Morfologia e estrutura de fungos patogênicos

Morfologia e estrutura de fungos
patogênicos
Os fungos são organismos formados por células eucarióticas e amplamente
distribuídos nos mais diversos ambientes. Alguns fazem parte da microbiota do ser
humano e outros são largamente utilizados em processos industriais, mas, em
algumas situações, podem gerar patologias em seres humanos sendo freqüente a
ocorrência de infecções graves em indivíduos imunocomprometidos
Diferenciando as células fúngicas de células bacterianas e vegetais, ele possui uma
parede celular constituída de quitina, um polímero de N-acetilglicosamina. Além
disso, encontramos na parede fúngica polissacarídeos como o Beta-glicano
(polímero de D-glicose) e que é sítio de ação de algumas drogas antifúngicas.
Outra característica, muito importante para o mecanismo de conhecidos
antifúngicos é a presença de ergosterol na membrana plasmática (em lugar do
colesterol presente nas células animais). Ocorre, porém, que embora o ergosterol
seja distinto do colesterol suas moléculas possuem grande semelhança estrutural
de modo que as drogas que agem sobre o ergosterol do fungo possuem também
alguma ação sobre o colesterol de células animais o que culmina nos muitos efeitos
extremamente desagradáveis que o tratamento com certos antifúngicos sistêmicos
podem desencadear.
Quanto a sua fisiologia, as células fúngicas são aeróbias ou aeróbias facultativas,
mas não anaeróbias. Quanto à temperatura ideal de crescimento, ela varia muito de
um fungo a outro, podendo determinar o local de infecção de cada espécie.
Em sua reprodução os fungos realizam um
ciclo sexuado e um ciclo assexuado. O mais
comum é que o ciclo sexuado ocorra no
ambiente e o assexuado no hospedeiro. No
período de reprodução assexuada podemos
observar uma curva característica em que o
crescimento do fungo é dividido em uma
fase inicial adaptativa (lag), em que não há
aumento do número de células visto que o
fungo ainda está “se acostumando” com
ambiente, uma fase exponencial em que ocorre o efetivo aumento do número de

fungos, uma fase estacionária em que a morte e o surgimento de novos
microorganismos é equilibrada e, por fim, um período de declínio quando em que a
resistência do ambiente (no caso do organismo) se mostra maior que a capacidade
de resposta do fungo.
Os fungos podem apresentar-se na forma de leveduras (células únicas que se
multiplicam por brotamento) ou na forma de fungos filamentosos (que crescem por
meio de hifas, filamentos longos que podem ou não ser septados).
Quando observamos culturas de leveduras macroscopicamente elas podem assumir
diversas características como formar colônias brilhantes, mucóides, lisas,
cerebiformes (lembram o formato de certos tipos de coral), cremosas ou mesmo
apresentar variações de cores. A análise dessas variações permite o diagnóstico de
algumas leveduras em específico (quando isso não é possível são utilizadas outras
técnicas químicas ou de microscopia). Vale lembrar que o tempo de cultura, quando
falamos de fungos, pode ser muito superior ao tempo de cultura de bactérias. A
reprodução das leveduras ocorre por produção de brotamentos. Quando estão em
meio líquido pode haver formação simultânea de duas novas leveduras a partir de
uma inicial, processo denominado de fissão binária.
Quando as leveduras encontram-se em ambientes mais hostis pode haver formação
de diversos brotamento que, no entanto, não se separam da levedura inicial. Diz-se,
então, que ocorreu a formação de uma pseudo-hifa. Entre as pseudo-hifas podemos
ter a formação de clamidoconídeos (esporos). Algumas vezes a observação da
forma filamentosa da levedura é essencial para seu diagnóstico. Quando isso
ocorre costuma-se cultivar leveduras em Agar-fubá (meio pobre) de modo que
filamentem.
Um teste rápido pode ser realizado quando se quer identificar se um fungo Candida
é albicans ou não-albicans, para isso os fungos são colocados em soro animal e caso
haja formação de uma estrutura conhecida como tubo germinativo trata-se de uma
Candida albicans. Esse teste é rápido (2h). Outros meios induzem a produção de
pigmentos distintos de acordo com a espécie de Candida, facilitando sua
identificação. Para leveduras há ainda diversos testes bioquímicos que podem ser
realizados em máquinas automáticas, sendo o resultado conseguido em cerca de
24h.

Algumas espécies fúngicas podem possuir cápsula.
Um dos poucos exemplos é o Cryptoccocus spp. A
cápsula possui constituição mucopolissacarídica e,
como nas bactérias, tem a função de proteção
contra o sistema imune do indivíduo. O
Cryptococcus é um possível causador de meningite
(especialmente em pacientes imunocomprometidos
devido ao HIV). Sua identificação pode ocorrer por
análise de amostra de líquor corada com tinta da
china (nanquim).Nesse caso se observa um halo
claro ao redor da célula fúngica. Embora não seja
tão bom quanto o nanquim, a coloração Gram
também permite a visualização da cápsula. Em
cultura fungos capsulados apresentam aparência
mucóide. Como alguns Cryptococcus podem
apresentar cápsula mais delgada pode ser
necessário o uso de testes bioquímicos como o
teste de urease. Uma enzima produzida pelo
Cryptoccocus, a fenol-oxidase é importante para a patogenicidade do fungo pois
inibe a oxidação do microorganismo durante a infecção de macrófagos. Além disso
essa enzima pode ser usada para identificação do Cryptococcus pois em meios
específicos (meio GACA – feito com alpiste) contendo ácido caféico ela estimula a
produção de melanina, havendo formação de colônias marrons (essa coloração só
aparece em meios especiais, mas não é natural das colônias de Cryptococcus).
Os fungos filamentosos, também conhecidos como bolores ou mofos, formam as
hifas propriamente ditas. Da hifa normalmente se projeta uma estrutura, o
conidióforo, que dá origem a diversos conídeos (esporos). A observação dessas
estruturas é essencial para identificação dos diversos tipos de fungos. Ocorre,
porém, que fungos de pacientes que já iniciaram tratamento só produzem hifas de
modo que para a identificação do agente é essencial que ele seja coletado antes do
início do tratamento. A liberação de esporos facilita a transmissão do fungo. A um
conjunto de hifas se dá o nome de micélio. O micélio não é considerado um tecido
verdadeiro. Com exceção de alguns fungos como os Zigomicetos as hifas são
septadas.
Fungos filamentosos que naturalmente produzem pigmento marrom são chamados
fungos demáceos (notar que o Cryptococcus não é dermáceo, pois só produz
pigmento em determinado meio e não é filamentoso) enquanto que os demais são

chamados de fungos hialinos.
As estruturas de reprodução dos fungos filamentosos são muito variadas. Fungos
com hifas não septadas, por exemplo, guardam esporos dentro de uma estrutura
chamada esporângio.
Para identificação dos fungos filamentosos podemos utilizar características
macroscópicas da colônia (cotonosa, cerebróide, etc), análise direta do fungo ao
microscópio ou microcultivo. O microcultivo consiste em colocar o fungo em
círculos de Agar batata que é, então, coberto com uma lamínula. O fungo cresce na
lamínula que é colada em outra lâmina.
Não há muitos testes químicos disponíveis para identificação de fungos
filamentosos.
Uma outra técnica clássica que se usa para diferenciar alguns fungos é a sua
capacidade de perfurar fios de cabelo.
Técnicas mais avançadas de seqüenciamento podem ser utilizadas, mas seu uso aina
é muito restrito.
Por fim, é importante comentar que alguns fungos são dimórficos, apresentando
estrutura filamentosa à temperatura ambiente (25 o C) e estrutura de levedura no
hospedeiro (37 o C). Não há, nestes casos, transformação das células já existentes,
mas as novas células que nascem o fazem no novo formato (ex: Paracoccidioides
brasiliensis).