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<strong>Conseils</strong> <strong>et</strong> <strong>astuces</strong> <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>ageJe fais suite à votre inscription <strong>et</strong> vais vous expliquer tout ce que vous <strong>de</strong>vezsavoir sur les bonnes pratiques <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age.R<strong>et</strong>rouvez ci-<strong>de</strong>ssous les 6 conseils <strong>et</strong> <strong>astuces</strong> relatifs au pip<strong>et</strong>age.EmmaConseil 1 : Appliquer un angle d'aspiration correctAppliquer un angle d'aspiration correctL'angle d'immersion du cône <strong>de</strong> votre pip<strong>et</strong>te dans l'échantillon doit être aussi proche que possible <strong>de</strong>90 <strong>de</strong>grés <strong>et</strong> ne doit pas s'écarter <strong>de</strong> plus <strong>de</strong> 20 <strong>de</strong>grés <strong>de</strong> la verticale. Si l'angle est supérieur à c<strong>et</strong>tevaleur, le niveau <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong> sera inférieur à celui utilisé lors <strong>de</strong> l'étalonnage <strong>de</strong> la pip<strong>et</strong>te. Une tropgran<strong>de</strong> quantité <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong> sera alors aspirée dans le cône, donnant lieu à <strong>de</strong>s résultats inexacts. Parexemple, à un angle <strong>de</strong> 30 <strong>de</strong>grés par rapport à la verticale, une quantité excessive <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong>, jusqu'à0,7 %, peut être aspirée.Pour en savoir plus sur l'angle correct d'aspiration, reportez-vous au manuel électronique World ofWon<strong>de</strong>rs d'Aca<strong>de</strong>mia.Conseil 2 : Assurer une homogénéité constanteRythme <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age régulierAppliquez un rythme <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age régulier d'un échantillon à un autre. Évitez <strong>de</strong> vous dépêcher ou d<strong>et</strong>ravailler trop rapi<strong>de</strong>ment <strong>et</strong> adoptez un rythme régulier pour chaque étape du cycle <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age.Pip<strong>et</strong>tes <strong>de</strong> grand volumePour les volumes élevés, généralement <strong>de</strong> 1 ml ou plus, faites une pause d'au moins 1 secon<strong>de</strong> aprèsavoir prélevé l'échantillon, avec le cône toujours immergé dans le liqui<strong>de</strong>, afin <strong>de</strong> perm<strong>et</strong>tre uneaspiration complète <strong>de</strong> l'échantillon. Ne relevez le cône qu'une fois l'aspiration terminée.Manipulation sans à-coups du poussoir du pistonAppliquez une vitesse <strong>et</strong> une pression régulières lorsque vous relâchez le poussoir du piston. Uneaspiration non contrôlée peut provoquer <strong>de</strong>s bulles, <strong>de</strong>s projections, <strong>de</strong>s aérosols <strong>et</strong> la contamination <strong>de</strong>la tige <strong>et</strong> du piston <strong>de</strong> la pip<strong>et</strong>te.Pip<strong>et</strong>tes électroniquesLes pip<strong>et</strong>tes électroniques offrent une homogénéité <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age optimale, éliminant ainsi la quasi-totalité<strong>de</strong>s problèmes dus à la variabilité <strong>de</strong> la technique d'utilisation.Pip<strong>et</strong>tes électroniques monocanalPip<strong>et</strong>tes électroniques multicanauxSystème <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age Liquidator96
Conseil 3 : Pré-rincer les cônesPré-rincer au moins <strong>de</strong>ux fois les cônesLorsque vous dosez un liqui<strong>de</strong> à l'ai<strong>de</strong> d'une pip<strong>et</strong>te, un dépôt <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong> se forme sur le cône. Levolume expulsé est donc légèrement inférieur à ce qu'il <strong>de</strong>vrait être. Chaque fois que vous utilisez unnouveau cône, vous <strong>de</strong>vez le rincer au moins <strong>de</strong>ux fois avec le liqui<strong>de</strong> à doser avant toute opération <strong>de</strong>pip<strong>et</strong>age, afin <strong>de</strong> compenser la quantité nécessaire à la formation <strong>de</strong> ce film <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong>. Le pré-rinçagecontribue également à neutraliser les eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong> capillarité dans les micropip<strong>et</strong>tes <strong>et</strong> à égaliser latempérature <strong>de</strong> l'air contenu à l'intérieur <strong>de</strong> la pip<strong>et</strong>te avec la température <strong>de</strong> l'échantillon, ce qui s'avèreimportant pour les pip<strong>et</strong>tes <strong>de</strong> grand volume.Exceptions au pré-rinçageLe pré-rinçage peut avoir <strong>de</strong>s eff<strong>et</strong>s négatifs sur les résultats lors du pip<strong>et</strong>age <strong>de</strong> solutions très chau<strong>de</strong>sou très froi<strong>de</strong>s. Il est déconseillé <strong>de</strong> procé<strong>de</strong>r à un pré-rinçage pour le pip<strong>et</strong>age <strong>de</strong> solutions très froi<strong>de</strong>s,telles que celles provenant d'un bain <strong>de</strong> glace, ou <strong>de</strong> solutions supérieures à 37 °C, car c<strong>et</strong>te opérationpeut générer <strong>de</strong>s erreurs dans une proportion pouvant atteindre 5 %.Cônes BioCleanConseil 4 : Éviter les variations <strong>de</strong> températureMaintenir une température ambiante constanteConservez les pip<strong>et</strong>tes à une température ambiante constante. Il est recommandé d'éviter les variations<strong>de</strong> température importantes ou soudaines, car la température <strong>de</strong> l'air contenu à l'intérieur <strong>de</strong> la pip<strong>et</strong>tes'ajuste lentement, ce qui peut avoir un impact sur le volume d'échantillon distribué. Une températureconstante peut accroître la précision <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age jusqu'à 5 %.Laisser un temps d'équilibrage appropriéLes pip<strong>et</strong>tes sont sensibles aux variations <strong>de</strong> la température <strong>de</strong>s échantillons distribués. Les liqui<strong>de</strong>sfroids ont tendance à provoquer un dosage excessif, alors que les liqui<strong>de</strong>s chauds peuvent entraîner ladistribution <strong>de</strong> volumes inférieurs au dosage souhaité. Sauf indication contraire, laissez un délaisuffisant pour que la température <strong>de</strong> vos pip<strong>et</strong>tes <strong>et</strong> <strong>de</strong>s liqui<strong>de</strong>s s'équilibre avant toute utilisation.Eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong> réchauffement par la chaleur <strong>de</strong> la mainDurant les opérations <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age sur <strong>de</strong> longues pério<strong>de</strong>s, la chaleur émise par la main peut réchaufferl'air contenu à l'intérieur <strong>de</strong> la pip<strong>et</strong>te <strong>et</strong> provoquer sa dilatation, générant ainsi <strong>de</strong>s résultats inexacts.Utilisez <strong>de</strong>s pip<strong>et</strong>tes en polymères PVDF <strong>de</strong> haute qualité, évitez <strong>de</strong> tenir en permanence la pip<strong>et</strong>te dansla main entre les cycles <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age <strong>et</strong> replacez toujours la pip<strong>et</strong>te sur son support après chaqueopération <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age.Pour en savoir plus, reportez-vous au manuel électronique World of Won<strong>de</strong>rs d'Aca<strong>de</strong>mia.
Conseil 5 : Assurer un dosage compl<strong>et</strong>Assurer la <strong>de</strong>scente appropriée <strong>de</strong> la <strong>de</strong>rnière goutteIl est impératif <strong>de</strong> veiller à ce que la <strong>de</strong>rnière goutte soit entièrement distribuée <strong>et</strong> n'adhère pas àl'extrémité du cône afin d'obtenir une précision <strong>et</strong> une reproductibilité optimales d'un échantillon àl'autre. Ce point s'avère particulièrement important pour le pip<strong>et</strong>age <strong>de</strong> micro-volumes, en raison <strong>de</strong>sfaibles volumes d'échantillons requis. Pour la plupart <strong>de</strong>s applications, il est recommandé <strong>de</strong> distribuerle liqui<strong>de</strong> avec l'extrémité du cône placée contre la paroi du récipient afin <strong>de</strong> réduire ou d'éliminer laquantité d'échantillon restant dans le cône. R<strong>et</strong>irez la pip<strong>et</strong>te en faisant glisser l'extrémité du cône lelong <strong>de</strong> la paroi afin <strong>de</strong> libérer toute gouttel<strong>et</strong>te r<strong>et</strong>enue au niveau <strong>de</strong> l'orifice du cône. C<strong>et</strong>te techniqueperm<strong>et</strong> d'accroître l'exactitu<strong>de</strong> <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age <strong>de</strong> 1 % ou plus. Pour les applications pour lesquelles ellen'est pas appropriée, utilisez <strong>de</strong>s cônes à parois fines, qui perm<strong>et</strong>tent <strong>de</strong> libérer complètement la<strong>de</strong>rnière gouttel<strong>et</strong>te, afin <strong>de</strong> distribuer l'échantillon au-<strong>de</strong>ssus <strong>de</strong> la surface du liqui<strong>de</strong> ou directementdans le liqui<strong>de</strong>.Pip<strong>et</strong>tes électroniques monocanalPip<strong>et</strong>tes électroniques multicanauxConseil 6 : Remplissage correct du cône <strong>et</strong> profon<strong>de</strong>ur d'immersion appropriéeRemplissage correct du côneLes meilleurs résultats sont obtenus en aspirant 50 % du volume maximum du cône. Il estrecommandé d'appliquer <strong>de</strong>s volumes <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age compris entre 35 <strong>et</strong> 100 % du volume nominal ducône afin <strong>de</strong> réduire les exigences en matière <strong>de</strong> technique <strong>de</strong> l'opérateur <strong>et</strong> d'améliorer les résultatsd'environ 1 %. Des volumes <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age inférieurs à 10 % du volume nominal du cône posentproblème.Profon<strong>de</strong>ur d'immersionUne profon<strong>de</strong>ur appropriée d'immersion du cône peut accroître l'exactitu<strong>de</strong> <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age jusqu'à 5 % <strong>et</strong>s'avère particulièrement importante pour les micropip<strong>et</strong>tes. La profon<strong>de</strong>ur d'immersion du cône doit être<strong>de</strong> 1 à 2 mm pour les micropip<strong>et</strong>tes <strong>et</strong> jusqu'à 6 à 10 mm pour les pip<strong>et</strong>tes <strong>de</strong> grand volume, selon lataille du cône. Si le cône est immergé trop profondément, le gaz contenu à l'intérieur <strong>de</strong> celui-ci estcomprimé <strong>et</strong> provoque l'aspiration d'une quantité excessive <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong>. Le liqui<strong>de</strong> r<strong>et</strong>enu à la surface ducône peut également altérer les résultats. Si le cône n'est pas immergé assez profondément, <strong>de</strong> l'air peutêtre aspiré, occasionnant <strong>de</strong>s bulles d'air <strong>et</strong> <strong>de</strong>s volumes inexacts.Liquidator96S'inscrire à un séminaire sur les bonnes pratiques <strong>de</strong> pip<strong>et</strong>age