Jo Yoshikuni Osugue

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SUMÁRIO Lista de tabelas............................................................................................xii Lista de gráficos.......................................................................................... xiii Lista de figuras ...........................................................................................xiv Lista de abreviaturas e siglas ......................................................................xv Resumo ..................................................................................................... xvii Abstract .................................................................................................... xviii 1 - Introdução....................................................................................................... 1 2 - Revisão da literatura...................................................................................... 2 2.1 - Considerações gerais sobre a hanseníase .......................................... 2 2.2 - Diagnóstico clínico e histopatológico ................................................... 8 2.3 - Métodos complementares de diagnóstico ......................................... 13 2.4 - Reação em cadeia pela polimerase (PCR)......................................... 17 3 - Objetivos .................................................................................................24 3.1 - Geral ..............................................................................................24 3.2 - Específicos ......................................................................................24 4 - Material e métodos ...................................................................................25 4.1 - Material............................................................................................... 25 4.2 - Métodos............................................................................................... 26 4.2.1 - Preparo dos controles para emblocamento em parafina .................. 26 4.2.2 - Preparo dos materiais e dos controles (CP e CN) para a PCR ........ 27 4.2.3 -,Quantificação dos ácidos nucléicos................................................... 29 4.2.4-Teste de inibidores dos controles ....................................................... 29 4.2.5 - PCR para amplificação do gênero Mycobacterium......................... 30 4.2.6 - Teste de sensibilidade......................................................................31 4.2.7 - Teste de inibidores ........................................................................... 34 4.2.8 - Análise Estatística ............................................................................ 35 5 - Resultados .................................................................................................36 5.1 - Resultado do exame histopatológico em HE e Wade: perfil da amostra ...............................................................................................37 5.2 - Resultado Global da PCR....................................................................41 5.3 - Resultado comparativo entre o método da PCR e Wade ....................42
5.4 - Documentação fotográfica dos produtos amplificados.......................51 5.5 - Resultado da sensibilidade da PCR ................................................... 55 5.6 - Resultado do teste de inibidores ........................................................ 56 6 - Discussão..................................................................................................... 58 7 - Conclusões................................................................................................... 68 8 - Referências bibliográficas .......................................................................... 69 9 - Anexos.......................................................................................................... 78 9. 1 - Materiais do SAP-UFF/Diagnóstico histopatológico em HE e Wade.. 79 9. 2 - Característica dos iniciadores " β-actina ............................................ 84 9. 3 - Protocolo de Plikaytis, 1990 ............................................................... 84 9. 4 - Protocolo de Richter, 1994 e 1995.................................................... 85 9. 5 - Protocolo de Cook, 1994...................................................................86 9. 6 - Modificações dos protocolos .............................................................87 9. 7 - Análise comparativa entre os resultados de Wade e PCR.................89 9. 8 - Materiais de consumo .......................................................................92 9. 9 - Equipamentos ....................................................................................93 9.10 - Soluções de uso................................................................................93
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