DoloÄanje encimske aktivnosti v kliniÄne namene
DoloÄanje encimske aktivnosti v kliniÄne namene
DoloÄanje encimske aktivnosti v kliniÄne namene
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Določanje <strong>encimske</strong> <strong>aktivnosti</strong> v klinične <br />
<strong>namene</strong> <br />
• encim prisoten v serumu, urinu ali drugi lahko <br />
dostopni telesni tekočini <br />
• enostavno določanje encima, po možnosti <br />
avtomatizacija <br />
• signi;ikantne razlike v encimski <strong>aktivnosti</strong> med <br />
zdravim in obolelim stanjem <br />
• stabilnost encima
Bolezni jeter <br />
• aspartat-‐aminotransferaza (AST)* <br />
• alanin-‐aminotransferaza (ALT)* <br />
• alkalna fosfataza <br />
• γ-‐glutamil transferaza (GGT)* <br />
• laktat-‐dehidrogenaza <br />
• izocitrat-‐dehidrogenaza <br />
• glutation-‐transferaza
Aspartat-‐aminotransferaza (AST) v serumu <br />
SGOT serumska glutamat: oksalacetat transaminaza <br />
Asp + 2-oksoglutarat<br />
oksalacetat + NADH + H<br />
aspartat aminotransferaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯<br />
oksalacetat + glutamat<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯⎯<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ malat + NAD<br />
+ malat dehidrogenaza<br />
+<br />
Alanin-‐aminotransferaza (ALT) v serumu <br />
SPGT serumska glutamat: piruvat transaminaza <br />
Ala + 2-oksoglutarat<br />
piruvat + NADH + H<br />
alanin aminotransferaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯ ⎯<br />
piruvat + glutamat<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯⎯<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ laktat + NAD<br />
+ laktat dehidrogenaza<br />
+
• aspartat-‐aminotransferaza (AST) <br />
• alanin-‐aminotransferaza (ALT) <br />
• alkalna fosfataza (4-‐nitrofenil fosfat) <br />
• γ-‐glutamil transferaza (GGT) (γ-‐glutamil nitroanilid) <br />
Bolezni jeter: <br />
• virusni ali toksični hepatitis <br />
• ciroza <br />
• primarni ali sekundarni jetrni tumor <br />
• obstrukcija žolčnih kanalov zaradi žolčnih kamnov ali <br />
tumorja <br />
Stanja so lahko akutna ali kronična
aktivnost alkalne-‐fosfataze <br />
v serumu (pri zlatenici) <br />
5 <br />
4 <br />
popolna obstrukcija <br />
3 <br />
2 <br />
delna obstrukcija <br />
1 <br />
0 <br />
0 1 2 3 4 5 6 7 <br />
dnevi
Bolezni srca <br />
• kreatin kinaza <br />
• aspartat-‐aminotransferaza <br />
• laktat-‐dehidrogenaza
Aktivnost encimov po miokardnem infarktu <br />
aktivnost <br />
10 <br />
8 <br />
6 <br />
4 <br />
2 <br />
0 <br />
kreatin-‐kinaza <br />
aspartat-‐aminotransferaza <br />
laktat-‐dehidrogenaza <br />
0 20 40 60 80 100 120 140 <br />
skeletne mišice: 99% MM 1% MB <br />
srčna mišica: 80-‐85% MM 15-‐20% MB <br />
možgani: 100% BB <br />
serum: 94-‐98 % MM 2-‐4 % MB <br />
čas po bolečini v prsih (h)
Druge bolezni <br />
• α-‐amilaza (pankreatitis, mumps) <br />
• kreatin kinaza in fruktoza-‐bifosfat-‐aldolaza <br />
(mišična obolenja) <br />
• alkalna-‐fosfataza (bolezni kosti) <br />
• kisla-‐fosfataza (prostata)
Encimska de;icienca <br />
prirojena napaka pomankanje encima pogostnost <br />
alkaptonurija 1,2-‐dioksigenaza 10 5 -‐10 6 <br />
feniketonurija fenilalanin 4-‐monooksigenaza 10 4 -‐2x10 4 <br />
galaktozemija galaktoza 1-‐fosfat uridililtransferaza 3,5x10 4 -‐6x10 4 <br />
bolezen shranjevanja glikogena Ia glukoza 6-‐fosfataza 10 5 <br />
bolezen shranjevanja glikogena V glikogen-‐fosforilaza 10 6 <br />
pentozurija xiluloza-‐reduktaza 2500 <br />
fruktozurija fruktokinaza 1,3x10 5 <br />
Gaucherjeva bolezen glukocerebrozidaza 6x10 4 -‐3,6x10 5 <br />
cistična ;ibroza regulator transmemb. prevodnosti 2000-‐3000 <br />
• fenilketonurija <br />
• galaktozemija
fenilalanin <br />
feniketonurija <br />
CH 2 CHCOOH<br />
CH<br />
CH 2 CHCOOH<br />
2 CHCOOH<br />
CH 2 CHCOOH<br />
NH 2<br />
NH<br />
NH 2 2<br />
HO<br />
NH 2<br />
HO<br />
fenilalanin <br />
4-‐monooksigenaza <br />
CH 2 CHCOOH<br />
CH<br />
CH 2 CHCOOH<br />
2 CHCOOH<br />
CH 2 CHCOOH<br />
NH 2<br />
NH 2<br />
HO<br />
NH 2<br />
HO NH 2<br />
tirozin <br />
CH 2 CCOOH<br />
CH 2 CCOOH<br />
O<br />
O<br />
CH<br />
CH 2 CCOOH<br />
2 CCOOH<br />
O<br />
O HO<br />
HO<br />
CH 2 CCOOH<br />
CH 2 CCOOH<br />
O<br />
HO<br />
HO<br />
O<br />
CH<br />
CH 2 CCOOH<br />
2 CCOOH<br />
O<br />
O<br />
hidroksifenilpiruvat <br />
fenilpiruvat <br />
OH<br />
OH<br />
OH<br />
OH<br />
CH 2 COOH<br />
CH 2 COOH<br />
CH<br />
CH 2 COOH<br />
2 COOH<br />
OH<br />
OH<br />
OH<br />
OH<br />
fumarat <br />
+ <br />
acetoacetat <br />
O<br />
O<br />
COO -<br />
COO<br />
COO - -<br />
COO -<br />
O<br />
O<br />
O<br />
C<br />
CH<br />
O<br />
2 OCH 2 -COOCH - C<br />
C<br />
C O CH 2 CH 2 -COO -<br />
2 CH 2 -COO -<br />
CH 2 CH 2 -COO -<br />
maleilacetoacetat
D-‐galaktoza + ATP <br />
galaktokinaza <br />
D-‐galaktoza 1-‐fosfat + ADP <br />
UTP <br />
galaktoza-‐1-‐fosfat-‐uridiltransferaza* <br />
pirofosfat <br />
UDP-‐D-‐galaktoza <br />
UDP galaktoza 4-‐epimeraza <br />
UDP-‐D-‐glukoza <br />
pirofosfat <br />
glikogen-‐sintaza <br />
UDP <br />
glikogen <br />
glukoza-‐1-‐fosfat-‐uridiltransferaza <br />
D-‐glukoza 1-‐fosfat <br />
UTP
Encimski inhibitorji <br />
H 3 C<br />
HO<br />
O<br />
C<br />
O -<br />
OH<br />
O<br />
• Hiperholesteromija <br />
hidroksi metil-‐glutaril CoA-‐reduktaze <br />
– mevinolin <br />
– compactin <br />
– monacol K <br />
H 3 C<br />
HO<br />
C<br />
OH<br />
O<br />
O -<br />
O<br />
O<br />
C<br />
HO<br />
H<br />
C<br />
O<br />
O<br />
O<br />
O<br />
C<br />
O<br />
C<br />
CH 3<br />
CH 3<br />
R<br />
• Giht/putika <br />
ksantin-‐oksidaza <br />
HO<br />
H<br />
mevinolin compactin monacol K <br />
O<br />
C<br />
R=H R=CH 3 <br />
– allopurinol (ksantin → topen aloksantin) <br />
O<br />
O<br />
O<br />
C<br />
R<br />
H 3 C<br />
HO<br />
O<br />
SCoA<br />
H 3 C<br />
HO<br />
O<br />
SCoA<br />
hipoksantin ksantin urna kislina
Encimi pri določevanju konc. metabolitov <br />
• krvni sladkor <br />
– heksokinaza <br />
– glukoza oksidaza <br />
– glukoza dehidrogenaza <br />
heksokinaza <br />
heksokinaza<br />
⎯⎯⎯⎯→<br />
glukoza + ATP ←⎯⎯⎯⎯ glukoza 6-P+ADP<br />
glukoza 6-P + NADP<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯⎯ ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ ⎯ D-glukono-δ-lakton 6-P+NADPH+H<br />
+ glukoza 6-P dehidrogenaza<br />
+<br />
glukoza oksidaza <br />
glukoza + H O + O<br />
glukoza oksidaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
2 2<br />
glukonska kislina + H2O<br />
2<br />
peroksidaza<br />
⎯⎯⎯⎯→<br />
2 2 red<br />
H2O + barvilooksid<br />
H O + barvilo<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯<br />
←⎯⎯⎯⎯<br />
glukoza dehidrogenaza <br />
glukoza + NAD<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯ ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ ⎯ D-glukono-δ-lakton +NADH+H<br />
+ glukoza-dehidrogenaza<br />
+
• urna kislina <br />
urna kislina + H PW O<br />
urna kislina + 2H O + O<br />
→ alantoin + CO + tungsten modro<br />
3 12 40 2<br />
⎯⎯⎯⎯→ alantoin + CO + H O<br />
uratoksidaza<br />
2 2 2 2 2<br />
• urea (ureaza) <br />
CO(NH ) ⎯⎯⎯→ NH + CO(NH )OH<br />
ureaza<br />
2 2 3 2<br />
CO(NH )OH ⎯⎯⎯→ NH + H CO<br />
ureaza<br />
2 3 2 3
• holesterol, holesterol estri, trigliceridi <br />
ester holesterola + H O<br />
2<br />
←⎯⎯⎯⎯ ⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ ⎯<br />
holesterol esteraza -<br />
holesterol + RCOO<br />
2 2<br />
holesterol oksidaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
2 2 2<br />
holesterol + O ←⎯⎯⎯⎯ ⎯ 4-holesten-3-on + H O<br />
2H O + 4-aminofenazin<br />
hrenova peroksidaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯⎯ kinon-imin barvilo + 4H2O<br />
trigliceridi + 3H O<br />
glicerol + ATP<br />
ADP + PEP<br />
2<br />
lipaza<br />
⎯⎯⎯→<br />
glicerol kinaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
piruvat kinaza<br />
⎯⎯⎯⎯⎯→<br />
piruvat + NADH + H<br />
←⎯ ⎯<br />
←⎯⎯⎯ ⎯<br />
←⎯⎯⎯ ⎯<br />
+<br />
glicerol + maščobne kisline<br />
glicerol-3-fosfat + ADP<br />
piruvat + ATP<br />
←⎯⎯⎯⎯⎯⎯<br />
⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ laktat + NAD<br />
laktat dehidrogenaza +
ADEPT (Ab Directed Enzyme Prodrug Therapy)
GDEPT (Gene Directed Enzyme Prodrug Therapy)
Razpolovni časi encimov v serumu <br />
encim <br />
laktat-‐dehidrogenaza <br />
izoencim 1 <br />
izoencim 5 <br />
aspartat-aminotransferaza<br />
<br />
mitohondrij <br />
citozol <br />
alanin-‐aminotransferaza <br />
kreatin kinaza <br />
MM <br />
MB <br />
BB <br />
alkalna-‐fosfataza <br />
jetra <br />
kosti <br />
črevo <br />
placenta <br />
glutation-‐transferaza <br />
razpolovni čas (h) <br />
50-‐110 <br />
8-‐14 <br />
6-‐7 <br />
12-‐17 <br />
40-‐50 <br />
10-‐20 <br />
7-‐17 <br />
3 <br />
140-‐230 <br />
30-‐50 <br />
1 <br />
170 <br />
1.5
Change language