQUE 

CLINIQUE 

L’imagerie par spectrométrie de masse est une technique en pleine expansion et extrêmement prometteuse. Grâce à un nouvel axe d’utilisation et une 

automatisation simplifiée, l’analyse directe de tissu permet de cartographier l’état dynamique du protéome/lipidome au sein d’un tissu (frais ou paraffiné) 

ou de cellules. Ainsi, une localisation spatiale de la répartition des biomolécules au sein d’un tissu est obtenu par l’automatisation de cette méthode 

avec l’aide d’un logiciel de reconstruction d’image. Cette technique permet la localisation de plus d’une centaine de peptides dans une seule coupe de 

tissu. L’avantage de cette technique est de s’affranchir de toutes les méthodes d’extraction, de purification et de séparation pouvant entraîner une perte 

de reproductibilité et de sensibilité. 

Au delà de l’amélioration des performances de cette technologie, nous nous sommes également focalisés sur le développement d’un nouveau 

concept d’imagerie spécifique par l’analyse indirecte du tissu par tag-mass (brevet ). Dans ce concept, la molécule cible est recherchée à l’aide d’une 

sonde présentant une affinité spécifique pour la cible, la sonde portant un groupement photoclivable à la longueur d’onde du laser de l’instrument et luimême 

relié à un marqueur de masse connue (e.g. peptide). Après balayage du laser sur la coupe, le tag-mass est libérée par clivage et une image est 

alors reconstituée avec la répartition de la biomolécule sur la coupe. 

Cette nouvelle approche permet de localiser au sein du tissu des biomarqueurs d’intérêts comme des protéines, des lipides, et des ARN en fonction du 

tag-mass utilisé qui peut être un anticorps, une ribosonde. 

Il est alors possible de colocaliser plusieurs protéines, ARN, lipides sur le tissu dans une seule analyse et de réaliser une image multicomplexe. De 

plus, la superposition de différentes images permet de définir une carte de corrélation entre l’expression d’une protéine et la transcription de l’ARN 

correspondant, et d’ainsi faire le lien entre lipidomique, protéomique et transcriptomique par imagerie spécifique. 

R.M. Caprioli, T.B. Farmer, J. Gil, Anal Chem. (1997) 69, 4751-4760 

R. Lemaire, J. C. Tabet, P. Ducoroy, J. B. Hendra, M. Salzet, and I. Fournier, Anal. Chem.; 2006; 809 - 819 

R.Lemaire, M.Wirstorski, A. Desmons, J.C. Tabet, R.Day, M.Salzet, I. Fournier MALDI MS direct tissu analysis of proteins : Improving signal sensitivity 

using organic treatments, Anal chem, En révision. 

Fournier, I, Dechamps, M, Lemaire, R, Tabet, J.C., Salzet, M. Use of conjugates with photocleavable linkers and ionic matrices for MALDI mass 

spectrometry analysis of tissue section. PCT , Déposé aux USA, 2005 

Mot(s)-clé(s) : Protéomique & spectrométrie de masse & recherche clinique 

TARONT Solenne U416 - André-Bernard TONNEL 

Régulation par les particules de diesel et les PAMP des interactions entre cellules épithéliales bronchiques et 

cellules dendritiques 

De nombreuses études montrent une corrélation nette entre les pics de pollution atmosphérique et la fréquence d’apparition de maladies respiratoires 

telles que l’asthme. La pollution par les particules de diesel (DEP ou Diesel Exhaust Particles) est en partie responsable de ces effets sur la santé. 

Cependant, le mode d’action de ces particules n’est pas élucidé. Pour se défendre des agressions par des polluants ou des agents microbiens, la 

muqueuse respiratoire dispose d’un réseau d’immuno-surveillance constitué de cellules dendritiques (DC) localisées au sein de la muqueuse 

respiratoire. Les DC jouent un rôle clé dans le développement et le contrôle de la réponse immune locale. La discrimination du soi par rapport au non 

soi est permise par les Pattern Recognition Receptors (PRR) (Toll-like Receptors ou TLR, Scavenger Receptors ou SR) qui reconnaissent les PAMP 

(Pathogen-Associated Molecular Pattern ou PAMP). De façon intéressante, les SR semblent impliqués dans l’élimination de particules inertes inhalées. 

Au niveau de la barrière épithéliale, la capture de l’antigène par les DC et par conséquent le développement de la réponse immune locale est limitée par 

les jonctions intercellulaires, et plus particulièrement les jonctions serrées, établies entre les cellules épithéliales bronchiques (CEB). Au niveau 

intestinal, la capture des bactéries par les DC, implique la participation des cellules épithéliales, qui vont ouvrir les jonctions intercellulaires, permettant 

aux DC d’insinuer des pseudopodes afin de capturer l’antigène. Dans ce contexte, nous supposons que l’ouverture des jonctions intercellulaires de 

l’épithélium pourrait également contrôler le remaniement des PRR à la surface des CEB, mais aussi au niveau des pseudopodes des DC, facilitant ainsi 

la capture de l’antigène dans la lumière bronchique. Ainsi, les PRR exprimés par les CEB pourraient réguler l’expression des protéines de jonctions 

intercellulaires (PJI) après exposition à des PAMP ou des DEP et altérer le maintien des jonctions intercellulaires 

L’objectif de ce projet est de définir l’influence de l’exposition à des DEP en association avec des PAMP sur le dialogue entre CEB et DC, en étudiant 

plus particulièrement la régulation de l’expression des SR SREC, LOX-1, CXCL16 et CD36 et des PJI E-Cadhérine, -Caténine, Occludine, ZO- 

1, Claudines-1 et 4, ainsi que les interactions entre ces deux types de protéines. 

Concernant les SR, les CEB et les DC ont été activées par des DEP associées ou non à des PAMP. L’exposition des CEB à des DEP augmente 

l’expression de SREC, LOX-1 et CD36. Associées aux ligands de TLR2 et 3, elles ont un effet antagoniste sur l’expression des 3 SR. Par ailleurs, les 

DEP induisent une augmentation de la production par les CEB d’IL-6 et d’IL-8 seuls ou en présence de ligand de TLR3. Au niveau des DC, les DEP 

augmentent l’expression de LOX-1, CD36, SR-A1 et CXCL16. 

Cette approche sera poursuivie par l’analyse du rôle des SR dans la reconnaissance des DEP et de certains composés isolés à l’aide de lignées 

exprimant spécifiquement un seul type de SR et en réalisant une compétition avec les ligands naturels des SR (Ox-LDL) 

Concernant la régulation des PJI, les DEP modulent l’expression de la E-Cadhérine, β-Caténine, et Claudine-4 sans induire leur maturation. De 

plus, , les ligands de TLR2, 3 et 4 induisent la maturation des DC et l’augmentation de l’expression de la E-Cadhérine, de la β-Caténine, de 

l’Occludine et de ZO-1. L’inhibition de l’activation de NF-κB bloque ces modulations 

A terme, l’implication de l’expression de ces protéines dans l’activation des DC et la capture de l’antigène sera définie, en analysant la délocalisation 

des SR et des TLR lors de la capture d’antigènes par les DC au niveau de l’épithélium. 

Mot(s)-clé(s) : Inflammation & Cellules épithéliales bronchiques & Cellules dendritiques & Pollution 


TASCHNER Christian EA2691 - Xavier LECLERC 

ARM DYNAMIQUE 3D AVEC IMAGERIE PARALLELLE ET ACQUISITION CENTRA KEYHOLE POUR L’ETUDE DES 

MALFORMATIONS ARTERIO-VEINEUSES CEREBRALES 

Objectifs: L’ARM dynamique a prouvé son intérêt pour l’étude des vaisseaux intracrâniens permettant de séparer les phases artérielle et veineuse de 

l’angiogramme. L’objectif de ce travail est d’évaluer une séquence d’ARM dynamique 3D pour l’étude des malformations artério-veineuses (MAV) 

utilisant des techniques d’imagerie parallèle en combinaison avec une acquisition stochastique de l’espace des k appelée CENTRA Keyhole. 

Matériels et méthodes: L’ARM dynamique 3D était réalisée sur un imageur 1.5 Tesla avec une antenne tête à huit canaux. Le protocole d’imagerie 

comprenait une séquence 3D fast field-echo avec injection de 20 mL de gadolinium à un débit de 5mL /sec. 140 coupes de 1.1 mm d’épaisseur étaient 

acquises avec un facteur SENSE de 3 et un CENTRA key hole de 16%. La résolution temporelle était de 0,8 s pour l’acquisition d’un volume couvrant 

l’ensemble de la tête. La séquence présentait une résolution spatiale isotrope de 1,1 x 1,1 x 1,1 mm. La séquence a été évaluée chez 15 patients 

présentant une MAV connue. 

Résultats : Les examens étaient interprétables chez tous les patients et constituaient un outil diagnostique robuste pour l’analyse des différentes phases 

de la circulation cérébrale. Les reconstructions MIP obtenues à partir d’une seule acquisition 3D fournissaient des informations fiables pour l’étude des 

artères nourricières, du nidus et des veines de drainage de la malformation. 

Conclusion : L’ARM dynamique 3D avec imagerie parallèle et acquisition CENTRA Keyhole permet d’optimiser la résolution temporelle et spatiale de 

l’image et obtenir une analyse précise de l’angioarchitecture de la MAV en ARM. 

Mot(s)-clé(s) : Malformation Arterio-veineuse & ARM & Gamma Knife 

THURU Xavier EPI114 - Jean-Frédéric COLOMBEL 

Récépteur aux cannabinoïdes 2 : nouvelle stratégie thérapeutique dans le traitement des Maladies 

Inflammatoires Chroniques Intestinales. 

Introduction : Les récepteurs aux cannabinoïdes (CB1 et CB2) sont exprimés au niveau du système nerveux central et périphérique, ce qui leur donne 

un effet analgésique ainsi qu’une action sur la motricité intestinale. Le récepteur CB2 est essentiellement exprimé sur les cellules immunitaires. 

Plusieurs études réalisées suggèrent que le récepteur CB2 serait également impliqué dans la régulation de l’inflammation. But du travail : Evaluer in 

vivo l’implication de CB2 dans le contrôle de l’inflammation dans différents modèles de colite expérimentale. Méthodes : 1) L’action d’un agoniste de 

CB2 (Fe200859) a été testée dans le modèle de colite au TNBS. L’intensité de la colite a été évaluée cinq jours (J5) après administration intra-rectale 

du TNBS par un score macroscopique (0 à 10), un score histologique (0 à 6), le dosage et la quantification de l’activité de la myéloperoxidase (MPO) et 

des ARNm du TNFα et de l’IL1β. Les résultats ont été comparés chez des groupes d’animaux recevant de manière préventive (J-1) ou 

curative (J0) un placebo ou du Fe200859 par voie sous-cutanée. 2) L’effet anti-inflammatoire de notre agoniste a été testé dans un modèle de colite au 

DSS 4% comme précédemment. La colite a été évaluée sept jours (J7) après l’administration de DSS par voie orale par un score clinique (0 à 8), un 

score histologique (O à 6). 3) L’intensité de la colite au TNBS a été comparée chez des animaux contrôles et invalidés pour le récepteur CB2 (CB2-/-). 

4) L’effet anti-inflammatoire de notre agoniste a été testé dans un modèle de colite chronique induite par l’administration chronique de DSS 2,5%. 

L’intensité de la colite était réalisée comme précédemment 40 jours après l’administration du DSS. Résultats : 1) L’administration intra-rectale de TNBS 

induisait à J5 une colite sévère macroscopiquement et histologiquement avec des concentrations élevées de MPO, d’ARNm du TNFα et de l’IL- 

1β. L’administration préventive ou curative de Fe200859 entraînait une diminution significative par rapport au placebo des scores 

macroscopiques, des scores histologiques et des concentrations de MPO, d’ARNm du TNFα et de l’IL-1β. 2) De la même manière 

l’administration préventive entraînait une diminution du score macroscopique et histologique lors de la colite au DSS. 3) Les souris CB2-/- développaient 

une colite nécrosante sévère et diffuse, rapidement fatale. 4) L’injection curative de l’agoniste permettait de prévenir l’apparition de la colite aigue par 

une diminution de production de collagène et donc de prévenir l’apparition de fibrose. Conclusion : L’activation de CB2 exerce un puissant effet antiinflammatoire 

in vivo. L’effet combiné des agonistes sélectifs sur la motricité, la douleur abdominale et l’inflammation pourrait rendre attractif leur 

utilisation dans les MICI. 

Mot(s)-clé(s) : Cannabinoïdes & Inflammation & Colon & Nouveaux ligands 


TIFFREAU Vincent EA3608 - Christian FONTAINE 

Evaluation isocinétique des muscles déficitaires appliquée aux maladies neuromusculaires 

La quantification objective de la force musculaire est devenue nécessaire à la mise en place de protocoles d’évaluation de patients atteints de 

pathologies neuromusculaires, inclus dans des protocoles thérapeutiques. Les dynamomètres isocinétiques offrent la possibilité de mesurer la force en 

condition dynamique, mais seule leur utilisation dans le cadre de pathologies locomotrices orthopédiques pour des sujets présentant un déficit de force 

modéré est véritablement documentée. 

L’évaluation isocinétique de sujets très déficitaires affectés par des pathologies neuromusculaires est possible, mais son développement nécéssite un 

travail d’élaboration de protocoles spécifiques en mode passif. Il est possible de programmer un enregistrement du régime de force pendant une 

mobilisation passive isocinétique robotisée et d’enregistrer durant une mobilisation passive de même vitesse et de même amplitude la force développée 

en demandant une effort maximal au sujet. La soustraction des deux enregistrements permet de calculer la force développée par le sujet, 

indépendamment des résistances passives et de la gravité. 

La pertinence d’une telle évaluation ne peut être retenue que si l’outil et la méthode de mesure offrent un sensibilité, une fiabilité et une validité 

suffisante : l’objectif de ce travail est d’explorer les qualités métrologiques d’un protocole d’évaluation isocinétique de ce type. Pour cela , différentes 

étapes sont nécessaires 

1. Le développement d’un protocole d’évaluation standardisé, pour différents groupes musculaires, et l’étude de la faisabilité du protocole auprès de 

sujets atteints de pathologies neuromusculaires 

2. L’évaluation de la précision et de la sensibilité du dynamomètre dans les conditions du protocole, déterminant le seuil de détection et le pourcentage 

d’erreur des mesures. 

3. Le développement d’outils informatiques permettant une quantification standardisée de la force à partir du signal produit par le capteur de force. 

4. l’étude de la reproductibilité des mesures répétées chez des sujets atteints de pathologies neuromusculaires 

5. L’étude de validité en relation avec les évaluations quantifiées utilisées en pratique clinique 

6. La sensibilité au changement d’un état clinique par le suivi prospectif des sujets atteints de pathologies neuromusculaires évolutives. 

7. A terme, la diffusion du protocole et des outils informatiques qui y sont associés devrait s’étendre aux dynamomètres isocinétiques commercialisés 

équipés d’une sortie analogique, permettant le traitement du signal 

Avancement des travaux : 

Actuellement, un protocole d’évaluation est décrit et appliqué pour quantifier la force des fléchisseurs et extenseurs des genoux et des coudes, dans 

des conditions standardisées, pour des vitesses de 10 /s et 30 /s. Le protocole est appliqué sur deux dynamomètres : le cybex 6000® au CHU de Lille 

(Service de Médecine Physique et de Réadaptation) et le Biodex 3® à l’insitut de myologie de Paris (Laboratoire d’évaluation neuromusculaire, Hôpital 

de la Salpêtrière). 

Le développement de logiciels de traitement de signal (Labview® ) et de calcul simple pour la quantification de la force (moment maximal, travail, 

puissance) est effectué sur les deux sites. 

L’achat de capteurs externe va permettre d’étudier la précision du signal du capteur dynamomètrique. 

L’étude de reproductibilité est effectuée sur 15 sujets atteints de pathologies neuromusculaires sur le biodex 3®, pour l’évaluation de la force des 

fléchisseurs et extenseurs des genoux. 

Une première étude de validité de la mesure en comparaison du testing musculaire manuel auprès de sujets atteints de polyradiculonevrite aigue en 

cours de récupération a été publiée (Tiffreau V, Turlure A, Viet G, Thevenon A. Isokinetic dynamometry of weak muscles. Isokinetics and exercise 

science 2003; 11 (1) : 13-20. 

Un suivi de cohorte de patients atteints de dystrophies musculaires est commencé au CHU de Lille sur Cybex 6000®. 

Mot(s)-clé(s) : isocinétisme & évaluation & force & neuromusculaire 

TONNELLE Veronique U422 - Jean-Claude BEAUVILLAIN 

Caractérisation des récepteurs erbB dans des cultures primaires d'astrocytes humains issus de différentes 

régions cérébrales et dans des échantillons tumoraux de glioblastome 

Problématique: Les astrocytes participent activement au traitement des informations dans le cerveau. La voie de signalisation erbB participe activement 

à la communication inter cellulaire et au controle de fonctions tels que la croissance, la différenciation, l'apoptose... 

Matériel et méthode: pour la première fois nous étudions cette voie de signalisation en condition physiologique, chez l'homme, dans des cultures 

d'astrocytes embryonnaires corticaux ou hypothalamiques. Nous réalisons également des cultures à partir d'échantillons tumoraux (glioblastome) et 

péri-tumoraux.Les récepteurs erbB ont été caractérisés par des techniques de Western blot et de RT-PCR, leur voir d'activation a été étudiée par des 

méthodes d'immunoprécipitation et de Western blot aprés réalisation de différents traitements activateurs ou inhibiteurs. Les résultats obtenus en 

condition physiologique ont été comparés à ceux obtenus à partir d'un écantillon glioblastome. 

Résultats : le profil d’expression des récepteurs erbB est différent dans les astrocytes corticaux (erbB1-2-3) et hypothalamiques (erbB1-2-4). Les 

astrocytes corticaux et hypothalamiques expriment tous les composants nécessaire à l’activation autocrine/paracrine de la voie de signalisation erbB. 

L’échantillon glioblastome est caractérisé par une surexpression du récepteur erbB-1, une activation spontanée des quatres récepteurs erbB, la 

présence du récepteur erbB-4 non retrouvé dans les astrocytes corticaux. 

Conclusion : Il s’agit de la première caractérisation de la voie de signalisation erbB dans les astrocytes humains en condition physiologique. Cette étude 

confirme partiellement les connaissances déjà acquises chez le rat et la souris.L'étude se poursuit pour les échantillons de glioblastome. 

Mot(s)-clé(s) : Récepteur erbB & Astrocytes & Humain 


VAN HECKE Elsa EA1033-Inserm ESPRI - Hubert HONDERMARCK 

Expression et activité biologique de la NT-4/5, du BDNF et de leurs récepteurs dans le cancer du sein. 

Les neurotrophines sont une famille de quatre facteurs de croissance comprenant le membre prototypique nerve growth factor (NGF), les 

neurotrophines 3 et 4/5 (NT-3 et NT-4/5) et le Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF). Les neurotrophines (NT), connues pour induire la 

différenciation et le maintien des neurones, sont désormais référencées dans bon nombre de cancers non neuronaux pour leur implication dans la 

croissance clonale des cellules cancéreuses et l’invasion tumorale. Dans le cancer du sein, notre laboratoire a déjà montré que le NGF et ses 

récepteurs membranaires TrkA (Tropomyosine Related Kinase A) et p75NTR (Neurotrophin Receptor) sont synthétisés. De plus, le NGF sécrété par les 

cellules de cancer du sein stimule leur prolifération et leur survie via une boucle autocrine. Mes travaux de recherche portent sur l’expression et les 

effets biologiques des autres neurotrophines (NT-3, NT-4/5, BDNF) et de leurs récepteurs tyrosine kinase (TrkB et TrkC). La PCR en temps réél, le 

western-blot et l’immunocytochimie indiquent que la NT-4/5, le BDNF et leur récepteur TrkB sont exprimés dans les cellules cancéreuses mammaires, 

alors que la NT-3 est faiblement exprimé et son récepteur TrkC n’est pas détecté. Par ailleurs ces même neurotrophines sont présentes dans des 

biopsies tumorales de sein. De plus, nous avons pu démontré que le BDNF et la NT-4/5 agissent comme facteur de survie dans les cellules 

cancéreuses de sein en empêchant l’action pro-apoptototique de diverses molécules chimiothérapeutiques. En conclusion cette étude indique que non 

seulement le NGF et ses récepteurs TrkA et P75NTR contribuent à la tumorigénèse mammaire, mais que les autres neurotrophines jouent un rôle dans 

cette pathologie. 

Mot(s)-clé(s) : cancer du sein & neurotrophines & Trk & p75NTR 

VAN WAES Vincent EA 4052 - Muriel DARNAUDERY 

Impact d'un stress prénatal sur l’activation de l’axe corticotrope 

en réponse à un traitement à l’éthanol et sur la consommation 

spontanée d’éthanol chez le rat adolescent 

L’axe corticotrope est un composant majeur de la réponse au stress et la relation entre cet axe et la vulnérabilité à l’éthanol est double. D’une part, 

l’éthanol est connu pour être un activateur puissant de l’axe corticotrope, d’autre part, des manipulations expérimentales de cet axe sont associées chez 

l’animal à des modifications de la consommation spontanée d’éthanol. Chez le rat, le stress chronique de la mère gestante induit chez la descendance 

de profonds dysfonctionnements de l’axe corticotrope, caractérisés notamment par une hyperactivité de l’axe en réponse à une exposition à la 

nouveauté ou à un stress de contention. Les animaux stressés prénatalement présentent par ailleurs une augmentation du comportement d’autoadministration 

d’amphétamine, de la réactivité locomotrice à la nicotine et de la sensibilité au MDMA (ecstasy). Bien que le stress prénatal induise des 

dysfonctionnements de l’axe corticotrope et que cet axe soit impliqué dans la vulnérabilité à l’éthanol, peu de travaux se sont focalisés sur l’impact du 

stress prénatal sur l’activation de l’axe corticotrope par l’éthanol et sur ses conséquences sur la propension à consommer de l’éthanol. 

Le but de notre travail était d’évaluer l’impact du stress prénatal d’une part sur l’activation de l’axe corticotrope en réponse à un challenge à l’éthanol, et 

d’autre part sur la consommation spontanée d’éthanol dans un modèle d’animaux adolescents. Pour cela, nous avons mesuré les taux plasmatiques 

d’ACTH et de corticostérone (RIA) suite à une injection intrapéritonéale d’éthanol (1.5 g/kg) chez des animaux adolescents stressés prénatalement ou 

témoins. Nous avons évalué en parallèle la cinétique d’élimination des taux sanguins d’éthanol (chromatographie). L’impact de l’éthanol sur l’expression 

génique (ARNm) de plusieurs acteurs centraux de l’axe corticotope (récepteurs aux glucocorticoïdes et aux minéralocorticoïdes hippocampiques, CRH 

hypothalamique, POMC hypophysaire) a été également évalué (HIS). Comparés aux témoins, les animaux stressés prénatalement présentaient une 

augmentation des taux de corticostérone et d’ACTH de moindre ampleur suite à l’injection d’éthanol. De plus, l’éthanol augmentait les taux d’ARNm 

codant la CRH (dans le NPV de l’hypothalamus) et la POMC (dans l’anté-hypophyse) chez les témoins alors que ces taux n’étaient pas modifiés chez 

les animaux stressés. Ces résultats suggèrent une atténuation de la réponse de l’axe corticotrope à l’éthanol chez les animaux adolescents stressés en 

période prénatale, et ceci, en l'absence de modification de la cinétique d’élimination de l’éthanol. De façon intéressante, une hyporéponse de l’axe 

corticotrope en réponse à une administration d’éthanol semble être associée chez l’Homme à une plus grande vulnérabilité à l’éthanol. Nous avons 

mesuré pendant 10 jours lors de l’adolescence la consommation spontanée d’éthanol des rats en leur laissant comme accès à la boisson le libre choix 

entre un biberon rempli d’eau et un biberon rempli d’éthanol (2.5%, 5% ou 10%). La préférence pour l’éthanol variait de manière importante en fonction 

de la dose utilisée mais était similaire chez les animaux stressés prénatalement et les animaux témoins. Les modifications de l’activation de l’axe 

corticotrope chez les adolescents stressés prénatalement, observées à la fois au niveau périphérique et au niveau central, ne semblent donc pas soustendre 

une consommation spontanée d’éthanol plus importante chez ces animaux dans nos conditions d’expérimentation. Des expériences 

complémentaires seront nécessaires pour déterminer si des différences de consommations pourraient être observées en conditions stressantes ou 

dans le cadre de conditionnements opérants. 

Mot(s)-clé(s) : stress prénatal & éthanol & axe corticotrope & consommation spontannée 

VANHOUTTE Francois U547 - François TROTTEIN 

Rôle des récepteurs Toll-like dans l'activation des cellules dendritiques par le parasite helminthe Schistosoma 

mansoni 

Les récepteurs Toll-like (TLRs) jouent un rôle important dans les mécanismes de reconnaissance innée des pathogènes par les cellules dendritiques 

(DCs) chez les Mammifères. Alors que l’implication des TLRs lors de l’initiation et la polarisation des réponses immunes pendant les infections virales et 

bactériennes est bien documentée, relativement peu d’études décrivent leur fonction dans les réponses acquises dirigées contre des microorganismes 

eucaryotes complexes, tels que les parasites helminthes. Nos travaux ont récemment montré que TLR2 et TLR3 sont activés en réponse au stade œuf 

du parasite helminthe Schistosoma mansoni. TLR3, un TLR connu pour sa participation dans les réponses antivirales, est activé par de l’ARN double 

brin isolé du stade œuf. Nous démontrons ici que les œufs activent des DCs dérivées de précurseurs de moelle osseuse de souris WT via la production 

de cytokines inflammatoires et une maturation alors que cette réponse est complètement abrogée dans le cas d’une double déficience en TLR2 et 

TLR3. De plus, l’activation de TLR3, et dans une moindre mesure celle de TLR2, chez les cellules dendritiques joue un rôle important lors de la mise en 

place de la réponse immune adaptative à la fois in vitro et in vivo. Pris dans leur ensemble, ces résultats suggèrent l’importance de TLR2 et TLR3 dans 

les interactions hôte/schistosome. 

Mot(s)-clé(s) : Toll-like receptors & schistosome & cellules dendritiques 


YAKOUB-AGHA Ibrahim EA2686 - Jean-Paul DESSAINT 

Impact de la composition du greffon en lymphocytes T naïfs et mémoires sur le devenir de l’allogreffe de cellules 

souches hématopoïétiques. 

L'allogreffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) constitue l'une des alternatives thérapeutiques aux affections hématologiques et à certaines 

maladies génétiques. Le greffon est source non seulement de CSH, mais aussi de cellules différenciées. Ces lymphocytes participent directement à la 

prévention du rejet du greffon, à la reconstitution du système immunitaire du receveur et à l'élimination des cellules tumorales résiduelles (GVL : Graft- 

Versus-leukemia). Les lymphocytes T transférés sont également responsables d'effets indésirables, tout particulièrement la réaction du greffon contre 

l'hôte (GVH). Deux types de CSH peuvent être prélevés chez un donneur: les CSH issues de la moelle osseuse (MO) et les CSH issues du sang 

périphérique (CSP) après leur mobilisation par un facteur de croissance (G-CSF). 

Des travaux récents soulignent l'hétérogénéité des lymphocytes T mémoires chez l'Homme, et ont permis la distinction de trois sous-populations 

mémoires selon leur expression des isoformes de CD45 et des molécules de domiciliation, CCR7 ou CD62L. Quatre sous-populations principales sont 

donc maintenant individualisables à l'aide d'un panel de marqueurs membranaires : cellules T naïves CD45RA+CCR7+CD62L+ (TN), mémoires 

centrales CD45RAnegCCR7+CD62L+ (TCM), mémoires effectrices CD45RAnegCCR7neg CD62L+/- (TEM) et effecteurs à différentiation terminale 

CD45RA+CCR7neg CD62Lneg (TTD). 

Des expériences menées chez la souris ont montré que des lymphocytes T CD8+ mémoires étaient capables de s'opposer à l'établissement de la 

tolérance d'une allogreffe. Les cellules impliquées possédaient les caractéristiques phénotypiques de cellules mémoires centrales CD62L+ et non de 

cellules mémoires effectrices CD62Lneg. De plus, des cellules mémoires effectrices purifiées se sont avérées incapables d'induire une GVH. A 

l'inverse, en ce qui concerne la population T CD4+, il a été montré que les lymphocytes T naïfs et non pas mémoires étaient capable d'induire une GVH 

chez la souris. Dans une autre étude, il a été montré que les animaux invalidés pour le gène du CCR7 présentaient une alloréactivité diminuée. Chez 

l'Homme, certaines observations cliniques soulignent l'influence des expériences immunologiques passées du donneur. La survenue de la GVH pourrait 

donc être favorisée par la réactivité des lymphocytes T mémoires du donneur vis-à-vis des tissus cibles du receveur. Très récemment, des cellules TCM 

humaines ont été impliquées dans un modèle de GVH induite chez la souris SCID. Foster et al. ont démontré, in vitro, que des cellules T CD4+CD62L+ 

(naïves et mémoires centrales) avaient un potentiel alloréactif plus important que les cellules mémoires CD62Lnég. 

L'ensemble de ces données nous a conduit à émettre l'hypothèse que la composition du greffon en cellules T naïves et/ou mémoires pourrait influencer 

la survenue et la sévérité de la GVH aiguë. 

Les rôles respectifs de lymphocytes T naïfs et mémoires dans les réactions allogéniques post-greffes restent à établir. 

Le but principal de notre travail, qui a commencé en 2003, est d’étudier les lymphocytes T naïfs et mémoires de greffons de CSH médullaires et 

périphériques et de suivre la reconstitution immunologique chez le receveur. 

Nous avons mené une analyse préliminaire de la composition des greffons. Cette étude a permis de révéler, par analyse multivariée (modèle de Cox) 

un risque significatif de GVH aiguë (p = 0,008) quand le pourcentage des lymphocytes T CD4+CCR7+ est élevé, sans influence sur les autres 

complications post-greffe. Ce risque excède même celui lié à un greffon de donneur non apparenté (p = 0,023). La sévérité de la GVH aiguë (grade III 

et IV vs I et II) s'accroît parallèlement à l'augmentation de ce rapport. En ce qui concerne la GVH chronique, notre étude n'a montré qu'une corrélation 

avec le type de greffon quelque soit la composition en cellules T naïves et mémoires. D’autres résultats seront présentés lors de la journée André 

VERBERT. 

Mot(s)-clé(s) : allogreffe de cellules souches hématopoïétiques & lymphocytes T & CCR7 & Greffon 


Nom de l'auteur (adresse électronique) (Unité de Recherche-Directeur de thèse) Session (horaire) 

ADAM Estelle (estelleadam@endotis.com) - U416 - Philippe LASSALLE poster 1 (n°1) - 10h00 à 11h 

ALLART Laurent (laurent.allart@univ-lille2.fr) - EA3614 - Mohamed LEMDANI poster 2 (n°2) - 13h00 à 14h 

AMNIAI Latiffa (amniai@yahoo.fr) - U416 - Benoît WALLAERT poster 1 (n°3) - 10h00 à 11h 

ANDO Kunie (kunie29@yahoo.co.jp) - U422 - Luc BUÉE poster 2 (n°4) - 13h00 à 14h 

ARAFAH Sonia (sonia.arafah@ibl.fr) - EMI364 - Michael MARCEAU poster 1 (n°5) - 10h00 à 11h 

BALLY Julia (julia.bally@bayercropscience.com) - UR_hors ED - Dominique JOB poster 2 (n°6) - 13h00 à 14h 

BENSEMAIN Faïza (faiza.bensemain@pasteur-lille.fr) - U508 - Nicole HELBECQUE orale "Neuropathologies" (4) - 11h00 à 12h 

BIGGIO Valeria (biggio@lille.inserm.fr) - U524 - Claude PREUDHOMME poster 1 (n°7) - 10h00 à 11h 

BILLIET Ludivine (ludivine.billiet@pasteur-lille.fr) - U545 - Graciela CASTRO poster 2 (n°8) - 13h00 à 14h 

BOISSE Thomas (thomas.boisse@hei.fr) - EA2692 - Benoît RIGO poster 1 (n°9) - 10h00 à 11h 

BOUHLEL Mohamed Amine (amine.bouhlel@pasteur-lille.fr) - U545 - Giulia CHINETTI poster 2 (n°10) - 13h00 à 14h 

BRETTEVILLE Alexis (bretteville@lille.inserm.fr) - U422 - Claude-Alain MAURAGE orale "Neuropathologies" (2) - 11h00 à 12h 

BRUANDET Amelie (a-bruandet@chru-lille.fr) - U508 - Philippe AMOUYEL poster 1 (n°11) - 10h00 à 11h 

BUYCK Julien (julien.buyck@univ-lille2.fr) - EA 2689 - Régis MATRAN poster 2 (n°12) - 13h00 à 14h 

CERTAD Gabriela (gabriela.certad@pasteur-lille.fr) - EA3609 - Thérèse DURIEZ poster 1 (n°13) - 10h00 à 11h 

CLASADONTE Jérôme (clasadonte@lille.inserm.fr) - U422 - Pierre POULAIN orale "Physiologie" (4) - 9h00 à 10h 

COQUART Jeremy (coquart.jeremy@voila.fr) - EA3608 - Murielle GARCIN poster 2 (n°14) - 13h00 à 14h 

CORDONNIER Charlotte (charlotte.cordonnier2@wanadoo.fr) - EA2691 - Hilde HENON poster 1 (n°15) - 10h00 à 11h 

DEGERNY Cindy (cindy.degerny@ibl.fr) - UMR8117 - Jean-Luc BAERT orale "Régulation génétique" (3) - 15h00 à 16h 

DELANGLE Aurelie (aurelie.delangle@ed.univ-lille1.fr) - UMR-CNRS 8576 - Jean-Marie LACROIX poster 2 (n°16) - 13h00 à 14h 

DESAILLOUD Rachel (desailloud.rachel@chu-amiens.fr) - EA3610 - Alain DUBREUIL poster 1 (n°17) - 10h00 à 11h 

DESSEIN Rodrigue (r-dessein@chru-lille.fr) - EMI364 - Michel SIMONET poster 2 (n°18) - 13h00 à 14h 

DILLY Sebastien (seb_dilly@yahoo.fr) - EA1043 - Philippe CHAVATTE poster 1 (n°19) - 10h00 à 11h 

DINON Jean-Francois (jf-dinon@chru-lille.fr) - UMR8160 - Muriel BOUCART poster 2 (n°20) - 13h00 à 14h 

DOURLEN Pierre (dourlen@lille.inserm.fr) - U422 - Luc BUÉE orale "Neuropathologies" (1) - 11h00 à 12h 

EL BEYROUTHY Marc (mr_tulipes@hotmail.com) - EA2692 - Annick DELELIS poster 1 (n°21) - 10h00 à 11h 

FAID Valegh (Valeghfaid@yahoo.fr) - UMR-CNRS 8576 - Jean-Claude MICHALSKI poster 2 (n°22) - 13h00 à 14h 

FAVORY Raphael (R-favory@chru-lille.fr) - EA2689 - Rémy NEVIÈRE poster 1 (n°23) - 10h00 à 11h 

FLOURAKIS Matthieu (flourakismatt@yahoo.fr) - U 800 - Natacha PREVARSKAYA orale "Transporteurs signalisation" (1) - 14h00 à 15h 

FOVEAU Benedicte (benedicte.foveau@ibl.fr) - UMR8117 - David TULASNE orale "Transporteurs signalisation" (3) - 14h00 à 15h 

FREALLE Emilie (emilie.frealle@pasteur-lille.fr) - EA3609 - Daniel CAMUS poster 2 (n°24) - 13h00 à 14h 

GACKIERE Florian (florian.gackiere@wanadoo.fr) - EMI0228 - Pascal MARIOT poster 1 (n°25) - 10h00 à 11h 

GARCIA Frederic (garcia.frederic2@caramail.com) - EA2694 - Paul FRIMAT poster 2 (n°26) - 13h00 à 14h 

GARENAUX Estelle (Estelle.Garenaux@ed.univ-lille1.fr) - UMR8576 - Jean-Claude MICHALSKI poster 1 (n°27) - 10h00 à 11h 

GARGOURI Imed (Imed.Gargouri@fmsf.rnu.tn) - EA2690 - Daniel MARZIN poster 2 (n°28) - 13h00 à 14h 

GINESTE Romain (romain.gineste@genfit.com) - U545 - Jean-Charles FRUCHART poster 1 (n°29) - 10h00 à 11h 

GLUSZOK Sébastien (sebastien.gluszok1@wanadoo.fr) - EA2692 - Patrick DEPREUX poster 2 (n°30) - 13h00 à 14h 

GUTIERREZ-AGUILAR Ruth (ruth.gutierrez@good.ibl.fr) - UMR8090 - Philippe FROGUEL poster 1 (n°31) - 10h00 à 11h 

HELLE Francois (francois.helle@ibl.fr) - UPR2511 - Jean DUBUISSON poster 2 (n°32) - 13h00 à 14h 

HOUDAYER Elise (elisehoudayer@hotmail.com) - EA2683 - Philippe DERAMBURE orale "Physiologie" (3) - 9h00 à 10h 

JARDIN-MATHE Olivia (olivia.jardin-mathe@ed.univ-lille1.fr) - FRE 2933 - Michel SALZET poster 1 (n°33) - 10h00 à 11h 

JEANNE Mathieu (mathieu_jeanne@yahoo.fr) - EA 1046 - Benoit TAVERNIER poster 2 (n°34) - 13h00 à 14h 

JEBARA Najate (n-jebara@chru-lille.fr) - UMR8160 - Delphine PINS poster 1 (n°35) - 10h00 à 11h 

Ecole Doctorale Biologie Santé de Lille 6ème Journée André VERBERT 27 septembre 2006

Nom de l'auteur (adresse électronique) (Unité de Recherche-Directeur de thèse) Session (horaire) 

LALLET Helene (hlallet@nomade.fr) - EMI0228 - Natacha PREVARSKAYA poster 2 (n°36) - 13h00 à 14h 

LARVOR Lydie (lydie.larvor@lille.inserm.fr) - EA2683 - Marie-Christine CHARTIER-HARLIN orale "Neuropathologies" (3) - 11h00 à 12h 

LAUNAY David (d-launay@chru-lille.fr) - EA2686 - Lionel PRIN poster 1 (n°37) - 10h00 à 11h 

LE BRAS Alexandra (alexandra.lebras@ibl.fr) - UMR8526 - Fabrice SONCIN poster 2 (n°38) - 13h00 à 14h 

LE NAOUR Morgan (morgan.le-naour@voila.fr) - EA1043 - Pascal BERTHELOT poster 1 (n°39) - 10h00 à 11h 

LEGRAND Fanny (fanny.legrand@pasteur-lille.fr) - U547 - Monique CAPRON poster 2 (n°40) - 13h00 à 14h 

LY Ousmane (ousmane.ly@sim.hcuge.ch) - EA2694 - Jean-Marc BRUNETAUD poster 1 (n°41) - 10h00 à 11h 

MARTIEN Sebastien (sebastien.martien@ibl.fr) - UMR-CNRS 8161 - Corinne ABBADIE orale "Régulation génétique" (1) - 15h00 à 16h 

MELCHIOR Aurelie (aurelie.melchior@ed.univ-lille1.fr) - UMR8576 - Joël MAZURIER poster 2 (n°42) - 13h00 à 14h 

MEURICE Edwige (edwige.meurice@ed.univ-lille1.fr) - UMR8576 - Stanislas TOMAVO poster 1 (n°43) - 10h00 à 11h 

MOLENDI-COSTE Olivier (oliviermolendi@hotmail.com) - EA2701 - Christophe BRETON orale "Physiologie" (1) - 9h00 à 10h 

MORTIER Laurent (l-mortier@chru-lille.fr) - U459 - Philippe MARCHETTI poster 2 (n°44) - 13h00 à 14h 

NGOUANESAVANH Tra My (tramy.ngouanesavanh@pasteur-lille.fr) - EA3609 - Jean-Charles CAILLIEZ poster 1 (n°45) - 10h00 à 11h 

OUK Thavarak (thavouk@yahoo.fr) - EA1046 - Régis BORDET poster 2 (n°46) - 13h00 à 14h 

PEIXOTO Paul (peixotopaul@yahoo.fr) - U524 - Amélie LANSIAUX orale "Régulation génétique" (5) - 15h00 à 16h 

PELAYO Sylvia (sylvia.pelayo@univ-lille2.fr) - EA2694 - Paul FRIMAT poster 1 (n°47) - 10h00 à 11h 

PENEL Nicolas (n-penel@o-lambret.fr ) - EA2694 - Yazdan YAZDANPANAH orale "Régulation génétique" (6) - 15h00 à 16h 

PHAM Van Minh (pvminhrehab@yahoo.com) - EA2683 - André THEVENON poster 2 (n°48) - 13h00 à 14h 

PIESSEN Guillaume (piessen@lille.inserm.fr) - U560 - Isabelle VAN SEUNINGEN poster 1 (n°49) - 10h00 à 11h 

PLAISIER Fabrice (fabriceplaisier@YAHOO.fr) - EA1046 - Michèle BASTIDE orale "Transporteurs signalisation" (2) - 14h00 à 15h 

POURCET Benoit (benoit.pourcet@pasteur-lille.fr) - U545 - Corine GLINEUR poster 2 (n°50) - 13h00 à 14h 

ROGEE Sophie (rogee@lille.inserm.fr) - U524 - Jean-Claude D'HALLUIN orale "Régulation génétique" (4) - 15h00 à 16h 

RUCKTOOA Prakash (prakash.rucktooa@ibl.fr) - UMR8525 - Vincent VILLERET orale "Transporteurs signalisation" (4) - 14h00 à 15h 

RZEPKA Marie-Amelie (marie-amelie.rzepka@etu.univ-lille2.fr) - EA2690 - Chantal VAN HALUWYN poster 1 (n°51) - 10h00 à 11h 

SABAOUNI Ahmed (sabaouni@yahoo.fr) - EA1043 - Said YOUS poster 2 (n°52) - 13h00 à 14h 

SCHIKORSKI David (david.schikorski@ed.univ-lille1.fr) - FRE 2933 - Michel SALZET poster 1 (n°53) - 10h00 à 11h 

SIMERABET Malika (smmalika@yahoo.fr) - EA1046 - Benoit VALLET poster 2 (n°54) - 13h00 à 14h 

STANDAERT Annie (astandaert@univ-lille2.fr) - EMI360 - Daniel POULAIN poster 1 (n°55) - 10h00 à 11h 

STAUBER Jonathan (jostauber@hotmail.com) - UMR8017 - Michel SALZET poster 2 (n°56) - 13h00 à 14h 

TARONT Solenne (solenne.taront@pasteur-lille.fr) - U416 - André-Bernard TONNEL poster 1 (n°57) - 10h00 à 11h 

TASCHNER Christian (c.taschner@web.de) - EA2691 - Xavier LECLERC poster 2 (n°58) - 13h00 à 14h 

THURU Xavier (x-thuru@chru-lille.fr) - EPI114 - Jean-Frédéric COLOMBEL poster 1 (n°59) - 10h00 à 11h 

TIFFREAU Vincent (v-tiffreau@chru-lille.fr) - EA3608 - Christian FONTAINE poster 2 (n°60) - 13h00 à 14h 

TONNELLE Veronique (tonnelle2001@yahoo.fr) - U422 - Jean-Claude BEAUVILLAIN poster 1 (n°61) - 10h00 à 11h 

VAN HECKE Elsa (elsa.van-hecke@ed.univ-lille1.fr) - EA1033-Inserm ESPRI - Hubert HONDERMARCK poster 2 (n°62) - 13h00 à 14h 

VAN WAES Vincent (vincent.van-waes@ed.univ-lille1.fr) - EA 4052 - Muriel DARNAUDERY poster 1 (n°63) - 10h00 à 11h 

VANHOUTTE Francois (francois.vanhoutte@pasteur-lille.fr) - U547 - François TROTTEIN poster 2 (n°64) - 13h00 à 14h 

VENNA Venugopal Reddy (venu.venna@univ-lille2.fr) - EA1046 - Dominique DEPLANQUE orale "Physiologie" (2) - 9h00 à 10h 

VINCENT Audrey (vincent@lille.inserm.fr) - U560 - Isabelle VAN SEUNINGEN orale "Régulation génétique" (2) - 15h00 à 16h 

YAKOUB-AGHA Ibrahim (i-yakoub-agha@chru-lille.fr) - EA2686 - Jean-Paul DESSAINT poster 1 (n°65) - 10h00 à 11h 

Ecole Doctorale Biologie Santé de Lille 6ème Journée André VERBERT 27 septembre 2006

ÉCOLE DOCTORALE BIOLOGIE SANTÉ DE LILLE 


Colloque Annuel des Doctorants – 27 Septembre 2006 

Comité d’Organisation 

Gabriel Bidaux Maxime Culot Yohann Demont Caroline Dupont 

Valérie Fauquette Matthieu Flourakis Maria Katsogiannou Christelle Le Danvicq 

Paul Peixoto Louisa Rafa Sophie Rogée Audrey Vincent 

Maud Collyn d’Hooghe Jean-Jacques Hauser 

Avec l’aide précieuse du Comité d’Animation Scientifique de l’Ecole Doctorale Biologie 

et Santé de Lille : 

Jean-Claude D’Halluin, Malika Hamdame, Albin Pourtier, Christophe Tastet, 

Stanilas Tomavo, Bernard Vandenbunder 

Le Comité d’Organisation exprime ses remerciements aux Institutions et Sociétés qui 

ont participé à l’organisation du Congrès 2006 :

Cahier des Résumés

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