paper baru - Digilib ITS

PRODUKSI GULA REDUKSI DARI BAGASSE TEBU MELALUI
DEGRADASI ENZIMATIK
Devy Dwi Lestari 1 , Emy Juniyati 2 , Setiyo Gunawan, Arief Widjaja*
Jurusan Teknik Kimia, Institut Teknologi Sepuluh Nopember
Surabaya - Indonesia
*corresponding author; e-mail: arief_w@chem-eng.its.ac.id*
devy_duonxx@yahoo.co.id 1 , mj_junzlover@yahoo.com 2
Abstrak
Tujuan penelitian ini adalah untuk melakukan
pretreatment dengan NaOH pada bagasse tebu serta
mendapatkan kondisi operasi yang optimal pada konversi
selulosa menjadi gula D-glukosa oleh enzim selulase. Enzim
yang digunakan merupakan enzim murni dari strain T.reesei
dan A.niger. Kondisi hidrolisa yang digunakan adalah pada
suhu 60 o C dan pH 3 pada semua sampel agar didapatkan
kondisi hidrolisa yang paling baik. Kondisi optimal hidrolisa
terbaik dari strain Trichoderma reesei dibandingkan dengan
hidrolisa menggunakan strain campuran dari Trichoderma
reesei dan Aspergillus niger dengan rasio 2:1. Hasil yang
didapatkan dari penelitian adalah sebagai berikut : hasil
hidrolisa terbaik adalah pada pretreatment dengan konsentrasi
NaOH 4% suhu 80 o C selama 8 jam dengan suhu hidrolisa 60 o C
dan pH 3 yaitu didapatkan gula reduksi sebesar 4,75 g/L. Dari
hasil perbandingan hidrolisa antara enzim murni Trichoderma
reesei, Aspergillus niger, dan campuran antara Trichoderma
reesei dan Aspergillus niger dengan perbandingan 2:1
didapatkan gula reduksi tertinggi pada hidrolisa menggunakan
enzim dari strain Trichoderma reesei yaitu sebesar 4,75 g/L.
Yield gula reduksi tertinggi yang dihasilkan pada konsentrasi
gula reduksi sebesar 4,75 g/L adalah 143 mg gula/g bagasse
tebu.
Kata kunci : enzim selulase, hidrolisa enzimatik, bagasse tebu,
glukosa, Trichoderma reesei, Aspergillus niger
I. PENDAHULUAN
Dunia sedang menghadapi problem penggunaan
energi berbasis fosil seperti minyak bumi dan gas alam,
dimana penggunaan energi ini akan semakin meningkatkan
kadar CO2 di alam selain juga gas-gas lain yang
memberikan efek rumah kaca yang disinyalir sebagai
sumber pemanasan global. Disamping itu, bahan bakar
berbasis fosil merupakan jenis yang tidak bisa diperbarui
karena berasal dari sisa-sisa makhluk hidup pada jaman
purba. Bila sumber energi ini dipergunakan terus menerus
tanpa ada inovasi mengenai sumber energi yang dapat
diperbarui, maka jumlahnya akan semakin menipis dan
habis pada akhirnya. Oleh karena itu penemuan sumber
energi dari bahan yang dapat diperbarui sangat dibutuhkan
untuk memenuhi kebutuhan energi dunia yang semakin
lama semakin meningkat.
Disisi lain Indonesia merupakan penghasil gula
besar di dunia yang memberikan limbah padat bagasse
tebu yang sangat besar pula. Luas areal tanaman tebu di
Indonesia pada tahun 2010 sekitar 430.000 hektar dengan
produksi tebu lebih dari 20 juta ton, dan menghasilkan
gula lebih dari 2,5 juta ton. Pada proses pembuatan gula,
sekitar 30% dari jumlah ini tersisa sebagai limbah padat
yaitu bagasse tebu, yang terdiri dari 45,5 % selulosa, 27 %
hemiselulosa dan 21,1 % lignin (Rocha dkk.,2011). Proses
konversi selulosa menjadi gula D-glukosa yang merupakan
bahan baku fermentasi menghasilkan etanol sudah banyak
dilakukan oleh para peneliti dengan menggunakan katalis
enzim selulase (Gomez dkk., 2008; Rabelo dkk.,2011)
Dibandingkan degradasi secara fisik maupun kimiawi,
degradasi menggunakan enzim memiliki banyak
keuntungan karena sifatnya yang sangat selektif, hemat
energi dan tidak mencemari lingkungan.
II. DASAR TEORI
Selulase adalah enzim yang dapat mendegradasi
selulosa (polisakarida dari bentukan glukosa). Selulase
dapat menjadi katalisator reaksi pendegradasian selulosa.
Umumnya selulase mendegradasi selulosa yang memiliki
rantai yang lebih pendek dari komponen kayu (selulosa,
hemiselulosa, lignin, ekstraktif dan mineral). Rantai
selulosa yang lebih pendek tersebut terdapat pada
hemiselulosa (glukosa, galaktosa, manosa, xylosa,
arabinosa). Karena komponen hemiselulosa yang memiliki
sifat seperti selulosa adalah glukosa maka hemiselulosa
lebih dahulu terdegradasi dibandingkan dengan selulosa.
Selulosa adalah bagian utama tanaman, berupa
polimer glukosa linier hidrofilik yang dihubungkan oleh
ikatan glikosida. Derajat polimerisasi untuk selulosa
tumbuhan berada pada kisaran 305 sampai 15300 (Fengel
dan Wegener,1984). Polimer selulosa terdiri dari bagian
kristalin dan amorf. Bagian amorf mudah dihidrolisis
sedangkan bagian kristalin tidak mudah dihidrolisis baik
secara kimiawi maupun enzimatik (Dahot dan Noomrio,
1996).
Hidrolisis selulosa terdiri dari dua tahap, yaitu
degradasi selulosa menjadi selobiosa oleh endo-β-1,4glukanase
dan ekso-β-1,4 glukanase kemudian dilanjutkan
dengan pemecahan selobiosa oleh β-1,4 glukosidase.
Kebanyakan sistem selulase yang dihasilkan oleh jamur
selulotik, jumlah β-glukosidasenya kurang dari yang
dibutuhkan untuk hidrolisis selulosa menjadi glukosa
secara efisien, sehingga produk utama hidrolisisnya bukan
glukosa melainkan selobiosa (Juhasz dkk., 2003; Martins
dkk., 2008; Ahamed dan Vermette, 2008). Selobiosa
merupakan inhibitor kuat terhadap endo-β-1,4-glukanase
dan ekso-β-1,4-glukanase mendegradasi selulosa. T. reesei
mampu menghasilkan endo-β-1,4-glukanase dan ekso-β-
1,4-glukanase sampai 80% (Muthuvelayudham dan
Viruthagiri, 2006), tetapi β-glukosidasenya rendah

(Martins dkk., 2008) sedangkan A. niger dapat
menghasilkan β-glukosidase tinggi tetapi endo-β-1,4glukanase
dan ekso-β-1,4-glukanasenya rendah.
Enzim selulase merupakan suatu campuran kompleks
yang terdiri dari tiga enzim yaitu :
1. Endo- β -1,4-glukanase
Endo-β-1,4-glukanase adalah glycoprotein dengan berat
molekul 5300-145000. Enzim ini menyerang rantai bagian
dalam dari selulosa amorphous menghasilkan selodextrin,
sellobiosa, atau glukosa. Enzim ini tidak dapat
menghidrolisa selulosa kristal secara sendirian, tetapi
ketika bersamaan dengan Exo-β-1,4-glukanase enzim ini
dapat mendegradasi selulosa kristal secara intensif.
2. Exo-β-1,4-glukanase
Exo-β-1,4-glukanase adalah glycoprotein dengan berat
molekul 42000-65000. Ada dua jenis yaitu Exo-β-1,4cellobiohidrolase
dan Exo-β-1,4-glucan glukohidrolase.
Enzim ini menyerang Crystalline Cellulose. Kerja enzim
ini dihambat dengan adanya produk yaitu selobiosa atau
glukosa.
3. β-1,4-glukosidase
β-1,4-glukosidase atau selobiosa adalah glycoprotein
dengan berat molekul 50000-410000. Enzim ini dapat
menghidrolisa selobiosa menjadi glukosa dan juga dapat
mendegradasi seloligosakarida. Kerja enzim ini dihambat
oleh produk reaksi yaitu glukosa.
III. METODE PENELITIAN
Persiapan Bagasse Tebu
Bagasse tebu didapatkan dari limbah Pabrik Gula
Candi Sidoarjo. Pada tahap pretreatment secara mekanik,
bagasse tebu digiling dan diayak untuk mendapatkan
ukuran 100-120 mesh, untuk pretreatment secara kimia,
digunakan NaOH dengan konsentrasi 0; 1 ;2 ; dan 4%,
dengan suhu 60 o C dan 80 o C, dan waktu pretreatment
selama 8 jam dan 16 jam. Kandungan kimia dari bagasse
tebu dianalisa dengan menggunakan metode Chesson.
Penyiapan Larutan Enzim Selulase
Enzim yang digunakan adalah enzim selulase komersial
dari strain Trichoderma reesei dan Asperrgillus niger yang
telah diencerkan. Untuk mengetahui aktivitas enzim,
dilakukan uji aktivitas enzim selulase dengan
menggunakan metode asam dinitrosalicylic (Miller, 1959).
Degradasi Enzimatik
Kondisi hidrolisa yang digunakan adalah pada suhu 60 o C
dan pH 3 pada semua sampel agar didapatkan kondisi
hidrolisa yang paling baik. 5 gram bagasse tebu yang
sudah dilakukan pretreatment secara kimiawi dimasukkan
ke dalam erlenmeyer 250 ml. Kemudian mencampurkan
enzim selulase dari T.reesei dan A.niger yang sudah
diketahui aktivitasnya ke dalam bagasse tebu.
menambahkan buffer sitrat pH 3 sampai volume 150 ml.
Menganalisa konsentrasi glukosa dalam hidrolisat dengan
menggunakan metoe DNS pada setiap selang waktu
tertentu. Kondisi optimal hidrolisa terbaik dari strain T.
reesei dibandingkan dengan hidrolisa menggunakan strain
campuran dari T. reesei dan A. niger dengan rasio 2:1.
IV. HASIL DAN DISKUSI
Komposisi Kimia Bagasse Tebu
Pada pretreatment mekanik, bagasse tebu
dikeringkan terlebih dahulu menggunakan sinar matahari
selama 12 jam. Setelah itu diayak dengan ukuran 100-120
mesh, dimana bertujuan untuk mempermudah proses
enzimatik oleh enzim selulase dan ukuran yang kecil akan
memperluas permukaan kontak antara enzim dengan
bagasse tebu sehingga mempermudah enzim dalam
mendegradasi selulosa dalam bagasse tebu menjadi
glukosa. Dari penelitian sebelumnya, ukuran optimum
untuk proses degradasi diperoleh pada ukuran 100-120
mesh. (Anwar, N., dkk, 2011)
Pretreatment bagasse tebu secara kimiawi perlu
dilakukan karena struktur lignin pada bagasse tebu yang
bersifat kokoh sehingga menghalangi kinerja enzim dalam
mendegradasi selulosa. Pada pretreatment ini
menggunakan NaOH, dimana NaOH dapat menurunkan
derajat polimerisasi, kristalinitas dan memutus ikatan
antara lignin dan karbohidrat. Oleh karena itu, diperlukan
treatment kimiawi untuk merusak komponen lignin. (Sun,
Ye., Cheng, Jiayang, 2002).
Efek utama dari pretreatment ini adalah
menghilangkan lignin dalam bagasse tebu, kemudian akan
meningkatkan kereaktifan dari polisakarida yang tersisa.
Dalam metode pretreatment ini, menggunakan variabel
konsentrasi NaOH (1%, 2%, 4%), suhu pretreatment
(60 o C, 80 o C), dan waktu pretreatment (8 jam, 16 jam).
Setelah proses pretreatment secara kimiawi selesai,
bagasse tebu dipisahkan dari larutan dan dicuci dengan air
panas sampai pH larutan menjadi 7. Kemudian bagasse
tebu dikeringkan dalam oven dan didinginkan hingga suhu
ruangan. Selanjutnya melakukan analisa dengan metode
chesson untuk mengetahui komponen-komponen dalam
bagasse tebu setelah pretreatment, hasil dari analisa
chesson ditunjukkan pada tabel 1.
Berdasarkan tabel di atas, dapat dilihat bahwa
massa total setelah pretreatment lebih kecil dari pada
massa awal sebelum pretreatment. Hal ini menunjukkan
adanya zat-zat organik dalam bagasse tebu yang menguap
ketika proses pretreatment dan larut ketika proses
pencucian. Selain itu, pretreatment yang dilakukan berhasil
menurunkan massa lignin dalam bagasse tebu serta
meningkatkan massa selulosanya.
Gambar 1. Pengaruh pretreatment pada 60 o C terhadap konsentrasi
hemiselulosa, selulosa dan lignin setelah 8 dan 16 jam pada berbagai
konsentrasi NaOH.

Komposisi
(%)
Tabel 1. Komposisi bagasse tebu sebelum dan sesudah pretreatment
Tanpa
pretre
atment
8
jam
Gambar 2. Pengaruh pretreatment pada 80 o C terhadap
konsentrasi hemiselulosa, selulosa dan lignin setelah 8 dan 16
jam pada berbagai konsentrasi NaOH.
Dari Gambar 1, tampak bahwa jika
pretreatment dilakukan pada 60 o C penggunaan 4%
NaOH tidak menyebabkan kenaikan kadar selulosa
secara signifikan. Dan sebaliknya, dari Gambar 2,
tampak bahwa jika pretreatment dilakukan pada
80 o C penggunaan 4% NaOH menyebabkan
kenaikan kadar selulosa sampai mencapai kadar
tertingginya. Untuk itu, disimpulkan bahwa
penggunaan 4% NaOH adalah yang terbaik. Pada
konsentrasi ini, konsentrasi lignin sudah turun
secara signifikan dengan kandungan selulosa yang
tertinggi.
Gambar 3. Pengaruh pretreatment dengan konsentrasi 4%
NaOH terhadap konsentrasi hemiselulosa, selulosa dan
lignin pada temperatur 60 dan 80 o C dan waktu 8 dan 16
jam.
Variabel
NaOH 1% NaOH 2% NaOH 4%
60 °C 80 °C 60 °C 80 °C 60 °C 80 °C
16
jam
8
jam
16
jam
8
jam
Selulosa 44,99 54,42 67,20 66,63 72,29 68,14 72,64 69,89 72,74 65,62 71,03 69,80 74,51
Hemiselulosa 30,59 28,20 17,38 21,83 19,26 22,52 17,59 21,77 17,33 18,89 19,27 17,53 15,20
Lignin 22,28 16,36 14,21 9,30 4,86 8,68 8,94 7,79 8,60 13,14 6,60 10,24 8,13
Abu 2,15 1,02 1,21 2,24 3,59 0,66 0,83 0,55 1,33 2,35 3,11 2,43 2,15
Total 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100
16
jam
8
jam
16
jam
8
jam
16
jam
8
jam
Berdasarkan analisa di atas, dapat
disimpulkan bahwa suhu optimal untuk
pretreatment adalah 80 o C, sedangkan waktu
pretreatment optimal adalah selama 16 jam.
Apabila dibandingkan berdasarkan konsentrasi
NaOH yang digunakan, dapat dilihat bahwa
konsentrasi NaOH 4% untuk pretreatment
menujukkan hasil yang lebih baik dari pada
pretreatment dengan konsentrasi NaOH 1% dan
2%. Kadar selulosa yang dihasilkan dari
pretreatment menggunakan konsentrasi NaOH 4%
mencapai 74,51%, angka ini jauh lebih tinggi dari
pada kadar selulosa yang dihasilkan dengan
pretreatment menggunakan konsentrasi NaOH 1%
dan konsentrasi NaOH 2%. Berdasarkan hal
tersebut, dapat disimpulkan bahwa konsentrasi
optimal untuk pretreatment bagasse tebu adalah 4%
NaOH.
Hal tersebut sesuai dengan hasil yang
didapatkan dari pretreatment dengan kondisi
optimal yaitu dengan konsentrasi NaOH 4%, pada
suhu 80 o C, dan selama 16 jam yang menunjukkan
hasil kadar selulosa paling tinggi. Kadar selulosa
yang dihasilkan dari kondisi optimal pretreatment
ini mencapai 74,51%, lebih tinggi dibandingkan
dengan kadar selulosa yang dihasilkan kondisi
pretreatment yang lain.
Selain analisa chesson, juga dilakukan
analisa Scanning Electron Microscope (SEM)
untuk mengetahui struktur dari bagasse tebu setelah
dilakukan pretreatment. Untuk analisa SEM,
mengambil beberapa sampel hasil dari pretretment
dimana menunjukkan kadar lignin yang tertinggi
dan juga terendah sehingga dapat dibandingkan
dengan bagasse tebu tanpa pretretment. Sampel
yang dianalisa dengan SEM adalah bagasse tebu
yang telah dipretreatment dengan konsentrasi
NaOH 1% pada suhu 60 o C selama 8 jam dimana
menghasilkan kadar lignin tertinggi dan konsentrasi
16
jam

NaOH 1% pada suhu 80 o C selama 16 jam dimana
menghasilkan kadar lignin terendah, serta bagasse
tebu tanpa pretreatment. Hasil dari analisa SEM
dapat dilihat pada gambar berikut ini :
(a) (b) (c)
Gambar 4. Foto SEM bagasse tebu : (a) tanpa pretreatment;
(b) hasil pretreatment dengan konsentrasi NaOH 1% pada
suhu 60 o C selama 8 jam; (c) hasil pretreatment dengan
konsentrasi NaOH 1% pada suhu 80 o C selama 16 jam
Pada gambar 4. (a) yaitu kondisi dimana
tidak dilakukan pretreatment menunjukkan selulosa
masih terbungkus oleh lignin dan hemiselulosa.
Sedangkan pada gambar 4. (b) merupakan bagasse
tebu yang telah di pretreatment dengan
menggunakan NaOH 1% pada suhu 60 o C selama 8
jam menunjukkan lignin dan hemiselulosa yang
membungkus selulosa sudah berkurang karena
larut dalam larutan NaOH pada saat pretreatment,
begitu juga pada gambar 4. (c) merupakan bagasse
tebu yang telah di pretreatment menggunakan
NaOH 1% pada suhu 80 o C selama 16 jam
menunjukkan semakin berkurangnya lapisan lignin
dan hemiselulosa yang membungkus selulosa.
Semakin berkurangnya lapisan lignin akan
menyebabkan semakin mudah mencapai ikatan
glikosida.
Hidrolisis bagasse tebu
Dalam penelitian ini, hidrolisis dilakukan
untuk semua sampel hasil pretreatment. Sampel
yang dihidrolisis yaitu bagasse tebu hasil
pretreatment dengan konsentrasi NaOH 1%, 2%,
dan 4% pada suhu 60 o C dan 80 o C selama 8 dan 16
jam.
Variabel yang digunakan untuk kondisi
hidrolisis adalah menggunakan suhu hidrolisis 60 o C
dengan pH 3. Variabel kondisi hidrolisis tersebut
ditetapkan berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan sebelumnya bahwa aktivitas enzim akan
optimum pada suhu tinggi dengan pH rendah
(anwar dkk., 2011), sehingga ditetapkan suhu 60 o C
dan pH 3 untuk variabel hidrolisis. Berdasarkan
analisa yang telah dilakukan, diperoleh hasil seperti
gambar 5.
Data hasil hidrolisa menunjukan
kecenderungan peningkatan konsentrasi gula yang
dihasilkan sampai jam ke 36 dan jam ke 42 setelah
itu menunjukan penurunan sedikit demi sedikit. Hal
ini berarti bahwa enzim yang dihasilkan mampu
menghidrolisis sampai jam ke 42 dan setelah itu
enzim mulai terdenaturasi sehingga tidak mampu
menghidrolisis substrat yang ada.
Gambar 5. Hasil hidrolisis pada bagasse tebu hasil
pretreatment dengan suhu hidrolisis 60 o C dan pH 3
Sedangkan penurunan gula yang
dihasilkan kemungkinan disebabkan terabsorbnya
gula yang dihasilkan kedalam partikel sellulosa dan
hemisellulosa yang tidak terhidrolisis. Pengaruh
pretreatment kimiawi menunjukan perbedaan hasil
yang signifikan.
Dari gambar grafik 5 di atas menunjukkan
hasil yang terbaik untuk hidrolisis pada bagasse
tebu hasil pretreatment adalah dengan konsentrasi
NaOH 4% pada suhu 80 o C selama 8 jam dengan
suhu hidrolisis 60 o C dan pH 3 yaitu didapatkan
sebesar 4,75 g/L. Dari hasil analisa, gula reduksi
yang dihasilkan semakin lama semakin meningkat
dengan kondisi yang stabil. Hal ini menunjukkan
bahwa suhu 60 o C dan pH 3 adalah kondisi yang
optimal digunakan dalam hidrolisis, diperkirakan
pada suhu ini aktifitas enzim menjadi semakin
meningkat.
Berdasarkan hal tersebut, dapat diambil
kesimpulan bahwa bagasse tebu dengan kadar
selulosa terbaik hasil pretreatment dengan kondisi
optimal belum tentu memberikan hasil terbaik pada
proses hidrolisis. Pretreatment akan mempermudah
akses enzim menuju selulosa, tetapi belum tentu
akan mengoptimalkan gula reduksi yang dihasilkan
dalam proses hidrolisis.
Aktivitas enzim bisa berkurang selama
berlangsungnya proses hidrolisis, sehingga akan
menghambat produksi gula reduksi. Salah satu
penyebabnya adalah adanya adsorpsi enzim
selulase oleh partikel selulosa yang tidak reversible.
Penambahan surfaktan selama proses hidrolisis
dapat memperbaiki sifat permukaan selulosa dan
meminimalkan adsorpsi selulase yang irreversible
(Errikson dkk., 2002).
Hasil hidrolisa yang tebaik dengan
menggunakan enzim murni yang berasal dari jamur
T. Reesei dibandingakan dengan enzim murni yang
berasal dari jamur A. Niger dan campuran enzim
murni yang berasal dari jamur T. Reesei dan A.
Niger dengan perbandingan 2 : 1. Maka hasil

perbandingannya dapat dilihat dalam grafik di
bawah ini :
Gambar 6. Hasil perbandingan hidrolisis pada bagasse tebu
hasil pretreatment untuk konsentrasi NaOH 4% pada suhu
80 o C selama 8 jam dengan suhu hidrolisis 60 o C dan pH 3 dan
menggunakan enzim murni yang berbeda-beda
Hidrolisis menggunakan enzim murni
yang berasal dari jamur T. Reesei menghasilkan
konsentrasi gula reduksi yang lebih tinggi
dibandingkan dengan hidrolisis menggunakan
campuran enzim murni yang berasal dari jamur T.
Reesei dan A. Niger dengan perbandingan 2 : 1 dan
diikuti dengan menggunakan enzim murni yang
berasal dari jamur A. Niger, hal tersebut
membuktikan bahwa enzim murni yang berasal dari
jamur T. Reesei lebih mampu mengkonversi
selulosa menjadi gula reduksi dibanding dengan
lainnya.
Hal ini dibuktikan dengan kandungan gula
reduksi yang didapatkan pada saat hidrolisis
menggunakan enzim murni yang berasal dari jamur
T. Reesei paling besar daripada lainnya yaitu 4,75
gram/L. Maka enzim murni yang berasal dari jamur
T. Reesei lebih cocok digunakan untuk hidrolisis
pada bagasse tebu hasil pretreatment dengan suhu
hidrolisis 60 o C dan pH 3.
V. KESIMPULAN
1. Bahan baku yang digunakan memilki
konsentrasi lignin, hemiselulosa, dan selulosa
berturut turut sebesar 22,28%; 30,59%;
44,99%.
2. Kondisi pretreatment yang menunjukkan hasil
kadar selulosa paling tinggi sebesar 74,51%
adalah konsentrasi NaOH 4%, pada suhu 80 o C,
dan selama 16 jam.
3. Hasil yang terbaik untuk hidrolisis pada
bagasse tebu hasil pretreatment adalah dengan
konsentrasi NaOH 4% pada suhu 80 o C selama
8 jam dengan suhu hidrolisis 60 o C dan pH 3
yaitu didapatkan gula reduksi sebesar 4,75 g/L.
4. Kandungan gula reduksi yang didapatkan pada
saat hidrolisis menggunakan enzym murni
yang berasal dari T. Reesei paling besar yaitu
4,75 gram/L daripada campuran enzym murni
yang berasal dari T. Reesei dan A. Niger
dengan perbandingan 2 : 1 dan enzim murni
yang berasal dari A. Niger.
DAFTAR PUSTAKA
1. Anwar, N., Widjaja, A., Winardi, S. 2011. “Study of The
Enzymatic Hydrolysis of Alkaline Pretrieted Rice Straw
Using Cellulase of Various Sources and
Compositions”.International Review of Chemical
Engineering Vol. 3.N.2. March 2011.
2. Dahot, M.U., dan M.H. Noomrio. 1996. “Microbial
Production ofCellulases by Aspergillus Fumigatus Using
Wheat Straw as A CarbonSource”.Journal of Islamic
Academy of Sciences 9:4, 119-124.
3. Fengel D. & Wegener G. 1984. Wood: Chemistry,
Ultrastructure and Reactions. De Gruvter. Berlin,
pp.217-20.
4. Gómez S.M R, Rafael A. R, Carlos S.G, Aline C. C, Filho
M. R. 2008. “Pretreatment of sugar cane bagasse with
phosphoric and sulfuric diluted acid for fermentable
sugars production by enzymatic hydrolysis”,School of
Chemical Engineering, University of Campinas,
UNICAMP: Campinas - SP – Brazil.
5. Juhasz, T., K. Kozma, Z. Szengyel, K. Reczey. 2003.
“Production of β-Glucosidase in Mixed Culture of
Aspergillus niger BKMF 1305 and Trichoderma reesei
RUT C30”, Food Technol. Biotechnol. 41 (1) 49–53.
6. Martins, L.F., D. Kolling, M. Camassola, A.J.P. Dillon,
L.P. Ramos. 2008. “Comparison of Penicillium
echinulatum and Trichoderma reesei Cellulases in
Relation to Their Activity Against Various Cellulosic
Substrates”, Bioresource Technology, 99, 1417–1424.
7. Muthuvelayudham, R. and T. Viruthagiri. 2006.
“Fermentative Production and Kinetics of Cellulase
Protein on Trichoderma reesei Using Sugarcane Bagasse
and Rice Straw”, African Journal of Biotechnology Vol.
5 (20), 16 October, pp. 1873-1881.
8. Rocha J.G., Martin C., Soares I.B.,Maior A. M. S., Baudel
H. M., Abreu A.C.. 2010. “Dilute mixed-acid
pretreatment of sugarcane bagasse for ethanol
production”. Biomass and Bioenergy 35; 663-670.
9. Yee S.danJiayang C. 2002.“ Hydrolysis of lignosellulosic
material forethanol production: a review”, Biosource
Technology 83: 1-11.