Dissertação em PDF - departamento de engenharia florestal - ufpr ...

líquidos, apesar de não conterem agentes solidificantes, necessitam de constante
agitação, o que pode se tornar uma desvantagem frente às demais consistências
conhecidas.
Durante anos, o meio desenvolvido por White foi utilizado para a cultura de
tecidos de diversas espécies (CALDAS et al., 1998). Esse meio apresenta em sua
constituição baixos níveis de oxigênio e potássio, sendo ainda hoje utilizada em
situações onde se necessita baixa concentração de sais (GUERRA; NODARI, 2006).
A partir de testes com o meio de White com suplementação de folhas de
fumo, surgiu o meio de cultura de Murashige e Skoog, também conhecido como
meio MS (CALDAS et al., 2006). Este meio apresenta altos níveis de nitrato,
potássio e amônio (GUERRA; NODARI, 2006). Outro meio de cultura muito
conhecido é o de Gamborg, também chamado de meio B5, que contém baixas
quantidades de sais minerais (CALDAS et al., 1998).
A escolha do meio de cultura depende da espécie em questão e do propósito
da cultura. O meio de cultura MS, juntamente com o meio B5, é utilizado na cultura
de tecidos da maioria das espécies (CALDAS et al., 1998). Modificações e diluições
do meio MS vêm apresentando resultados positivos para várias espécies. Outras
formulações, especialmente desenvolvidas para espécies lenhosas, já estão sendo
empregadas a fim de aperfeiçoar a micropropagação (WENDLING; DUTRA;
GROSSI, 2006).
O pH do meio de cultura é um fator muito importante. Este valor é
normalmente ajustado para um valor ligeiramente ácido (entre 5 e 6) com HCl ou
NaOH, sempre depois de adicionarem-se todos os componentes (CALDAS et al.,
1998).
Os meios devem ser esterilizados, antes ou após a distribuição nos frascos ou
vasilhames de cultivo. Esta esterilização é feita por autoclavagem a 121°C por 15 a
20 minutos, dependendo do tempo mínimo de esterilização do volume de meio no
recipiente em que se encontra (CALDAS et al., 1998).
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