TRIPLO TESSUTO (FEGATO, RENE, STOMACO) - Simel

QUADRI QUADRI FLUOROSCOPICI FLUOROSCOPICI NELLE NELLE
MALATTIE MALATTIE AUTOIMMUNI AUTOIMMUNI D’’ORGANO
D ORGANO
Brunetta Porcelli
Dipartimento di Medicina Interna,
Scienze Endocrino-Metaboliche Endocrino Metaboliche e
Biochimica
Università Universit degli Studi di Siena
PRINCIPALI SUBSTRATI
UTILIZZATI PER GLI
AUTOANTICORPI ORGANO
SPECIFICI
Triplo tessuto (fegato, rene, stomaco)
Terzo inferiore di esofago scimmia
Altri substrati
ISTOLOGIA DEL FEGATO…..
FEGATO ..
Dotticino biliare
Fessura di
Kiernan
Vena
Arteriola
Dotticino biliare
Lobulo epatico
E REAZIONE FLUORESCENTE
Bassano del Grappa, 7 ottobre 2009
Dotticino biliare
Vena
Vena centrale del lobulo
Trabecole di
Remak
IMMUNOFLUORESCENZA
INDIRETTA
Rappresenta a tutt’oggi un metodo analitico
di fondamentale importanza nella ricerca di
autoanticorpi correlati alla presenza di
patologie autoimmuni d’ organo
TRIPLO TESSUTO
(FEGATO, RENE, STOMACO)
LKS: LIVER-KIDNEY
LIVER KIDNEY-STOMACH
STOMACH
ISTOLOGIA DEL RENE….. RENE ..
E REAZIONE FLUORESCENTE

ISTOLOGIA DELLO STOMACO…..
STOMACO ..
E REAZIONE FLUORESCENTE
ASMA-V
Stomaco Rene
ANTICORPI ANTI-MUSCOLO LISCIO
(ASMA)
ASMA G
Pattern di tipo glomerulare
Stomaco Rene
Autoantigeni: actina,
tubulina, vimentina,
desmina, citocheratine.
Si riscontrano nel 70-
85% delle EAI 1.
La positività ASMA
dovuta alla presenza di
anticorpi diretti verso
la forma filamentosa
dell’actina (F-actina)
sembra essere quella
maggiormente specifica
per EAI.

ASMA T
Stomaco Rene
ANTICORPI ANTI-LKM
Stomaco: le cellule parietali
gastriche risultano negative
Autoantigeni: citocromo
P4502D6/P4502C9/UDPglucorosiltransferasi.
Sono diretti contro i
microsomi del fegato e del
rene. In base all’antigene
bersaglio sono classificati in
tre tipi chiamati anti-
LKM1, 2 e 3.
Gli anti-LKM1, associati
nel 90% dei casi alla EAI 2,
ne rappresentano il
marcatore caratteristico.
Fegato: fluorescenza
intensa, fine e omogenea
degli epatociti
Rene:
fluorescenza non
uniforme ma
marcata solo a
livello dei tubuli
prossimali
ANTICORPI ANTI-CITOSOL
EPATICO TIPO 1 (LC-1)
Autoantigene:
formiminotransferasiciclodeaminasi.
Riscontrati in circa il
50% dei pazienti con
EAI-2.
Nella maggior parte dei
casi sono in genere
associati a LKM1 che
nella maggior parte dei
casi copre la positività
all’ IFI dell’LC-1.

Fegato
Rene
Fegato:
fluorescenza più
intensa nella zona
periportale e meno
intensa nella zona
centro-lobulare.
Il rene e lo
stomaco sono
negativi.
ANTICORPI ANTI-MITOCONDRIO
(AMA)
Autoantigeni: localizzati sulla
membrana mitocondriale,
classificati in diversi tipi
indicati con le sigle da M1 a
M9. Solo gli anticorpi anti-
M2, anti-M4, anti-M8 e anti-
M9 sono specifici per PBC e
tra questi solo gli anti-M2
hanno rilevanza diagnostica
essendo presenti ad alto titolo
in quasi tutti i pazienti.
Fegato:
Fluorescenza di
aspetto granulare
A B
ANTICORPI ANTI-
LKM E ANTI-LC1
Gli anticorpi anti-
LKM mostrano una
fluorescenza intensa,
fine e omogenea
degli epatociti (A).
Gli anticorpi anti-
LC1 mostrano una
fluorescenza intensa
nella zona
periportale (B).
La zona centrolobulare
è
scarsamente o per
nulla colorata.
Rene: fluorescenza
citoplasmatica di aspetto
granulare interessante
tutte le cellule tubulari
ma più intensa a livello
dell’epitelio dei tubuli
renali distali (più piccoli e
di forma regolare rispetto
a quelli prossimali).
Stomaco: fluorescenza
diffusa interessante sia le
cellule parietali che le
principali
ANTICORPI ANTI -
MITOCONDRI E ANTI- LKM
AMA: fluorescenza citoplasmatica
di aspetto granulare interessante
tutte le cellule tubulari ma più
intensa a livello dell’epitelio dei
tubuli renali distali (A).
LKM: fluorescenza non uniforme
ma marcata solo a livello dei tubuli
prossimali (B).
Solo gli AMA sono in grado di
colorare anche le cellule parietali e
principali dello stomaco. (A).

ANTICORPI ANTI-CELLULE
PARIETALI GASTRICHE (PCA)
Autoantigene: H + /K + -ATPasi
gastrica presente sulla
membrana delle cellule
parietali gastriche.
La presenza di PCA è
altamente indicativa di
anemia perniciosa.
Sono inoltre rilevati in circa il
90% dei pazienti affetti da
gastrite cronica autoimmune
ANTICORPI ANTI-MITOCONDRI E ANTI-PCA
AMA: fluorescenza diffusa interessante
sia le cellule parietali che le principali
PCA: omogenea e diffusa
colorazione del citoplasma
solo delle cellule parietali
ANTICORPI ANTI-ENDOMISIO
(EmA)
Autoantigene:
l’enzima
transglutaminasi.
Sono anticorpi
estremamente
sensibili e specifici
(95-100%) per la
malattia celiaca.
TERZO INFERIORE DI
ESOFAGO SCIMMIA
ISTOLOGIA DELL’ESOFAGO
DELL ESOFAGO
Stomaco:
omogenea e
diffusa
colorazione del
citoplasma delle
cellule parietali.
I nuclei e le cellule
principali sono
completamente
negativi.
Il rene il fegato
sono negativi.
Pattern reticolare a nido d’ape identificabile nella
muscolaris mucosae. Ab: IgA

ALTRI SUBSTRATI
Pancreas (anticorpi anti-cellule insulari
pancreatiche, ICA)
Surrene (anticorpi anti-corticale del surrene, ACA)
Ipofisi di scimmia o di babbuino (anticorpi antiipofisi,
APA)
Esofago e vescica di scimmia (anticorpi anti-cute)
Nervo di scimmia (anticorpi anti-MAG)
Cellule Hep-2 (AMA, anti-gp210, anti-Sp100, anticentromero,
anti-F actina )
Cellule intestinali di ratto/fibroblasti (anti-F-actina)
VSM47 (F-actina)
HEK-239 (anticorpi anti-acquaporina-4, AQP-4)
Neutrofili (P-ANCA)
Zona Reticolata
Zona
Fascicolata
Zona Midollare
Zona
Glomerulare
Substrato:
Pancreas di
scimmia
Ab: Ab IgAGM
Pattern:
Fluorescenza
da omogenea a
granulare nel
citoplasma di
tutte le cellule
delle isole di
Langerhans.
Pattern:
Fluorescenza da granulare
a omogenea nel citoplasma
delle cellule di tutti e tre
gli strati della corteccia del
surrene
ANTICORPI ANTI-CELLULE
INSULARI PANCREATICHE
(ICA) Autoantigeni:
componenti
citoplasmatiche
delle isole di
ANTICORPI ANTI-
CORTICALE DEL
SURRENE (ACA)
Langerhans.
Presenti nell’80% nell 80%
dei pazienti con
diabete di tipo 1
Marker
predittivo.
Alto titolo =
Elevato rischio di
malattia
Autoantigene
principale: 21idrossilasi
(21-OH).
Specificità elevata
per la diagnosi di
MA autoimmune.
Marker predittivo.
Substrato: Surrene di scimmia Ab: Ab IgAGM ANTICORPI ANTI-
GLICORPOTEINA MIELINICA
(ANTI-MAG)
Antigeni: proteine
della membrana
della guaina
mielinica.
Sono associati
prevalentemente a
neuropatie
demielinizzanti,
croniche, lentamente
progressive.

Substrato:
Nervo Suralis di scimmia
Pattern:
Fluorescenza striata
Substrato:cellule
embrionali di aorta
di ratto VSM47
Ab: Ab IgG
ANTICORPI ANTI-F ACTINA
ASMA rappresentano un gruppo
eterogeneo di anticorpi che possono
riconoscere diversi antigeni nel
citoscheletro: actina, tubulina,
vimentina, desmina, citocheratine.
La positività ASMA dovuta alla
presenza di anticorpi diretti verso
la forma filamentosa dell’actina (Factina)
sembra essere quella
maggiormente specifica per EAI.