SureStepTM Smoke Check test Test one-step de ... - ulti med Products

SureStep TM Smoke Check test
Test one-step de la cotinine
008A086
Immunodosage one-step visuel pour la détection qualitative de la cotinine urinaire
UTILISATION PREVUE
Le test de détection sur carte de la cotinine est un immunodosage one-step avec Flow latéral utilisé pour la
détection qualitative de la cotinine, le métabolite majeur de la nicotine dans l’urine humaine, à une
concentration seuil de 200 ng/ml. Ce produit est utilisé pour obtenir un résultat visuel, qualitatif et est
destiné à un usage professionnel.
Ce test ne fournit qu’un résultat analytique préliminaire. Une méthode chimique alternative plus spécifique
comme une chromatographie liquide à haute performance (HPLC) ou une chromatographie
gazeuse/spectrométrie de masse en tandem (GC/MS) doit être utilisée pour obtenir un résultat analytique
confirmé. Tous les résultats de tests doivent être considérés en fonction du tableau clinique et du jugement
professionnel, particulièrement lorsque le test indique des résultats préliminaires positifs.
RÉSUMÉ
L’utilisation largement répandue du tabac entraîne des frais importants pour
notre société. Fumer entraîne l’absorption de nicotine via les poumons et
l’épithélium buccal/nasal. Environ 20 métabolites de la nicotine peuvent être
identifiés dans l’urine. La cotinine est le métabolite majeur de la nicotine et
s’accumule dans le corps lorsque la personne fume régulièrement. La
nicotine et la cotinine sont métabolisées par la même enzyme hépatique.
L’on a rapporté que la cotinine est stable dans les liquides corporels et
présente un temps de demi-vie relativement long de 17 heures. Elle est donc
moins dépendante du moment de collecte de l’échantillon que la nicotine ou
d’autres métabolites. La cotinine a été largement utilisée en tant que
biomarqueur de l'exposition au tabac. Les méthodes d’analyse de la cotinine
dans les fluides biologiques incluent la chromatographie gazeuse, la
chromatographie gazeuse /spectrométrie de masse en tandem, HPLC, la
spectrométrie de masse HPLC et RIA. Ces méthodes nécessitent
habituellement un équipement spécial et des procédures compliquées. Le
test sur carte de la cotinine est un immunodosage one-step utilisé pour la
détection qualitative de la cotinine urinaire. Il est basé sur le principe des
réactions immunochimiques très spécifiques des antigènes et anticorps. Son
utilisation pour la détection qualitative de la cotinine urinaire à une
concentration seuil de 200 ng/ml est simple, rapide et commode.
PRINCIPE DU TEST
Le test de détection sur carte de la cotinine applique le principe de la liaison Ag-b compétitive. Le test
contient une membrane en forme de bandelette recouverte d’antigène de la cotinine au niveau de la ligne
test. Le tampon avec de l’or conjugué aux anticorps de la cotinine est placé à la fin de la membrane. Dans
l’urine sans cotinine, la solution colorée de conjugué d’or colloïdal - anticorps et l’urine se déplace
chromatographiquement sur la membrane par effet capillaire. La solution migre ensuite vers la ligne de test
immobilisée contenant l’antigène de la cotinine et forme une ligne visible lorsque l'anticorps forme un
complexe avec l’antigène. La formation d’une précipitation visible dans la zone de test a lieu lorsque l’urine
testée est négative (non-fumeur). Lorsque la cotinine est présente dans l’urine, elle entre en compétition
avec la cotinine pré-fixée et marquée au conjugué d’or de la bandelette de test pour les sites de fixation
d'anticorps limités. Lorsque la concentration de cotinine présente dans l’urine est suffisante, elle remplira
les sites de liaison anticorps limités. Ceci empêchera la liaison du conjugué colloïdal or-anticorps coloré au
niveau de la zone de test. C'est pourquoi l’absence de ligne colorée dans la zone de test indique un résultat
positif (fumeur). Une ligne de contrôle avec réaction antigène/anticorps différente est ajoutée à la
membrane immunochromatographique de la zone de contrôle (C), afin d’indiquer la réalisation correcte du
Test one-step de la cotinine # 008A086 1

SureStep TM Smoke Check test
Test one-step de la cotinine
test. Cette ligne de contrôle doit toujours apparaître, indépendamment de l’état de la cotinine urinaire.
L’urine négative montrera donc deux lignes colorées, et l’urine positive une seule ligne. La présence de
cette ligne colorée dans la zone de contrôle indique a) qu’un volume d’échantillon suffisant a été ajouté, et
b) qu’un flux correct a été obtenu.
CONSERVATION ET STABILITÉ
Le kit de test peut être conservé au frigo ou à température ambiante 2-30°C (36-86°F) dans la pochette scellée
pour la durée du temps de demi-vie.
PRÉCAUTIONS
Pour utilisation en laboratoire uniquement. Les échantillons d’urine peuvent être une source potentielle
d’infection. Des méthodes de manipulation et d’élimination appropriées doivent être établies. Eviter la
contamination croisée des échantillons d’urine en utilisant un nouveau conteneur d’échantillonnage et une
nouvelle pipette d’échantillonnage pour chaque échantillon d’urine. Ne pas utiliser de kit provenant d’une
pochette endommagée.
RÉACTIF ET MATERIAUX FOURNIS
Les tests emballés individuellement contiennent tous une pipette à jeter. Chaque test
contient une membrane recouverte de conjugué drogue-protéine et un tampon conjugué
d’or colloïdal recouvert d’anticorps de la cotinine. Fiche d’instructions.
MATÉRIAUX NÉCESSAIRES MAIS NON FOURNIS
1. Récipient pour le prélèvement de l’échantillon
2. Minuteur
PRÉLÈVEMENT D’ÉCHANTILLON ET MANIPULATION
Le test de détection sur carte de la cotinine est conçu pour des échantillons d’urine. L’urine fraîche ne
requiert pas de manipulation spéciale ou de prétraitement. Le test doit être effectué peu après la collecte de
l’échantillon d’urine, de préférence le même jour. L’échantillon peut être réfrigéré à 2-8°C pendant 3 jours
ou congelé à –20°C pour une plus longue durée. Les échantillons ayant été réfrigérés doivent être ramenés
à la température de la pièce avant d’être testés. Les échantillons ayant été congelés doivent être dégelés et
ramenés à la température de la pièce ainsi que soigneusement mélangés avant d’être testés.
Remarque : Les échantillons d’urine et tous les matériaux en contact avec eux, doivent être manipulés et
éliminés comme s'ils pouvaient transmettre une infection. Eviter tout contact avec la peau par le port de
gants et d’équipement de laboratoire approprié.
PROCÉDURE DE TEST
• Relire les instructions « Prélèvement des échantillons ». Amener le dispositif de test, les
échantillons du patient et de contrôle à température ambiante (20 - 30ºC) avant de procéder au
test. Ne pas ouvrir les pochettes avant d’être prêt à réaliser le test. Ne pas utiliser de kit provenant
d’une pochette endommagée.
• Retirer le dispositif de test de la pochette de protection (amener le dispositif à température
ambiante avant d’ouvrir la pochette afin d’éviter la condensation d’humidité sur la membrane).
Marquez le dispositif de test pour l’identification patient ou contrôle.
• Aspirer l’échantillon d’urine jusqu’à la ligne marquée sur la pipette (environ 100ul). Verser l’urine
dans la cupule pour échantillon. Utiliser une nouvelle pipette et un nouveau dispositif pour chaque
échantillon ou contrôle.
• Lire les résultats 3-8 minutes après l’addition des échantillons. Les résultats peuvent devenir
inexacts après 8 minutes.
Remarque : Une ligne très pâle dans la zone de test indique que la concentration de cotinine urinaire est
proche du seuil du test. Ces échantillons doivent être testés une deuxième fois ou confirmés à l'aide d’une
méthode plus spécifique avant de déterminer un résultat positif.
Test one-step de la cotinine # 008A086 2

INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
SureStep TM Smoke Check test
Test one-step de la cotinine
Négatif Positif Non validé Non validé
Négatif La ligne de test (T) et la ligne de contrôle (C) doivent toutes deux apparaître dans la fenêtre
d'observation. La ligne de contrôle (C) indique la bonne performance du dispositif.
L’intensité de la ligne de test peut être plus forte ou plus faible que celle de la ligne contrôle.
Positif Une ligne colorée apparaît uniquement dans la zone de contrôle (C). Il n’y a pas de ligne
colorée dans la zone de test (T).
Non
validé
Pas d’apparition d’une ligne colorée dans la zone de contrôle (C). Ne jamais identifier un
résultat comme positif s’il n’y pas apparition de la ligne de contrôle (C) dans la fenêtre
d’observation. Si la ligne de contrôle (C) n’apparaît pas, le résultat du test est non concluant
et le test doit être répété.
LIMITATIONS DE LA PROCEDURE
Le test est conçu pour l'utilisation avec de l’urine humaine uniquement. Un résultat positif indique
uniquement que la présence de cotinine dépasse la concentration seuil. Il n’indique et ne mesure pas
l’intoxication.
Des erreurs techniques ou procédurales ainsi que d’autres substances ou facteurs non-repris dans la liste
peuvent interférer avec le test et entraîner de faux résultats. Voir SPÉCIFICITÉ pour la liste de substances
qui entraîneront des résultats positifs ou qui n’interfèrent pas au niveau de la performance du test.
Si l’on soupçonne que les échantillons ont été mal marqués ou détériorés, il faut prélever un nouvel
échantillon et répéter le test.
CONTRÔLE DE LA QUALITÉ
Les bonnes pratiques de laboratoire recommandent l’utilisation de contrôles appropriés afin de garantir la
performance du kit. Des échantillons pour le contrôle de qualité sont disponibles dans le commerce. Utiliser
la même procédure de test pour le test des contrôles positifs et négatifs que celle utilisée pour l’échantillon
d’urine.
CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCE
Exactitude
L’exactitude du test sur carte de détection de la cotinine a été évaluée par rapport à un immunodosage
disponible dans le commerce à une concentration seuil de 200 ng/ml. Cent vingt échantillons (120) prélevés
chez des volontaires présumés non-fumeurs ont été testés avec les deux méthodes, la concordance a
atteint 100%. Dans une étude séparée, cinquante (50) échantillons d’urine obtenus de fumeurs présumés
ont été déterminés comme étant positifs à des concentrations de cotinine entre 300 ng/ml et plus de 200
ng/ml par un immunodosage disponible dans le commerce. SureStick TM Smoke Check a indiqué tous ces
50 échantillons comme positifs avec une concordance de 100%.
Reproductibilité
La reproductibilité du test sur carte de détection de la cotinine a été évaluée par rapport à quatre sites
différents utilisant des contrôles aveugles. Tous les soixante (60) échantillons avec une concentration de
cotinine de 100 ng/ml ont été déterminés comme négatifs. Tous les soixante (60) échantillons avec une
concentration de cotinine de 400 ng/ml ont été déterminés comme positifs.
Test one-step de la cotinine # 008A086 3

SureStep TM Smoke Check test
Test one-step de la cotinine
Précision
La précision du test sur carte de détection de la cotinine a été testée en ajoutant différentes drogues,
métabolites de drogues et autres composants susceptibles d’être présents dans l’urine. Les contrôles à 100
ng/ml doivent donner un résultat négatif.
Concentration [ng/ml] Nombre Résultats corrects Résultats corrects
[%]
100 50 50 100
400 50 50 100
Spécificité
La spécificité du test sur carte de détection de la cotinine a été testée en ajoutant différentes drogues,
métabolites de drogues et autres composants susceptibles d’être présents dans l’urine. Tous les
composants ont été préparés dans de l’urine humaine normale sans drogue. Le composant structurellement
lié suivant a entraîné un résultat positif lorsque testé à des valeurs égales ou supérieures à 350 µg/ml.
(-)-Nicotine
Les composants suivants n’ont pas entraîné de réaction croisée lorsque testés à des concentrations allant
jusqu’à 100 µg/ml.
Acétaminophène (+/-)-Ephédrine Penicilline G
Acide acétylsalicylique (+/-)-Epinéphrine Pentobarbital
Amitriptyline Erythromycine Phéniramine
D-Amphétamine EDDP Phénobarbital
Ampicilline Furosémide Phénothiazine
Aspartame Glucose L-Phénylephrine
Aspirine Ether glycérique du gaïacol p-Phénylethylamine
Atropine DL-Homatropine (+/-)-Phénylpropanolamine
Benzocaïne Hydrocodone Phentemine
Benzoylecgonine Hydromaphone Procaïne
[+]-Bromphéniramine Lidocaïne Prométhazine
Caféine Mépéridine d-Propoxyohene
Chloroquinine Maprotiline Secobarbital
(+)-Chlorphéniramine (+/-)3,4-MDMA Chlorure de sodium
(+/-)Chlorphéniramine Méthadol (+/-)-isoprotérénol
Chlorprothixène Méthamphétamine Tenocyclidine
Codéine Méthaqualone 11-nor-∆ 9 -
Créatinine Méthadone Tetrahydrocabinnol-9-
Cyclobenzaprine Methapyrilène Acide carboxylique
r-Cyclodextrine (1R,2S)-(-)-N-Methyl-Ephédrine Theophylline
(-)-Deoyephédrine Morphine Thioridazine
Dextromethamorphane Morphine-3+d-glucuronide D(+)Trehalose
Diazepam Naloxone Trifluoperazine
4-Dimethylaminoantipyrine Naltrexone Trimethobenzamide
5,5-Diphénylhydantoïne (+)-Naproxène Triprolidine hydrochloride
Dopamine Acide p-naphthalenacetic Tyramine
Doxylamine Nortriptyline Vitamine C
Ecgonine methyl ester Acide nicotinique
(+)-Ephédrine Acide oxalique
Test one-step de la cotinine # 008A086 4

SureStep TM Smoke Check test
Test one-step de la cotinine
LITTÉRATURE
1. Zevin S, Jacob P and Benowitz N. Cotinine effects on nicotine metabolism. Clinical Pharmacology &
Therapeutics, 1997 June 61(6): 649-54.
2. Zuccaro P, Pichini S, Altieri I, Rosa M, Pellegrini M and Pacifici R. Interference of nicotine metabolites in
cotinine deter-mination by RIA. Clinical Chemistry, 1997 Jan 43(1): 180-1.
3. Benowitz NL. Cotinine as biomarker of environmental tobacco smoke exposure. Epidemiologic
Reviews, 1996 18(2): 188-204.
4. Curvall M and Vala FK. Nicotine and metabolites: analysis and levels in body fluids. Edited by Gorrod
JW and Wahren J. Published in 1993 by Chapman & Hall, London. ISBN 0 142 55740
DISTRIBUTEUR
ulti med Products (Deutschland) GmbH ulti med Products (Belgium) BVBA
Reeshoop 1 • 22926 Ahrensburg Honzebroekstraat 137 • 8800 Roeselare
Tél: 04102 – 80090 Tél : +32 +51 200 425
e-mail: info@ultimed.de Fax: +32 +51 200 449
e-mail: belgium@ultimed.org
Susceptible de modifications /mise à jour : 02/2007 rev. E
Test one-step de la cotinine # 008A086 5