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•Term S - Spécialité Chromatographies TPC n ◦ 21 Principe de la chromatographieLa chromatographie est une méthode d’analyse chimique consistant à séparer etidentifier les constituants d’un mélange. Elle est fondée sur la différence d’affinitéd’un composant entre une phase mobile (l’éluant) et une phase fixe. L’éluantest un liquide ou un gaz en mouvement à travers une phase fixe, liquide ou solide.Les phénomènes mis en jeu différent selon les phases utilisées.– La chromatographie de partage est fondée sur la différence de solubilité des espèceschimiques dans l’éluant. (exemple : chromatographie sur papier)– La chromatographie d’adsorption est fondée sur l’adsorption (formation de liaisonsde faible intensité) plus ou moins importante des espèces chimiques sur la phase fixe.(exemples : chromatographie sur couche mince, ou chromatrographie sur colonne)En chromatographie sur couche mince ou sur papier, on définit le rapport frontalR f qui caractérise l’espèce chimique et qui dépend de la nature de l’éluant et de la phasefixe. Il est égal au rapport entre la distance parcourue par l’espèce chimique et la distanceparcourue par l’éluant.front de l’éluantespèce chimique étudiéeR f = h HHhligne de dépôt2 Chromatographie sur couche mince (CCM)La phase fixe est solide : c’est de la silice étalé en couche mince sur une plaque support.La phase mobile est un solvant adapté. Il migre sur la phase fixe par capillarité.– Verser l’éluant (mélange eau salée + éthanol) dans le fond de la cuve.– Déposer à l’aide des micropipettes une goutte de chacun des colorants alimentaires(bleu, jaune et vert) sur la plaque de silice.ATTENTION : manipuler avec grand soin (pas les doigts sur la plaque!). Utiliser unepince à épiler pour manipuler la plaque (par les coins). Les gouttes seront déposéessur une ligne horizontale tracée au crayon à papier à 1 cm du bas de la plaque.– Introduire délicatement la plaque dans la cuve (l’éluant doit être au-dessous de laligne de dépôt). Fermer la cuve.– Laisser migrer. Noter la limite du front du solvant. Laisser sécher. fiche réponse 1.3 Chromatographie sur papierLa phase fixe est la feuille de papier (cellulose). L’éluant est un solvant adapté quimigre à nouveau par capillarité.– Verser l’éluant (mélange eau salée + éthanol) dans le fond de la cuve.Chimie Partie A : Extraire et identifier des espèces chimiques 1/ 2


Term S - Spécialité Chromatographies TPC n ◦ 2– Déposer à l’aide des micropipettes une goutte de chacun des colorants alimentaires(bleu, jaune et vert) sur la feuille de papier. Les gouttes seront déposées sur uneligne horizontale tracée au crayon à papier à 1 cm du bas de la feuille.– Introduire la feuille dans la cuve (l’éluant doit être au-dessous de la ligne de dépôt).Fermer la cuve.– Laisser migrer. Noter la limite du front du solvant. Laisser sécher. fiche réponse 2.4 Chromatographie sur colonne (paillasse prof)La phase fixe est un gel de silice. L’éluant est un solvant qui migre à travers la phasefixe par gravité.On va à nouveau analyser le colorant vert par le biais d’un sirop de menthe. On pourracomparer le résultat obtenu avec les indications portées sur l’étiquette commerciale. fiche réponse 3.5 CCM : vérification de la formule d’un médicamentVoici la formulation annoncée sur l’étiquette du médicament Actron.– Principes actifs :acide acétylsalicylique 0,267 gparacétamol 0,133 gcaféine 0,04 g– Principes non-actifs (excipients) :carbonate monosodique (HCO – 3 )acide citriqueLe but de cette manipulation est de vérifier cette formulation par chromatographie surcouche mince.– Préparer la plaque de CCM et la cuve avec l’éluant (acétate d’éthyle / éther diéthylique80/20).– Préparer les échantillons dans une plaque à godets :(1) : solution d’Actron dans l’eau tiède(2) : solution d’acide acétylsalicylique dans l’eau tiède(3) : solution de paracétamol dans l’eau tiède(4) : solution de caféine dans l’eau tiède(5) : solution d’Actron dans l’éther diéthylique (à préparer de dernière minute carl’éther est très volatil !!)– Déposer les échantillons sur la plaque de silice à l’aide de tubes capillaires.– Réaliser l’élution, sécher à l’aide d’un sèche-cheveux.– Révéler sous lumière UV et entourer légèrement les taches avec un crayon à papier. fiche réponse 4.Chimie Partie A : Extraire et identifier des espèces chimiques 2/ 2

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