Protocollo diagnosi Ceratocystis platani.pdf - Strateco
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<strong>Protocollo</strong> <strong>diagnosi</strong> <strong>Ceratocystis</strong> <strong>platani</strong> - Progetto ARNADIA<br />
Premessa<br />
Di seguito sono descritti due protocolli diagnostici che sono il prodotto dell’attività effettuata<br />
nell’ambito del Progetto Finalizzato “ARNADIA - Armonizzazione della <strong>diagnosi</strong> e valutazione del<br />
rischio di patogeni da quarantena e nocivi ai vegetali e ai prodotti vegetali - Definizione di protocolli<br />
di <strong>diagnosi</strong> di funghi patogeni” finanziato dal Ministero per le Politiche Agricole, Alimentari e<br />
Forestali.<br />
I protocolli diagnostici forniscono le linee guida per la <strong>diagnosi</strong> e l’identificazione molecolare<br />
di C. <strong>platani</strong> direttamente da matrice infetta e da effettuarsi nei laboratori presenti sul territorio<br />
italiano preposti alla <strong>diagnosi</strong> degli organismi da quarantena. L’uso di tali protocolli diagnostici è<br />
alla base di un’efficiente applicazione delle misure fitosanitarie, soprattutto per la salvaguardia di<br />
zone indenni dal cancro colorato.<br />
I protocolli diagnostici sono stati sviluppati ex novo non essendoci pre-esistenti metodiche<br />
molecolari per il rilevamento di C. <strong>platani</strong> da legno di Platanus.<br />
Delle metodologie descritte nel protocollo è stata caratterizzata definitivamente e/o<br />
preliminarmente: efficienza del processo di amplificazione, robustezza (efficienza del processo di<br />
amplificazione su matrice ambientale), sensibilità analitica e diagnostica, specificità e sensibilità<br />
diagnostica, selettività.<br />
Per la definizione di tali parametri le due metodologie di <strong>diagnosi</strong> sono state sviluppate e<br />
validate con reagenti e strumentazione dettagliatamente riportati. Ciò non comporta l’esclusione<br />
dell’uso di reagenti e strumentazioni alternative per meglio avvicinarsi agli standard di ogni singolo<br />
laboratorio, purché ciò venga adeguatamente validato.<br />
Lo sviluppo delle metodiche è riportato in forma di lavoro scientifico nella seguente<br />
pubblicazione:<br />
Pilotti M, Lumia V, Di Lernia G, Brunetti A (2012) Development of Real-Time PCR for<br />
in wood-detection of <strong>Ceratocystis</strong> <strong>platani</strong>, the agent of canker stain of Platanus spp.<br />
European Journal of Plant Pathology, 134:61–79<br />
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