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Centro di Referenza Nazionale per la Ricerca di OGMReport di validazione mais MON810RisultatiTabella 5: Risultati0,10% 0,50% 1,00% 5,00%mangimeLab. n. C05 C09 C11 C16 C01 C04 C14 C18 C02 C08 C13 C19 C07 C10 C15 C20 C03 C06 C12 C171 0,04 0,04 0,08 0,05 0,24 0,19 0,28 0,26 0,51 0,44 0,61 0,56 2,86 2,80 3,24 2,87 0,00 0,00 0,00 0,002 0,06 0,05 0,10 0,06 0,33 0,33 0,37 0,33 0,59 0,57 0,75 0,61 2,63 2,26 3,42 2,73 0,00 0,00 0,00 0,003 0,16 0,15 0,10 0,13 0,45 0,40 0,40 0,37 0,83 0,77 0,66 0,95 3,20 4,48 4,06 4,37 0,00 0,00 0,00 0,004 0,09 0,06 0,07 0,08 0,39 0,37 0,32 0,32 0,78 0,51 0,66 0,82 3,57 2,45 3,32 3,96 0,00 0,00 0,00 0,005 0,10 0,12 0,10 0,08 0,43 0,41 0,39 0,40 0,87 0,80 0,94 0,77 4,23 4,13 4,09 3,94 0,00 0,00 0,00 0,006 0,10 0,12 0,09 0,10 0,35 0,36 0,36 0,40 0,74 0,66 0,74 0,85 2,64 3,57 3,21 3,76 0,00 0,00 0,00 0,007 0,12 0,12 0,10 0,10 0,33 0,42 0,42 0,41 0,75 0,72 0,70 0,90 3,33 3,72 3,86 3,66 0,00 0,00 0,00 0,008 0,10 0,08 0,09 0,08 0,34 0,35 0,35 0,35 0,66 0,65 0,70 0,67 3,40 3,25 3,20 3,17 0,00 0,00 0,00 0,009 0,05 0,05 0,07 0,05 0,24 0,27 0,34 0,24 0,61 0,50 0,85 0,54 3,62 2,82 3,38 2,98 0,00 0,00 0,00 0,0010 0,05 0,04 0,05 0,04 0,23 0,16 0,22 0,20 0,35 0,36 0,38 0,32 1,45 1,65 1,65 1,57 0,00 0,00 0,00 0,0011 0,06 0,07 0,06 0,06 0,33 0,27 0,24 0,27 0,53 0,54 0,57 0,55 2,45 2,63 2,55 2,75 0,00 0,00 0,00 0,0012 0,06 0,06 0,07 0,06 0,26 0,25 0,23 0,24 0,56 0,48 0,57 0,47 2,72 2,79 2,67 2,70 0,00 0,00 0,00 0,0013 0,05 0,04 0,07 0,07 0,29 0,21 0,30 0,25 0,52 0,44 0,94 0,47 3,19 2,79 4,27 3,66 0,00 0,00 0,00 0,0014 0,06 0,04 0,03 0,03 0,25 0,29 0,19 0,17 0,50 0,45 0,45 0,28 3,44 2,53 2,01 2,15 0,00 0,00 0,00 0,0015 0,07 0,10 0,10 0,07 0,33 0,31 0,29 0,32 0,69 0,62 0,63 0,69 3,32 3,35 3,00 3,27 0,00 0,00 0,00 0,0016 0,07 0,07 0,06 0,07 0,33 0,39 0,37 0,47 0,61 0,92 0,67 1,00 3,97 4,35 4,04 3,62 0,00 0,00 0,00 0,0017 0,07 0,08 0,07 0,04 0,21 0,27 0,20 0,36 0,54 0,57 0,48 0,47 3,76 4,78 2,77 3,71 0,56* 0,00 0,00 0,0018 0,09 0,08 0,06 0,07 0,41 0,38 0,27 0,29 0,80 0,75 0,54 0,59 3,06 3,11 2,74 2,96 0,00 0,00 0,00 0,0019 0,00 0,00 0,07 0,07 0,32 0,31 0,43 0,41 0,64 0,64 0,66 0,63 2,66 2,51 3,89 2,52 0,00 0,00 0,00 0,00* dato non considerato nelle analisi successiveAnomalie riportate- Il laboratorio 1 ha eliminato il punto di calibrazione S9 per il sistema diquantificazione MON810 per la piastra A;- Il laboratorio 7 ha eseguito le prove con un volume di reazione pari a 20 µlinvece di 25 µl mantenendo le medesime concentrazioni dei reagenti;- Il laboratorio 14 ha eseguito l'export dei dati con una sola cifra decimale;- Il laboratorio 19 ha eliminato un replicato di PCR del punto di calibrazione S9per il sistema di quantificazione MON810 in entrambe le piastre (A e B) e haeliminato il punto S5 della calibrazione del sistema HMG in entrambe lepiastre (A e B).Pagina 8 di 14
Centro di Referenza Nazionale per la Ricerca di OGMReport di validazione mais MON810Efficienza e linearitàTabella 6: Valori di slope, efficienza e R 2 per i sistemi MON810 e HMGMON810Slope Efficienza (%) R 2Lab. n. A B A B A B1 -3,432 -3,709 95,6 86,0 0,996 0,9852 -3,546 -3,592 91,4 89,8 0,996 0,9903 -3,665 -3,562 87,4 90,9 0,993 0,9964 -3,636 -3,586 88,4 90,0 0,977 0,9995 -3,766 -3,596 84,3 89,7 0,999 0,9966 -3,591 -3,618 89,9 89,0 0,983 0,9997 -3,544 -3,633 91,5 88,5 0,997 0,9988 -3,51 -3,418 92,7 96,1 0,999 0,9959 -3,525 -3,667 92,2 87,4 0,997 0,99510 -3,497 -3,527 93,2 92,1 0,990 0,99011 -3,634 -3,57 88,4 90,6 0,988 0,98812 -3,489 -3,526 93,5 92,1 0,997 0,99513 -3,351 -3,391 98,8 97,2 0,993 0,98914 -3,544 -3,248 91,5 103,2 0,998 0,99815 -3,558 -3,593 91,0 89,8 0,998 0,99816 -3,409 -3,403 96,5 96,7 0,993 0,99717 -3,644 -3,52 88,1 92,3 0,983 0,96918 -3,655 -3,385 87,8 97,4 0,990 0,99519 -3,695 -3,851 86,5 81,8 0,995 0,995Media Media Media-3,555 91,3 0,993HMGSlope Efficienza (%) R 2Lab. n. A B A B A B1 -3,375 -3,413 97,8 96,3 0,999 0,9992 -3,494 -3,644 93,3 88,1 0,992 0,9933 -3,408 -3,407 96,5 96,6 0,999 0,9974 -3,314 -3,269 100,3 102,3 0,993 0,9955 -3,77 -3,648 84,2 88,0 0,999 0,9996 -3,314 -3,385 100,3 97,4 0,999 0,9997 -3,485 -3,479 93,6 93,8 0,999 1,0008 -3,444 -3,482 95,1 93,7 0,999 0,9999 -3,43 -3,334 95,7 99,5 0,996 0,99910 -3,444 -3,365 95,1 98,2 0,997 0,99911 -3,464 -3,471 94,4 94,1 0,999 0,99912 -3,421 -3,316 96,0 100,2 0,999 0,99913 -3,373 -3,326 97,9 99,8 1,000 0,99914 -3,465 -3,356 94,4 98,6 0,995 0,99015 -3,427 -3,451 95,8 94,9 0,999 1,00016 -3,389 -3,269 97,3 102,3 0,996 0,99717 -3,604 -3,598 89,4 89,6 0,996 0,99818 -3,394 -3,382 97,1 97,6 0,998 0,99519 -3,429 -3,476 95,7 93,9 0,996 0,996Media Media Media-3,435 95,7 0,997Per tutti i metodi è possibile osservare una buona corrispondenza tra il modello diregressione calcolato e la distribuzione dei dati. In particolare il valore di R 2 èsempre maggiore o uguale al valore limite di accettabilità fissato a 0,98 [AllegatoB]. E' quindi possibile osservare una buona linearità di risposta nell’intervallo dinumero di copie:- HMG: [1000; 5x10 5 ];- MON810: [25; 5x10 4 ];Per quanto riguarda l’efficienza di reazione ricordiamo che il valore delcoefficiente angolare (slope) della retta di calibrazione è direttamente correlatocon l’efficienza in particolare:⎡⎛E (%) = ⎢⎜10⎢⎜⎣⎝1−slope⎞ ⎤⎟ −1⎥× 100⎟⎠ ⎥⎦Il valore di slope medio, e quindi l'efficienza di reazione, è considerato accettabilenel caso in cui sia compreso nell'intervallo [-3,1;-3,6] [Allegato B] corrispondente avalori di efficienza compresi tra 110% e 87%. I valori di slope per i sistemi diquantificazione di MON810 e HMG sono rispettivamente pari a -3,555 (efficienza:91,3%) e -3,435 (efficienza: 95,7%) e sono quindi in accordo con i limiti diaccettabilità.Pagina 9 di 14
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