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Características Gerais dos Vírus - Unirio

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CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

<strong>Características</strong> <strong>Gerais</strong> <strong>dos</strong> <strong>Vírus</strong><br />

Dra. Carmen Saramago


1- HISTÓRICO<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

1886 – Adolf Mayer Doença do Mosaico do Tabaco (TMD) :<br />

2<br />

• era transmissível de uma planta doente para uma saudável;<br />

• não era isolado “in vitro” pela técnicas habituais;<br />

1892 – Dmitri Iwanowski Agente do TMD era filtrável;<br />

1932 – Ernest Ruska Inventou o Microscópio Eletrônico;<br />

1935 – Wendell Stanley purificou e descreveu as propriedades químicas do<br />

<strong>Vírus</strong> do TMD (facilitou visualização ao microscópio eletrônico)<br />

TMD


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

2- DEFINIÇÃO São agentes infecciosos com características próprias<br />

3<br />

CONSTITUIÇÃO SIMPLES:<br />

Material genético - DNA ou RNA<br />

Capsídeo proteico<br />

Envelope lipídico (alguns)<br />

<strong>Vírus</strong> Envelopa<strong>dos</strong><br />

<strong>Vírus</strong> Nus


TAMANHO :<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

Dimensões, em geral, de 20 a 1000 nm<br />

• Passam por filtros que retêm bactérias;<br />

• Não são visualiza<strong>dos</strong><br />

ao Microscópio Ótico;<br />

4<br />

nm = nanômetro = 10 -9 do metro<br />

µm = micrômetro = 10 -6 do metro<br />

mm = milímetro = 10 -3 do metro<br />

3 µm


5<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS


CRESCIMENTO :<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

São Parasitos Intracelulares Obrigatórios;<br />

• Não possuem metabolismo próprio;<br />

6<br />

• Só crescem dentro de célula viva;<br />

• Não são isola<strong>dos</strong> “in vitro” pelas<br />

técnicas de cultura habituais;<br />

• Não possuem enzimas relacionadas à síntese de proteínas ou de energia;


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

VIRION Partícula viral completa


8<br />

<strong>Vírus</strong> Nus<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ESTRUTURA DA PARTÍCULA VIRAL:<br />

<strong>Vírus</strong> Envelopa<strong>dos</strong>


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

CORE : Ácido nucleico DNA ou RNA<br />

CAPSÍDEO : Estrutura rígida formada por<br />

unidades protéicas (capsômeros)<br />

Funções - Proteger o material genético<br />

Dar forma ao vírus<br />

Participar da ligação com a célula hospedeira


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ENVELOPE: Estrutura membranosa formada de lipídeos e proteínas<br />

LIPÍDEOS – origina<strong>dos</strong> da célula<br />

hospedeira<br />

da matriz – fazem a ligação<br />

do capsídeo com o envelope<br />

glicoproteínas – projeções<br />

PROTEÍNAS na superfície externa<br />

Ex: Hemaglutinina<br />

Neuraminidase<br />

Hemolisina


Enzima<br />

Envelope<br />

Capsídeo<br />

Ácido<br />

Nucléico<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

PROJEÇÕES DO ENVELOPE VIRAL:<br />

<strong>Vírus</strong> da Gripe<br />

Ligação a<br />

Receptores<br />

11


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS


13<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ORIGEM DO ENVELOPE VIRAL:<br />

Saída da Partícula Viral<br />

da Célula Hospedeira<br />

por Brotamento


14<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

3- MORFOLOGIA DA PATÍCULA VIRAL:<br />

Poliédrica Helicoidal<br />

Adenovírus TMD<br />

Complexa


15<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

MORFOLOGIA DA PATÍCULA VIRAL:<br />

Poliédrica Envelopada Helicoidal Envelopada<br />

<strong>Vírus</strong> Varicela-Zoster<br />

<strong>Vírus</strong> da Raiva


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

4- MULTIPLICAÇÃO DOS VÍRUS no interior de uma célula viva<br />

ESPECIFICIDADE<br />

Célula Animal (Homem e outros animais)<br />

Célula Vegetal<br />

TMD<br />

Célula Bacteriana<br />

E. coli + Fago T4<br />

16


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

INFECÇÃO VIRAL<br />

Ciclo lítico Ciclo lisogênico


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

Ciclo lítico<br />

Ciclo lisogênico


ETAPAS DA REPLICAÇÃO VIRAL<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

1- Reconhecimento – especificidade<br />

2- Adsorção – estruturas de fixação do vírus<br />

presentes no capsídeo ou envelope<br />

ligam-se a receptores da célula alvo<br />

3- Penetração – por pinocitose ou injeção do AN<br />

4- Desnudamento – destruição do envoltório do AN<br />

5- Transcrição inicial<br />

Tradução inicial – síntese das enzimas<br />

necessárias à replicação do AN viral.<br />

Ex: polimerases<br />

- síntese de proteínas que paralisam o<br />

metabolismo da célula hospedeira<br />

6- Replicação do ácido nucléico viral<br />

7- Transcrição posterior<br />

Tradução posterior – síntese <strong>dos</strong> componentes<br />

estruturais da partícula viral<br />

8 - Maturação<br />

9 - Liberação – por lise da célula ou por<br />

brotamento (vírus envelopa<strong>dos</strong>)


20<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

5- ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:<br />

Inoculação em ovos embriona<strong>dos</strong> de galinha com 3 – 5 dias


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

Evidenciação do crescimento do vírus em ovo embrionado:<br />

“Pocks”<br />

Focos Hemorrágicos<br />

Morte do embrião<br />

Sorologia


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

Preparo da vacina contra Febre Amarela em ovos embriona<strong>dos</strong><br />

FioCruz - RJ


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:<br />

Inoculação em Cultura de Células<br />

Frasco de Cultura de Células<br />

23<br />

Células com grande capacidade de multiplicação<br />

Microscópio Invertido Efeito Citopatogênico


Células<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

de linhagem primária embrionárias<br />

Ex: Fibroblastos<br />

de linhagem contínua tumorais<br />

Ex: HeLa<br />

Hep 2<br />

Vero<br />

Evidenciação do crescimento do vírus em cultura de células:<br />

CPE (Efeito Citopatogênico) Lise<br />

Formação de sincício<br />

Arredondamento<br />

Corpúsculos de inclusão


25<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:<br />

Em Cultura de Células<br />

Cultura de Fibroblastos<br />

Cultura de Células Vero<br />

Poliovirus tipo 1 Herpes Simplex Virus


26<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:<br />

Em animais de laboratório :<br />

Camundongo Recém-Nascido (Baby) Primatas<br />

Evidenciação do crescimento do vírus em animais:<br />

Paralisia flácida ou espástica<br />

Morte


VÍRUS VÍRUS DNA DNA<br />

DNA<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

Herpes genital<br />

6- CLASSIFICAÇÃO DOS VÍRUS: Herpes labial<br />

• POXVIRIDAE - Varíola, Vacínia<br />

Molusco contagioso<br />

Zoster<br />

• HERPESVIRIDAE - Herpes simples 1, 2<br />

Catapora ou Varicela<br />

Herpesvírus humano 3 Varicela-zoster<br />

• HEPADNAVIRIDAE - Hepatite B<br />

• ADENOVIRIDAE - Adenovírus<br />

• PAPILLOMAVIRIDAE - HPV<br />

Herpesvírus humano 4 Epstein-Barr<br />

Herpesvírus humano 5 Citomegalovírus<br />

Herpesvírus humano 8 Sarcoma de Kaposi


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

VÍRUS VÍRUS RNA RNA<br />

RNA<br />

•REOVIRIDAE - Rotavírus<br />

•TOGAVIRIDAE - Rubéola<br />

•FLAVIVIRIDAE - Febre amarela, dengue<br />

Hepatite C<br />

•PARAMYXOVIRIDAE - Parainfluenza<br />

Caxumba<br />

Sarampo<br />

Rubéola Congênita<br />

Respiratório Sincicial<br />

catarata, catarata,<br />

•ORTHOMYXOVIRIDAE - Influenza A, B, C<br />

glaucoma,<br />

•FILOVIRIDAE - Ebola<br />

Rubéola surdez,cardiopatia, Pós-Natal<br />

microcefalia, retardo mental.<br />

•RHABDOVIRIDAE - Raiva<br />

•BUNYAVIRIDAE - Hantavirus<br />

Caxumba<br />

•RETROVIRIDAE - HTLV-1, HTLV-2, HIV<br />

•PICORNAVIRIDAE - Enterovirus<br />

Sarampo<br />

Rhinovirus<br />

Hepatovirus Hepatite A<br />

•DELTA – Hepatite Delta<br />

•NOROVIRIDAE – Calicivírus ( Hepatite E )<br />

<strong>Vírus</strong> Norwalk


7- PATOGENICIDADE:<br />

• <strong>Vírus</strong> invade a célula<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

• <strong>Vírus</strong> causa alterações funcionais e estruturais<br />

Inclusões<br />

Lise Sincício


8- IMUNIDADE:<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

• HUMORAL Não desempenha papel na interrupção da infecção,<br />

mas é importante na prevenção de re-infecção<br />

• CELULAR Importante na interrupção da infecção.<br />

Célula infectada é reconhecida e destruída<br />

• INTERFERON<br />

Células NK<br />

Citotoxicidade mediada por células Ac dependentes:<br />

fagócitos, células NK<br />

Linfócitos T citotóxicos (TDC8)


INTERFERONS<br />

INTERFERONS<br />

INTERFERONS<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

São glicoproteínas de baixo PM, secretadas pelas células eucariotas de<br />

animais vertebra<strong>dos</strong>, em resposta a diversos estímulos, dentre eles as<br />

infecções virais.<br />

TIPOS DE INTERFERONS<br />

TIPO 1<br />

α - produzi<strong>dos</strong> por células epiteliais e leucócitos em resposta a infecções<br />

virais, bacterianas e por protozoários<br />

β - produzi<strong>dos</strong> por fibroblastos<br />

TIPO 2<br />

γ - produzi<strong>dos</strong> por linfócitos TH1 e células “ natural-killer” em resposta a<br />

antígenos, mitógenos e ativadores de células T


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

ATIVIDADE DOS INTERFERONS<br />

• ATIVIDADE ANTIVIRAL principalmente α e β<br />

Bloqueio de diversas etapas da replicação viral - estado “anti-viral”<br />

• ATIVIDADE IMUNOMODULADORA principalmente γ<br />

Ativação generalizada do sistema imune


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

Estado<br />

“anti-viral”<br />

Produção de<br />

Moléculas Efetoras<br />

Anti-Virais<br />

(MEAVs)<br />

Duração<br />

de 2 – 3 dias


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

USO TERAPÊUTICO INTERFERON α<br />

• Atividade só em células da mesma espécie<br />

• Produzido em E. coli através de DNA recombinante<br />

• Contra-indicado para indivíduos < 12 anos e > 65 anos<br />

• Não pode ser administrado por via oral<br />

APLICAÇÕES<br />

•Hepatite B, C e Delta<br />

•AIDS<br />

•HPV<br />

•Herpes simples ( uso tópico )<br />

•Viroses respiratórias ( spray nasal ) – uso profilático<br />

EFEITOS INDESEJADOS Febre, calafrios, cefaléia, mialgia, artralgia,<br />

náuseas, vômitos, diarréia


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

9- DIAGNÓSTICO DAS VIROSES:<br />

• Microscopia eletrônica – só em laboratórios de pesquisa<br />

• Citologia Evidenciação de CPE na amostra de tecido<br />

Ex: Sincícios - HSV, VZV<br />

Corpúsculos de inclusão - Raiva, CMV<br />

• Isolamento e Cultivo para identificação do vírus<br />

• Detecção de material genético viral<br />

Ex: Hibridização in situ com sondas de DNA – CMV, HPV<br />

Dot blot – detecção de DNA viral em solução<br />

Southern blot – caracterização de DNA viral após clivagem por<br />

endonuclease de restrição<br />

Northern blot - caracterização de RNA viral após clivagem por<br />

endonuclease de restrição<br />

PCR - detecção de vírus DNA<br />

RT-PCR - detecção de vírus RNA<br />

• Sorologia Detecção de anticorpos IgM contra o vírus<br />

TÉCNICAS : Imunofluorescência, Elisa, Western blot


10- AGENTES ANTIVIRAIS :<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

• Amantadina - Inibe a penetração e desnudamento do vírus<br />

• Aciclovir (ZOVIRAX) - Inibe DNA polimerase<br />

• Penciclovir<br />

• Valaciclovir<br />

• Zidovudina (AZT, RETROVIR) - Inibe a transcriptase reversa<br />

• Didanosine (DDI) - Inibe a transcriptase reversa<br />

• Idoxuridine (HERPESINE) - Inibe replicação de vírus DNA<br />

• Ribavirina (VIRAZOLE) - Interfere na síntese de RNA m viral<br />

• Saquinavir (INVIRASE) - Inibe a protease<br />

• Lamivudina (EPIVIR) - Inibe a transcriptase reversa<br />

• Oseltamivir - Inibe neuraminidase do vírus Influenza<br />

• Interferon α (Intron A) - Inibe síntese de proteínas virais


TARV<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

INIBIDORES DA TRANSCRIPTASE REVERSA<br />

⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOSÍDEOS : Zidovudina, Didanosina, Lamivudina,<br />

Estavudina, Abacavir<br />

⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOTÍDEOS : Tenofovir<br />

⇒ NÃO-ANÁLOGOS DE NUCLEOSÍDEOS : Efavirenz, Nevirapina<br />

INIBIDORES DA PROTEASE<br />

Amprenavir, Indinavir, Atazanavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir,<br />

Norvirapina


OUTROS USOS<br />

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

⇒LAMIVUDINA : Hepatite B<br />

⇒ RIBAVIRINA : Hepatite C<br />

Viroses respiratórias (Influenza, Respiratório sincicial)<br />

Aerosol<br />

⇒AMANTADINA, RIMANTADINA : Influenza A<br />

⇒ACICLOVIR : Herpes simples<br />

Herpes zoster<br />

⇒INTERFERON α : Hepatite B, C, Delta<br />

AIDS


CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS<br />

FIM

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