B ProbeTec ET Legionella pneumophila (LP) Amplified DNA ... - BD

Instrument, utstyr og forbruksvarer: BD ProbeTec ET Instrument and Instrument Plate (instrument og
instrumentbrett), BD ProbeTec ET Lysing Heater (lysator), BD ProbeTec ET Priming & Warming Heater,
BD ProbeTec ET Pipettor (pipette), stativ og Power Supply (strømforsyning), 2 mL stativ for prøverør,
BD ProbeTec ET Accessories Kit (tilbehørskit), BD ProbeTec ET Pipette Tips (pipettespisser).
Nødvendige materialer som ikke følger med: Klasse II biologisk sikkerhetskabinett (BSC), vortexmixer,
-20 °C og/eller -70 °C (eller kaldere) stabil ikke-temperaturs-syklusfryser, mikrosentrifuge som klarer
16 000 x g, vannbad, digitalt termometer, vannbadsstativ med påskrudd lokk, annet passende
stativ for prøverør, QIAGEN QIAamp DNA Stool Mini Kits, 96 – 100 % etanol, BBL CultureSwab EZ
Swabs, BD ProbeTec ET 2 mL prøverør og lokk, engangshansker, alkoholbestandige markeringstusjer,
mikropipeetter som kan levere volum på 25 – 1 000 µL, aerosolresistente pipettespisser, destillert vann, L.
pneumophila ATCC 33152 (Philadelphia-1), bovint albumin (fraksjon V) 0,2 % (w/v) i 0,85 % (w/v) saltvann,
1 % (v/v) natriumhypokloritt med Alconox.*
*Løs opp 7,5 g Alconox i 1 L 1 % (v/v) natriumhypoklorittoppløsning og bland. Lages nytt daglig.
Oppbevarings- og håndteringsanvisninger: BD ProbeTec ET LP-reagenspakker kan oppbevares
ved 2 − 33 °C. Uåpnede reagenspakker skal ikke brukes etter utløpsdato. Når en pose er åpnet, er
mikrobrønnene stabile i 12 uker hvis de er ordentlig forseglet eller til utløpsdatoen, ettersom hva som
kommer først. Skal ikke fryses.
BD ProbeTec ET Respiratory and Media Diluent and Control Kit (CF/LP/MP) kan oppbevares ved 2 − 33 °C.
Reagensene skal ikke brukes etter utløpsdato. Skal ikke fryses.
Advarsler og forsiktighetsregler:
Til in vitro-diagnostisk bruk.
1. Patogene mikroorganismer, blant annet hepatittvirus og humant immunsviktvirus, kan være til stede
i kliniske prøver. ”Standard forsiktighetsregler” 4-7 og institusjonelle retningslinjer skal følges ved
håndtering av alt materiale kontaminert med blod og andre kroppsvæsker.
2. Håndtering og behandling av prøver fra nedre luftveier forut for inkubering ved 70 °C, skal foretas i et
klasse II biologisk sikkerhetskabinett.
3. Under trinnet med inkubering ved 70 °C, bruk et vannbadsstativ med skrulokk for å sørge for ekstra
isolering av potensielt smittefarlige prøver fra nedre luftveier.
4. BD ProbeTec ET Respiratory and Media Diluent inneholder dimetylsvoveloksid (DMSO). DMSO er
skadelig ved innånding, hudkontakt eller svelging. Unngå kontakt med øynene, og bruk alltid hansker
ved håndtering. Dersom det kommer i kontakt med øynene, skyllumiddelbart med rikelige mengder
vann i åpne øyne, og søk medisinsk hjelp hvis symptomene vedvarer. Dersom det kommer i kontakt
med huden, vask umiddelbart med rikelige mengder såpe og vann.
5. Se håndboken for QIAamp DNA Stool Mini Kit for sikkerhetsinformasjon om QIAGEN-reagenser
som brukes i denne prosedyren. Ikke legg QIAGEN-reagenser i blekemiddeloppløsninger. Utsett ikke
QIAGEN-reagenser for blekemidler.
6. Det har forekommet rapporter som antyder at QIAGEN DNA-ekstraksjonskit ikke er egnet for
Legionella-PCR (polymerasekjedereaksjon) på grunn av muligheten for at reagensene er kontaminert
med Legionella-DNA. 8,9 Selv om sannsynligheten for dette er lav, og andre Legionella-arter enn
L. pneumophila ble identifisert i disse studiene, skal brukere kontrollere ytelsen til hver ny levering av
QIAGEN-reagenser før de brukes på pasientprøver.
7. Selv om egne arbeidsområder ikke er nødvendig fordi BD ProbeTec ETs design reduserer muligheten
for ampliconkontaminering i testomgivelsene, er det nødvendig med andre forholdsregler for å
kontrollere kontamineringen, særlig for å hindre kontaminering under prosessen.
8. Reagensposer som inneholder ubrukte priming-brønner og amplifiseringsbrønner MÅ forsegles godt
igjen etter åpning. Kontroller at en tørkepose er til stede før reagensposen forsegles på nytt.
9. Platen som inneholder amplifiseringsbrønner, MÅ forsegles ordentlig med den selvklebende
forseglingen før platen flyttes fra BD ProbeTec ET Priming & Warming Heater til BD ProbeTec
ET Instrument. Forseglingen sørger for en lukket reaksjon for amplifiseringen og påvisning,
og er nødvendig for å unngå kontaminering av instrumentet og arbeidsområdet med
amplifiseringsprodukter. Forseglingen skal ikke på noe tidspunkt fjernes fra mikrobrønnene.
10. Priming-brønner med gjenværende væske (etter overføring av væske fra priming-brønnene til
amplifiseringsbrønnene) utgjør en kilde til målkontaminering. Forsegl priming-brønnene godt med
den selvklebende platen før de kastes.
11. For å forhindrekontaminering av arbeidsområdet med amplifiseringsprodukter, bruk avfallsposene
som leveres i reagenspakken ved kasting av testede amplifiseringsbrønner. Pass på at posene er godt
lukket før de kastes.
12. SKIFT HANSKER ved spesifiserte trinn under behandling av prøvene og analyseprosedyren for å unngå
krysskontaminering av prøver. Hvis hansker kommer i kontakt med prøven, skal hanskene straks skiftes
for å hindre kontaminering av andre prøver.
13. I tilfelle kontaminering av arbeidsområdet eller utstyret med prøver eller kontroller, rengjør
det kontaminerte området grundig med 1 % (v/v) natriumhypokloritt med Alconox og skyll
grundig med vann. La overflaten tørke fullstendig før videre testing. Før fjerning av noen
QIAGEN-prøveprosessreagenser, tørk av alle affiserte områder med vann før bruk av 1 % (v/v)
natriumhypoklorittoppløsning som inneholder Alconox.
14. Bruk bare BD ProbeTec ET Pipettor og BD ProbeTec ET Pipette-spisser til overføring av
behandlede prøver til priming-brønnene og overføring av prøvene fra priming-brønnene til
amplifiseringsbrønnene.
2