Colonnes pour la HPLC - Macherey Nagel

Chromatographie liquide 

Chromatographie liquide 

Page 

Colonnes pour la HPLC 

Colonnes analytiques remplies avec NUCLEODUR ® Nouveau! 

Phase hautement désactivée · NUCLEODUR ® Gravity 92 – 96 

Phases NUCLEODUR ® standard pour la chromatographie RP 96 – 98 

Colonnes analytiques remplies avec NUCLEOSIL ® 

Silice NUCLEOSIL ® · aperçu des modifications disponibles 99 

Phases NUCLEOSIL ® hautement désactivées pour la chromatographie RP 101 – 115 

Phases NUCLEOSIL ® standard pour la chromatographie RP 116 – 127 

NUCLEOSIL ® non modifié, phases polaires NUCLEOSIL ® 

et échangeurs d’ions NUCLEOSIL ® 128 – 137 

Colonnes analytiques remplies avec des phases d’autres 

fabricants 138 – 139 

HPLC préparative 140 – 151 

Principes de la HPLC préparative 140 – 144 

Transposer la technique analytique à la HPLC préparative 146 

Colonnes MN pour la HPLC préparative · types de colonnes 145 

Colonnes préparatives remplies avec NUCLEOSIL ® et NUCLEODUR ® 148 – 151 

Colonnes HPLC pour les applications spéciales 152 – 209 

Aperçu 153 

Colonnes pour les analyses environnementales 154 – 157 

Colonnes pour la séparation des énantiomères 158 – 171 

Colonnes pour les analyses biochimiques 172 – 194 

Colonnes pour les analyses alimentaires 195 – 199 

Principes de la chromatographie d’exclusion 200 – 202 

Colonnes pour la chromatographie par perméation de gel 202 – 209 

Polymères étalons pour la GPC 210 – 211 

Systèmes de colonnes HPLC de MACHEREY-NAGEL 212 – 219 

Résumé 212, système ChromCart ® 214, colonnes microbore 216, colonnes EC 217, 

colonnes de type Valco 218, colonnes PEEK 218, précolonnes pour colonnes MN 219 

Adsorbants pour la chromatographie liquide 

Matériaux de remplissage pour la HPLC 

Aperçu 220 

NUCLEOSIL ® et NUCLEODUR ® · gels de silice sphériques 221 – 232 

POLYGOSIL ® et POLYGOPREP ® · gels de silice irrégulières 233 – 240 

Matériaux de remplissage pour la chromatographie liquide 

à basse pression 241 – 247 

Résumé 241, gels de silice 242, oxydes d’aluminium 243, 

kieselguhr, adsorbants argileux Florex ® , Florisil ® 244, polyamide 245, 

poudres de cellulose 246 – 247 

Flash-chromatographie 248 – 249 

Accessoires pour la HPLC 

Accessoires pour colonnes en inox, capillaires en inox 

et accessoires pour capillaires 250 – 251 

Accessoires et capillaires en PEEK 252 – 253 

Vannes d’injection et commutateur pour la HPLC 253 – 254 

Principes fondamentaux de la HPLC 

Introduction aux principes de la HPLC 255 – 256 

Pics irréguliers · causes et remèdes 257 – 264 

MN 

91



Colonnes analytiques remplies avec NUCLEODUR ® 

Matériaux de remplissage NUCLEODUR ® en phase inverse 

Nouveau 

Vous trouverez un descriptif des matériaux de base NUCLEODUR ® à la page 221. 

NUCLEODUR ® C 18 Gravity · la phase haute performance 

pour le développement de méthode 

pour de l’HPLC dans des pH extrêmes 

pour les séparations analytiques exigeantes 

Désactivée 

NUCLEODUR ® C 18 Gravity est à base de notre nouveau 

gel de silice ultra-pur NUCLEODUR ® . Un procédé spécial de 

dérivation permet d’avoir une surface homogène avec une 

densité de silanes élevée (teneur en carbone ~18%). Un endcapping 

bien adapté et soigné supprime toutes les interactions 

polaires non souhaitées entre la surface de la silice et 

l’échantillon; par conséquent la Gravity est particulièrement 

bien adaptée pour les séparations de composés basiques et 

ionisables. La figure de droite présente un comparatif entre 

différentes phases C 18 désactivées sur l’élution de l’amitriptyline 

fortement basique sous des conditions isocratiques. 

Meilleure stabilité aux pH 

Un des points faible des phases à base de gel de silice est 

une de résistance limitée aux pH fortement acides et basiques. 

L’hydrolyse des liaisons siloxane ou la dissolution de la 

silice conduit rapidement à une baisse de l’efficacité de séparation. 

Par conséquent, pour des phases RP traditionnelles 

il ne faut pas utiliser longtemps des phases mobiles avec 

des pH > 8 ou pH < 2. 

En raison de la technique spéciale de greffage de la surface 

et de la faible concentration des éléments présents 

sous forme de trace, la NUCLEODUR ® C 18 Gravity peut 

être utilisée dans une gamme de pH comprise entre 1 et 11. 

En chromatographie phase inverse l’efficacité de remplissage 

est fortement affectée par la qualité du gel de silice. Des 

imperfections au niveau de la géométrie de la surface des 

particules ou des contaminants métalliques sont les raisons 

majeures d’un recouvrement inadéquat des alkylsilanes 

dans les étapes suivantes de dérivations. Il est bien connu, 

qu’un faible recouvrement de la surface et, par conséquent, 

une activité élevée des silanols libres entraînent des traînés 

de pics ”tailing“ ou des adsorptions, particulièrement avec 

des composés basiques. 

Les silices NUCLEODUR ® sont synthétisées par un procédé 

unique et soigneusement contrôlées lors du processus de fabrication. 

Ce procédé permet d’obtenir des particules de silice 

totalement sphériques. Les avantages fondamentaux du 

NUCLEODUR ® sont: 

particules idéalement sphériques et symétrie 

de surface idéale 

grande pureté · teneur en ions métalliques minime 

stabilité aux pressions 

Comparatif de différentes phases désactivées 

Colonnes: EC 250 x 4 mm 

Eluant: méthanol/20 mM KH 2 PO 4 , pH 7,0 (75 : 25, v/v) 

Débit: 1,0 ml/min 

Température: 30°C 

Pics: 

1. Dibutylphtalate 

2. Acénaphtène 

3. Amitriptyline 

1 

2 

3 

10 15 20 25 min 

Phase S (C18, 5 µm) 

Phase P (C18, 5 µm) 

Phase L (C18, 5 µm) 

co-élution des pics 1 et 2 

Phase I (C18, 5 µm) 

NUCLEODUR ® C 18 Gravity, 5 µm 

92 

MN




Influence du pH sur les silanols 

Si 

Si 

Si 

Si 

Si 

Si 

O – 

O – 

O 

O – 

O – 

O – 

O 

O – 

O 

Si 

Si 

Si 

OH – 

OH – – OOC 

OH – 

MeHN OH – 

H + 

Stabilité de NUCLEODUR ® Gravity à pH 1,5 

Colonne: EC 125/4 NUCLEODUR ® C 18 Gravity, 5 µm 

éluant: acétonitrile / 1% TFA dans l’eau (50:50, v/v), pH 1,5 

débit: 1,0 ml / min, température: 30°C, détection: UV, 230 nm, 

volume d’inj.: 5 µl, pics: 1. pyridine, 2. toluène, 3. éthylbenzène 

1 2 

après 5000 ml d’éluant 

3 

Si 

Si 

Si 

Si 

Si 

Si 

OH 

OH 

O 

OH 

OH 

OH 

Si 

O Si 

OH 

O Si 

+ NH 2 Me 

H + 

HOOC 

Les avantages d’une meilleure stabilité aux pH 

Dans le cadre du développement de méthode on est souvent 

amené à travailler dans de larges gammes de pH. Beaucoup 

de composés azotés, notamment dans les composés pharmaceutiques 

basiques, sont protonés en milieu acide ou 

neutre et montrent dans ce cas une faible rétention sur des 

phases C18 standards. On peut améliorer cette rétention en 

utilisant un pH plus élevé, du fait que les analytes ne sont 

plus protonés mais portent une charge neutre, comme c’est 

le cas entre pH 9 – 10. Pour les analytes acides l’inverse est 

vrai, la rétention maximale est obtenue pour de faibles valeurs 

de pH. La figure ci-dessus montre l’étendue de la protonation 

des silanols de surface et deux exemples d’analytes 

en pH acide et basique. 

La courbe ci-dessous montre la corrélation entre la rétention 

et le pH. 

k’ 

Corrélation entre la rétention et le pH 

pour des composés acides et basiques 

HA 

H + 

H + 

B 

1 ère injection 

0 5 10 min 

Le chromatogramme ci-dessus montre l’exceptionnelle stabilité 

des colonnes NUCLEODUR ® C 18 Gravity utilisées sous 

des conditions très acides. Les temps de rétention des trois 

composés du test de colonne restent pratiquement inchangés 

même après utilisation de 5000 ml d’éluant. En raison 

de l’extrême stabilité de la modification de la surface, 

aucune rupture de liaisons Si-O-Si n’est remarquée, et de ce 

fait il n’y a pas de dégradation du remplissage de la colonne 

dont l’efficacité demeure. 

Un autre exemple où la sélectivité peut être contrôlée par le 

pH, c’est la séparation d’un acide (ketoprofène) et d’une base 

(lidocaine) et du benzamide. Sous des conditions acides 

la lidocaine protonée est éluée très rapidement, du fait qu’il 

n’y ait pas suffisamment d’interactions hydrophobes fortes 

entre l’analyte et les chaînes C18, alors que la forme neutre 

du ketoprofène est éluée seulement après 3 minutes. A pH 

10, il y a inversion des ordres d’élution avec un temps de rétention 

beaucoup plus long pour la lidocaine basique. 

Influence de la valeur du pH sur la sélectivité 

Colonne: CC 125/4 NUCLEODUR ® C 18 Gravity, 5 µm 

éluants: A) acétonitrile/10 mM 

A) 2 

NH 4 HCO 2 , pH 3,0 (50:50, v/v) 

1 

B) acétonitrile/10 mM NH 4 HCO 3 , 

pH 10,0 (50:50, v/v) 

débit: 1 ml/min 

température: 30 °C 

détection: UV, 240 nm 

3 

volume d’injection: 2 µl 

Pics: 

1. Lidocaine 

0 2 4 min 

NH 

B) 

2 

2. Benzamide 

O 

N 

O NH 2 

BH + A – 

3 

1 

3. Kétoprofène 

O 

0 4 8 12 

pH 

0 2 4 min 

O 

OH 

MN 

93




Les chromatogrammes ci-dessous montrent la stabilité de la 

NUCLEODUR ® C 18 Gravity sous des conditions d’utilisation 

alcalines, comparativement à 4 phases RP 18 modernes actuellement 

commercialisées sur le marché. Là également, la 

Gravity ultra-pure, du fait de sa densité parfaite de silanes 

sur la surface de la silice, montre une exceptionnelle stabilité 

par rapport à des phases mobiles très alcalines. Aucune détérioration 

de la qualité de la séparation n’est constatée même 

après 300 injections, qui pourrait se remarquer par l’élargissement 

des pics ou l’allongement des temps de rétention. 

Phase X 

0 1 2 min 

NUCLEODUR ® 

C 18 Gravity 

Phase L 

0 1 2 3 min 

Stabilité de la NUCLEODUR ® C 18 

Gravity sous conditions alcalines 

comparée à différentes phases C18 

première injection 

après 300 injections 

Colonnes: EC 50/4.6 

Eluants: méthanol / eau / ammoniaque 

(20:80:0,5, v/v/v), pH 11 

Débit: 1,3 ml /min 

Température: 30 °C 

Détection: UV, 254 nm 

Volume d’inj.: 2,0 µl 

Pics: 

1. Théophylline 

2. Caféine 

Phase K 

0 1 2 min 

Phase I 

0 2 4 min 

0 1 2 3 min 

Comme déjà mentionné ci-dessus, la stabilité aux pH de la 

phase stationnaire est très utile pour notamment accroître la 

sélectivité dans le cadre de développement de méthode. Les 

deux chromatogrammes montrent la séparation de 4 alcaloïdes 

sous des conditions acides et basiques. 

A pH 2,5 les analytes protonés montrent une faible rétention 

(élution très rapide) et en plus, la séparation entre la papavérine 

et la noscapine n’est pas satisfaisante alors que les 

molécules non ionisées sont séparées avec retour à la ligne 

de base du fait de leur meilleure rétention en milieu alcalin. 

La stabilité du gel de silice aux pH sous conditions alcalines 

est principalement un effet cinétique que se base sur la vitesse 

de dissolution du support silice. Il ne faut néanmoins 

pas oublier que ce phénomène est également dépendant de 

la nature et de la concentration du tampon et de la température. 

Il est connu que l’utilisation de tampon phosphate plus 

particulièrement dans des températures élevées écourtent la 

durée de vie des colonnes analytiques même sous des conditions 

d’utilisations modérées de valeur de pH. Il faudra si 

possible, remplacer les tampons phosphates par des alternatives 

moins corrosives. 

Séparation d’alcaloïdes basiques 


Eluant A: acétonitrile 

2 

Eluant B: 20 mM (NH 4 ) 2 HPO 4 , 

pH 2,5 ou 10,0 

Gradient: 10% A (1 min) 

→ 75% A en 10 min 




3 

Volume d’inj.: 2 µl 

pH 2,5 1 4 

0 5 

2 

3 

1 

4 

10 min 

Pics: 

1. Lidocaine 

2. Papavérine 

3. Noscapine 

4. Diphénhydramine 

pH 10,0 

0 5 10 min 

94 

MN




Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEODUR ® Gravity 

Longueur → 30 mm 1) 50 mm 70 mm 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes 


granulométrie 3 µm, taille des pores 110 Å; phase octadécyle, endcapped, 18% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

Colonnes ChromCart ® 

2 mm DI 761450.20 761451.20 761452.20 761453.20 761124.30 

3 mm DI 761450.30 761451.30 761452.30 761453.30 761124.30 

4 mm DI 761450.40 761451.40 761452.40 761453.40 761124.40 

4,6 mm DI 761450.46 761451.46 761452.46 761454.46 761453.46 761124.40 

Colonnes microbore 2) 

1 mm DI 717714.10 717715.10 717716.10 717717.10 

Colonnes EC 3) 

2 mm DI 760080.20 760081.20 760082.20 761124.30 

3 mm DI 760080.30 760081.30 760082.30 761124.30 

4 mm DI 760080.40 760081.40 760082.40 761124.40 

4,6 mm DI 760080.46 760081.46 760083.46 760082.46 761124.40 




2 mm DI 761502.20 761503.20 761500.20 761501.20 761125.30 

3 mm DI 761502.30 761503.30 761500.30 761501.30 761125.30 

4 mm DI 761502.40 761503.40 761500.40 761501.40 761125.40 

4,6 mm DI 761502.46 761503.46 761500.46 761504.46 761501.46 761125.40 


1 mm DI 717706.10 717707.10 717708.10 717705.10 


2 mm DI 760102.20 760100.20 760101.20 761125.30 

3 mm DI 760102.30 760100.30 760101.30 761125.30 

4 mm DI 760102.40 760100.40 760101.40 761125.40 

4,6 mm DI 760102.46 760100.46 760103.46 760101.46 761125.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 110 Å; phase octyle, endcapped, 11 % C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 761755.20 761751.20 761753.20 761754.30 

3 mm DI 761755.30 761751.30 761753.30 761754.30 

4 mm DI 761755.40 761751.40 761753.40 761754.40 

4,6 mm DI 761755.46 761751.46 761752.46 761753.46 761754.40 


2 mm DI 760750.20 760751.20 760753.20 761754.30 

3 mm DI 760750.30 760751.30 760753.30 761754.30 

4 mm DI 760750.40 760751.40 760753.40 761754.40 

4,6 mm DI 760750.46 760751.46 760752.46 760753.46 761754.40 

Les colonnes ChromCart ® de 30 mm et les précolonnes de 8 mm sont vendues par trois et les autres colonnes par unité d’emballage. 

1) 

Les colonnes ChromCart ® de 30 mm nécessitent le kit de montage 30 mm (Art. n o 721823). 

2) 

Sur demande, les colonnes microbore sont aussi disponibles en longueur de 40, 60, 20, et 300 mm et avec des diamètres internes de 0,3, 

0,4, 0,5, 0,75 et 1,5 mm. Des précolonnes pour les colonnes microbore sont disponibles sur demande. 

3) 

Pour les colonnes EC utiliser les précolonnes ChromCart ® avec l’adaptateur de précolonne EC (Art. n o 721359). 

MN 

95



Colonnes analytiques remplies de NUCLEODUR ® 

Test de sélectivité 


Eluant: méthanol / 20 mM KH 2 PO 4 , pH 7,0 (75:25, v/v) 





Pics 

1. Uracile 

6. Naphtalène 

2. 2,7-Dihydroxynaphtalène 7. Ethylbenzène 

3. 2,3-Dihydroxynaphtalène 8. Dibutylphtalate 

4. Lidocaine 

9. Acenaphtène 

5. Toluène 


2 3 

4 5 6 

1 

7 8 

10 

Séparation d’anti-dépresseurs 


Eluant A: méthanol / acétonitrile (50:50, v/v) 

Eluant B: 20 mM KH 2 PO 4 , pH 7,0 

Gradient: 50% A → 65% A en 6 min, puis 20 min 65% A 





Pics: 

1. Nordoxepine 

2. Protriptyline 

3. Maprotiline 

1 

4. Nortriptyline 

5. Norclomipramine 

6. Doxépine 

4 

7. Imipramine 

6 


9. Clomipramine 

5 

10. Trimipramine 

117790 

2 

8 

9 

3 

7 

9 

10 

0 5 10 15 20 min 

0 5 10 15 min 

Séparation d’anti-inflammatoires 


Eluant: acétonitrile / 20 mM KH 2 PO 4 , pH 2,5 (45:55, v/v) 





Pics: 

1. Acide acétylsalicylique 

2. Sulindac 

3. Piroxicam 

4. Suprofène 

5. Tolmétine 

1 

6. Naproxène 

2 6 

7. Diflunisal 

8. Flurbiprofène 

9. Indométhazine 

10. Ibuprofène 

7 

117840 

Séparation de médicaments contre le refroidissement 


Eluant A: 50 mM KH 2 PO 4 + 5 mM Na-pentanesulfate, 

pH 2,5 

Eluant B: méthanol 

Gradient: 65% A → 45% A en 5 min 



Pics: 


1. Acide maléique 

Volume d’inj.: 

1 

5 µl 

2. Acétaminophène 

3. Pseudoéphédrine 

4. Acide benzoïque 

5. Chlorphéniramine 

6. Dextrométhorphane 

2 

3 

4 

5 

6 

8 

9 

3 4 5 

10 

0 5 10 min 

0 5 min 

117810 

96 

MN




NUCLEODUR ® C18 ec · l’outil de travail pour les analyses de routine et pour la transposition 

à l’HPLC préparative 

L’efficacité d’une séparation est contrôlée par la taille des 

particules et par la sélectivité de la phase stationnaire. En 

raison de l’exceptionnelle couverture de la surface avec des 

alkylsilanes monomériques combinée avec un endcapping 

exhaustif, la surface de la silice présente une faible activité 

des silanols. L’élution de composés critiques comme les médicaments 

basiques est possible sans adsorption ou déformation 

des pics. NUCLEODUR ® C 18 ec est disponible en 8 

différentes tailles de particules (3, 5, 10, 12, 16, 20, 30 et 

50 µm). La grande étendue des différentes tailles de particules 

permet une utilisation de la HPLC analytique rapide à la 

HPLC préparative moyenne et basse pression. 

NUCLEODUR ® C 18 ec est donc un outil idéal pour les applications 

de transposition en chromatographie liquide. 

Séparation de vitamines hydrosolubles 

Colonne: EC 125/4 NUCLEODUR ® 100-5 C 18 ec 

Eluants: A: 10 mM KH 2 PO 4 , pH 7,0; B: acétonitrile 

Gradient: 2,5 min 100% A, puis en 6 min à 20% A, 

11 min 20% A, puis en 12 min à 100% A 

Débit: 1,0 ml/min Pics: 

Température: 30 °C 1. Acide ascorbique (C) 

Détection: UV, 215 nm 2. Acide nicotinique (B) 


3. Acide p-aminobenzoïque (H1) 

4. Pyridoxine (B6) 

5. Thiamine (B1) 

6. Acide folique 

7. Biotine (H) 

8. Cyanocobalamine (B12) 

9. Riboflavine (B2) 

117900 

4 5 

2 

6 

3 

1 

7 

8 

9 

0 5 10 min 

Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEODUR ® C 8 et C 18 


NUCLEODUR ® 100-3 C 18 ec 

granulométrie 3 µm, taille des pores 110 Å; phase octadécyle, endcapped, 17,5% C; 

éluant dans la colonnes acétonitrile / eau 


2 mm DI 761001.20 761002.20 761003.20 761004.20 761005.30 

3 mm DI 761001.30 761002.30 761003.30 761004.30 761005.30 

4 mm DI 761001.40 761002.40 761003.40 761004.40 761005.40 

4,6 mm DI 761001.46 761002.46 761003.46 761006.46 761004.46 761005.40 


1 mm DI 717710.10 717711.10 717712.10 717713.10 


2 mm DI 760050.20 760051.20 760052.20 761005.30 

3 mm DI 760050.30 760051.30 760052.30 761005.30 

4 mm DI 760050.40 760051.40 760052.40 761005.40 

4.6 mm DI 760050.46 760051.46 760053.46 760052.46 761005.40 


1) Les colonnes ChromCart ® de 30 mm nécessitent le kit de montage 30 mm (Art. n o 721823). 

2) Sur demande, les colonnes microbore sont aussi disponibles en longueur de 40, 60, 20, et 300 mm et avec des diamètres internes de 0,3, 


3) Pour les colonnes EC utiliser les précolonnes ChromCart ® avec l’adaptateur de précolonne EC (Art. n o 721359). 

MN 

97




Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEODUR ® C 8 et C 18 



granulométrie 5 µm, taille des pores 110 Å; phase octadécyle, endcapped, 17,5% C; 

éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 761200.20 761150.20 761350.20 761400.20 761100.30 

3 mm DI 761200.30 761150.30 761350.30 761400.30 761100.30 

4 mm DI 761200.40 761150.40 761350.40 761400.40 761100.40 

4,6 mm DI 761200.46 761150.46 761350.46 761380.46 761400.46 761100.40 


1 mm DI 717701.10 717700.10 717702.10 717703.10 


2 mm DI 760004.20 760001.20 760002.20 761100.30 

3 mm DI 760004.30 760001.30 760002.30 761100.30 

4 mm DI 760004.40 760001.40 760002.40 761100.40 

4,6 mm DI 760004.46 760001.46 760008.46 760002.46 761100.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 110 Å; phase octyle, endcapped, 10,5 % C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 761705.20 761701.20 761703.20 761704.30 

3 mm DI 761705.30 761701.30 761703.30 761704.30 

4 mm DI 761705.40 761701.40 761703.40 761704.40 

4,6 mm DI 761705.46 761701.46 761702.46 761703.46 761704.40 


2 mm DI 760700.20 760701.20 760703.20 761704.30 

3 mm DI 760700.30 760701.30 760703.30 761704.30 

4 mm DI 760700.40 760701.40 760703.40 761704.40 

4,6 mm DI 760700.46 760701.46 760702.46 760703.46 761704.40 






98 

MN




Dans ce chapitre nous décrivons les colonnes analytiques 

remplies avec nos gels de silice NUCLEOSIL ® . Les colonnes 

remplies de gel de silice et de polymère pour les applications 

spéciales sont décrites dans le chapitre ”Colonnes pour 

applications spéciales“ à partir de la page 152. 

Gels de silice NUCLEOSIL ® · les phases standard en HPLC 

Les phases NUCLEOSIL ® sont des gels de silice poreux 

sphériques. Elles se caractérisent par leur structure SiO 2 

très pure et régulière, et ont gagnés une place importante en 

tant que matériau de remplissage dans tous les domaines de 

la chromatographie moderne. Grâce à sa granulométrie, 

NUCLEOSIL ® peut être utilisé pour la chromatographie analytique 

et préparative. Les avantages: 

grande stabilité grâce aux particules sphériques 

grande efficacité grâce à la distribution étroite de la 

taille des particules 

grande capacité de séparation grâce à la technique de 

liaison 

grande stabilité chimique et mécanique 

grande capacité de charge et taux de recouvrement 

élevés 

grande reproductibilité d’une charge à l’autre 

Cliché de NUCLEOSIL ® agrandi au microscope électronique 

à balayage (agrandissement voir échelle, 1 cm ≈ 40 µm) 

Gels de silice NUCLEOSIL ® · aperçu des modifications disponibles 

Modification 

Phases RP hautement désactivées 

C 18 HD 

C 8 HD 

C 18 AB 

voir p. 107 

voir p. 107 

voir p. 109 

C 18 NAUTILUS 

voir p. 110 

groupe fonctionel 

groupe Si-C organique 

Pour nos matériaux de remplissage en vrac, sous forme de 

sphères régulières NUCLEOSIL ® et NUCLEODUR ® ou de 

particules de forme irrégulière POLYGOSIL ® et POLYGO- 

PREP ® se référer au chapitre ”Matériaux de remplissage 

pour la HPLC“ à partir de la page 220. 

Comme le montre la photo, les matériaux de remplissage 

NUCLEOSIL ® sont constitués de particules sphériques de 

gel de silice complètement poreux. Les tailles des pores disponibles 

sont 50, 100, 120, 300, 500, 1000 et 4000 Å avec 

des volumes des pores entre 0,65 et 1,0 ml/g. La granulométrie 

pour les séparations analytiques et préparatives est de 

3 µm (seulement pour NUCLEOSIL ® 50, 100 et 120) à 10 µm 

avec une distribution très étroite de la taille des particules. 

Les différents groupes de matériaux NUCLEOSIL ® et les colonnes 

remplies avec ces phases seront décrits en détail 

dans les pages suivantes. Les types NUCLEOSIL ® à pores 

étroits montrent une résistance à la pression de 600 bars, 

NUCLEOSIL ® 120 résiste au moins à 800 bars. Les silices 

NUCLEOSIL ® à pores larges sont stables à une pression de 

300 ou 400 bars. Ainsi tous les types de NUCLEOSIL ® 

s’adaptent à l’ensemble des techniques HPLC. 

Matériaux de remplissage modifiés 

Les silices NUCLEOSIL ® sont disponibles aussi bien non 

modifiées qu’avec de nombreuses phases chimiquement 

liées. Parmi les gels de silice modifiés, nous différencions 

ceux qui sont principalement utilisés pour la chromatographie 

en phase inverse (phases désactivées C 18 AB, C 18 HD, 

C 8 HD, PROTECT I et NAUTILUS, et les phases RP standards 

C 18 , C 8 ec, C 8 , C 4 , C 2 et phényle) de ceux qui sont 

modifiés chimiquement par des groupes polaires (comme 

CN, NO 2 , NH 2 , N(CH 3 ) 2 , OH) qui sont caractérisés par des 

séparations sélectives. Nous fabriquons également des 

échangeurs d’ions à partir de la silice NUCLEOSIL ® de 

100 Å (NUCLEOSIL ® SA et SB), stables dans un domaine 

de pH de 2 à 8,5. Ces échangeurs d’ions ne gonflent pas et 

présentent, par opposition aux résines échangeuses d’ions 

classiques, une perméabilité constante, même en cas de 

changement de la force ionique et /ou du pH de l’éluant. 

taille des pores [Å] 

50 100 120 300 500 1000 4000 

particules 

octadécyle, hautement désactivée 

✔ 3 µm 

-(CH 2 ) 17 -CH 3 ✔ 7 µm 

modification monomérique 

✔ 5 µm 

octyle, hautement désactivée 

✔ 3 µm 

-(CH 2 ) 7 -CH 3 


✔ 5 µm 


modification polymérique 

-(CH 2 ) 17 -CH 3 

✔ ✗ 5 µm 


groupe polaire dans la chaîne alkyle 

pour éluants jusqu’à 100% d’eau 

✔ = colonne standard; ✗ = disponible comme phase en vrac; ❉ = colonne spéciale 

✔ 3 µm 

✔ 5 µm 

MN 

99




Gels de silice NUCLEOSIL ® · aperçu des modifications disponibles 

Modification 

PROTECT I 

voir p. 112 

Phases RP standard 

C 18 

voir p. 118 

C 8 ec 

voir p. 122 

C 8 

voir p. 122 

C 6 H 5 ec 

voir p. 124 

C 6 H 5 

voir p. 124 

C 4 

voir p. 126 

C 3 

voir p. 185 

C 2 

voir p. 127 

phase RP spéciale 

hautement désactivée, 


octadécyle, endcapped 

octyle, endcapped 

octyle, non endcapped 

phényle, endcapped 

phényle 

butyle 

propyle 

taille des pores [Å] 

particules 

50 100 120 300 500 1000 4000 

✔ 3 µm 

✔ 5 µm 

✔✗ ✔✗ 3 µm 

✔✗ ✔✗ ✔✗ ✔✗ 5 µm 

✔✗ ✔✗ ✗ ✔✗ ✔✗ ✔✗ 7 µm 

-(CH 2 ) 17 -CH 3 ✔✗ ✔✗ ✗ 10 µm 

-(CH 2 ) 7 -CH 3 

✔✗ ✔✗ 5 µm 

-(CH 2 ) 7 -CH 3 ✔✗ ✗ ✗ 10 µm 

✔✗ 3 µm 

✔✗ ✔✗ ✔✗ 5 µm 

✔✗ ✗ ✗ ✗ 7 µm 

-(CH 2 ) 3 

✔✗ 5 µm 

-(CH 2 ) 3 

✔✗ ✗ ✗ ✗ ✗ 7 µm 

✔✗ 5 µm 

-(CH 2 ) 3 -CH 3 ✗ 10 µm 

✔✗ ✔✗ 5 µm 

✔✗ ✗ ✗ ✗ 7 µm 

❉ 5 µm 

3 2 

✔✗ 5 µm 

diméthyle 

-(CH ) 

✔✗ 7 µm 

Phases NUCLEOSIL ® polaires et échangeurs d’ions NUCLEOSIL ® 

cyano (nitrile) 

✔✗ 5 µm 

CN 

✔✗ ✗ ✗ 7 µm 

voir p. 130 

-(CH 2 ) 3 -CN ✔✗ 10 µm 

nitro 

-(CH 2 ) 3 NO 2 

✗ 10 µm 

NO 2 

voir p. 131 

OH 

groupe fonctionel 

groupe Si-C organique 

diol ✔ 5 µm 

-(CH 2 ) 3 -O-CH 2 -CH-CH 2 

✔✗ ✗ ✗ ✗ ✗ 7 µm 

voir p. 132 

OH OH 

amino 

✔✗ 3 µm 

NH 2 ✔✗ 5 µm 

✔✗ ✗ 7 µm 

voir p. 134 

-(CH 2 ) 3 -NH 2 ✗ 10 µm 

diméthylamino 

✔✗ 5 µm 

N(CH 3 ) 2 ✗ 10 µm 

voir p. 135 

-(CH 2 ) 3 -N(CH 3 ) 2 

acide sulfonique 

✔✗ 5 µm 

SA 

voir p. 136 

-(CH 2 ) 3 SO 3 Na ✔✗ 10 µm 

ammonium quaternaire 

✔✗ 5 µm 

SB 

voir p. 137 -(CH 2 ) 3 CH 2 -N + (CH 3 ) 3 Cl – ✔✗ 10 µm 

✔ = colonne standard; ✗ = disponible comme phase en vrac; ❉ = colonne spéciale 

100 

MN




Phases désactivées pour la chromatographie RP 

Si OH phase classique NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 

Si 

O 

Si(CH 3 ) 3 

Il est bien connu que la surface de la silice contient des groupes 

actifs qui peuvent induire des interactions non désirées 

avec les analytes, même après dérivatisation et endcapping. 

Pour NUCLEOSIL ® , MACHEREY-NAGEL propose quatre 

approches différentes pour réduire les interactions avec les 

groupes silanols. Il en résulte 4 types de phases RP désactivées, 

qui couvrent une large échelle de sélectivité pouvant 

ainsi résoudre presque tous les problèmes de séparations 

rencontrés en phase inverse. 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB 

la phase classique octadécyle désactivée Acide et Base 

avec une modification polymérique 

Les liens transversaux avec le squelette carbonique augmentent 

la teneur en carbone et rendent la phase apolaire. 

Cette phase fait preuve d’une haute sélectivité stérique. 

NUCLEOSIL ® 100-3 C 8 HD · 100-5 C 8 HD · 100-3 C 18 HD · 100-5 C 18 HD 

une famille de phases désactivées avec une Haute Densité 

de modifications monomériques 

disponible sous forme de phase octyle et de phase octadécyle, 

avec des particules de 3 ou 5 µm 

Ces phases présentent un faible saignement (en raison de la 

forte densité des groupements alkyles). Elles sont donc 

idéales pour des analyses de traces et spécialement 

recommandées pour le couplage LC/MS. 

NUCLEOSIL ® 100-3 C 18 NAUTILUS, NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 NAUTILUS 

Si 

Si 

NUCLEOSIL ® 100-3 PROTECT I, NUCLEOSIL ® 100-5 PROTECT I 

Si 

Si 

OH 

O 

OH 

O 

Pol 

Pol 

Si(CH 3 ) 3 

pro 

pro 

Si(CH 3 ) 3 

phase octadécyle désactivée, stable sous conditions 

aqueuses pouvant atteindre 100% d’eau 

Un groupement polaire inclus dans la chaîne carbonée permet 

de travailler dans des conditions d’élution purement 

aqueuses. D’autre part, en raison des interactions polaires 

supplémentaires, la sélectivité et les caractéristiques des 

temps de rétention peuvent présenter de nettes différences 

par rapport aux phases C18 pures. 

une phase RP de silice désactivée avec modification 

monomérique spéciale 

Un groupement protecteur dans le squelette carboné interagit 

avec les groupements silanols, en fait les protège des 

analytes. 

Bien que la PROTECT I représente une phase désactivée 

remarquable elle présente une hydrophilie plus élevée que 

les phases AB et HD. 

MN 

101




Phases désactivées pour la chromatographie RP 

Pourquoi est-il important d’avoir une bonne désactivation de la silice? 

Les interactions de composés basiques avec des résidus silanols 

sur de la silice standard peuvent causer d’importants 

problèmes notamment dans la symétrie des pics et la sensibilité 

de détection. Une modification de surface ”normale“ 

laisse quelques groupes silanols à la surface de la silice, qui 

Nos adsorbants sont fabriqués en accord avec des critères de qualité très stricts. 

Toutes les phases désactivées NUCLEOSIL ® présentent: 

sélectivité variée 

endcapping optimisé 

silice de haute pureté 

reproductibilité remarquable de charge à charge 

une excellente forme de pic pour les composés basiques 

peuvent sévèrement interférer avec la chromatographie en 

phase inverse de groupements polaires, particulièrement si 

l’on travaille sans tampons ou sans réactifs PIC. Même un 

simple endcapping ne résout pas toujours ces problèmes. 

pour toute séparation la phase RP optimale 

phase octadecyle avec modification 

monomérique et groupe polaire 

NUCLEOSIL ® dans la chaîne alkyle 

C 18 NAUTILUS 

phase octadécyle 

avec modification 

monomérique 

phase octadécyle 


polymérique 

NUCLEOSIL ® 

C 18 HD 

NUCLEOSIL ® 

C 18 AB 

augmentation de 

relativement 

plus 

hydrophobe 

la 

silices 

désactivées 

pour la 

RPLC 

teneur en carbone 

relativement 

plus 

hydrophile 

NUCLEOSIL ® 

C 8 HD 

NUCLEOSIL ® 

PROTECT I 

phase octyle 


monomérique 

phase octyle avec modification 

monomérique et groupe polaire 

dans la chaîne alkyle 

102 

MN




Kits de développement de méthodes en phase inverse 

Fast-LC d’anilines 

Colonne: CC 30/4 NUCLEOSIL ® 100-5 PROTECT I, 

30 x 4 mm DI, 

Art. n o 721157.40 

2 

Eluant: méthanol – eau 

(45:55, v/v) 

1 

Débit: 2 ml/min 


Pics: 

1. Aniline 

3 

2. N,N-Diméthylaniline 

3. N,N-Diéthylaniline 

Pour sélectionner la phase RP afin de réaliser votre séparation, 

nous vous offrons trois kits de développement de méthodes 

RP contenant des colonnes ChromCart ® de 30 mm 

avec trois différents diamètres internes: 

Chaque kit contient un kit de montage 30 mm et une colonne 

de 30 x 2, 30 x 4 mm ou 30 x 4,6 mm, respectivement, remplie 

avec les phases: 

NUCLEOSIL ® PROTECT I, NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 HD, 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 HD, NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB et 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 NAUTILUS 

Références de commande 

Désignation 

Art. n o 

Kit de développement ChromCart ® 2 mm 721125.20 

Kit de développement ChromCart ® 4 mm 721125.40 

Kit de développement ChromCart ® 4,6 mm 721125.46 

114980 

0 1 2 min 

www.mn-net.com 

Comparaison de la sélectivité des phases désactivées RP 

Séparation d’un mélange test sur quatre phases désactivées NUCLEOSIL ® 

Les chromatogrammes montrent les différences concernant les temps de rétention et les sélectivités des quatre phases. 

Colonnes: A) CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 HD, Art. n o 721850.40; B) CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB, Art. n o 721663.40; 

C) CC 250 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 HD, Art. n o 721498.40; D) CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 PROTECT I, Art. n o 721150.40 

Eluant: méthanol – eau (60:40); débit 0,8 ml/min; température 35 °C 


Pics: 

1. p-Ethylaniline 

2. Diéthylphtalate 


4. Benzoate d’éthyle 

5. Toluène 


7. Ethylbenzène 

C 18 HD C 18 AB C 8 HD PROTECT I 

2,3 

2,3 

3 

4 

3 4 

4 

4 

1 

2 

1 

2 

1 

5 

1 

5 

7 

5 

6 

7 

5 

7 

6 

6 

7 

6 

0 10 20 

min 

30 

0 10 20 

min 

30 

0 10 20 min 0 10 min 

MN 

103




Caractérisation des différentes phases NUCLEOSIL ® RP 

La séparation d’un mélange de substances dépend de plusieurs facteurs. Basés sur les suggestions de Tanaka 1) et Johnson 2) 

nous comparons nos adsorbants RP en respectant les paramètres suivants: 

A capacité k’ (pentylbenzène) nombre de chaînes alkyles, teneur en C 

B hydrophobicité α (pentylbenzène, butylbenzène) sélectivité des groupes CH 2 

C sélectivité stérique α (triphénylène, o-terphényl) différences stériques des analytes 

D capacité des groupes silanol α (caféine, phénol) groupes silanol résiduels 

E capacité d’échange d’ions à pH 7,6 α (benzylamine, phénol) groupes silanol résiduels 

F capacité d’échange d’ions à pH 2,8 α (benzylamine, phénol) groupes silanol résiduels 

Le facteur de capacité du pentylbenzène (axe A) et la sélectivité 

entre le pentyl- et butylbenzène (axe B) sont une mesure 

de l’interaction hydrophobe d’une phase stationnaire. 

Naturellement, les phases modifiées octadécyles montrent 

de très larges valeurs pour ces paramètres. Le facteur de capacité 

de la NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 HD prouve la forte densité 

des groupes alkyles de cette phase comparée à la 

phase désactivée NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB et la phase 

classique NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 . 

La diminution de la chaîne alkyle d’une C 18 à une C 8 a pour 

conséquence une diminution de la teneur en carbone et une 

réduction des interactions hydrophobes. 

La sélectivité stérique (axe C), c’est-à-dire la capacité d’un 

adsorbant de différencier des molécules de même hydrophobicité, 

mais de différentes formes (planaires ou non planaires), 

est particulièrement large pour la phase NUCLEOSIL ® 

100-5 C 18 AB. 

Les axes D – F décrivent la qualité de la désactivation sous 

différentes conditions. 

1) N. Tanaka et al., J. Chromatogr. Sci. 27, 721 (1989) 

2) C. M. Johnson et al., Chromatographia 44, 151 (1997) 

Caractéristiques de quelques phases NUCLEOSIL ® désactivées 

Phase Graphique de Tanaka Hydrophobicité Désactivation 

de la phase 

pour comparaison: 

NUCLEOSIL ® 

100-5 C 8 

Sélectivité 

stérique 

A 6.5 

A 6.5 

NUCLEOSIL ® 

100-5 C 8 HD 

F 

0 

3.25 

0.1 

B 

1.5 

1.375 

F 

0 

0.1 

3.25 

1.375 

B 

1.5 

moyenne très bonne faible 

E 0 

1.5 

0.7 

1.5 

2.2 C 

E 0 

1.5 

0.7 

1.5 

2.2 C 

0.2 D 

0.2 D 

NUCLEOSIL ® 

100-5 C 18 HD 

F 

0 

A 6.5 

3.25 

1.375 

0.1 

1.5 

1.5 

B 

1.5 

Rem: cette phase n’est pas 

endcapped 

pour comparaison: 

NUCLEOSIL ® 

100-5 C 18 

A 6.5 

très élevée très bonne moyenne 

NUCLEOSIL ® 

100-5 C 18 AB 

E 0 

F 

0 

E 0 

0.7 

0.2 D 

A 6.5 

3.25 

1.375 

0.1 

1.5 

1.5 

0.7 

2.2 C 

B 

1.5 

2.2 C 

F 

0 

E 0 

1.5 

0.1 

0.7 

3.25 

1.375 

1.5 

B 

1.5 

2.2 C 

0.2 D 

cette phase est endcapped 

élevée bonne élevée 

0.2 D 

104 

MN




Phases désactivées · taille des particules et efficacité de séparation 

Selon les principes fondamentaux en HPLC 1) une courte 

trajectoire de diffusion dans les pores de la phase stationnaire 

est nécessaire afin d’atteindre une grande efficacité de la 

colonne. Pour des particules totalement poreuses cette distance 

est d’autant plus courte que la taille de la particule est 

petite. Selon l’équation de van Deemter: 

h A⋅ 

ν 0, 

33 B 

= + --- + C ⋅ ν 

ν 

A: terme de remplissage, la taille des particules, leur répartition 

dimensionnelle et la régularité du remplissage 

sont à l’origine de chemins préférentiels qui 

peuvent conduire à des échanges imparfaits entre les 

deux phases (facteur de diffusion d’Eddy) 

B: terme de diffusion dans la phase mobile (diffusion 

moléculaire longitudinale dans la colonne) 

C: terme d’équilibre de distribution entre la phase stationnaire 

et la phase mobile 

ν: vitesse linéaire de la phase mobile 

le terme C décrit la résistance au transfert de masse du soluté 

entre les deux phases. Dans les pores des plus petites 

particules, les trajectoires de diffusion sont plus courts, ce 

qui fera diminuer la valeur C et permettra d’atteindre de faibles 

valeurs HEPT (hauteur équivalente à un plateau théorique). 

Ainsi, quand la vitesse de la phase mobile est dans sa 

gamme optimale, les particules de 3 µm augmentent incroyablement 

l’efficacité de la colonne comparé aux particules 

de 5 µm. 

Une colonne remplie en 3 µm a une efficacité de 

séparation environ deux fois supérieure à celle 

d’une colonne remplie en 5 µm. 

Le choix d’un diamètre de particules plus petit permet d’utiliser 

des colonnes plus courtes pour une séparation rapide. 

Ceci est démontré lors de la séparation de différents dérivés 

de la vanilline. Le temps d’analyse peut être diminué à un 

cinquième en remplaçant la colonne classique 250 mm/5 µm 

NUCLEOSIL ® NAUTILUS par une colonne de 70 mm remplie 

de particules de 3 µm, avec des pics plus étroits. 

La forte diminution du temps d’analyse n’est pas seulement 

due à la réduction de la longueur de la colonne, mais aussi à 

l’augmentation du débit de 50%. Les problèmes d’étalement 

des pics ne se posent pas car pour les remplissages avec de 

plus petites particules le débit optimal de la phase mobile est 

plus élevée. Un autre avantage de l’utilisation de ce type de 

colonne, est bien sûr une remarquable diminution de la consommation 

de solvants. 

Phases 3 µm NUCLEOSIL ® disponibles: 


NUCLEOSIL ® 100-3 PROTECT I 

NUCLEOSIL ® 100-3 C 8 HD 


A côté de ces phases désactivées, les phases standards 

NUCLEOSIL ® 100-3 C 18 , NUCLEOSIL ® 120-3 C 18 et 

NUCLEOSIL ® 120-3 C 8 sont toujours disponibles. 

Toutes les phases en 3 µm sont disponibles sous des longueurs 

et diamètres internes de colonnes différentes et sont 

utilisables pour des applications standards et à plus grande 

échelle. 

Comme nos silices haute performance de 5 µm, les matériaux 

de remplissage en phase inverse NUCLEOSIL ® 3 µm 

sont caractérisés par les données suivantes: 

silice NUCLEOSIL ® de haute pureté 

dérivés de greffage homogène avec des silanes monofonctionnels 

spéciaux 

endcapping perfectionné 

remarquable symétrie de pics pour les composés basiques 

excellente reproductibilité de charge à charge et de colonne 

à colonne 

Séparation d’isovanilline, vanilline et éthoxyvanilline 

Colonne: a) CC 70/4 NUCLEOSIL ® 100-3 C 18 NAUTILUS 

b) CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 NAUTILUS 

Eluant: ACN/eau/H 3 PO 4 (20:80:0,1, v/v/v) 

température ambiante 

Débit: a) 1,5 ml/min, b) 1 ml/min 

Détection: UV 280 nm 

Pics: 

1. Isovanilline 

a) 

2. Vanilline 

3. Ethoxyvanilline 

b) 

2 4 6 

0 5 10 15 20 25 

min 

1) Meyer, V. (1999) Praxis der Hochleistungs-Flüssigchromatographie, 

8. Auflage, Laborbücher Chemie, Otto 

Salle Verlag GmbH & Co. KG, Verlag Sauerländer AG, 

Frankfurt am Main, Aarau 

115770 

MN 

105



Phases NUCLEOSIL ® désactivées pour la chromatographie RP 

Phases désactivées pour la chromatographie RP · NUCLEOSIL ® HD 

NUCLEOSIL ® HD est une famille de phases inverses modifiées 

octyle ou octadécyle en 3 ou 5 µm avec une optimisation 

de la désactivation. 

La NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 HD est une phase inverse modifiée 

octyle avec une taille de particule de 5 µm. Comme nous 

pouvons le voir sur la figure ci-dessous, le composé basique 

lidocaine est élué sans tailing. Comparé à la NUCLEOSIL ® 

100-5 C 18 HD la diminution de la longueur de la chaîne carbonique 

entraîne une réduction des interactions hydrophobes. 

Les chromatogrammes montrent la séparation de composés 

ayant différents groupes fonctionnels sur les deux types de 

phase. Le toluène et le naphtalène (les moins polaires des 

composés aromatiques) sont élués plus tôt sur la phase C 8 

HD; il en résulte une inversion d’élution entre le toluène et la 

lidocaine. 


Comparaison de la sélectivité entre les phases NUCLEOSIL ® HD octadécyle et octyle 

Séparation d’un mélange test sur NUCLEOSIL ® C 8 HD 

Colonne: CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 HD, 

Art. n o 721498.40 

Eluant: MeOH – 25 mM NaH 2 PO 4 pH 7,0 (65:35) 



1 

3 


Pics: 

2 

4 

1. Phénol 

2. 5’-(p-Méthylphényl)- 

5-phénylhydantoin 


5 

4. Lidocaine 

5. Toluène 


0 5 10 15 min 

6 

110000 

Séparation d’un mélange test sur NUCLEOSIL ® C 18 HD 


Art. n o 721850.40 





Pics: 

1 3 

1. Phénol 

4 

2 

2. 5’-(p-Méthylphényl)- 

6 

5-phénylhydantoin 


5 

4. Lidocaine 

5. Toluène 


0 10 20 min 

110650 

Très haute qualité! · Reproductibilité de charge à charge pour NUCLEOSIL ® HD 

Séparation d’un mélange test sur trois charges différents 

de NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 HD 

Colonne CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 HD, Art. n o 721498.40 

éluant méthanol – eau (55:45, v/v); débit 1 ml/min 

température 40 °C; détection: UV, 254 nm 

2 

Pics: 

1. Thiourée 

4 

2. Aniline 

1 

3. Phénol 

5 

4. o,m,p-Toluidine 

3 

6 7 


6. Benzoate de méthyle 

7. Toluène 

8 8. Ethylbenzène 

Facteur de capacité 

8 

k’ (toluène) 

6 

k’ (benzoate d’éthyle) 

4 

α (MPPH/toluène) 

2 

k’ (MPPH) 

α (benzoate d’éthyle/toluène) 

0 

charge A B C D E F 

Sélectivité 

7 

6 

5 

4 

3 

2 

1 

0 10 20 min 

110890 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 HD, acétonitrile – eau (50:50, 

v/v), 1 ml/min, 25 °C, UV 254 nm 

106 

MN





Octyle 3 µm 

particules de silice sphériques de granulométrie 3 µm 

avec une modification octyle monomérique 


Octyle 5 µm 


avec une modification octyle monomérique 


Octadécyle 3 µm 


avec une modification octadécyle monomérique 




avec une modification octadécyle monomérique 

Ces matériaux de remplissage sont fabriqués à partir de 

NUCLEOSIL ® 100 avec des granulométries de 3 ou 5 µm. 

Ainsi, la protection de la surface, le facteur de capacité et la 

sélectivité sont les mêmes pour chaque matériau. Cependant, 

le nombre de plateaux théoriques est supérieur lorsque 

l’on démarre avec une silice de granulométrie 3 µm. L’utilisation 

de particules de 3 µm permet d’utiliser des colonnes 

plus courtes (réduction du temps de l’analyse) et améliore la 

sensibilité de la détection du fait du rétrécissement de la largeur 

des pics. 

Le chromatogramme montre pour la séparation du paracétamol 

et de la caféine la haute efficacité de la colonne 

NUCLEOSIL ® 100-3 C 8 HD comparée à la colonne équivalente 

en 5 µm pour deux colonne de la même longueur (a et b). 

La hauteur des pics sur le chromatogramme démontre l’amélioration 

de la sensibilité du matériel en 3 µm. Cependant, si la 

longueur de la colonne est réduite de 250 à 150 mm, une séparation 

avec retour à la ligne de base, sous les conditions 

chromatographiques données ne peut être réalisée (c). Dans 

ce cas, l’utilisation d’une colonne en 250 mm est fortement recommandée 

afin d’obtenir les meilleurs résultats. 

Séparation de paracétamol, caféine et l’acide acétylsalicylique 

Préparation de l’échantillon: 

Dissoudre 1 comprimé dans 20 ml d’ACN/eau (50:50), diluer 1:10. Eluant: ACN/eau/H 3 PO 4 , 20:80:0,1 (v/v/v) 

Colonnes: a) EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 HD 


b) EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-3 C 8 HD 1 Débit: 1 ml/min 

c) EC 150/4 NUCLEOSIL ® 100-3 C 8 HD 

Détection: UV 254 nm 

2 

Pics: 

1. Paracétamol 

2. Caféine 

3. Acide acétylsalicylique 

a) b) c) 

3 

116960 

2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 min 

Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEOSIL ® HD 

Longueur → 30 mm 1) 70 mm 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes 


granulométrie 3 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, endcapped, modification monomérique, 13% C; 



2 mm DI 721656.20 721657.20 721658.20 721669.20 721612.30 

3 mm DI 721656.30 721657.30 721658.30 721669.30 721612.30 

4 mm DI 721656.40 721657.40 721658.40 721669.40 721612.40 

4,6 mm DI 721656.46 721657.46 721658.46 721704.46 721669.46 721612.40 


1 mm DI 717115.10 717116.10 717117.10 717118.10 


2 mm DI 720526.20 720528.20 721612.30 

3 mm DI 720526.30 720528.30 721612.30 

4 mm DI 720526.40 720528.40 721612.40 

4,6 mm DI 720526.46 720527.46 720528.46 721612.40 

D’autres longueurs de colonnes sont disponibles sur demande (fabrication spéciale) 

MN 

107




Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEOSIL ® HD 



granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, endcapped, modification monomérique, 13% C; 



2 mm DI 721071.20 721499.20 721497.20 721498.20 721500.30 

3 mm DI 721071.30 721499.30 721497.30 721498.30 721500.30 

4 mm DI 721071.40 721499.40 721497.40 721498.40 721500.40 

4,6 mm DI 721071.46 721499.46 721497.46 721501.46 721498.46 721500.40 


1 mm DI 717043.10 717046.10 717049.10 717057.10 


2 mm DI 720195.20 720196.20 721500.30 

3 mm DI 720195.30 720196.30 721500.30 

4 mm DI 720195.40 720196.40 721500.40 

4,6 mm DI 720195.46 720194.46 720196.46 721500.40 


granulométrie 3 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, modification monomérique, 20% C; 



2 mm DI 721196.20 721493.20 721491.20 721492.20 721494.30 

3 mm DI 721196.30 721493.30 721491.30 721492.30 721494.30 

4 mm DI 721196.40 721493.40 721491.40 721492.40 721494.40 

4,6 mm DI 721196.46 721493.46 721491.46 721495.46 721492.46 721494.40 


1 mm DI 717037.10 717038.10 717039.10 717040.10 


2 mm DI 720191.20 720192.20 721494.30 

3 mm DI 720191.30 720192.30 721494.30 

4 mm DI 720191.40 720192.40 721494.40 

4,6 mm DI 720191.46 720193.46 720192.46 721494.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, modification monomérique, 20% C; 



2 mm DI 721072.20 721851.20 721852.20 721850.20 721853.30 

3 mm DI 721072.30 721851.30 721852.30 721850.30 721853.30 

4 mm DI 721072.40 721851.40 721852.40 721850.40 721853.40 

4,6 mm DI 721072.46 721851.46 721852.46 721854.46 721850.46 721853.40 


1 mm DI 717033.10 717024.10 717015.10 717001.10 


2 mm DI 720296.20 720280.20 721853.30 

3 mm DI 720296.30 720280.30 721853.30 

4 mm DI 720296.40 720280.40 721853.40 

4,6 mm DI 720296.46 720294.46 720280.46 721853.40 


1) 


2) 

Sur demande, les colonnes microbore sont aussi disponibles en longueur de 40, 60, 20, et 300 mm et avec des diamètres internes de 0,3, 


3) 


Chaque colonne est testée individuellement et livrée avec son chromatogramme test et les conditions du test 

108 

MN




NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB 


silice sphérique de granulométrie 5 µm avec une modification octadécyle polymérique 

Sélectivité stérique de NUCLEOSIL ® C 18 AB 

Colonnes: a) EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 , b) EC 250/4 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB, 250 x 4 mm DI; éluant MeOH – 

H 2 O (80:20, v/v), débit 1 ml/min, température 40 °C, détection 

UV, 254 nm 

Pics: 

1. Phénol 

6. o-Terphényl 


7. Anthracène 


8. Pentylbenzène 

4. Dibutylphtalate 

9. Triphénylène 

5. Butylbenzène 

1 

2 

3 

4 

5 

7 

8 

6 

9 

Tailing, changement des ordres d’élution, diminution de la 

sensibilité, sont des problèmes couramment rencontrés lors 

de la séparation de substances basiques ou acides sur des 

phases inverses conventionnelles. La modification octadécyle 

polymérique de la phase NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB 

protège la silice du fait des liens C 18 transversaux. De plus, 

celle-ci est inerte vis à vis des substances basiques et acides 

qui ont une très forte affinité pour la silice. La teneur en 

carbone (25%) est nettement supérieure à celle d’une phase 

octadécyle standard. 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB est une phase inverse non polaire 

et hydrophobe avec une stabilité élevée contre les hydrolyses 

dans les milieux alcalins comparée aux phases 

standards. 

De plus la sélectivité stérique de cette phase est particulièrement 

large. 

a) 

1 

2 

3 

4 5 

6 

7 

8 

9 

117670 

b) 

0 

5 10 15 20 min 

Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB 

matériau de remplissage: granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, modification polymérique, 

25% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 



2 mm DI 721073.20 721719.20 721623.20 721663.20 721603.30 

3 mm DI 721073.30 721719.30 721623.30 721663.30 721603.30 

4 mm DI 721073.40 721719.40 721623.40 721663.40 721603.40 

4,6 mm DI 721073.46 721719.46 721623.46 721643.46 721663.46 721603.40 


1 mm DI 717032.10 717023.10 717014.10 717006.10 


2 mm DI 720935.20 720936.20 721603.30 

3 mm DI 720935.30 720936.30 721603.30 

4 mm DI 720935.40 720936.40 721603.40 

4,6 mm DI 720935.46 720305.46 720936.46 721603.40 







MN 

109

O 

O 

H 

H 

H 





H 

la formule pour la chromatographie RP avec des milieux aqueux 

Pol 

O H 

Si 

O H 

Si 

Avec des phases mobiles très aqueuses (> 95%), les phases 

inverses classiques montrent souvent, après un certain temps, 

une détérioration des performances de la colonne. La chaîne 

alkyle apolaire perd sa structure en forme de brosse qui maintenait 

les interactions hydrophobes entre la phase stationnaire 

et les analytes. La phase ainsi s’effondre et, par conséquent 

on observe une diminution drastique des temps de rétention et 

une faible résolution. Ce phénomène peut se produire très rapidement 

ou après un certain temps. 

H 2 O 

H 2 O 

A 

A 

H 2 O 

H 2 O 

A 

H 2 O 

H 2 O 

H 2 O 

A 

H 2 O 

H 2 O 

H 2 O 

A 

H 2 O 

H 2 O 

A 

H 2 O 

H 2 O 

A 

H 2 O 

A 

H 2 O 

A 

Même après plusieurs jours ou semaines d’utilisation de la 

colonne avec des éluants aqueux purs, les chaînes C 18 de la 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 NAUTILUS maintiennent leur caractère 

lipophile. Une diminution significative des temps de 

rétention n’est pas observée, comme le montre le diagramme 

suivant. 

100 

80 

60 

40 

20 

Collapse des phases en milieu aqueux 

changement des temps de rétention avec des éluants 100% 

aqueux 

% de la temps de 

rétention initial 


phase RP classique 

0 

0 2 4 6 8 

jour 

Start 

2 

4 

6 

8 

La phase s’effondre, et on observe une diminution des 

temps de rétention sur une phase inverse classique avec 

des éluants 100% aqueux. A = analyte 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 NAUTILUS est une phase inverse 

à base de silice, greffée C 18 , de haut degré de pureté, avec 

un endcapping perfectionné qui est totalement stable sous 

des conditions 100% aqueuses sans modifiant organique. 

La remarquable stabilité de la NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 

NAUTILUS vis à vis des solutions aqueuses est due à un 

nouveau type de silane C 18 lié covalement (synthétisé par 

les laboratoires R&D de MN) et à un groupement fonctionnel 

inclus dans la chaîne. Ceux-ci forment la force de résistance 

de cette phase RP aux conditions aqueuses. En comparaison 

à une C 18 classique où il y a des interactions hydrophobes 

entre les analytes et la phase, la NUCLEOSIL ® 100-5 

C 18 NAUTILUS présente également des interactions polaires 

via des activités de liaisons hydrogènes et des forces dipôle-dipôle. 

Ce type d’interactions peut influer sur les temps 

de rétention (t R ) et améliorer la sélectivité (α), particulièrement 

lors de la séparation de composés polaires. 

Start 

2 

4 

6 

1 2 

3 

4 

5 

4 8 min 

Séparation de nucléobases dans un 

éluant purement aqueux 

Colonne: CC 125/4 NUCLEOSIL ® 

100-5 C 18 NAUTILUS 

Eluant: 20 mM formiate d’ammonium, 

pH 4,1 




Pics: 

1. Cytosine 

2. Uracile 

3. Hypoxanthine 

4. Xanthine 

5. Adénine 

En plus du caractère polaire du groupe fonctionnel inclus 

dans la chaîne carbonée, la NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 

NAUTILUS présente également des propriétés hydrophobes 

similaire à la phase NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 . 

115640 


110 

MN




Cette colonne convient aussi pour l’analyse de composés 

basiques. Dans le test de sélectivité à droite, la base forte p- 

éthylaniline est éluée comme un signal net avec une remarquable 

forme de pic. Un autre exemple qui montre l’excellente 

désactivation de la phase NUCLEOSIL ® NAUTILUS 

est l’élution de la pyridine sans phénomène de tailing. 

Conditions chromatographiques: 

Colonne CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 NAUTILUS; 

éluant méthanol – eau (à gauche 55:45, à droite 30:70, v/v); 

débit à gauche 0,8 ml/min, à droite 1 ml/min; température 

40 °C; détection UV, 254 nm. Pics (à gauche): 1. uracile, 2. 

aniline, 3. phénol, 4. p-éthylaniline, 5. N,N-diméthylaniline, 6. 

toluène, 7. éthylbenzène 

Références bibliographiques 

D. Rieger, H. Riering, Int. Laboratory, Vol. 30, p. 41 

Test de sélectivité 

1 2 

3 

4 

5 

6 

7 

N 

Pyridine/ 

phénol 

4 8 12 16 20 24 28 min 4 8 12 16 

OH 

Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEOSIL ® NAUTILUS 



granulométrie 3 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, groupe polaire dans la chaîne alkyle, 16% C; 



2 mm DI 721649.20 721650.20 721651.20 721652.20 721611.30 

3 mm DI 721649.30 721650.30 721651.30 721652.30 721611.30 

4 mm DI 721649.40 721650.40 721651.40 721652.40 721611.40 

4.6 mm DI 721649.46 721650.46 721651.46 721703.46 721652.46 721611.40 


1 mm DI 717110.10 717111.10 717112.10 717113.10 


2 mm DI 720472.20 720470.20 721611.30 

3 mm DI 720472.30 720470.30 721611.30 

4 mm DI 720472.40 720470.40 721611.40 

4.6 mm DI 720472.46 720471.46 720470.46 721611.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, groupe polaire dans la chaîne alkyle, 16% C; éluant 

dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 721133.20 721134.20 721131.20 721130.20 721140.30 

3 mm DI 721133.30 721134.30 721131.30 721130.30 721140.30 

4 mm DI 721133.40 721134.40 721131.40 721130.40 721140.40 

4.6 mm DI 721133.46 721134.46 721131.46 721132.46 721130.46 721140.40 


1 mm DI 717066.10 717065.10 717067.10 717068.10 


2 mm DI 720430.20 720431.20 721140.30 

3 mm DI 720430.30 720431.30 721140.30 

4 mm DI 720430.40 720431.40 721140.40 

4.6 mm DI 720430.46 720432.46 720431.46 721140.40 


1) 




3) 



MN 

111





Phase RP spéciale 3 µm 

silice sphérique de granulométrie 3 µm avec une modification 



Phase RP spéciale 5 µm 

silice sphérique de granulométrie 5 µm avec une modification 


Ces matériaux de remplissage sont fabriqués à partir du 

NUCLEOSIL ® 100 avec une taille de particule de 3 ou 5 µm. 

Il en résulte que les deux phases présentent la même protection 

de surface, la même sélectivité et des facteurs de capacité 

égaux. Cependent, le nombre de plateaux théoriques 

est plus élevé lors de l’utilisation du gel de silice avec une 

taille de particule de 3 µm. On peut ainsi réduire d’une part la 

longueur des colonnes (= réduction du temps d’analyse) et, 

d’autre part réduire la largeur des pics, pour accroître la sensibilité. 

Bien que les interactions hydrophobes des phases 

NUCLEOSIL ® PROTECT I soient comparables aux phases 

octyles standard NUCLEOSIL ® 100 C 8 , la modification spéciale 

de la surface combinée à un endcapping des silanols 

résiduels réduit avec succès les interactions indésirables et 

assure une excellente forme de pics avec des composés basiques. 

En comparaison avec les phases NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 

AB, NUCLEOSIL ® 100 C 18 HD et NUCLEOSIL ® 100 C 8 HD 

la NUCLEOSIL ® 100 PROTECT I se distingue par sa forte 

polarité. Néanmoins des composés critiques tels que les 

amines montrent une incroyable symétrie des pics. Cette 

phase stationnaire convient parfaitement pour la séparation 

de composés de faible poids moléculaire (jusqu’à 5000 daltons), 

par exemple les drogues ou les pesticides. 

Par exemple, les amines tricycliques protriptyline et amitriptyline 

ont une très forte interaction avec des groupes silanols 

résiduels sur une phase C 18 conventionnelle, alors que notre 

NUCLEOSIL ® PROTECT I propose 

✔ une élution plus rapide et 

✔ une excellente symétrie de pics pour ces composés critiques 

(voir chromatogramme). 

Ce mélange test souligne bien la remarquable désactivation 

et l’unique sélectivité de la NUCLEOSIL ® 100-3 PROTECT I 

pour la séparation de bases critiques comme l’amitryptiline 

et la protriptyline. Celles-ci sont éluées avec une excellente 

forme de pic comme pour les hydrocarbures aromatiques. 

Séparation d’un mélange test contenant des amines 

tricycliques 

Colonne: EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-3 PROTECT I, 

Art. n o 720542.40 

Eluant: acétonitrile – 25 mM KH 2 PO 4 , pH 7,5 (50:50) 




Pics: 

1. Uracile 

2 


3 


4. Benzoate d’éthyle 

5. Toluène 

6. Ethylbenzène 

116970 

1 

4 


5 

4 8 12 min 

6 


112 

MN




Références de commande · colonnes analytiques avec NUCLEOSIL ® PROTECT I 



granulométrie 3 µm, taille des pores 100 Å; phase RP spéciale, endcapped, modification monomérique, 11% C; 



2 mm DI 721670.20 721671.20 721672.20 721673.20 721613.30 

3 mm DI 721670.30 721671.30 721672.30 721673.30 721613.30 

4 mm DI 721670.40 721671.40 721672.40 721673.40 721613.40 

4,6 mm DI 721670.46 721671.46 721672.46 721705.46 721673.46 721613.40 


1 mm DI 717120.10 717121.10 717122.10 717123.10 


2 mm DI 720540.20 720542.20 721613.30 

3 mm DI 720540.30 720542.30 721613.30 

4 mm DI 720540.40 720542.40 721613.40 

4,6 mm DI 720540.46 720541.46 720542.46 721613.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase RP spéciale, endcapped, modification monomérique, 11% C; 



2 mm DI 721157.20 721152.20 721151.20 721150.20 721154.30 

3 mm DI 721157.30 721152.30 721151.30 721150.30 721154.30 

4 mm DI 721157.40 721152.40 721151.40 721150.40 721154.40 

4,6 mm DI 721157.46 721152.46 721151.46 721153.46 721150.46 721154.40 


1 mm DI 717034.10 717025.10 717016.10 717007.10 


2 mm DI 720175.20 720170.20 721154.30 

3 mm DI 720175.30 720170.30 721154.30 

4 mm DI 720175.40 720170.40 721154.40 

4,6 mm DI 720175.46 720174.46 720170.46 721154.40 







MN 

113




Applications 

Séparation de phénols 

Colonnes: CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 PROTECT I, 

250 x 4 mm DI, Art. n o 721150.40 

Eluant: acétonitrile – 25 mM KH 2 PO 4 pH 7 (50:50, v/v) 




Pics: 

1. p-Benzoquinone 

7. 2,5-Dinitrophénol 

2. Phénol 


3. o-Nitrophénol 


4. p-Nitrophénol 



11. 2,4,6-Trinitrophénol 

6. m-Nitrophénol 

1 

2 

3 

4 

5 

6 

7 8 

9 

10 

11 

111540 

Séparation de produits de protection solaire 

V. Vanquerp et al. J. Chromatogr. 832 (1999) 273 – 277 


250 x 4 mm DI, 

E 

Art. n o 721498.40 

Eluants: A) 1% d’acide acétique 

dans l’eau, 

B) méthanol 

Gradient: 80 – 100% B 

en 10 min 



Pics 

(volume d’injection 10 µl): 

A) Benzophénone-3 

B) Méthylbenzylidène camphre 

C) Octyl-méthyl-PABA 

D) Butyl-méthoxydibenzoylméthane 

C 

D 

A 

E) PEG-25-PABA 

B 

0 10 20 

min 

114740 

0 5 10 15 20 

1 

2 

Analyse de héroïne, diluée avec 

paracétamol/caféine 

Colonne CC 250/2 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB, 

250 x 2 mm DI, Art. n o 721663.20 avec précolonnes 

CC 8/3 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 AB, 8 x 3 mm DI, 

Art. n o . 721603.30 

volume d’injection 30 µl 

éluants: A) 2 mmol NaH 2 PO 4 , 1 g/l d’acide 1-hexanesulfonique 

ajusté à pH 2,5 avec H 3 PO 4 , B) acétonitrile 

gradient: 8 – 33% B en 30 min, puis 5 min 90% B 

débit: 0,32 ml/min, température: 40 °C 

détection: DAD, 210 nm 

Pics: 

1. Paracétamol 

2. Caféine 

3. 6-Monoacétylmorphine 

6 4. Héroïne 

4 


6. Noscapine 

Analyse de l’ecstasy d’usage 

Colonne: CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 HD 

250 x 4 mm DI, Art. n o 721850.40 

Eluants: A) 2 mmol NaH 2 PO 4 ajusté à pH 2,5 avec H 3 PO 4 

B) acétonitrile mAU 

Gradient: 8– 33% B en 30 min 

2 

30 



Pics: 

1. Caféine ? 

2. Hydrochlorure de S(+)-3,4-méthylènedioxyméthamphétamine 

(Ecstasy) 

20 

10 

1 

3 

5 

110180 

110130 

0 

10 20 min 30 

avec permission de M. Kothe, Laboratoire Dr. Krone, Prof. Hagedorn, 

Medizinal-Untersuchungsstelle Herford, Allemagne 

0 10 20 30 

min 

avec permission de M. Kothe, Laboratoire Dr. Krone, Prof. Hagedorn, 

Medizinal-Untersuchungsstelle Herford, Allemagne 

114 

MN




Applications 

Séparation d’antidépresseurs tricycliques 

Colonne: CC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 PROTECT I 

250 x 4 mm DI, Art. n o 721150.40 

Eluant: acétonitrile – 25 mM KH 2 PO 4 , pH 7,0 (35:65, v/v) 




Pics: 


3. Doxepine 


O 

1 

2 

3 

4 

5 

6 

NHMe 

NMe 2 

NMe 2 


4. Imipramine 


N 

N 

NHMe 

NMe 2 

NMe 2 

110030 

0 5 10 15 min 



250 x 4 mm DI, Art. n o 721498.40 



Température: 

Détection: 

30 °C 

UV, 254 nm 

3 

Pics: 



3. Doxepine 


1 

4 


2 

5 



250 x 4 mm DI, Art. n o 721850.40 

Volume d’injection: 5 µl 

Eluant: acétonitrile – 0,1% TEAPO 4 pH 6,9 (45:55) 

Débit: 

1 ml/min 


Détection: UV, 

254 nm 

Pics: 



3. Doxepine 

4. Imipramine 



12 3 4 5 

6 

min 

110750 

0 10 20 30 

110760 

0 10 min 20 

MN 

115




Phases standard pour la chromatographie RP 

Les silices en phase inverse sont les matériaux de remplissage 

les plus utilisés. La haute performance de nos matériaux 

RP désactivés est décrite dans le chapitre précédent. 

Dans ce chapitre vous trouverez les colonnes remplies avec 

de la silice standard pour la RPLC. Les références de commande 

pour les matériaux de remplissage correspondants 

se trouvent dans le chapitre commençant page 220. Pour un 

composé donné le temps de rétention peut varier suivant le 

type de phase utilisé: octadécyle, octyle, butyle, diméthyle et 

phényle. Dans les mêmes conditions (phase mobile, vitesse 

d’élution, température etc.), les temps de rétention de nombreuses 

substances peuvent être jusqu’à deux fois plus 

grands pour NUCLEOSIL ® C 18 que pour NUCLEOSIL ® C 8 . 

Le mécanisme de séparation de toutes les phases inverses 

NUCLEOSIL ® est basé sur l’attraction par les forces de van 

der Waals entre les parties hydrophobes de la molécule de 

l’échantillon et les groupements alkyles liés au support. 

Moins les molécules de l’échantillon sont polaires, plus elles 

sont attirées. Cette différence de structure chimique des 

molécules conduit à leur adsorption plus ou moins forte donc 

à leur séparation. 

L’augmentation du caractère polaire des molécules à séparer 

diminue les forces de van der Waals et ainsi le temps de rétention. 

L’ordre décroissant de rétention est à peu près le suivant: 

hydrocarbures aliphatiques, dipôles induits (CCI 4 ), dipôles 

permanents (CHCI 3 ), bases faibles de Lewis (éthers, 

aldéhydes, cétones), bases fortes de Lewis (amines), acides 

faibles de Lewis (alcools, phénols) et acides forts de Lewis 

(acides carboxyliques). C’est surtout la longueur de la chaîne 

des molécules qui a une grande influence sur le temps de 

rétention. 

La phase mobile en chromatographie RP 

η 

[cP] 

à 

20 °C 

3 

2 

1 

eau 

viscosité 

Viscosité de mélanges de solvants 

en fonction de leur composition 

n-propanol 

2 

éthanol 

méthanol 

acétonitrile 

0 20 40 60 80 100% [w/w] 

organique 

3 

1 

La viscosité de l’éluant doit également être prise en compte. 

On oublie souvent dans la pratique que les éluants ont des 

viscosités (η) très différentes et que les changements de viscosité 

(à vitesse d’élution constante) entraînent de grandes 

variations de pression. La pression évolue selon la formule 

suivante: 

η 

p 1 

1 = ----- ⋅ p 

η 2 

2 

La viscosité d’un mélange de solvants est souvent plus élevée 

que celle de ses composants. Pour conserver une vitesse 

d’élution constante, il faudra augmenter la pression. 

La figure ci-contre montre comment évolue la viscosité des 

éluants. Il en découle que la pression peut doubler quand on 

passe par exemple d’un mélange acétonitrile – eau (70:30) à 

un mélange méthanol – eau (70:30). 

Lorsqu’on utilise l’eau comme éluant ou dans un gradient de 

solvants, il faut tenir compte de l’air qui peut s’y dissoudre. 

Une instabilité apparente du système peut provenir des bulles 

d’air qui se rassemblent dans le détecteur si l’éluant n’a 

pas été suffisamment dégazé. La meilleure façon de se débarrasser 

des bulles d’air est de faire passer dans la colonne 

un solvant bien dégazé puis de lui ajouter la quantité d’eau 

dégazée nécessaire. Le dégazage peut se faire par évacuation 

sous vide, par saturation avec de l’hélium ou par ultrasons. 

La phase mobile à utiliser pour une séparation en phase inverse 

est un mélange d’eau et d’un solvant organique miscible 

à l’eau. Le temps d’élution des substances à séparer dépend 

fortement de la teneur en eau du solvant organique, on 

peut donc facilement arriver à une valeur optimale. Si l’on 

augmente la proportion de solvant organique, le temps de 

rétention diminue. On peut optimiser une séparation en phase 

inverse en utilisant la sélectivité spécifique du solvant organique. 

116 

MN



Colonnes analytiques remplies avec NUCLEOSIL ® 117 

Mélange test pour les colonnes en phase inverse (RP) 

Pour les colonnes HPLC en phase inverse nous proposons 

un mélange test dans l’acétonitrile. La figure de droite montre 

un chromatogramme test classique d’une phase stationnaire 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 . 

Référence de commande 

Désignation 

Conditionnement 

Art. n o 

Mélange test dans l’acétonitrile pour 

colonnes HPLC en phase inverse 

1 ml 722394 

Mélange test pour colonnes HPLC en phase inverse 

(Art. n o 722394) 

Colonne: EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 18 

Art. n o 720014.40 

Volume de 

l’échantillon: 20 µl 

Eluant: acétonitrile – eau (70:30) 


2 3 

Pression: 105 bars 


1 


Pics: (concentration 

en µg/ml d’éluant) 

1. Phénol (400) 

2. Naphtalène (180) 

3. Anthracène (12) 

4 8 min 

MN




Phases octadécyles -(CH 2 ) 17 – CH 3 

Analyse des composés nitroaromatiques 

(explosifs) 

Colonne CC 250/3 NUCLEOSIL ® 120-3 C 18, 250 x 3 mm DI, 

Art. n o 721666.30; 

éluants: A) méthanol, B) eau, gradient 35 – 55% A en 12 min, 

puis 40 min isocratique, en fin 100% A, débit 0,35 ml/min; température 

30 °C, détection DAD, 230 nm; volume d’injection 40 µl 

Pics: 

1) 2,6-Diamino-4-nitrotoluène 

2) 2,4-Diamino-4-nitrotoluène 

3) Hexogène (Hexahydro- 

1,3,5-trinitro-1,3,5-triazine) 

4) 1,3,5-Trinitrobenzène 

5) 2-Méthyl-3-nitroaniline 



8) 1,3-Dinitrobenzène 

9) 2,4,6-Trinitrotoluène 

4 

200 

100 

mAU 

1 

2 

3 

5 

6 

8 

7 

10) 4-Amino-2,6-dinitrotoluène 

11) 2-Amino-4,6-dinitrotoluène 

12) 2,6-Dinitrotoluène 

13) 2,4-Dinitrotoluène 

14) 2-Nitrotoluène 



9 

10 11 

13 

12 

14 15 16 

114810 

Les phases C 18 sont recommandées pour la chromatographie 

en phase inverse et pour la chromatographie de paires 

d’ions, pour la séparation de composés non polaires à 

moyennement polaires comme les 

acides gras 

glycérides 

aromatiques polycycliques 

esters (phtalates) 

vitamines 

stéroïdes 

prostaglandines 

acides aminés PTH etc. 

Séparation de triazines 


3 4 5 

Colonne: CC 250/4 NUCLEOSIL ® 50-5 C 18 ec, 

250 x 4 mm DI, Art. n o 721828.40 

Eluant: méthanol – acétonitrile – eau (40:20:40, v/v/v) 

Débit: 1 ml/min, 30 °C, 220 bars 


Pics (volume d’injection 5 µl, 10 µg/ml chaque): 

1. Simazine 

2. Atrazine 

1 

3. Prometon 2 

4. Amétryne 

5. Propazine 

6. Prométryne 

7. Terbutryne 

6 7 

111570 

0 

20 40 min 

avec permission de Dr. Steinbach, Inst. p. Chimie Org., Univ. 

Marburg, Allemagne 

0 

10 20 min 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® C 18 


NUCLEOSIL ® 50-5 C 18 ec 

granulométrie 5 µm, taille des pores 50 Å; phase octadécyle, endcapped, 14,5% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 721825.20 721826.20 721828.20 721829.30 

3 mm DI 721825.30 721826.30 721828.30 721829.30 

4 mm DI 721825.40 721826.40 721828.40 721829.40 

4,6 mm DI 721825.46 721826.46 721827.46 721828.46 721829.40 


4 mm DI 720098.40 721829.40 

4,6 mm DI 720098.46 721829.40 



2) 

Sur demande, les colonnes microbore sont aussi disponibles en longueur de 40, 60, 200 et 300 mm et avec des diamètres internes de 0,3, 


3) 



118 

MN





NUCLEOSIL ® 100-3 C 18 



2 mm DI 721883.20 721865.20 721866.30 

3 mm DI 721883.30 721865.30 721866.30 

4 mm DI 721883.40 721865.40 721866.40 

4,6 mm DI 721883.46 721806.46 721865.46 721866.40 


1 mm DI 717029.10 717020.10 717011.10 717003.10 


2 mm DI 720150.20 720133.20 721866.30 

3 mm DI 720150.30 720133.30 721866.30 

4 mm DI 720150.40 720133.40 721866.40 

4,6 mm DI 720150.46 720949.46 720133.46 721866.40 




2 mm DI 721074.20 721781.20 721622.20 721662.20 721602.30 

3 mm DI 721074.30 721781.30 721622.30 721662.30 721602.30 

4 mm DI 721074.40 721781.40 721622.40 721662.40 721602.40 

4,6 mm DI 721074.46 721781.46 721622.46 721642.46 721662.46 721602.40 


1 mm DI 717028.10 717019.10 717010.10 717002.10 


2 mm DI 720002.20 720014.20 721602.30 

3 mm DI 720002.30 720014.30 721602.30 

4 mm DI 720002.40 720014.40 721602.40 

4,6 mm DI 720002.46 720120.46 720014.46 721602.40 




3 mm DI 721878.30 721609.30 

4 mm DI 721878.40 721609.40 

4,6 mm DI 721609.46 


4 mm DI 720018.40 

4,6 mm DI 720018.46 


1) 


2) 



3) 



D’autres longueurs de colonnes et d’autres phases sont disponibles sur demande (fabrication spéciale) 

MN









3 mm DI 721681.30 721689.30 

4 mm DI 721681.40 721689.40 

4,6 mm DI 721689.46 


4 mm DI 720023.40 

4,6 mm DI 720023.46 




2 mm DI 721075.20 721721.20 721626.20 721666.20 721606.30 

3 mm DI 721075.30 721721.30 721626.30 721666.30 721606.30 

4 mm DI 721075.40 721721.40 721626.40 721666.40 721606.40 

4,6 mm DI 721075.46 721721.46 721626.46 721646.46 721666.46 721606.40 


1 mm DI 717031.10 717022.10 717013.10 717005.10 


2 mm DI 720040.20 720055.20 721606.30 

3 mm DI 720040.30 720055.30 721606.30 

4 mm DI 720040.40 720055.40 721606.40 

4,6 mm DI 720040.46 720740.46 720055.46 721606.40 




2 mm DI 721070.20 721723.20 721629.20 721712.20 721783.30 

3 mm DI 721070.30 721723.30 721629.30 721712.30 721783.30 

4 mm DI 721070.40 721723.40 721629.40 721712.40 721783.40 

4,6 mm DI 721070.46 721723.46 721629.46 721659.46 721712.46 721783.40 


1 mm DI 717030.10 717021.10 717012.10 717004.10 


2 mm DI 720051.20 720041.20 721783.30 

3 mm DI 720051.30 720041.30 721783.30 

4 mm DI 720051.40 720041.40 721783.40 

4,6 mm DI 720051.46 720730.46 720041.46 721783.40 




4 mm DI 720042.40 

4,6 mm DI 720042.46 


1) 


2) 



3) 



120 

MN








4 mm DI 720043.40 

4,6 mm DI 720043.46 




2 mm DI 721790.20 721628.20 721668.20 721608.30 

3 mm DI 721628.30 721668.30 721608.30 

4 mm DI 721628.40 721668.40 721608.40 

4,6 mm DI 721628.46 721648.46 721668.46 721608.40 


1 mm DI 717045.10 717048.10 717056.10 717059.10 


2 mm DI 720713.20 721608.30 

3 mm DI 720713.30 721608.30 

4 mm DI 720065.40 721608.40 

4,6 mm DI 720065.46 721608.40 




4 mm DI 720074.40 

4,6 mm DI 720074.46 


granulométrie 7 µm, taille des pores 1000 Å; phase octadécyle, endcapped, ~1% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


4 mm DI 720077.40 

4,6 mm DI 720077.46 


granulométrie 7 µm, taille des pores 4000 Å; phase octadécyle, endcapped,




Phases octyles -(CH 2 ) 7 – CH 3 



d’ions pour la séparation de composés moyennement à fortement 

polaires (soluble dans l’eau) comme les 

stéroïdes 

nucléosides 

cyclodextrines 

substances pharmacologiques de plantes 

Anthranoïdes dans les drogues à base de senna 

L. Kabelitz, K. Reif, Dtsch. Apotheker Ztg. 134 (1994) 37 – 40 

Colonne: EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-5 C 8 , 250 x 4 mm DI, Art. n o 720013.40 

Eluants: A) 0,02 M KH 2 PO 4 , ajusté à pH 2 avec H 3 PO 4 (85%), B) acétonitrile 

Gradient: débit 1 ml/min: 10 min 14% B, en 5 min à 20% B, 10 min à 20% B, débit 0,8 ml/min: en 1 min à 21% B, en 29 min à 80% B, 

débit 1 ml/min: en 2 min à 14% B, puis 13 min à 14% B 

Photodiode array: dianthrones à 270 nm, anthraquinones à 435 nm 

12 

Détection: 

Pics: 

1. 8-Glucoside d’émodine 

d’aloès 

2. 8-Glucoside de rheïne 

3: Sennoside D 1 

4: Sennoside D 

5: Sennoside B 

6: Sennoside A 1 

7: Sennoside C 

8: Sennoside A 

9: Monoglucoside de 

sennidine B 

10: Monoglucoside de 

sennidine A 

11: Emodine d’aloès 

12: Rheïne 

13: Sennidine A 

14: Emodine 

15: Sennidine B 

0.6 

0.5 

0.4 

0.3 

0.2 

0.1 

1 

2 

3 4 5 

6 

7 

8 

9 10 11 

13 

14 

15 

102630 

0 

0 10 20 30 40 min 




granulométrie 5 µm, taille des pores 50 Å; phase octyle, endcapped, 9% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 721830.20 721831.20 721833.20 721834.30 

3 mm DI 721830.30 721831.30 721833.30 721834.30 

4 mm DI 721830.40 721831.40 721833.40 721834.40 

4,6 mm DI 721830.46 721831.46 721832.46 721833.46 721834.40 


4 mm DI 720092.40 721834.40 

4,6 mm DI 720092.46 721834.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, endcapped, 9% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 721804.20 721795.20 721796.20 721805.30 

3 mm DI 721804.30 721795.30 721796.30 721805.30 

4 mm DI 721804.40 721795.40 721796.40 721805.40 

4,6 mm DI 721804.46 721795.46 721797.46 721796.46 721805.40 


1 mm DI 717035.10 717026.10 717017.10 717008.10 



2) Sur demande, les colonnes microbore sont aussi disponibles en longueur de 40, 60, 200 et 300 mm et avec des diamètres internes de 0,3, 




122 

MN






granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, non endcapped, 8,5% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 721194.20 721780.20 721621.20 721661.20 721601.30 

3 mm DI 721194.30 721780.30 721621.30 721661.30 721601.30 

4 mm DI 721194.40 721780.40 721621.40 721661.40 721601.40 

4,6 mm DI 721194.46 721780.46 721621.46 721641.46 721661.46 721601.40 


1 mm DI 717036.10 717027.10 717018.10 717009.10 


3 mm DI 720001.30 720013.30 721601.30 

4 mm DI 720001.40 720013.40 721601.40 

4,6 mm DI 720001.46 720990.46 720013.46 721601.40 




4 mm DI 720017.40 

4,6 mm DI 720017.46 




4 mm DI 720022.40 

4,6 mm DI 720022.46 




2 mm DI 721720.20 721786.20 721782.20 721785.30 

3 mm DI 721720.30 721786.30 721782.30 721785.30 

4 mm DI 721720.40 721786.40 721782.40 721785.40 

4,6 mm DI 721720.46 721786.46 721722.46 721782.46 721785.40 


2 mm DI 720071.20 720703.20 721785.30 

3 mm DI 720071.30 720703.30 721785.30 

4 mm DI 720071.40 720703.40 721785.40 

4,6 mm DI 720071.46 720214.46 720703.46 721785.40 


1) 


2) 



3) 





MN









2 mm DI 721868.20 721892.20 721801.20 721787.30 

3 mm DI 721868.30 721892.30 721801.30 721787.30 

4 mm DI 721868.40 721892.40 721801.40 721787.40 

4,6 mm DI 721868.46 721892.46 721521.46 721801.46 721787.40 


2 mm DI 720050.20 720052.20 721787.30 

3 mm DI 720050.30 720052.30 721787.30 

4 mm DI 720050.40 720052.40 721787.40 

4,6 mm DI 720050.46 720735.46 720052.46 721787.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 300 Å; phase octyle, non endcapped, ~3% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


3 mm DI 721103.30 721098.30 721101.30 

4 mm DI 721103.40 721098.40 721101.40 


4 mm DI 720062.40 721101.40 

4,6 mm DI 720062.46 721101.40 



2) Sur demande, les colonnes microbore sont aussi disponibles en longueur de 40, 60, 200 et 300 mm et avec des diamètres internes de 0,3, 



Phases phényles -(CH 2 ) 3 

Les phases C 6 H 5 sont recommandées pour la chromatographie 


d’ions pour la séparation de composés moyennement polaires. 

Les caractéristiques de rétention sont similaires à une 

phase C 8 , mais avec une sélectivité différente pour les hydrocarbures 

polycycliques aromatiques, les aromatiques polaires, 

les acides gras etc. 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® C 6 H 5 

Longueur → 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes 

NUCLEOSIL ® 100-5 C 6 H 5 ec 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase phényle, endcapped, 8 % C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


3 mm DI 721535.30 721533.30 721537.30 

4 mm DI 721535.40 721533.40 721537.40 

Conditionnement: les précolonnes ChromCart ® de 8 mm sont vendues par trois et les autres colonnes par unité d’emballage. 

1) 



124 

MN



Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® C 6 H 5 


NUCLEOSIL ® 100-5 C 6 H 5 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase phényle, non endcapped, 8% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


3 mm DI 721860.30 721861.30 721862.30 

4 mm DI 721860.40 721861.40 721862.40 

4,6 mm DI 721860.46 721887.46 721861.46 721862.40 


2 mm DI 720695.20 721862.30 

3 mm DI 720695.30 720956.30 721862.30 

4 mm DI 720956.40 721862.40 

4,6 mm DI 720956.46 721862.40 

NUCLEOSIL ® 100-7 C 6 H 5 

granulométrie 7 µm, taille des pores 100 Å; phase phényle, non endcapped, 8% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


4 mm DI 720019.40 

4,6 mm DI 720019.46 




N.R. Ayyangar, S. R. Bhide, J. Chromatogr. 436 (1988) 455-465 

Colonne: EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-7 C 6 H 5 , 

250 x 4 mm DI, Art. n o 720019.40 

Eluant A: méthanol – eau (5:95) avec 1% tampon 

phosphate de triéthylammonium, pH 3,2 

Eluant B: méthanol – eau (80:30) avec 1% tampon 

phosphate de triéthylammonium, pH 3,95 

Gradient: linéaire de 100% A à 100% B en 20 min, 

puis 12 min éluant B 



Pics: 

1. Morphine 

2. Acide méconique 

3. Codéine 

4. Thebaïne 

5. Laudanosine 

6. Cryptopine 

7. Noscapine 

8. Narcéïne 


Séparation des alcaloïdes de l’opium et de l’acide méconique 

% v CH 3 OH 

100 

90 

80 

70 

60 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

1 

2 

3 

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 

temps, minutes 

4 

5 6 7 

8 

9 

101200 


MN




Phases butyles -(CH 2 ) 3 – CH 3 



d’ions pour la séparation de macromolécules et de substances 

hydrophobes. Les temps de rétention sur les phases butyles 

sont plus courts que sur les phases C 8 ou C 18 . 


Les phases butyles et propyles pour les problèmes de séparations 

biochimiques voir pages 184 / 185. 

Longueur → 70 mm 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes 


granulométrie 5 µm, taille des pores 120 Å; phase butyle, endcapped, ~2 % C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


3 mm DI 721891.30 721890.30 721889.30 

4 mm DI 721891.40 721890.40 721889.40 


4 mm DI 720096.40 721889.40 

4,6 mm DI 720096.46 721889.40 


granulométrie 5 µm, taille des pores 300 Å; phase butyle, endcapped, ~2% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


2 mm DI 721784.20 721627.20 721667.20 721607.30 

3 mm DI 721627.30 721667.30 721607.30 

4 mm DI 721627.40 721667.40 721607.40 

4,6 mm DI 721627.46 721647.46 721667.46 721607.40 


1 mm DI 717044.10 717047.10 717055.10 717058.10 


4 mm DI 720059.40 721607.40 

4,6 mm DI 720059.46 721607.40 


granulométrie 7 µm, taille des pores 300 Å; phase butyle, endcapped, ~2% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


4 mm DI 720060.40 

4,6 mm DI 720060.46 


1) 



2) 

Pour les colonnes EC utiliser les précolonnes ChromCart ® avec l’adaptateur de précolonnes EC (Art. n o 721359). 


126 

MN



Phases butyles · application 

Analyse de l’hémoglobine d’un tigre adulte de Sumatra 


M. Jahan et al. Biol. Chem. Hoppe-Seyler 370 (1989) 27 – 33 

Colonne: CC 250/4.6 NUCLEOSIL ® 300-5 C 4 , 

250 x 4,6 mm DI, Art. n o 721667.46 

Eluants: A) 0,1% d’acide trifluoroacétique, B) acétonitrile 

Gradient: 0 – 35% B en 2 min, puis 35 – 60% B en 60 min 



A 230 

Heme 

α 

βII 

βI 

0 10 20 30 40 50 60 

113500 

t [min] 

Phases diméthyles -(CH 3 ) 2 

Les phases diméthyles sont recommandées pour la chromatographie 

en phase inverse et pour la chromatographie de 

paires d’ions. Les temps de rétention sur la phase diméthyle 

sont beaucoup plus courts que sur les autres phases RP. 


Longueur → 125 mm 250 mm Précolonnes 


granulométrie 7 µm, taille des pores 100 Å; phase diméthyle, non endcapped, 3.5 % C; 



4 mm DI 721873.40 721874.40 721069.40 


4 mm DI 720089.40 721069.40 

4,6 mm DI 720089.46 721069.40 


1) 



MN




NUCLEOSIL ® non modifié, phases NUCLEOSIL ® polaires et échangeurs d’ions 

Matériaux de remplissage modifiés par des groupes 

polaires 

Ces matériaux se distinguent par un transport de masse rapide, 

puisque la couche organique liée est constituée de 

monomères. Les trajectoires de diffusion sont ainsi racourcies. 

En choisissant les groupes fonctionnels, il est possible de varier 

les propriétés chimiques de la surface et ainsi les propriétés 

d’adsorption de la phase stationnaire. Les silices modifiées 

par des groupes polaires allient les avantages de la 

chromatographie de partage (variation des propriétés de 

sorption) et de la chromatographie d’adsorption (transport de 

masse rapide dans la phase stationnaire). Les phases polaires 

chimiquement modifiées se distinguent en plus par les 

avantages suivants: 

Elles ne ”saignent“ pas; l’équilibrage avec une phase 

stationnaire liquide – comme pour la chromatographie 

de partage – est superflu. 

L’influence d’impuretés contenues dans l’éluant (par 

exemple l’eau) sur les propriétés de séparation de telles 

phases est beaucoup moins importante que pour les 

matériaux de remplissage non modifiés (gel de silice, 

alumine). 

Les gels de silice modifiés ne gonflent pas et la perméabilité 

de la colonne n’est pas modifiée. L’utilisation d’eau 

ou d’éluants contenant de l’eau ne pose pas de problèmes. 

Même si la phase liée à la surface de la silice est composée 

de monomères organiques, ces phases stationnaires se distinguent 

par une grande concentration en groupes fonctionnels 

sur la surface. Il y a 3 à 4 groupes par 100 Å 2 , c’est-à-dire 

environ 5 µéq/m 2 . 

Influence des groupes fonctionnels sur la capacité de séparation de la phase stationnaire 

k’ 

10,0 

9,0 

8,0 

7,0 

6,0 

Influence de la modification sur la séparation 

d’hydrocarbures aromatiques 

phase NO 2 

La figure ci-contre montre l’influence d’une modification chimique 

sur les propriétés de séparation de différents gels de 

silice, à savoir NUCLEOSIL ® non modifié, NUCLEOSIL ® 

CN, NUCLEOSIL ® NH 2 et NUCLEOSIL ® NO 2 . Pour cela, 

nous nous sommes basés sur les facteurs de capacité k’ de 

plusieurs hydrocarbures aromatiques avec l’heptane comme 

phase mobile. Le groupe nitroaromatique a une influence 

particulièrement grande sur la séparation. Les interactions 

entre les systèmes électroniques π résultent dans la formation 

des complexes de transfert de charge, ce qui entraîne 

des valeurs k’ beaucoup plus grandes que pour NUCLEO- 

SIL ® non modifié. 

5,0 

phase NH 2 

4,0 

3,0 

2,0 

NUCLEOSIL ® 

non modifié 

1,0 

0 

Benzène 

Naphtalène 

Biphényl 

Anthracène 

Phenanthrène 

Pyrène 

Chrysène 

Benzo[a]pyrène 

phase CN 

Benzo[e]pyrène 

128 

MN




Les échangeurs d’ions NUCLEOSIL ® 

Ces matériaux ont été spécialement développés pour la 

HPLC. Contrairement aux chromatographies d’adsorption ou 

en phase inverse, il existe pour la chromatographie par 

échange d’ions trois paramètres de la phase mobile qui peuvent 

être changés librement pour influencer la séparation, à 

savoir 

le type de la solution tampon, 

la force ionique et 

la valeur du pH. 

En variant la force ionique de la phase mobile, on peut influencer 

les affinités concurrentielles des solvants et des 

molécules contenues dans l’échantillon pour les groupes 

fonctionnels ioniques du support. Si le temps de rétention 

des molécules est trop long, on peut accélérer l’élution en 

augmentant la force ionique du solvant (de la phase mobile) 

et vice-versa. 

La variation du pH de la phase mobile influence la dissociation 

du soluté et du sel du tampon. Ces deux effets influencent 

l’équilibre entre les molécules de l’échantillon et les 

groupes fonctionnels ioniques du support. Ainsi, la rétention 

d’acides faibles sur un échangeur d’anions augmente si le 

pH est augmenté, puisque la dissociation de l’acide augmente. 

D’autre part, si l’on utilise par exemple un tampon phtalate, 

la concentration en ions phtalates et donc la force ionique 

vont augmenter si l’on augmente le pH. Les temps de rétention 

diminuent de cette façon. Le choix judicieux du tampon 

et de son pH permet d’utiliser les grandes différences de 

sélectivité pour l’optimisation d’une séparation. 

Malgré des forces ioniques identiques pour la phase mobile, 

les différents ions présentent des affinités différentes pour 

les groupes échangeurs d’ions. Pour les échangeurs 

d’anion, on observe l’ordre d’affinité croissante suivant 

F – < OH – < Cl – < CN – 

et pour les échangeurs de cations 

H + < Na + < NH 4 + < K + < Cs + < Ag + 

Les ions bivalents seront attirés plus fortement par les groupes 

chargés de l’échangeur que les ions monovalents, et les 

ions trivalents seront également attirés plus fortement que 

les ions bivalents. En règle générale, les ions sont mieux attirés 

par les groupes chargés de l’échangeur si leur charge et 

leur rayon ionique sont grands. 

+ + + 

+ + – – 

– – – 

+ – 

+ + + 

+ 

+ + 

+ + 

+ 

+ + + 

+ 

+ 

– 

+ 

– 

– 

+ + 

+ + 

– 

+ 

+ 

+ – – – – + 

+ – – 

– – 

+ 

– 

MN




Phases cyano (nitrile) 

Analyse des traces de tétracyclines 

C. Fu, H. Xu, Proc. 6th Natl. Symp. Chromatogr. (1987) 412 – 413 

Colonne: EC 250/4.6 NUCLEOSIL ® 100-5 CN, 

Eluant: 

Art. n o 720090.46 

acétonitrile – 0,015 M 

acide oxalique pH 2,35 

3 

1 2 

(20:80) 



Pics: 

1. Terramycine 

2. E-Tétracycline 

4 5 6 

3. Tétracycline 

4. E-Auréomycine 

5. Auréomycine 

6. Deoxyterramycine 

-(CH 2 ) 3 – CN 

Les phases CN sont recommandées pour la chromatographie 

en phase inverse et en phase normale: 

Chromatographie en phase normale: 

avec des solvants relativement apolaires pour beaucoup de 

composés qui peuvent aussi être séparés sur silice non modifiée; 

mais plus appropriés pour les séparations par gradient 

grâce aux équilibres plus rapides 

Chromatographie en phase inverse: 

avec une autre sélectivité que les matériaux modifiés par 

C 18 , C 8 ou phényle 

Attention: l’éluant dans les colonnes (sauf NUCLEOSIL ® 

100-5 CN-RP) est du n-heptane. Si vous voulez utiliser un 

éluant non miscible au n-heptane (par ex. l’eau), il est indispensable 

de rincer la colonne préalablement avec du THF. 

103760 

0 4 8 12 

min 


Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® CN 

Longueur → 70 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes 

NUCLEOSIL ® 100-5 CN 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase cyano (nitrile), éluant dans la colonne n-heptane 


2 mm DI 721788.20 721624.20 721664.20 721604.30 

3 mm DI 721624.30 721664.30 721604.30 

4 mm DI 721624.40 721664.40 721604.40 

4,6 mm DI 721624.46 721644.46 721664.46 721604.40 


4 mm DI 720090.40 721604.40 

4,6 mm DI 720090.46 721604.40 

NUCLEOSIL ® 100-5 CN-RP 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase cyano (nitrile), éluant dans la colonne acétonitrile / eau 


4 mm DI 720205.40 721917.40 

4,6 mm DI 720205.46 721917.40 




4 mm DI 720024.40 721917.40 

4,6 mm DI 720024.46 721917.40 




4 mm DI 720057.40 

4,6 mm DI 720057.46 


1) 



130 

MN




Phases cyano · Application 

LC/MS des produits d’oxidation du cholestérol 

M. Careri et al. J. Chromatogr. 794 (1998) 253 – 262 

Colonne: CC 250/2 NUCLEOSIL ® 100-5 CN, 

250 x 2 mm DI, Art. n o 721664.20 

Eluant: heptane – propan-2-ol (94:6) 


Détection: MS; (a) mode EI, (b) mode PCI, (c) mode NCI 

Succession d’élution: 1. cholestérol, 2. 5,6α-epoxycholestérol, 

3. 25-hydroxycholestérol, 4. 7-ketocholestérol, 5. 7β-hydroxycholestérol, 

6. Cholestan-3β-5α-6β-triol 

100% = 78315 

100 

(a) 

Phases nitro · Application 

Séparation de gibbérellines par HPLC en phase normale 

P.C. Odén et al. J. Chromatogr. 464 (1989) 195 – 200 

Colonne: CC 125/4.6 NUCLEOSIL ® 100-5 NO 2 , 

125 x 4,6 mm DI, Art. n o 721864.46 

Eluant A: n-heptane demi-saturé avec 1 M d’acide formique 

Eluant B: acétate d’éthyle avec 1% d’eau et 0,5% d’acide 

formique 

Gradient: 100% A – 100% B en 60 min 


Détection: radioactivité 

50 

0 

0 2 4 6 8 10 12 14 16 

100% = 12136 

100 

temps (min) 

(b) 

50 

0 

0 2 4 6 8 10 12 14 16 

radioactivité 

kaurene kaurenal 

kaurenol 

acide kaurenoique 

GA 12 -ald 

GA 9 

GA 15GA12 

GA 4 

GA 20 

GA 44 

GA 53 

GA 1 

GA 3 

GA 19 

GA 29 

GA 8 

100% = 19350 

100 

temps (min) 

(c) 

50 

112030 

0 

0 2 4 6 8 10 12 14 16 

temps (min) 

106280 

10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 

volume d’élution 

(ml) 

Phases nitro -(CH 2 ) 3 NO 2 

Les phases NO 2 sont recommandées pour la séparation de 

composés avec des doubles liaisons ou pour des composés 

aromatiques. 

Attention: l’éluant dans les colonnes est du n-heptane. Si 

vous voulez utiliser un éluant non miscible au n-heptane (par 

ex. l’eau), il est indispensable de rincer la colonne préalablement 

avec du THF. 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® NO 2 


NUCLEOSIL ® 100-5 NO 2 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase nitro, éluant dans la colonne n-heptane 


3 mm DI 721864.30 721707.30 721863.30 

4 mm DI 721864.40 721707.40 721863.40 


4 mm DI 720993.40 721863.40 

4,6 mm DI 720993.46 721863.40 




MN




Phases diol 

Séparation SFC de stéroïdes 

F. Vérillon et al. LC · GC int. 7 (1994) 710 – 716 

Colonne: CC 250/2 NUCLEOSIL ® 100-7 OH (Diol), 

250 x 2 mm DI, Art. n o 721877.20 

Eluant: 

CO 2 avec 1 – 12% méthanol 

Débit: 

2,5 ml/min 

Pression de sortie: 14 – 35 Mpa 



E 

Pics: 

A) Cholestérol 

B) Progestérone 

G) Cortisone 

H) Hydrocortisone 

K 

C) Androstérone I) Prednisone 

D) Testostérone J) Prednisolone G 

E) Estrone K) Estriol 

A 

F) Estradiol 

B D 

F 

HI J 

C 

109840 

-(CH 2 ) 3 – O – CH 2 – CH – CH 2 

– 

OH 

– 

OH 

Les phases OH sont recommandées pour la chromatographie 

en phase inverse et en phase normale. Elles sont moins 

polaires que la silice non modifiée et facilement mouillables 

par l’eau. 




avec du THF. 

0 2 4 min 6 

La dépression du chromatogramme supérieur résulte d’une 

détection instantanée du gradient de pression et d’une détection 

retardée du gradient en méthanol. Le graphique inférieur montre 

un chromatogramme corrigé par logiciel. 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® OH (Diol) 


NUCLEOSIL ® 100-5 OH (Diol) 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase diol, éluant dans la colonne n-heptane 


3 mm DI 721480.30 721471.30 721478.30 

4 mm DI 721480.40 721471.40 721478.40 


4 mm DI 720143.40 721478.40 

4,6 mm DI 720143.46 721478.40 

NUCLEOSIL ® 100-7 OH (Diol) 

granulométrie 7 µm, taille des pores 100 Å; phase diol, éluant dans la colonne n-heptane 


4 mm DI 720070.40 

4,6 mm DI 720070.46 


1) 



132 

MN




Silice non modifiée 

Pour la chromatographie d’adsorption, nous recommandons 

la NUCLEOSIL ® 50 à cause de la structure étroite de ses 

pores, alors que NUCLEOSIL ® 100 peut être utilisée aussi 

bien pour la chromatographie d’adsorption que pour la chromatographie 

de partage. 

SiOH 




avec du THF. 

Références de commande · colonnes analytiques remplies avec NUCLEOSIL ® non modifié 


NUCLEOSIL ® 50-5 

granulométrie 5 µm, taille des pores 50 Å; silice non modifiée, éluant dans la colonne n-heptane 


2 mm DI 721794.20 721620.20 721660.20 721600.30 

3 mm DI 721620.30 721660.30 721600.30 

4 mm DI 721620.40 721660.40 721600.40 

4,6 mm DI 721620.46 721640.46 721660.46 721600.40 


4 mm DI 720093.40 721600.40 

4,6 mm DI 720093.46 721600.40 




4 mm DI 720015.40 

4,6 mm DI 720015.46 




2 mm DI 721871.20 721870.20 721872.30 

3 mm DI 721871.30 721870.30 721872.30 

4 mm DI 721871.40 721870.40 721872.40 

4,6 mm DI 721871.46 721516.46 721870.46 721872.40 


3 mm DI 720099.30 721872.30 

4 mm DI 720099.40 721872.40 

4,6 mm DI 720099.46 721872.40 




4 mm DI 720016.40 

4,6 mm DI 720016.46 




4 mm DI 720021.40 

4,6 mm DI 720021.46 


1) 



MN




Phases amino -(CH 2 ) 3 – NH 2 

Les phases NH 2 ont de nombreuses applications: 

– chromatographie en phase normale avec hexane, 

CH 2 CI 2 ou isopropanol comme phase mobile pour des 

substances polaires comme anilines substituées, esters, 

pesticides chlorés etc. 

– avec systèmes d’éluant eau / solvant organique pour la 

chromatographie en phase inverse de composés polaires 

comme les carbohydrates 

– faible échangeur d’anions pour les anions et les acides 

organiques avec les tampons usuels (par ex. acétate ou 

phosphate) additionnés de solvant organique (par ex. 

acétonitrile) 

NUCLEOSIL ® 100-5 NH 2 RP 

– la phase amino pour applications en 

phase inverse; éluant dans la colonne: 

acétonitrile / eau 

– le rinçage au THF n’est pas nécessaire 


Nouveau 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® NH 2 


NUCLEOSIL ® 100-3 NH 2 

granulométrie 3 µm, taille des pores 100 Å; phase amino, éluant dans la colonne n-heptane 


3 mm DI 721121.30 721120.30 721122.30 

4 mm DI 721121.40 721120.40 721122.40 

4,6 mm DI 721121.46 721120.46 721122.40 


4 mm DI 720275.40 721122.40 

4,6 mm DI 720275.46 721122.40 




2 mm DI 721789.20 721625.20 721665.20 721605.30 

3 mm DI 721625.30 721665.30 721605.30 

4 mm DI 721625.40 721665.40 721605.40 

4,6 mm DI 721625.46 721645.46 721665.46 721605.40 


4 mm DI 720095.40 721605.40 

4,6 mm DI 720095.46 721605.40 

NUCLEOSIL ® 100-5 NH 2 RP 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase amino, éluant dans la colonne acétonitrile / eau (80:20) 


3 mm DI 721625.30RP 721665.30RP 721605.30RP 

4 mm DI 721665.40RP 721605.40RP 

4,6 mm DI 721645.46 RP 721605.40RP 

EC-Säulen 1) 

3 mm DI 720121.30RP 720095.30RP 721605.30RP 




4 mm DI 720058.40 

4,6 mm DI 720058.46 


1) 



134 

MN




Phases diméthylamino -(CH 2 ) 3 – N(CH 3 ) 2 

La phase DMA est un échangeur d’anions légèrement basique 

pour la séparation de différents anions; elle peut être utilisée 

comme la phase NH 2 . 




avec du THF. 

Séparation de sennosides de la rhubarbe 

Y. Ohshima, K. Takahashi, J. Chromatogr. 258 (1983) 292 – 296 

Colonne: NUCLEOSIL ® 100-5 N(CH 3 ) 2 , 250 x 8 mm DI 

Eluant: THF – eau – acide acétique (8:2:1) 



Echantillons: extraits méthanoliques de 

a) Rheum palmatum var. tanguticum 

b) Rheum coreanum 

c) Rheum palmatum 

d) Rheum coreanum x Rheum palmatum (Shinshu-rhubarbe) 

(d) 

(c) 

(b) 

(a) 

102590 

min 10 0 min 10 0 min 10 0 min 10 0 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® N(CH 3 ) 2 

Longueur → 250 mm Précolonnes 

NUCLEOSIL ® 100-5 N(CH 3 ) 2 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; phase diméthylamino, éluant dans la colonne n-heptane 

Colonnes EC 

4 mm DI 720994.40 721610.40 

4,6 mm DI 720994.46 721610.40 




MN




Echangeur de cations, fortement acide -(CH 2 ) 3 SO 3 Na 

L’échangeur de cations NUCLEOSIL ® SA est recommandé 

pour la chromatographie par échange d’ions. 

C’est un échangeur de cations fortement acide avec une modification 

sulfonique et une capacité d’environ 1 méq/g. 

Séparation des métaux des terres rares 

Nuryono et al. Chromatographia 48 (1998) 407 – 414 

Colonne: CC 150/4.6 NUCLEOSIL ® 100-5 SA, 150 x 4,6 mm DI, 

Art. n o 721525.46 

Eluant A: 20 mM acide α-hydroxyisobutyrique (HIBA), pH 4,6 

Eluant B: 12 mM acide oxalique, pH 4,6 

Gradient: 8 min 5% B, 5 – 50% B en 10 min, 50 – 75% B en 2 min, 

5 min 75% B 



Détection: dérivatisation après la colonne avec Arsenazo I, 

mesure à la lumière visible à 600 nm 

Echantillon: métaux des terres rares, 10 ppm chaque, 20 µl injecté 

80 

60 

40 

mAU 

600 nm 

Lu 

Yb 

Tm 

Y 

Gd 

Sm Nd Pr 

Eu 

Ce 

La 

Ho 

Er Dy 

Tb 

20 

114030 

0 

0 5 10 15 20 min 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® SA 


NUCLEOSIL ® 100-5 SA 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; échangeur de cations, fortement acide, 

éluant dans la colonne 0,15 M (NH 4 ) 2 HPO 4 , pH 5 


3 mm DI 721486.30 721342.30 721487.30 

4 mm DI 721486.40 721342.40 721487.40 

4,6 mm DI 721486.46 721525.46 721342.46 721487.40 


4 mm DI 720097.40 721487.40 

4,6 mm DI 720097.46 721487.40 

NUCLEOSIL ® 100-10 SA 

granulométrie 10 µm, taille des pores 100 Å; échangeur de cations, fortement acide, 



3 mm DI 721881.30 721683.30 721706.30 

4 mm DI 721881.40 721683.40 721706.40 


4 mm DI 720028.40 721706.40 

4,6 mm DI 720028.46 721706.40 


1) 



136 

MN



Echangeur d’anions, fortement basique -(CH 2 ) 3 CH 2 – N + (CH 3 ) 3 Cl – 

L’échangeur d’anions NUCLEOSIL ® SB est recommandé 

pour la chromatographie par échange d’ions. 

C’est un échangeur d’anions fortement basique avec une 

modification ammonium quaternaire et une capacité d’environ 

1 méq/g. 

HPLC d’anions minéraux et d’anions organiques 

D. Yan, G. Schwedt, J. Chromatogr. 516 (1990) 383 – 393 

Colonne: EC 250/4 NUCLEOSIL ® 100-10 SB, 

250 x 4 mm DI, Art. n o 720029.40 

Eluant: 1 mM acide diéthylènetriaminepentaacétique (DTPA) 


Détection: conductivité 



Acétate 

Cl – NO 2 

– 

Formiate 

Br – NO 3 

– 

SO 2– 

4 

Tartrate 

Oxalate 

0,2 µS 

0 8 16 min 

106540 

Références de commande · colonnes analytiques NUCLEOSIL ® SB 


NUCLEOSIL ® 100-5 SB 

granulométrie 5 µm, taille des pores 100 Å; échangeur d’anions, fortement basique, 



3 mm DI 721688.30 721884.30 721885.30 

4 mm DI 721688.40 721884.40 721885.40 

4,6 mm DI 721688.46 721523.46 721884.46 721885.40 


4 mm DI 720996.40 721885.40 

4,6 mm DI 720996.46 721885.40 

NUCLEOSIL ® 100-10 SB 

granulométrie 10 µm, taille des pores 100 Å; échangeur d’anions, fortement basique, 



3 mm DI 721882.30 721879.30 721886.30 

4 mm DI 721882.40 721879.40 721886.40 


4 mm DI 720029.40 721886.40 

4,6 mm DI 720029.46 721886.40 


1) 



MN



Colonnes ChromCart ® remplies par des phases de silice d’autres fabricants 

LiChrospher ® et Superspher ® 

Matériaux de remplissage fabriqués par E. Merck (D) 


LiChrospher ® 100 RP 8, 5 µm 

granulométrie nom. 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, non endcapped, 12,5% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728025.20 728026.20 728051.30 

3 mm DI 728025.30 728026.30 728051.30 

4 mm DI 728025.40 728026.40 728051.40 

4,6 mm DI 728025.46 728027.46 728026.46 728051.40 

LiChrospher ® 100 RP 8 ec, 5 µm 

granulométrie nom. 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, endcapped, 12,5% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728028.20 728029.20 728052.30 

3 mm DI 728028.30 728029.30 728052.30 

4 mm DI 728028.40 728029.40 728052.40 

4,6 mm DI 728028.46 728030.46 728029.46 728052.40 

LiChrospher ® 100 RP 18, 5 µm 

granulométrie nom. 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, non endcapped, 21% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728031.20 728032.20 728053.30 

3 mm DI 728031.30 728032.30 728053.30 

4 mm DI 728031.40 728032.40 728053.40 

4,6 mm DI 728031.46 728033.46 728032.46 728053.40 

LiChrospher ® 100 RP 18 ec, 5 µm 

granulométrie nom. 5 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, 21% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728034.20 728035.20 728054.30 

3 mm DI 728034.30 728035.30 728054.30 

4 mm DI 728034.40 728035.40 728054.40 

4,6 mm DI 728034.46 728036.46 728035.46 728054.40 

LiChrospher ® 60 RP select B, 5 µm 

granulométrie nom. 5 µm, taille des pores 60 Å; phase octyle, endcapped, 12% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728037.20 728038.20 728055.30 

3 mm DI 728037.30 728038.30 728055.30 

4 mm DI 728037.40 728038.40 728055.40 

4,6 mm DI 728037.46 728039.46 728038.46 728055.40 

Superspher ® 100 RP 18 

granulométrie 4 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, non endcapped, 21% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728543.20 728545.20 728546.30 

3 mm DI 728543.30 728545.30 728546.30 

4 mm DI 728543.40 728545.40 728546.40 

4,6 mm DI 728543.46 728544.46 728545.46 728546.40 

Superspher ® 100 RP 18 ec 


2 mm DI 728540.20 728553.20 728550.30 

3 mm DI 728540.30 728553.30 728550.30 

4 mm DI 728540.40 728553.40 728550.40 

4,6 mm DI 728540.46 728552.46 728553.46 728550.40 


138 

MN



Colonnes ChromCart ® remplies par des phases de silice d’autres fabricants 

Inertsil ® 

Matériaux de remplissage fabriqués par GL Sciences (J) 



Inertsil ® ODS-2, 5 µm 

granulométrie nom. 5 µm, taille des pores 150 Å; phase octadécyle, endcapped, 18,5% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728301.20 728302.20 728320.30 

3 mm DI 728301.30 728302.30 728320.30 

4 mm DI 728301.40 728302.40 728320.40 

4,6 mm DI 728301.46 728303.46 728302.46 728320.40 


Kromasil ® 

Matériaux de remplissage fabriqués par Eka Chemicals (S) 



Kromasil ® C 8 , 3,5 µm 

granulométrie 3,5 ± 1,5 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, endcapped, 12% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728403.20 728405.20 728401.30 

3 mm DI 728403.30 728405.30 728401.30 

4 mm DI 728403.40 728405.40 728401.40 

4,6 mm DI 728403.46 728404.46 728405.46 728401.40 

Kromasil ® C 8 , 5 µm 

granulométrie 5 ± 1,6 µm, taille des pores 100 Å; phase octyle, endcapped, 12% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728043.20 728044.20 728057.30 

3 mm DI 728043.30 728044.30 728057.30 

4 mm DI 728043.40 728044.40 728057.40 

4,6 mm DI 728043.46 728045.46 728044.46 728057.40 

Kromasil ® C 18 , 3,5 µm 

granulométrie 3,5 ± 1,5 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, 19% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728412.20 728414.20 728410.30 

3 mm DI 728412.30 728414.30 728410.30 

4 mm DI 728412.40 728414.40 728410.40 

4,6 mm DI 728412.46 728413.46 728414.46 728410.40 

Kromasil ® C 18 , 5 µm 

granulométrie 5 ± 1,6 µm, taille des pores 100 Å; phase octadécyle, endcapped, 19% C; éluant dans la colonne acétonitrile / eau 

2 mm DI 728040.20 728041.20 728056.30 

3 mm DI 728040.30 728041.30 728056.30 

4 mm DI 728040.40 728041.40 728056.40 

4,6 mm DI 728040.46 728042.46 728041.46 728056.40 


MN 

139

Colonnes pour la HPLC - Macherey Nagel

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