Misure di lotta eco-compatibili contro il cancro e il mal dell'inchiostro ...

34 AGRICOLTURA FITOPATOLOGIA
Misure di lotta eco-compatibili contro il cancro
e il mal dell’inchiostro del castagno
Giacomo Tamietti e Danila Valentino • Università di Torino – DI.VA.P.R.A., Settore Patologia vegetale
S
toricamente, la coltura del castagno è stata fondamentale
nell’economia delle popolazioni insediate nelle
zone collinari e montane italiane. Essa, per circostanze
di ordine socio-economico, identificabili nel progressivo
e talvolta drammatico spopolamento di dette
zone dovuto alle migliori condizioni di vita e di reddito
offerti dalle città e dalle attività industriali e commerciali
ad esse connesse, perse progressivamente
importanza; a ciò contribuì anche l’introduzione in Italia
di malattie quali il mal dell’inchiostro da Phytophthora
cambivora (Petri, 1917) e il cancro corticale da
Cryphonectria parasitica (Biraghi, 1938) e la loro rapida
diffusione in tutto l’areale del castagno. A partire
dagli anni ‘80 del secolo appena trascorso si è assistito
ad una inversione di tendenza dovuta ad un’attiva
ripresa della domanda di legname e di frutti, in particolare,
per il consumo fresco e per l’industria di trasformazione
che, abbinate ad intelligenti operazioni di
marketing e alla meccanizzazione, seppure essenziale,
delle operazioni di raccolta, hanno restituito al castagneto
una redditività altamente competitiva anche con
le colture agrarie di fondovalle. Inoltre il castagneto è
stato riconosciuto elemento paesaggistico essenziale
della zona altimetrica compresa fra i 600 e i 900 m
s.l.m., con ricadute sulle attività turistiche e ricreative.
In tale ambito va ricordata l’importanza del patrimonio
costituito da alberi secolari presenti in alcune vallate
piemontesi di cui, ad esempio, nella sola Val Pellice nel
1994 se ne contarono circa 9.000. Precedenti ricerche
condotte nei territori e con la collaborazione delle
Comunità Montane Pellice, Gesso Vermenagna e
Pesio, e Mongia Cevetta e Langa Cebana hanno permesso
di disporre di un quadro aggiornato sulla distribuzione
territoriale e sulla pericolosità delle malattie
poc’anzi menzionate. Sulla base di tali conoscenze nell’anno
2002 sono state impostate esperienze tendenti
a valutare l’efficacia di trattamenti chimici contro il mal
dell’inchiostro e il cancro utilizzando principi attivi capaci
di indurre nell’ospite risposte di resistenza; il comportamento
verso il mal dell’inchiostro di alcuni ecotipi
di castagno; la possibilità di intervenire contro il mal
dell’inchiostro mediante interventi di endoterapia; l’efficacia
nel contenimento del cancro corticale di ceppi
ipovirulenti autoctoni di Cryphonectria parasitica a
larga compatibilità vegetativa.
Materiali e metodi
Saggi in vaso
• Trattamenti in chioma
Nel 2002, piante di castagno da seme dell’età di 3 anni
mantenute in vaso sono state nebulizzate ogni 15 gg
con Phosethyl-Al alla dose 300 g/hl e mantenute in
serra; quattordici giorni dopo il primo trattamento 24
(3 gruppi di 4, trattate e non trattate) sono state inoculate
a 12-15 cm dalla base con un dischetto di una
coltura ricca di picnidi di C. parasitica di nota virulenza.
Al fine di proteggere l’inoculo dalla disidratazione,
le lesioni e l’inoculo sono stati fasciati con parfilm. Nel
2003 le piante è stato sono state trattate ogni 20 gg
con fosfito di potassio (Phyto’s) alla dose 400 g/hl, inoculate
come sopra e mantenute in campo; inoltre
altrettante sono state inoculate con un isolato di
Phytophthora cinnamomi (isolamento da castagno da
Chiusa Pesio). Nelle due prove le piante testimoni sono
state trattate con acqua. Periodicamente delle lesioni
sono stati misurati i diametri e calcolata l’area e il
grado d’azione del trattamento.
• Trattamenti per endoterapia
Fosfito di potassio è stato preparato in laboratorio
facendo reagire in H2O 1 kg di H3PO3 e 1 Kg di KOH
aggiustando il pH a 6,0-6,2 e la concentrazione a 28
g/l (Ann J.P., 2001). Tale preparato è stato somministrato
alle piante per endoterapia. Allo scopo, alla base
del fusto è stato praticato un foro del diametro di 2
mm e profondo 6-7 mm in cui è stato infisso un puntale
da 2 ml raccordato con un puntale da 5 ml avente
funzione di serbatoio, contenente la quantità necessaria
di soluzione. La dose di intervento è stata di 0,77
g di fosfito di potassio/cm di diametro del tronco. In
tale saggio P. cinnamomi è stata inoculata 12 gg
prima e 12 gg dopo il trattamento. Un ugual numero di
piante trattate solo con acqua è stato inoculato con un
dischetto di coltura del patogeno o con un dischetto di
agar non colonizzato. Complessivamente sono state
utilizzate 40 piante (4 tesi di 10 piante). I rilievi sono
stati eseguiti uno e due mesi dopo l’inoculazione rilevando
l’estensione del diametro longitudinale e trasversale
delle lesioni.

Prove di campo
• Trattamenti di endoterapia
Una prima prova è stata condotta nel 2002 in comune
di Villar Pellice, su 10 alberi da frutto affetti da mal dell’inchiostro
e da cui in precedenza era stata isolata
Phytophthora cambivora (fig. 1) . E’ stato utilizzato un
formulato all’80% di Phosethyl-Al (OPTIX) in sospensione
acquosa a 25 g/l (20 g/l di p.a.) alla dose di 5 ml
per cm di diametro del tronco all’altezza di un metro
dal suolo. Il trattamento è stato effettuato affidando
all’assorbimento naturale la sospensione introdotta in
tre fori equidistanti, del diametro di 3 mm e profondi 6-
8 cm in relazione allo spessore della corteccia, con
attrezzatura MCE (fig. 2, 3).
Un secondo saggio è stato ripetuto nel 2003 in comune
di Villar Pellice (9 piante), Scagnello (9 piante),
Robilante (6 piante). Al fine di ovviare agli inconvenienti
riscontrati nel precedente anno, dovuti all’occlusione
dei vasi provocata dai coformulanti, il fosfito è stato
apportato come fosfito di potassio sintetizzato in laboratorio
secondo le tecnica sopra riportata.
Come nelle prove condotte su giovani piante in vaso, il
sale è stato somministrato alla dose di 0,77 g di fosfito
di potassio/cm di diametro del tronco, con la stessa
tecnica seguita nel 2002. Il 24 ottobre è stato rilevato
lo stato vegetativo delle piante trattate.
• Lotta biologica al cancro del castagno
Due ceppi virulenti, ma compatibili con la totalità degli
isolati di C. parasitica reperiti in Val Pellice, sono stati
abbinati in capsule Petri con ceppi ipovirulenti reperiti
nella stessa vallata, ma caratterizzati da ridotta com-
FITOPATOLOGIA 35
Fig. 1 - Esemplari di
castagno, con evidenti
sintomi di deperimento
da mal dell'inchiostro,
sottoposti ad
endoterapia.
Fig. 2 - Trattamento di
endoterapia su castagno
affetto da mal
dell'inchiostro.
Agricoltura/47

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Fig. 3. Particolari del
trattamento di
endoterapia (sacche,
regolatore di flusso,
raccordo con il fusto,
cannule).
patibilità vegetativa. A partire da settori di colonie del
ceppo virulento con caratteristiche simili a quelle del
ceppo ipovirulento sono stati effettuati degli espianti
ottenendo nuove colonie di cui è stata valutata la compatibilità
vegetativa con gli isolati incompatibili con il
ceppo parentale ipovirulento, la presenza di dsRNA, la
virulenza su talee di castagno. Quattro ceppi trasformati
rispondenti per quanto possibile alle caratteristiche
desiderate (dsRNA positive, larga compatibilità
vegetativa, dotate di patogenicità sufficiente per
garantirne l’insediamento nell’ospite e di bassa virulenza)
sono stati utilizzati in prove di virulenza e di lotta
biologica verso un ceppo virulento condotte in bosco
su polloni del diametro di 8-10 cm, in località
Cognetti.In bosco sono stati utilizzati i ceppi trasformati
1, 2, 10 e 12 e il ceppo virulento cp112, come
colture su PDA ben fruttificate. Le prove di patogenicità
sono state condotte su 10 polloni, praticando nella
corteccia di ciascuno 5 fori del diametro di 7 mm,
distanziati di 40 cm. In ogni foro è stato deposto un
dichetto di colonia fungina, in modo da inoculare su un
medesimo pollone tutti i ceppi. Le prove di antagnonismo
sono state condotte sempre su 10 polloni, in cui
sono state praticate, sempre a 40 cm fra di loro, 5
serie di 7 fori, di cui sei sulla circonferenza e uno al
centro di un cerchio del diametro di 3,5 cm: nei fori
periferici è stato inoculato uno dei ceppi trasformati,
nel foro centrale il ceppo virulento; nel caso del testimone
il ceppo virulento è stato inoculato in tutti i 7 fori.
Su ogni pollone sono stati inoculati 4 ceppi antagonisti
e il solo patogeno. In alcuni casi i fori non sono stati
inoculati. In ogni caso la corteccia rimossa è stata
posta a proteggere il foro e mantenuta in sede con
parafilm. L’inoculazione è stata realizzata il 28 luglio
2002; il 7 ottobre 2002 e 24 ottobre 2003 i diametri
trasversale e longitudinale delle lesioni corticali presenti
in corrispondenza dei fori di inoculazione sono
stati misurati; le lesioni sono state assimilate a un’ellisse
di cui è stata calcolata l’area. I dati sono stati trattati
statisticamente con l’analisi della varianza ed il test
di Tukey.
Risultati
Saggi in vaso
• Trattamenti in chioma
Tre mesi dopo l’inoculazione, l’estensione delle lesioni
provocate dal ceppo virulento cp112 di C. parasitica
sul fusto delle piante di castagno testimoni è variata da
6 a 16 cm 2 circa (media 9,25); in quelle trattate con
Phosethyl-Al è variata da 0 a 8 cm 2 , ad eccezione di
una pianta su cui i cancri si estendevano per 12 cm 2 ,
con una media di 5,16 cm 2 . Il grado d’azione dei trattamenti
è stato del 44%, con una probabilità d’errore
dello 0,014 al test di Student.
Un mese circa dopo l’inoculazione, le piante trattate
con Phyto’s K ed inoculate con il ceppo cp112 di C.
parasitica, manifestavano lesioni aventi una superficie
di 165 mm 2 contro 228 mm 2 delle piante non trattate,
senza differenza significativa tra le medie. Dopo due
mesi i cancri misuravano 238 e 584 mm 2 nelle piante
trattate e non trattate rispettivamente, con un grado di
protezione del 59% circa e una probabilità d’errore
dello 0,2% all’analisi statistica (Fig. 4).
A 30 gg dall’inoculazione, le lesioni provocate da P.
cinnamomi misuravano 202.81 mm nelle piante non
trattate e 26,16 mm in quelle trattate con Phyto’s K a
400 ml/hl. Al 3 settembre il 71,43% delle piante testimoni
erano morte, mentre quelle superstiti presentavano
necrosi dell’estensione di 261,7 mm. Alla stessa
data le piante trattate manifestavano lesioni invariate e
provviste di un visibile callo di cicatrizzazione.
Trattamenti per endoterapia
Attività preventiva. Il trattamento è stato effettuato il
18/6/2003 e l’assorbimento del fitofarmaco è stato
regolare da parte di tutte le piante, ad eccezione di
una. Le stesse sono state inoculate il 27/6 e i sintomi
rilevati il 31/7 ed il 3/9. Al primo rilievo le piante trattate
manifestavano inizi di cicatrizzazione della ferita
praticata con l’inoculazione; la cicatrizzazione è risultata
completa in occasione del secondo rilievo. Una
pianta soltanto su 10 presentava una necrosi della
dimensione di 223 x 25 mm. in occasione del primo e

di 310 x 25 mm al secondo rilievo. La totalità delle
piante non trattate ha invece manifestato sintomi molto
estesi (vds paragrafo successivo).
Attività curativa. Il trattamento curativo è stato praticato
il 10/7/2003, 14 gg dopo l’inoculazione (27/6) su
piante che presentavano lesioni della dimensione
media di 49,1 x 13,7 mm (98,6 mm 2 ).
L’assorbimento della soluzione di fosfito di potassio è
stata regolare nelle piante che presentavano lesioni
aventi diametro trasversale ridotto e difficoltosa in
quelle con lesioni molto sviluppate trasversalmente. In
un caso la malattia aveva già cinghiato il fusto ed in
tale occasione l’assorbimento è risultato addirittura
incompleto. Al 31/7 P. cinnamomi aveva provocato
lesioni misuranti 106,6 x 18,8 mm (196,9 mm 2 ) nelle
piante trattate per endoterapia e 203,3 x 20,7 mm
(352 mm 2 ) in quelle non trattate, con un incremento del
217% in lunghezza e 200% in superficie e del 414% in
lunghezza e 357% in superficie nelle piante trattate e
non trattate rispettivamente.
Al 3/9 il 30% delle piante trattate erano morte, mentre
le rimanenti presentavano lesioni invariate (113,2 x
18,3 mm, pari ad una superficie media di 206,6 mm 2 );
nel caso delle piante non trattate la mortalità aveva
raggiunto il 71,43% degli individui, mentre i superstiti
manifestavano lesioni variabili da 180 a 450 mm di lunghezza.
All’analisi statistica la riduzione della colonizzazione
del fusto è risultata altamente significativa
(P=0,04%) (fig. 5).
Prove di campo
• Trattamenti di endoterapia
A circa 4 mesi dal trattamento di endoterapia ne è
stato rilevato l’effetto mediante il conteggio delle piante
morte ed una valutazione comparativa del vigore
vegetativo espresso dalle piante superstiti. Va premesso
che un numero rilevante degli individui trattati si trovava
in condizione di evidente deperimento, manifestazione
di attacchi pesanti e avanzati di P. cambivora,
tant’è che l’assorbimento del fitofarmaco in più casi è
avvenuto con difficoltà a causa della perdita di funzionalità
del legno. Delle 9 piante trattate in comune di
Scagnello 3 sono morte, 1 ha manifestato aggravamento
dei sintomi, 4 sintomi stazionari ed 1 remissione
parziale dei sintomi resa evidente dall’emissione di
foglie aventi lamina espansa e verde. Delle 6 piante
trattate in comune di Robilante 3 sono morte, mentre
le rimanenti hanno manifestato un arresto nella progressione
dei sintomi. Delle 9 piante trattate in comune
di Villar Pellice 2 sono morte, 3 hanno manifestato
sintomi stazionari, 4 miglioramento del vigore vegetativo,
più evidente in quelle già trattate nel 2002.
• Lotta biologica al cancro del castagno
Quindici mesi dopo l’inoculazione, l’estensione delle
lesioni provocate dal ceppo virulento cp112 di C. parasitica
su polloni di castagno è variata da 45,15 a
62,79 cm 2 circa (media 54,83); quelle provocate dal
ceppo ipovirulento 1 da 3,45 a 11,78 cm 2 (media
7,35); dal ceppo ipovirulento 2 da 9,11 a 51,83 cm 2
(media 26,42); dal ceppo ipovirulento 12 da 4,24 a
8,64 cm 2 (media 6,68); dal ceppo ipovirulento 12 da
6,28 a 11,23 cm 2 (media 7,68). Nel giro di un anno,
l’estensione dei cancri è aumentata di 12,8 volte per il
ceppo virulento cp112 e di 2,36, 6,14, 1,97 e 1,81
volte per i ceppi 1, 2, 12 e 10 rispettivamente.
All’analisi statistica sono emerse differenze significati-
FITOPATOLOGIA 37
Fig. 4. Effetto di trattamenti fogliari con Phyto’s (400 ml/hl) sullo sviluppo di lesioni (mm 2 )
causate da C. parasitica e P. cinnamomi a 30 e a 60 dopo l’inoculazione (P=0,2% per
C. parasitica al 2° rilievo; P=0,04% per P. cinnamomi per entrambi i rilievi)
Fig. 5. Attività preventiva e curativa di trattamenti endoterapici con fosfito di K (0,77
g/cm di Ø del tronco) sullo sviluppo di lesioni da P. cinnamomi dopo 1 e 2 mesi circa
dall’inoculazione. Nel caso del trattamento preventivo solo 1 pianta ha manifestato sintomi.
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Tabella 1 - Sviluppo assunto dal cancro su polloni di castagno 15 mesi dopo l'inoculazione con un ceppo
virulento associato o meno a ceppi ipovirulenti di C. parasitica in funzione della variabilità del
parassita e della ceppaia dell'ospite.
C.parasitica (1) Area cancri (cm2) C.parasitica (2) Area cancri (cm2) Ceppaia Area cancri (cm2)
cp112 54,83 A cp112 113,44 A * A **
1 7,35 B cp112 + 1 32,70 B B 70,07 n.s.
2 26,42 B cp112 + 2 32,04 B C 36,41n.s.
10 7,67 B cp112 + 10 33,96 B D 52,05 n.s
12 6.67 B cp112 +12 33,39 B
–– 0.00 0,0
* Medie seguite da lettere uguali non si diversificano fra di loro con una probabilità d'errore dello 0,025%.
** Ceppaia rappresentata da un solo pollone morto nel corso dell'anno in seguito al cancro provocato dal ceppo cp112 situato in
posizione prossimale che ha cinghiato il pollone. L'imbrunimento della corteccia ha impedito il rilievo sull'estensione dei cancri
protetti dai ceppi ipovirulenti.
(1) Inoculazione eseguita con un solo dischetto da 7 mm di Ø
(2) Inoculazione eseguita con 7 dischetti da 7 mm di Ø, il centrale appartenente sempre a cp112
ve tra il cp112 e i ceppi ipovirulenti, ma non entro i
ceppi ipovirulenti (P=5%).
Nella prova di lotta biologica i cancri determinati dalla
presenza del solo ceppo virulento cp112 hanno assunto
uno sviluppo netto di 113,44 cm 2 ; quelli determinati
dalla presenza del ceppo virulento cp112 e di uno
dei ceppi 1, 2, 10 e 12 antagonisti assunto uno sviluppo
variabile da 32,03 a 33,96 cm 2 con differenze
significative (P= 0,025%) all’analisi statistica. Il grado
di protezione da essi fornito è variato dal 70 al 71%
circa. Indipendentemente dai ceppi inoculati, la dimensione
dei cancri è variata in base alla ceppaia, da
36,41 a 70,07 cm 2 , senza differenze significative all’analisi
statistica (tab. 1).
Conclusioni
Il fosfito di potassio somministrato come prodotto commerciale
Phyto’s K o come soluzione preparata in laboratorio
ha contenuto in misura altamente significativa gli
attacchi di mal dell’inchiostro. La sua efficacia è risultata
elevata quando impiegato in trattamenti fogliari preventivi,
dove ha evidenziato un grado di protezione
dell’87% già a un mese dall’inoculazione, bloccando
successivamente la colonizzazione del fusto da parte
del patogeno. Impiegato in trattamenti preventivi endoterapici
ha ridotto del 90% l’incidenza delle infezioni di
P. cinnamomi. La sua attività è risultata ancora molto
elevata anche quando usato in trattamenti endoterapici
curativi, risultando in grado di arrestare la colonizzazione
delle piante da parte di P. cinnamomi presente in
lesioni ormai estese. Tali risultati, così evidenti in prove
condotte su giovani piante, non sono stati del tutto confermati
dalle prove di cura endoterapica in bosco, dove
una buona parte delle piante trattate è andata incontro
a morte. Va però sottolineato che le piante secolari trattate
manifestavano sintomi di elevata sofferenza, indice
di attacchi pregressi molto gravi. È comunque interessante
notare che parte dei soggetti trattati in bosco
hanno manifestato un arresto nella progressione dei sintomi
o addirittura un ringiovanimento della chioma, attri-
buibile all’attività del farmaco. Nessuna fra le piante attigue
non trattate ha manifestato una seppur minima
remissione dei sintomi. In ogni caso i preparati commerciali
di Phosethyl-Al si sono dimostrati inadatti alla
somministrazione per endoterapia, in quanto i coformulanti
hanno manifestato effetti occlusivi sui vasi con
interruzione dell’assorbimento.
I sali dell’acido fosforoso, Phosethyl-Al e Phyto’s K,
impiegati in trattamenti fogliari preventivi, hanno
mostrato un buona attività anche contro il cancro, con
un grado di azione del 44% e 59% rispettivamente.
Trattamenti fogliari con Phosethyl-Al effettuati a titolo
dimostrativo su un impianto di castagno da frutto in
Comune di Peveragno non hanno purtroppo fornito
buoni risultati (dati non riportati).
Dopo 15 mesi dall’inoculazione i cancri prodotti da
ceppi ipovirulenti e virulenti di C. parasitica si sono nettamente
differenziati: in presenza di soli ceppi ipovirulenti
o in compresenza di ceppi ipovirulenti e virulenti i
cancri hanno presentato margini cicatriziali evidenti e
le loro dimensioni sono risultate normalmente contenute,
pari a circa il doppio di quelle dello scorso anno; in
presenza del solo ceppo virulento i margini dei cancri
sono risultati depressi, le lesioni fruttificate e le dimensioni
variabili da 4 a 12 volte quelle rilevate tre mesi
dopo l’inoculazione. Alla luce dei risultati ottenuti e dei
tempi biologici richiesti, la cura dei cancri attivi
mediante l’inoculazione degli stessi con ceppi ipovirulenti
è una pratica utilizzabile solo su branche o fusti di
diametro relativamente elevato in castagneto da frutto
e finalizzata non solo alla cura dei cancri trattati, ma
anche a promuovere la futura naturale la diffusione nel
castagneto dei ceppi ipovirulenti.
Gli Autori ringraziano la Regione Piemonte
per il contributo economico e le Comunità
Montane Valli Mongia, Cevetta e Langa Cubana,
Valli Gesso, Vermenagna e Pesio e Val Pellice
per la fattiva collaborazione.