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TRATTATO ITALIANO DI MEDICINA DI LABORATORIO 

Fondato da ANGELO BURLINA 

Volume V/1 

TECNICHE DI LABORATORIO 

NELLA DIAGNOSTICA 

DELLE EMOPATIE 

Seconda edizione a cura di 

ANTONIO CUNEO, GIANLUIGI CASTOLDI 

e GIAN MATTEO RIGOLIN

Dello stesso Editore 

Alescio/Buonomini/Dori – Biologia dinamica 

Amadori – Ematologia 

Arienti – Le basi molecolari della nutrizione 

Arienti – Un compendio di biochimica per le lauree triennali 

Bauer et al. – Analisi strumentale 

Bergmeyer – Principi di analisi enzimatica 

Betterle – Le malattie autoimmuni 

Betterle – Gli autoanticorpi 

Boari – Emocromo: guida rapida all’interpretazione ragionata 

Bolognani/Volpi – Tavole metaboliche 

Bozzetti – Idee direttive in medicina di laboratorio 

Cabras/Martelli – Chimica e tecnologia degli alimenti 

Cao/Dallapiccola/Notarangelo – Malattie genetiche. 

Molecole e geni 

Cevenini – Microbiologia clinica 

Cevenini/Sambri – Microbiologia e Microbiologia clinica 

per le lauree triennali 

Cifuentes Delatte – Il laboratorio dell’urologo 

Cooper/Hausman – La cellula: un approccio molecolare 

Crepaldi – Trattato di medicina interna 

d’Ischia – La chimica organica in laboratorio 

De la Maza/Pezzlo/Shigei/Peterson - Atlante a colori di batteriologia 

medica 

Dizionario Medico Enciclopedico 

Duarte – Tests di funzionalità renale 

Duranti/Pagani – Enzimologia 

Fontana/Cornaglia – L’antibiogramma 

Fradà – Semeiotica medica 

Galli/Corsini/Marinovich – Tossicologia 

Galzigna – Principi di enzimologia 

Galzigna – Introduzione alla biochimica patologica 

Ganong – Fisiologia medica 

Garrett – Principi di biochimica 

Giannetti – Trattato di Dermatologia 

Gombos – Immunopatologia orale 

Greenspan/Forsham – Endocrinologia clinica 

Gulletta/Bertiato – Le biotecnologie in microbiologia diagnostica/Le 

infezioni trasmesse da zecche 

Hage/Carr - Chimica analitica ed analisi quantitativa 

Ishikawa/Kawai/Miyai – Dosaggi immunoenzimatici 

Laposata – Medicina di laboratorio 

Lewis – Genetica umana 

Janeway/Travers/Walport/Shlomchik – Immunobiologia 

Jawetz/Melnick/Adelberg – Microbiologia medica 

Mader – Biologia: l’essenziale 

Mandell – Atlante basilare delle malattie infettive 

Mandell/Diamond – Atlante delle infezioni fungine 

Mariuzzi – Anatomia patologica e correlazioni anatomo-cliniche 

Mazzi – Tecniche istologiche e istochimiche 

McCann/Foà/Smith/Conneally – Casi clinici di ematologia 

McMurry – Chimica organica 

Meduri/Notario – Testo-Guida alla Diagnostica clinica 

interattiva su CD-Rom 

Mentasti/Saini – Analisi chimica cromatografica 

Milanesi/Tani/Ciapini – Immunofissazione nella diagnostica 

di laboratorio 

Milanesi/Tani/Ciapini/Spandrio – Principi e metodi di indagine 

immunoelettroforetica delle proteine urinarie 

Monesi – Istologia 

Pearse – Istochimica 

Petrucci – Chimica generale 

Pier/Lyczak/Wetzler – Immunologia, infezione, immunità 

Pizzoferrato – Ormoni e dosaggi ormonali 

Pontieri – Patologia generale 

Quaglino/Cavallo/Forni – Le difese immunitarie 

Ravetto/Boccato – Atlante di citodiagnostica per aspirazione 

con ago sottile 

Regueiro – Immunologia 

Rizzotti/Pradella – I reticolociti 

Rhoades/Pflanzer – Fisiologia generale e umana 

Samaja – Biochimica per le lauree sanitarie 

Siliprandi/Tettamanti – Biochimica medica 

Spandrio – Principi e tecniche di chimica clinica 

Spandrio – Manuale di laboratorio 

Tietz – Guida clinica alle analisi di laboratorio 

Tozzoli/Bizzaro – La diagnostica di laboratorio nelle malattie 

autoimmuni sistemiche 

Vaira/Menegatti/Miglioli – Testo-Atlante a colori di diagnostica 

di laboratorio dell’infezione da Helicobacter Pylori 

Vaira/Menegatti/Miglioli – Testo-Atlante a colori di patologia 

da Helicobacter Pylori 

Verna – Diagnostica di laboratorio con i metodi della biologia 

molecolare 

Ziegler – Nutrizione 

TRATTATO ITALIANO DI MEDICINA 

DI LABORATORIO 

Fondato da A. Burlina 

Vol. I: Galzigna/Plebani – Biochimica clinica generale 

(N. Ed.) 

Vol. II: Spandrio – Biochimica clinica speciale (N. Ed.) 

Vol. III: Eyquem – Microbiologia clinica (aggiornato) 

Vol. IV: Dammacco – Immunologia clinica (N. Ed.) 

Vol. V: Cuneo/Castoldi/Rigolin/D’Onofrio/Zini – 

Diagnostica ematologica (N. Ed.) 

Vol. VI: Di Minno/Reali – Emocoagulazione ed emostasi – 

Immunoematologia e trasfusione (N. Ed.) 

Vol. VII: Panteghini – Interpretazione degli esami di laboratorio 

(N. Ed.) 

Vol. VIII: Boccato – Citopatologia diagnostica (N. Ed.) 

Vol. IX: Balestrieri/D’Amora/Giordano/Napoli/Pavan – 

Diagnostica molecolare nella medicina di laboratorio (N. 

Ed.) 

TRATTATO DI MEDICINA INTERNA 

Fondato da P. Larizza 

Vol. I: Tomo I – Generalità – Malattie del sangue 

e degli organi emopoietici 

Vol. I: Tomo II – Malattie del sangue, degli organi 

emopoietici e della milza – Coagulopatie – 

Immunologia clinica 

Vol. II: Malattie infettive 

Vol. III: Malattie delle ghiandole endocrine, del metabolismo 

e della nutrizione 

Vol. IV: Malattie osteoarticolari e del connettivo – 

Malattie da agenti fisici, chimici e ambientali 

Vol. V: Malattie dell’apparato respiratorio 

Vol. VI: Malattie del cuore e dei vasi 

Vol. VII: Malattie del rene, delle vie urinarie e dell’apparato 

genitale maschile 

Vol. VIII: Malattie del canale digerente 

Vol. IX: Malattie del fegato, delle vie biliari e del pancreas 

Vol. X: Malattie del sistema nervoso

TRATTATO ITALIANO DI MEDICINA DI LABORATORIO 

Fondato da ANGELO BURLINA 

Volume V/1 

TECNICHE DI LABORATORIO 

NELLA DIAGNOSTICA 

DELLE EMOPATIE 

Seconda edizione a cura di 

ANTONIO CUNEO 

Professore Ordinario di Ematologia 

Dipartimento di Scienze Biomediche 

e Terapie Avanzate 

Azienda Ospedaliero Universitaria 

Arcispedale S. Anna - Ferrara 

GIANLUIGI CASTOLDI 

Professore Ordinario di Ematologia 




Arcispedale S. Anna - Ferrara 

GIAN MATTEO RIGOLIN 

Ricercatore Universitario di Ematologia 




Arcispedale S. Anna - Ferrara

Tutti i diritti sono riservati 

È VIETATA PER LEGGE LA RIPRODUZIONE IN FOTOCOPIA 

E IN QUALSIASI ALTRA FORMA 

È vietato riprodurre, archiviare in un sistema di riproduzione 

o trasmettere sotto qualsiasi forma o con qualsiasi mezzo elettronico, 

meccanico, per fotocopia, registrazione o altro, 

qualsiasi parte di questa pubblicazione senza autorizzazione scritta dell’Editore. 

Ogni violazione sarà perseguita secondo le leggi civili e penali. 

ISBN 978-88-299-2054-9 

Stampato in Italia 

© 2012, by Piccin Nuova Libraria S.p.A. - Padova 

www.piccin.it

PREFAZIONE 

Dopo la stesura della 1 a edizione del V volume della 

Collana di Medicina di Laboratorio fondata da 

Angelo Burlina a cura di G.L. Castoldi e D. Quaglino 

e dedicata alle tecniche laboratoristiche in campo ematologico, 

è parso opportuno, nella nuova edizione a distanza 

di circa 10 anni, introdurre nuovi capitoli o aggiornarne 

alcuni di base. 

Ne sono scaturiti due volumi (l’uno a cura di 

Cuneo, Castoldi e Rigolin, dedicato alla diagnostica 

del midollo osseo, l’altro a cura di D’Onofrio, Zini e 

Rigolin, dedicato allo studio del sangue periferico), 

pressoché totalmente rinnovati e comprendenti numerose 

nuove tecniche di laboratorio applicate alla diagnostica 

delle emopatie anche in accordo con i criteri 

delle recenti classificazioni internazionali. 

Ci riferiamo in particolare, per quanto riguarda il I 

volume, alla citogenetica molecolare di numerose 

emopatie sistemiche, ai principali aspetti istopatologici, 

corredati dall’uso di anticorpi monoclonali, alla applicazione 

di microarrays o alle tecniche di valutazione 

dei riarrangiamenti delle Immunoglobuline, ai vari 

aspetti del processo infiammatorio, ai nuovi concetti 

sui quadri iporigenerativi ed in particolare sulla anemia 

aplastica. 

Questi capitoli completamente nuovi sono frutto 

della esperienza maturata lungo diversi anni da ricercatori 

che hanno acquisito prestigio e rilevanza nei singoli 

campi, anche con prolungati soggiorni presso istituzioni 

estere. 

L’aspetto più significativo di questo volume riguarda 

la diagnostica integrata delle singole emopatie che, 

partendo dai classici aspetti morfologici, introduce 

progressivamente aspetti di citochimica, cromosomici, 

molecolari, del fenotipo e della microscopia elettronica. 

Sebbene non tutte queste metodiche siano di immediata 

applicabilità, tuttavia l’analisi in sequenza delle 

stesse consente una valorizzazione di numerosi dettagli 

utili alla diagnosi. 

Sono stati mantenuti ovviamente alcuni capitoli 

quali quello dedicato all’agoaspirato midollare ed alla 

biopsia midollare o alla composizione classica del midollo 

osseo, anche se opportunamente aggiornati, 

mentre la gran parte dei capitoli è di nuova introduzione 

in rapporto alle mutate esigenze diagnostiche maturate 

negli ultimi anni. A questo riguardo si è fatto ricorso 

a numerose nuove figure e schemi interpretativi 

che integrano il testo in modo da dare al lettore una 

immediata comprensione degli argomenti. 

Non va dimenticata da ultimo la particolare dedizione 

della casa editrice Piccin alla composizione di 

questo volume che non ha risparmiato energie nella risoluzione 

di numerosi problemi legati alla stampa di 

un volume così complesso. 

A. Cuneo 

G.L.Castoldi 

G.M. Rigolin

AUTORI 

Dott. Andrea Bacigalupo 

Reparto di Ematologia 

Ospedale San Martino - Genova 

Dott. Maurizio Bergami 

Dirigente I Livello U.O. di Nefrologia 

Arcispedale S. Anna di Ferrara 

Prof. Gianluigi Castoldi 

già Direttore Cattedra Ematologia 

Dipartimento Scienze Biomediche e Terapie Avanzate 

Sezione di Ematologia e Fisiopatologia dell’Emostasi 

Università degli Studi di Ferrara 

Dott. Luigi Catizone 

Direttore U.O. di Nefrologia 


Dott. Francesco Cavazzini 

Ricercatore 

Sezione Ematologia 

Arcispedale S. Anna 


Prof. Luigi Cavazzini 

P.O. Anatomia Patologica 

Dipartimento di Medicina Sperimentale e Diagnostica 

Sezione di Anatomia, Istologia e Citologia Patologica 


Dott.ssa Maria Ciccone 

Assegnista di Ricerca 

Sezione di Ematologia 



Prof. Antonio Cuneo 

P.O. Ematologia 

Direttore Sezione di Ematologia 



Dott.ssa Melissa Dabusti 

Contrattista 

Sezione di Ematologia 



Prof. Francesco Di Virgilio 

P.O. Patologia Clinica 


Sezione di Paologia Generale 


Prof. Giuseppe D’Onofrio 

P.A. Patologia Clinica 

Università Cattolica del Sacro Cuore di Roma 

Prof. Vincenzo Liso 

Presidente C.d.L. in Medicina e Chirurgia 


Dipartimento di Anatomia Patologica 

Università degli Studi di Bari 

Cattedra e Servizio di Ematologia 

Azienda Policlinico di Bari 

Prof. Shaun Mc Cann 

P.E. di Ematologia, FRCPath, FRCPI 

Haematology Department 

Trinity College University di Dublino 

Dott. Massimo Negrini 

Ricercatore 



Dott. Andrea Piccin 

Specialista in Ematologia, MD, PhD 

Reparto di Ematologia e Centro Trapianti di Midollo 

Osseo 

Ospedale S. Maurizio di Bolzano 

Dott. Giorgio Ricci 

Ricercatore 

Segretario UNIGASTRO 



Prof. Franco Rigolin 

già Direttore del Laboratorio di Analisi 


Università degli Studi di Ferrara

VIII AUTORI 

Vol. V/1 

Dott. Gian Matteo Rigolin 

Ricercatore 

Dipartimento Scienze Biomediche e Terapie Avanzate 

Sezione di Ematologia e Fisiopatologia dell’Emostasi 


Dott.ssa Gloria Russo 

Dirigente I Livello U.O. di Nefrologia 


Dott. Paolo Tomasi 

Dirigente I Livello 

Sezione Ematologia 



Prof.ssa Gina Zini 

P.A. Patologia Clinica 

Università Cattolica del Sacro Cuore di Roma 

Prof.ssa Giorgina Specchia 


Cattedra e Servizio di Ematologia 

Azienda Policlinico Bari 

Università degli Studi di Bari

INDICE GENERALE 

PARTE PRIMA 

L’esame del midollo osseo. Tecniche di laboratorio 

1. Metodi di prelievo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 

G.M. Rigolin, R. Spanedda, G.L. Castoldi 

Agoaspirato midollare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 

Indicazioni all’agobiopsia midollare . . . . . . . . . . .3 

Tecnica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 

Principio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 

Strumentazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 

Sede del prelievo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 

Modalità del prelievo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 

Esame dell’aspirato midollare . . . . . . . . . . . . . . . .6 

Biopsia ossea . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 

Tecnica del prelievo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 

Sede del prelievo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 

Strumentazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9 

Preparazione delle sezioni . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9 

Esame della biopsia ossea . . . . . . . . . . . . . . . . . .11 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12 

2. Composizione cellulare del midollo osseo . . . .13 

G.L. Castoldi, V. Liso, G.M. Rigolin 

Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13 

Compartimento stromale midollare (microambiente 

osteo-midollare) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14 

Compartimento emopoietico . . . . . . . . . . . . . . . . . .14 

Serie eritroide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .17 

Proeritroblasto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .17 

Eritroblasto basofilo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .18 

Eritroblasto policromatofilo . . . . . . . . . . . . . .18 

Eritroblasto ortocromatico . . . . . . . . . . . . . . . .18 

Reticolocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .18 

Microscopia elettronica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .18 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20 

Eritrocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20 

Serie granulocitaria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21 

Mieloblasto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21 

Promielocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22 

Mielocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22 

Metamielocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22 

Granulocito neutrofilo . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23 

Principali anomalie morfologiche dei granulociti 

neutrofili . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23 

Serie eosinofila . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 

Promielocito eosinofilo . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 

Mielocito e metamielocito eosinofilo . . . . . . . .24 

Eosinofilo maturo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 

Serie basofila e mastcellule . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 

Promielocito, mielocito e metamielocito 

basofilo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25 

Polimorfonucleato basofilo . . . . . . . . . . . . . . . .25 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25 

Mastcellule . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25 

Serie monocito-macrofagica . . . . . . . . . . . . . . . . . .25 

Monoblasto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26 

Promonocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26 

Monocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26 

Immunofenotipo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26 

Macrofago e cellula di Langerhans . . . . . . . . .26 

Serie megacariocitaria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27 

Megacarioblasto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27 

Promegacariocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28 

Megacariocito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28 

Piastrine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 

Serie linfoide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 

Sangue periferico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 

Linfociti B . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30 

Linfociti T . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .31 

Terza popolazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .31 

Microscopia ottica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .31 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32 

Plasmacellula . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32 

Microscopia ottica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32 

Microscopia elettronica . . . . . . . . . . . . . . . . . .32 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Cellule non emopoietiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Osteoblasti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Adipociti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Osteoclasti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Strutture vascolari . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34

X INDICE GENERALE 

Vol. V/1 

3. Tecniche d’indagine del midollo osseo . . . . .35 

A. Tecniche citochimiche . . . . . . . . . . . . . . . . . .35 

P. Tomasi 

Mieloperossidasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .35 

Principio del metodo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .35 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36 

Metodo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36 

Risultati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36 

Interpretazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37 

Esterasi leucocitarie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37 

α-Naftil acetato esterasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37 

Metodo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .38 

Risultati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .38 

Naftol ASD-acetato: metodo con il fast blue bb .39 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .39 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .39 

α-Naftil-acetato esterasi acida: metodo con 

la pararosanilina esazotizzata . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

α-Naftil-butirrato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Naftol AS-D cloroacetato esterasi (chlor e) . . . . .40 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Metodo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Risultati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 

Metodo con il Fast Garnet per strisci e sezioni . .41 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 

Colorazione con il Sudan black B . . . . . . . . . . . .41 

Principio del test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 

Sudan Nero B . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42 

Metodo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42 

Interpretazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42 

Colorazione con l’Acido Periodico Schiff (PAS) 42 


Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .43 

Tecnica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .43 


Fosfatasi Alcalina Leucocitaria . . . . . . . . . . . . . .44 

Principio del metodo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44 

Preparazione delle soluzioni . . . . . . . . . . . . . . .44 

Soluzioni tampone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44 

Procedure . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44 

Risultati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44 

Calcolo dei risultati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45 

Commenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45 

Metodo del Colorante Azoico; Naftol AS-MX 

Fosfato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45 

Principio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45 

Preparazione delle soluzioni . . . . . . . . . . . . . . .45 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .46 

Risultati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .46 

Calcolo del punteggio ed interpretazione . . . . .46 

Commenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .46 

Fosfatasi acida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .46 


Fast Garnet GBC Method . . . . . . . . . . . . . . . . . . .47 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .47 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .47 

Fast Red ITR method . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .47 

Reattivi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .47 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48 

Metodo con la Pararosanilina . . . . . . . . . . . . . . . .48 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48 


Quadri interpretativi delle principali rezioni 

citochimiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48 

Reazione al Blue di Prussia . . . . . . . . . . . . . . . . .49 

Finalità del test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .49 


Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Interpretazione dei risultati . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Blue di Toluidina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Finalità del test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 


Metacromasia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Preparazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Procedura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 

Risultato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .51 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .51 

B. Tecniche immunocitochimiche ed immunoistochimiche 

in ematologia. L’immunoperossidasi 

e l’immunofosfatasi alcalina . . . . . . . . . . . . . .53 

P. Tomasi 

Trattamenti dei campioni citologici . . . . . . . . . . .53 

Fase di preparazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .53 

Fissazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .53 

Metodi con coniugati anticorpo-enzima . . . . . .54 

Metodi indiretti con complessi immuni 

anticorpo-enzima . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .54 

Metodi indiretti con coniugati non anticorpali . . .55 

Sistema con complessi avidina-enzima . . . . . .55 

Sistemi con complessi ABC . . . . . . . . . . . . . . .55 

Doppia colorazione immunoenzimatica . . . . . . . .55 

Sviluppo della reazione colorimetrica . . . . . . . . .56 

Rivelazione della perossidasi . . . . . . . . . . . . . .56 

Rivelazione della fosfatasi alcalina . . . . . . . . .56 

Colorazione immunoenzimatica degli strisci e 

delle sezioni istologiche secondo la procedura 

APAAP . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .56 

Preparazione degli strisci cellulari . . . . . . . . . .56 

Fissazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .57 

Preparazione delle sezioni tissutali . . . . . . . . . .57 

Fissazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .57 

Colorazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .57 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .58 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .58

Vol. V/1 


XI 

C. Allestimento di campioni cellulari per 

l’osservazione in microscopia elettronica 

a trasmissione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .59 

P. Tomasi 

Fissazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .59 

Post-fissazione, deidratazione, impregnazione, 

inclusione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .60 

Metodi di preparazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .60 

Sezione e colorazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61 

Contrasto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61 

Citochimica ultrastrutturale . . . . . . . . . . . . . . . . .61 

Fosfatasi acida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .62 

Esterasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .62 

Metodo dell’azo-indoxyl per la dimostrazione 

dell’esterasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .62 

Alpha naphtyl acetate esterase (ANAE) . . . . . .62 

Citocromo ossidasi (con il metodo DAB) . . . .63 

Perossidasi endogene . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .63 

5’-nucleotidasi (Naidoo e Pratt-1954, 

Uusitalo-1981) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .64 

Immunoelettronmicroscopia . . . . . . . . . . . . . . . . .64 

D. Metodiche di pre-embedding su cellule isolate. 

Marcatura di antigeni di superficie su cellule 

isolate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .66 

P. Tomasi 

Metodica di singola marcatura con perossidasi . .66 

Metodica di singola marcatura con particelle di 

oro colloidale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .66 

Metodica di doppia marcatura con particelle di 

oro colloidale di diametro diverso (metodo indiretto 

e metodo diretto) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .67 

Metodica di doppia marcatura oro colloidaleperossidasi 

(due metodi indiretti anticorpi della 

stessa specie ma di classe diversa) . . . . . . . . . . . .67 

Metodica di doppia marcatura con particelle di 

oro colloidale di diverso diametro (metodo indiretto 

e metodo streptavidina-biotina) . . . . . . . .67 

Tecnica di immunomarcatura in post embedding 68 

Immunocitochimica immunostrutturale . . . . . . . .68 

Immuno-tem-mieloperossidasi (MPPO) . . . . . . .68 

Microscopia a scansione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .69 

Tecniche di preparazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . .69 

Immunoelettronmicroscopia a scansione . . . . . . .70 

Immunocitochimica a scansione . . . . . . . . . . . . .71 

Procedura per il rilievo della fosfatasi acida . .71 

Procedura per il rilievo della mieloperossidasi 71 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .71 

E. Biopsia osteomidollare . . . . . . . . . . . . . . . . . .73 

L. Cavazzini 

Processazione e colorazione della biopsia 

osteomidollare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .73 

Adeguatezza della biopsia osteo-midollare . . . . .75 

Cellularità e popolazioni emopoietiche . . . . . . . .78 

Alterazioni di significato patologico . . . . . . . . . .87 

Esame della biopsia osteomidollare . . . . . . . . . .102 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .105 

F. Diagnostica molecolare . . . . . . . . . . . . . . . .106 

M. Negrini 

Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .106 

Metodiche molecolari nella diagnosi di leucemie 

e linfomi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .106 

Southern Blot . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .106 

Reazione polimerasica a catena (PCR) . . . . . .107 

Nested PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .109 

Analisi dei frammenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . .109 

Analisi del chimerismo con microsatelliti . . .110 

PCR real time . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .110 

Analisi di sequenza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .110 

Screening di mutazioni . . . . . . . . . . . . . . . . . .110 

Uso delle tecniche molecolari in diagnostica 

e nel follow-up . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .111 

Tecniche molecolari in diagnostica . . . . . . . . .111 

Controlli di remissione con diverse tecniche 

PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .113 

Campionamento del materiale . . . . . . . . . . . .113 

Diagnostica molecolare nella leucemia mieloide 

acuta (AML) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .114 

Rilevazione di geni di fusione . . . . . . . . . . . .114 

Mutazioni molecolari nella leucemia mieloide 

acuta (AML) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .114 

Controlli di remissione della AML . . . . . . . . .115 

Diagnostica molecolare nella sindrome 

mielodisplastica (MDS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . .115 

Rilevazione di delezioni nella MDS . . . . . . . .115 

Rilevazione di geni di fusione nella MDS . . .116 

Marcatori di follow up della MDS . . . . . . . . .116 

Diagnostica molecolare nella leucemia mieloide 

cronica (CML) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .116 

Resistenza all’Imatinib nelle leucemie 

positive a BCR-ABL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .117 

Controlli di follow-up nella CML . . . . . . . . .117 

Altre patologie mieloproliferative . . . . . . . . .117 

Diagnostica molecolare nella leucemia linfatica 

acuta (LLA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .117 

Diagnostica molecolare della LLA . . . . . . . . .117 

Mutazioni molecolari nella LLA . . . . . . . . . .118 

Controlli di follow-up nella LLA . . . . . . . . . .118 

Diagnostica molecolare nella leucemia 

linfatica cronica (LLC) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .119 

Delezioni cromosomiche nella LLC . . . . . . . .119 

Riarrangiamento di geni nella LLC . . . . . . . .119 

Iper-mutazione dei geni VH nella LLC . . . . .119 

Leucemia a cellule pelose (HCL) . . . . . . . . . .119 

Diagnostica molecolare nei linfomi . . . . . . . . . .119 

Linfoma mantellare (MCL) . . . . . . . . . . . . . .119 

Linfoma follicolare (FL) . . . . . . . . . . . . . . . . .119 

Linfoma MALT . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .120 

Linfoma linfoplasmocitico/immunocitoma 

(LPL) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .120 

Linfoma di Burkitt (BL) . . . . . . . . . . . . . . . . .120 

Mieloma multiplo (MM) . . . . . . . . . . . . . . . . . .120 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .121

XII INDICE GENERALE 

Vol. V/1 

G. Impiego di microarray per l’analisi 

dell’espressione genica . . . . . . . . . . . . . . . . .123 

M. Negrini 

Caratteristiche principali nella tecnologia microarray 123 

Tipologie di Array . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .123 

Caratteristiche delle sonde . . . . . . . . . . . . . . . . .123 

Marcatura degli acidi nucleici . . . . . . . . . . . . . .124 

Protocollo per analisi dell’espressione di mRNA .125 

Marcatura a cRNA diretta - Un colore (Cy3) - 

Oligonucleotide High density microarray . . . . .125 

Sintesi del cDNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .126 

Amplificazione a cRNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . .126 

Purificazione del cRNA marcato . . . . . . . . . . . .127 

Quantificazione del cRNA marcato . . . . . . . . . .127 

Frammentazione del cRNA . . . . . . . . . . . . . . . .127 

Ibridizzazione e lavaggi . . . . . . . . . . . . . . . . . . .128 

Acquisizione immagine ibridazione mediante 

scanner confocale a fluorescenza . . . . . . . . . . . .128 

Protocollo per l’analisi dell’espressione 

di microRNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .128 

Marcatura del campione di RNA . . . . . . . . . . . .130 

Defosforilazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .130 

Ligazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .130 

Purificazione e concentrazione del marcato . . . .130 

Ibridazione, lavaggi e acquisizione dell’immagine 130 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .131 

H. Analisi del riarrangiamento clonale VDJ e 

mutazioni somatiche della regione IGVH 

nella leucemia linfatica cromatica . . . . . . . .132 

M. Negrini 

Diversità Anticorpale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .133 

Analisi della clonalità dei linfociti B . . . . . . . . .134 

Procedura sperimentale basata su PCR per 

l’analisi della regione VDJ in campioni LLC . .135 

PARTE SECONDA 

Diagnosi integrata nelle principali emopatie 

1. Anemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .143 

G.L. Castoldi, V. Liso, L. Cavazzini, A. Cuneo, 

G. Specchia, P. Tomasi, G.M. Rigolin 

Definizione e classificazione . . . . . . . . . . . . . . .143 

Anemia aplastica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .143 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .143 

Sangue periferico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .143 

Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .145 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .145 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .145 

Test di laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .145 

Anemia delle malattie croniche . . . . . . . . . . . . .146 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .146 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .146 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .146 


Anemie diseritropoietiche (CDA) . . . . . . . . . . .146 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .146 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 


CDA I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 

Sangue periferico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 

Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 

Microscopia elettronica . . . . . . . . . . . . . . . .147 

CDA II (HEMPAS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 

Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 


Test di laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 

CDA III . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 



Altri tipi di CDA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 

Anemia megaloblastica . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .150 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .150 

Microscopia elettronica . . . . . . . . . . . . . . . . .152 


Anemia sideropenica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .152 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .152 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .154 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .155 


Diagnosi differenziale . . . . . . . . . . . . . . . . . . .155 

Talassemia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .155 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .155 

Genetica molecolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .155 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .156 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .157 



Anemia drepanocitica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .157 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .157 



Sferocitosi ereditaria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .158 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .158 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .159 


Fisiopatologia della sferocitosi . . . . . . . . . . . .160 

Ellissocitosi ereditaria comune . . . . . . . . . . . . . .160 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .160 



Piropoichilocitosi ereditaria . . . . . . . . . . . . . . . .160 

Ellissocitosi sferocitica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .160

Vol. V/1 


XIII 

Ovalocitosi del Sud-Est Asiatico . . . . . . . . . . . .160 

Anemie emolitiche da difetto enzimatico . . . . .161 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .161 

Anemia emolitica da carenza di glucoso-6-fosfato 

deidrogenasi (Shunt dei pentoso-fosfati) . . . . . .161 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .161 



Anemia emolitica da carenza di piruvato chinasi 

(glicolisi anaerobia) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162 



Emoglobinuria parossistica notturna (EPN) . . . .162 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .162 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .163 


Anemia mieloftisica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .163 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .163 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .164 

2. Neoplasie mieloproliferative . . . . . . . . . . . .165 



Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .165 

Leucemia mieloide cronica (LMC) . . . . . . . . . .165 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .165 

Fase florida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .165 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .165 

Midollo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .165 

Fase accelerata . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .166 


Midollo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .166 

Criteri WHO per la definizione di LMC in 

fase accelerata . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .166 

Crisi blastica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .167 


Midollo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .167 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .167 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .167 

Criteri WHO per la definizione di LMC in 

fase blastica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .168 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .168 

Mutazioni di bcr-abl . . . . . . . . . . . . . . . . . . .172 

Test biochimici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .172 

Disordini eosinofili . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .172 

Leucemia cronica eosinofila . . . . . . . . . . . . . .172 

Sindrome ipereosinofila idiopatica (HES) . . .173 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .174 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .175 


Alterazioni citogenetiche e Biologia 

molecolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .175 

Policitemia vera (PV) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .176 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .176 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .176 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .177 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .177 

Biologia molecolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .178 


Criteri WHO per la diagnosi di PV . . . . . . . .180 

Criteri maggiori . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .180 

Criteri minori . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .180 

Trombocitemia essenziale . . . . . . . . . . . . . . . . .180 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .180 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .180 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .181 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .181 

Biologia molecolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . .181 


Criteri WHO per la diagnosi di TE . . . . . . .182 

Mielofibrosi idiopatica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .182 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .182 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .182 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .183 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .183 

Biologia molecolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . .183 


Criteri WHO per la diagnosi di MI . . . . . . .184 

Criteri maggiori . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .184 

Criteri minori . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .184 

3. Neoplasie mielodisplastiche/ 

mieloproliferative . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .185 



Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .185 

Leucemia mielomonocitica cronica (CMML) . .185 

RARS-T . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .186 

4. Sindromi mielodisplastiche (MDS) . . . . . .187 



Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .187 

Diagnosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .188 

Sangue periferico e midollo osseo . . . . . . . . .188 

Blasti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .190 

Sideroblasti ad anello . . . . . . . . . . . . . . . . . . .191 



Sindrome 5q- . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .193 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .193 

SMD e prognosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .198

XIV INDICE GENERALE 

Vol. V/1 

5. Leucemie acute mieloidi (LAM) . . . . . . . . .199 



Proposte della WHO per la classificazione 

delle LAM . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .199 

Diagnosi di LAM . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .200 

Campioni richiesti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .200 

Valutazione dei blasti . . . . . . . . . . . . . . . . . . .200 

Valutazione della filiera di appartenenza 

dei blasti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .201 

Valutazione delle caratteristiche genetiche . . .201 

Refertazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .201 

LAM con anomalie citogenetiche ricorrenti . . .201 

LAM con minima differenziazione (corrisponde 

a M0 FAB) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .202 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .202 


Immunofenotipo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .203 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .203 

LAM senza maturazione (corrisponde a M1 FAB) 204 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .204 



Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .205 

LAM con maturazione (corrisponde a M2 FAB) .206 

Sangue periferico e midollo . . . . . . . . . . . . . .206 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .206 



LAM con t(8;21)(q22;q22); RUNX1- 

RUNX1T1 (AML1-ETO) . . . . . . . . . . . . . . . .206 

LAM con basofilia (corrisponde a M2 baso FAB) .207 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .211 

Microscopia elettronica . . . . . . . . . . . . . . . . . .211 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .211 

Leucemia acuta promielocitica (LAP) 

(corrisponde a M3) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .214 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .214 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .216 



Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .217 

Test biochimici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .218 

Leucemia acuta a cellule mieloidi/Natural killer . .218 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .219 


Citogenetica e biologia molecolare . . . . . . . .219 

LAM mielomonocitica (corrisponde a M4 FAB)219 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .222 



Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .222 


LAM mielomonocitica con eosinofilia 

(corrisponde a M4 Eos FAB) . . . . . . . . . . . . . . .224 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .224 



LAM monocitica/monoblastica (M5) . . . . . . . . .225 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .226 



Forme varianti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .227 


Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .227 

LAM monoblastica con eritrofagocitosi . . . . . .228 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .228 


Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .233 

Leucemia acuta eritroide (corrisponde a 

M6 AFB) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .233 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .234 



Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .236 

Leucemia acuta megacarioblastica (corrisponde 

a M7 FAB) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .236 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .238 



Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .239 

LAM con alterazioni di tipo mielodisplastico . .240 

Neoplasie mieloidi correlate a terapie . . . . . . . .244 

Leucemie bifenotipiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . .244 

Leucemie bilineari . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .245 

Leucemia di origine ambigua e WHO 2008 . . .245 

6. Malattie del sistema monocito-macrofagico 247 

G.L. Castoldi, V. Liso, L. Cavazzini, A. Cuneo, G. 

Specchia, P. Tomasi, G.M. Rigolin 

Granuloma da corpo estraneo . . . . . . . . . . . . . . .247 

Da processi infettivi e parassitari . . . . . . . . . . . .247 

Sindromi emofagocitiche . . . . . . . . . . . . . . . . . .247 

Malattia di Rosai-Dorfman . . . . . . . . . . . . . . . . .247 

Tesaurismosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .248 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .248 

Malattia di Gaucher . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .248 

Malattia di Niemann-Pick . . . . . . . . . . . . . . . .249 

Istiocitosi blu mare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .249 

Sarcoma istiocitico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .250 

Istiocitosi a cellule di Langerhans (Istiocitosi X) .250 

7. Disordini reattivi della filiera linfoide 

(linfoadenopatie reattive) . . . . . . . . . . . . . .251 



Mononucleosi e sindromi mononucleosiche . . .251

Vol. V/1 


XV 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .251 



Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .251 


Sarcoidosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .252 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .252 


Diagnosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .252 

8. Disordini neoplastici linfoproliferativi . . . .253 



Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .253 

Disordini ematologici linfoproliferativi cronici 

ad interessamento periferico . . . . . . . . . . . . . . . .254 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .254 

Leucemia linfatica cronica a cellule B (LLC) . .255 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .255 

Stadiazione della LLC . . . . . . . . . . . . . . . . . .255 

Stadiazione di Rai . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .255 

Stadiazione di Binet . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .255 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .256 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .256 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .258 



Evoluzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .259 

Leucemia prolinfocitica a cellule B (LPL-B) . .260 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .260 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .260 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .261 


Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .261 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .261 

Hairy cell leukemia (HCL) . . . . . . . . . . . . . . . . .261 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .261 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .263 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .263 


Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .264 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .264 


Variante di Cawley (tipo II) . . . . . . . . . . . . . .265 

Variante di Katayama . . . . . . . . . . . . . . . . . . .265 

9. Gammapatie monoclonali . . . . . . . . . . . . . .266 



Mieloma multiplo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .266 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .266 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .270 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .270 



Istologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .271 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .271 


Leucemia plasmacellulare . . . . . . . . . . . . . . . . .279 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .279 



Macroglobulinemia di Waldenström (MW) . . . .280 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .280 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .281 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .281 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .281 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .281 



10. Linfomi non Hodgkin a possibile componente 

leucemica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .283 



Linfoma follicolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .285 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .285 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .285 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .286 

Linfoma mantellare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .286 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .286 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .288 

Istopatologia linfonodi . . . . . . . . . . . . . . . . . .289 


Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .289 

Linfoma diffuso a grandi cellule B . . . . . . . . . .291 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .291 


Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .291 

Linfoma anaplastico CD30+ a grandi cellule 

(T o null) sistemico primitivo . . . . . . . . . . . . . .291 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .291 


Linfoma di Burkitt . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .293 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .293 

Istopatologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .293 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .293 

Linfoma splenico della zona marginale . . . . . . .293 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .293 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .296 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .296 


Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .296 

Citogenetica e indagini molecolari . . . . . . . . .298 

11. Linfoma di Hodgkin (LH) . . . . . . . . . . . . . .299 



Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .299

XVI INDICE GENERALE 

Vol. V/1 

Inquadramento anatomopatologico: 

classificazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .299 

LH a predominanza linfocitaria nodulare . .299 

LH classico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .299 

Istopatologia midollare . . . . . . . . . . . . . . . . . .302 

Esami di laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .302 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .302 

12. Neoplasie a cellule t mature . . . . . . . . . . . .303 

G.L. Castoldi, V. Liso, L. Cavazzini, A. Cuneo, G. 

Specchia, P. Tomasi, G.M. Rigolin 

Leucemia prolinfocitica T (LPL-T) . . . . . . . . . .303 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .303 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .303 


Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .303 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .304 


Leucemia a grandi linfociti granulari (LGLG) .305 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .305 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .305 


Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .305 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .305 



Adult T-cell leukemia-lymphoma (A-TLL) . . . .306 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .306 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .307 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .307 

Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .307 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .307 


Micosi fungoide (MF) e sindrome di Sézary (SS) 307 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .307 


Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .308 


Immunologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .308 

Citogenetica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .308 

Interessamento cutaneo . . . . . . . . . . . . . . . . . .308 

13. Leucemia linfoblastica acuta . . . . . . . . . . .310 



Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .310 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .310 

Citochimica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .310 



Citogenetica e Genetica Molecolare . . . . . . . .313 


14. Piastrinopenie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .322 



Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .322 

Porpora trombocitopenica idiopatica cronica 

(malattia di Werlhof) (PTI) . . . . . . . . . . . . . . . .322 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .322 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .323 



Porpora trombotica trombocitopenica (sindrome 

di Moschowitz) (TTP) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .324 

Definizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .324 


Midollo osseo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .325 



Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .326 

PARTE TERZA 

Disordini dell’emoglobina 

1. Le emoglobinopatie . . . . . . . . . . . . . . . . . . .331 

F. Rigolin 

Inquadramento generale delle emoglobinopatie . .331 

Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .331 

Emoglobine con ridotta solubilità . . . . . . . . . . .332 

Hb S . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .332 

Trait falcemico eterozigote (β genotipo AS) 333 

Anemia falciforme o stato omozigote 

(β genotipo SS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .333 

Emoglobine instabili . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .333 

Emoglobine con alterata affinità per l’O 2 

. . . . .333 

Emoglobine M . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .334 

Metaemoglobinemia congenita . . . . . . . . . . . . .334 

Anomalie acquisite . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .334 

Intossicazioni da CO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .334 

Metaemoglobinemia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .334 

Solfoemoglobinemia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .334 

Sindromi talassemiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .335 

β-talassemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .335 

β-talassemie complesse . . . . . . . . . . . . . . . . . .336 

α-talassemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .336 

Indagini per lo screening e la diagnosi 

delle emoglobinopatie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .336 

Parametri ematologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .337 

Prelievo di sangue periferico . . . . . . . . . . . . . . .337 

Striscio periferico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .337 

Emolisati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .337 

Sicurezza di qualità . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .337 

Elettroforesi dell’emoglobina . . . . . . . . . . . . . . .338 

Acetato di cellulosa a pH alcalino . . . . . . . . .338 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .338 

Interpretazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .338 

Elettroforesi su agar citrato pH 6,0-6,2 . . . . .339 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .339 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .339

Vol. V/1 


XVII 

Elettroforesi in gel di agarosio . . . . . . . . . . . .339 

Cromatografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .339 

Automated high performance liquid 

chromatography (HPLC) . . . . . . . . . . . . . . . .340 

Principio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 


Isoelettrofocalizzazione (IEF) . . . . . . . . . . . . . .341 

Separazione delle catene globiniche . . . . . . . . .341 

Elettroforesi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .341 

HPLC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .341 

Sintesi in vitro delle catene globiniche . . . . . . .341 

Esami speciali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Esami per evidenziare la presenza di Hb S . .342 

Test di falcizzazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Test di solubilità . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Test per evidenziare le emoglobine instabili . . .342 

Test di stabilità al calore . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Principio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .342 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .343 


Test di precipitazione con isopropanolo . . . . .343 

Principio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .343 

Reagenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .343 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .343 

Dosaggio della metaemoglobina . . . . . . . . . . . .343 

Procedimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .343 

Determinazione della percentuale di 

carbossiemoglobina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .343 

Determinazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .344 

Derivati emoglobinici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .344 

Corpi di Heinz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .344 

Test per la ricerca dei corpi di Heinz . . . . . .344 

Inclusioni da Hb H . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .344 

Screening neonatale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .344 

Screening e diagnosi delle emoglobinopatie .344 

Metodi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .345 

Tecniche di biologia molecolare . . . . . . . . . . . .345 

Analisi strutturali del DNA . . . . . . . . . . . . . . .345 

Principi fondamentali degli acidi nucleici . . .345 

Reazione a catena della polimerasi PCR . . . .346 

Trascrizione inversa con PCR (RT-PCR) . . . .348 

Analisi del DNA amplificato . . . . . . . . . . . . .348 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .348 

PARTE QUARTA 

Il processo infiammatorio 

1. Il processo infiammatorio . . . . . . . . . . . . . .351 

F. Di Virgilio, D. Cavagna, A.L. Giuliani 

Caratteristiche generali del processo infiammatorio 351 

Cenni storici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .352 

Mediatori chimici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .356 

Citochine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .356 

Interleuchine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .358 

L’inflammasoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .360 

Fattori di crescita . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .360 

Interferoni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .361 

Il TNF . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .362 

Chemiochine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .364 

Funzioni delle chemiochine . . . . . . . . . . . . . .364 

Fattori stimolanti le colonie (CSF) . . . . . . . . . . .364 

Molecole di adesione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .364 

Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .364 

Classificazione delle molecole di adesione 

cellulare (CAMs) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .365 

Le cellule infiammatorie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .365 

Granulociti neutrofili . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .365 

Cellule endoteliali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .366 

Monociti/macrofagi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .366 

Mastociti e granulociti basofili . . . . . . . . . . . . . .366 

Granulociti eosinofili . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .367 

Linfociti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .367 

Piastrine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .367 

Infiammazione acuta . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .367 

Evoluzione della flogosi acuta . . . . . . . . . . . .371 

Infiammazione cronica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .374 

Caratteristiche generali del processo 

infiammatorio cronico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .374 

Cellule della infiammazione cronica . . . . . . . . .375 

Monociti/macrofagi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .375 

Linfociti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .375 

Plasmacellule . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .375 

Cellule dendritiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .375 

Fibroblasti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .375 

Infiammazione granulomatosa . . . . . . . . . . . . . .375 

Risposte sistemiche al processo infiammatorio . . .376 

Studio dei leucociti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .377 

Conteggio cellulare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .377 

Metodi di separazione delle frazioni leucocitarie .379 

Metodi di separazione dei granulociti neutrofili . .381 

Metodi di separazione dei granulociti eosinofili . .382 

Metodi di separazione dei granulociti basofili . . .384 

Metodi di separazione dei linfociti . . . . . . . . . . . .385 

Metodi di separazione dei monociti . . . . . . . . . . . .385 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .386 

PARTE QUINTA 

Anemia aplastica e mielopatie autoimmuni 

1. L’anemia aplastica ereditaria e acquisita e l’emoglobinuria 

parossistica notturna . . . . . .391 

A. Piccin, S. Mc Cann, A. Bacigalupo 

Introduzione e cenni storici . . . . . . . . . . . . . . . .391 

Le sidromi congenite da insufficienza midollare .391 

L’Anemia di Fanconi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .391 

Discheratosi Congenita . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .392 

Trombocitopenia amegacariocitaria . . . . . . . . . .392 

La Sindrome di Schwachmann Diamond . . . . . .392 

Anemia aplastica acquisita . . . . . . . . . . . . . . . . . . .392 

Diagnosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .392 

Classificazione dell’AA . . . . . . . . . . . . . . . . .392 

Caratteristiche cliniche dell’Anemia Aplastica393 

Epidemiologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .393 

Patogenesi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .393

XVIII INDICE GENERALE 

Vol. V/1 

Le cellule staminali e lo stroma nell’AA . . . .393 

L’ipotesi autoimmune . . . . . . . . . . . . . . . . . . .393 

Sostanze chimiche, farmaci e radiazioni . . . .394 

Virus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .394 

Diagnosi e test diagnostici . . . . . . . . . . . . . . . . .394 

Esame emocromocitometrico . . . . . . . . . . . . .394 

Osservazione dello striscio periferico . . . . . . .394 

Biopsia osteomidollare . . . . . . . . . . . . . . . . . .394 

Dosaggio dell’emoglobina fetale . . . . . . . . . .395 

Conteggio dei reticolociti . . . . . . . . . . . . . . . .395 

Analisi citogenetiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . .395 

Test specifici per la diagnosi di Anemia 

di Fanconi (FA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .395 

Test al Diepossibutano (DEB), descrizione 

della metodica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .395 

Analisi dei telomeri . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .396 

Diagnosi differenziale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .396 

Anemia Aplastica Idiopatica ed Emoglobinuria 

parossistica notturna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .396 

Etiopatogenesi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .397 

Sintomatologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .398 

La diagnosi di laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . .398 

Test di Ham o test dell’emolisi acida . . . . . . . . .400 

Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .401 

Indice analitico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .403

pagine romane.qxd - Piccin

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