Prof. Oliviero E. Varnier - Sezione di Microbiologia
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<strong>Prof</strong>. <strong>Oliviero</strong> E. <strong>Varnier</strong><br />
1
CAUSE <strong>di</strong> MORTE nei TRAPIANTATI <strong>di</strong> RENE<br />
OSPEDALIZZAZIONE DA INFEZIONI RIATTIVATE DOPO LA<br />
PROFILASSI NEI TRAPIANTI IN PEDIATRIA<br />
Malattie Car<strong>di</strong>ovascolari<br />
40%<br />
Tumori<br />
9%<br />
35<br />
30<br />
25<br />
20<br />
15<br />
10<br />
Infezioni<br />
24%<br />
Altre<br />
27%<br />
5<br />
0<br />
6-24 mesi post-trapianto<br />
1987 1990 1993 1996 1999<br />
anno<br />
United States Renal Data System 1 ST Kidney Transplants, 1994-2000 (N=67,874) 5<br />
6<br />
2
LA REGOLAZIONE IMMUNE E’ COMPLESSA<br />
Il TEST CYLEX IMMUKNOW per l’IMMUNITA’ CELLULO MEDIATA<br />
Il test fCylex ImmuKnow:<br />
fornisce una misurazione oggettiva della funzione del sistema immune<br />
del paziente<br />
fornisce una guida per bilanciare l’immunosoppressione<br />
fa evitare il rigetto dell’organo trapiantato<br />
fa evitare la riattivazione <strong>di</strong> infezioni virali<br />
9<br />
10<br />
PlATTAFORMA<br />
IMMUKNOW MISURA LA FUNZIONE DEI LINFOCITI T CD4+<br />
Sangue intero<br />
Incubare per<br />
15-18 h<br />
lavaggio<br />
Attivazione<br />
delle<br />
Cellule<br />
Separazione<br />
delle<br />
Cellule<br />
rilevamento<br />
Quantificazione <strong>di</strong><br />
marker metabolici<br />
(ATP)<br />
11<br />
Stimolazione con<br />
PHA dei linfociti<br />
ATP<br />
ATP ATP<br />
Lisi delle Cellule e<br />
Rilascio <strong>di</strong> ATP<br />
Reagenti per<br />
il rilevamento<br />
<strong>di</strong> ATP<br />
Separazione Magnetica<br />
delle cellule CD4<br />
Luminometer<br />
Misurazione dell’intensità<br />
della luce<br />
12<br />
“In Vitro CMI: Rapid Assay for Measuring Cell-Me<strong>di</strong>ated Immunity”, CRC Press, 2002<br />
3
LA RISPOSTA LINFOCITARIA<br />
Immunosuppressive Agents<br />
Il test<br />
ImmuKnow®<br />
I test per le<br />
Citochine<br />
Linfoproliferazione<br />
Drug Class Generic Name Brand Name Mechanism of Action<br />
Calcineurin Inhibitors Cyclosporin A, Tacrolimus Neoral®, Prograf® Inhibit cytokine transcription of T-cells<br />
TOR Inhibitors Sirolimus, Everolimus Rapamune®, Certican® Inhibits growth factor signal transduction of<br />
ATP<br />
1/2 - 6 h<br />
Antimetabolites<br />
Azathioprine,<br />
cyclophosphamide,<br />
mycophenolate mofetil,<br />
leflunomide<br />
Imuran®, Cytoxan®,<br />
Cellcept®, Rheumatrex®,<br />
Arava®<br />
T-cells<br />
Inhibit Guanine nucleotide de novo<br />
synthesis affecting T-cells<br />
Corticosteroids<br />
Prednisone, methylpre<strong>di</strong>nsolone,<br />
dexamethasone<br />
Oraone®, Deltasone®,<br />
Solumedrol®, A-methaPred®,<br />
Medrol®, Decadron®<br />
Inhibits antigen presentation, cytokine<br />
production and proliferation of T-cells<br />
Stimolazione<br />
Linfocitaria<br />
5 - 10 giorni<br />
6 - 24 h<br />
Espansione clonale<br />
Cluster dei recettori superficiali Proliferazione<br />
Sintesi <strong>di</strong> RNA<br />
Produzione & rilascio delle citochine<br />
Replicazione del DNA<br />
Polyclonal and<br />
Monoclonal Antibo<strong>di</strong>es<br />
Anti-mature T-cells, antithymocytes,<br />
IL2 receptor<br />
antagonists, daclizumab,<br />
basiliximab<br />
OKT3, Thymoglobulin®,<br />
Xenapax®, Simulect®<br />
Produce T-cell depletion, modulation of<br />
cell surface receptors, induction of anergy<br />
and apoptosis of activated T-cells<br />
J. Britz et. al.,“In Vitro CMI: Rapid Assay for Measuring Cell-Me<strong>di</strong>ated Immunity”, CRC Press, 2002<br />
13<br />
14<br />
Funzione Immune verso conta <strong>di</strong> CD4<br />
I Livelli dei Farmaci Immunosoppressori NON sempre<br />
correlano con la Funzione Immune<br />
Immune Response (ATP ng/mL)<br />
1000<br />
900<br />
800<br />
700<br />
600<br />
500<br />
400<br />
300<br />
200<br />
100<br />
0<br />
0 250 500 750 1000 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000<br />
CD4 Count (Cells/uL)<br />
Strong<br />
Moderate<br />
Low<br />
Immune Response<br />
Immune Response<br />
(ATP ng/mL)<br />
(ATP ng/mL)<br />
1000<br />
800<br />
600<br />
400<br />
200<br />
0<br />
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500<br />
Cyclosporine Level (ng/mL)<br />
700<br />
600<br />
500<br />
400<br />
300<br />
200<br />
100<br />
0<br />
0 5 10 15 20 25<br />
Strong<br />
Moderate<br />
Low<br />
Strong<br />
Moderate<br />
Low<br />
Il numero <strong>di</strong> CD4 non correla accuratmente con la funzione immune.<br />
15<br />
Loscatter plot <strong>di</strong>mostra una minima correlazione tra numero <strong>di</strong> CD4 e la risposta immune<br />
Tacrolimus Level (ng/mL)<br />
16<br />
4
Il test Cylex ImmuKnowmisura la CMI<br />
CYLEX ImmuKnow CRONOLOGIA<br />
.<br />
Identifica i pazienti a rischio immunologico<br />
Consente una gestion attiva verso un Sistema<br />
Immunologicamente stabile<br />
In<strong>di</strong>vidualizza il protocollo immunosoppressivo com<br />
maggiore precisione<br />
Monitorizza la risposta del paziente ai cambiamenti<br />
terapeutici<br />
1998: US Patent Issued for Immune Function Assay<br />
2002: FDA Clearance “ImmuKnow Detection of CMI in<br />
Immunosuppressed Populations”<br />
2003: Trapianto <strong>di</strong> Organo Solido<br />
2006: Trapianto <strong>di</strong> cellule Staminali Ematopoietiche<br />
Malattie Autoimmuni<br />
Sepsi<br />
Ottimizza la terapia verso le dosi minori<br />
17<br />
18<br />
IMMUKNOW STRATIFICATION OF IMMUNE RESPONSE<br />
Research Energy for ImmuKnow<br />
Immune Response (ATP ng/mL)<br />
800<br />
600<br />
400<br />
200<br />
0<br />
P < 0.0001<br />
415<br />
258<br />
Strong<br />
Moderate<br />
Low<br />
Healthy Adults Stable Transplant Recipients<br />
(n=155)<br />
(n=127)<br />
Year<br />
N=Peer-<br />
Reviewed<br />
Articles<br />
2008 3<br />
2 Forthcoming<br />
Organ Focus<br />
3 Renal<br />
1 Liver, pen<strong>di</strong>ng<br />
1 Lung, pen<strong>di</strong>ng<br />
2007 11 4 Renal<br />
3 Review<br />
2006 9 3 Review<br />
3 Renal<br />
3 Lab/Immunology<br />
1 Lung<br />
1 Multiple<br />
1 Liver<br />
1 Pancreas<br />
Number of Past & Forecasted* Peer-Review Articles<br />
Kowalski R, Post D, Schneider MC, Britz JA, Thomas J, Deierhoi M, Lobashevsky A, Redfield R, Schweitzer E, Here<strong>di</strong>a A, Reardon E, Davis C, Bentlejewski C,<br />
Fung J, Shapiro R, Zeevi A. IMMUNE CELL FUNCTION TESTING: AN ADJUNCT TO THERAPEUTIC DRUG MONITORING IN TRANSPLANT PATIENT<br />
MANAGEMENT Clinical Transplantation, April 2003: 17:77-88.<br />
19<br />
20<br />
20<br />
5
SUMMARY DESCRIPTIVE STATISTICS<br />
Cylex ImmuKnow: RISPOSTA CELLULO MEDIATA<br />
Of N=23 Research Stu<strong>di</strong>es:<br />
Percent Kidney 52.2%<br />
Percent Liver 30.4%<br />
Percent Thoracic 13.0%<br />
Percent Islet 4.3%<br />
all transplants in 2006 and in 2007<br />
Mean Sample Size<br />
Average Duration,<br />
Observation Period<br />
83.17 3.04 Years<br />
Total Number of Patients Stu<strong>di</strong>ed >1,900<br />
21<br />
22<br />
LA STABILITA’ IMMUNOLOGICA E’ ORGANO-INDEPENDENTE<br />
L’IMMUNITA’ CELLULO MEDIATA CORRELA con lo STATO CLINICO<br />
1000<br />
Immune Response (ATP ng/mL)<br />
600<br />
400<br />
200<br />
0<br />
275<br />
258 275<br />
236<br />
228<br />
185<br />
Trials Kidney Liver Heart Lung* Small Bowel<br />
(n=127) (n=162) (n=107) (n=86) (n=128) (n=22)<br />
Strong<br />
Moderate<br />
Low<br />
Immune Response (ATP ng/mL)<br />
800<br />
600<br />
400<br />
200<br />
0<br />
P < 0.001<br />
P < 0.001<br />
488<br />
415<br />
249<br />
111<br />
Healthy Rejection Stable Infection<br />
(n=155) (n=39) (n=504) (n=66)<br />
Strong<br />
Moderate<br />
Low<br />
*Note: Lung data not in paper<br />
Kowalski R, Post D, Mannon R, Sebastian A, Wright H, Sigle G, Bur<strong>di</strong>ck J, Abu Elmagd K, Zeevi A, Lopez-Cepero M, Daller J, Gritsch, H, Reed E,<br />
Jonsson J, Hawkins D, Britz J. ASSESSING RELATIVE RISKS OF INFECTION AND REJECTION: A META-ANALYSIS USING AN IMMUNE FUNCTION<br />
ASSAY Transplantation, September 2006: 82: 663-668.<br />
23<br />
Kowalski R, Post D, Mannon R, Sebastian A, Wright H, Sigle G, Bur<strong>di</strong>ck J, Abu Elmagd K, Zeevi A, Lopez-Cepero M, Daller J, Gritsch, H, Reed E, Jonsson J,<br />
Hawkins D, Britz J. ASSESSING RELATIVE RISKS OF INFECTION AND REJECTION: A META-ANALYSIS USING AN IMMUNE FUNCTION ASSAY Transplantation,<br />
September 2006: 82: 663-668.<br />
24<br />
6
LA VIREMIA BK CORRELA CON UNA BASSA CMI<br />
ANALISI DEI RISULTATI<br />
Immune Response (ATP ng/mL)<br />
600<br />
400<br />
200<br />
259<br />
p
IMPATTO CLINICO<br />
• Riduzione significativa delle biopsie<br />
• Riduzione significativa degli eventi avversi<br />
• Riduzione dei farmaci Immunosoppressivi & degli Antibiotici<br />
• Diminuzione della durata dei ricoveri<br />
• Riduzione delle visite ambulatorioli <strong>di</strong> follow-ups<br />
29<br />
8
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