Esponjas Marinhas da Bahia - Guia de Campo e ... - Porifera Brasil

Identificação de esponjas
o efeito desejado. Só troque a água se o cheiro estiver demasiadamente forte, o que
também pode ser minimizado ampliando-se o volume de água relativo ao tamanho
do fragmento da esponja. Uma vez concluído o processo, lava-se as fibras com água
limpa, desidrata-se com etanol 80–96% e passa-se à montagem sobre lâmina.
Maceração em água-sanitária (hipoclorito de sódio) a 10–20%: coloque um
fragmento da esponja (aproximadamente 1 cm 3 ) em solução diluída de água-sanitária
a frio (1 parte de água-sanitária + 4–9 partes de água, a depender da delicadeza do
material). Trabalhe em ambiente bem ventilado ou em capela de exaustão. A amostra
poderá ser pressionada repetidas vezes, porém com suavidade (pinça de ponta
larga) para facilitar o acesso do cloro às partes internas da amostra. Também se pode
utilizar uma siringa, não para perfurar a amostra, mas para gerar jatos de solução
que auxiliarão no desmantelamento do mesoílo da esponja, desprendendo-o das
fibras de espongina. O procedimento deve ser observado de perto, com intervalos
não superiores a alguns poucos minutos, especialmente no caso de amostras mais
delicadas, ou do contrário pode-se perder toda a amostra. Alcançado o efeito
desejado lava-se a amostra com água limpa, desidrata-a com etanol 80–96% e passase
a cortá-la, se for o caso, para aplicação sobre lâmina e montagem.
Maceração enzimática (papaína): incube um fragmento da esponja com 1–2 cm 3
em 3 mL de tampão de digestão (100 mM de acetato de sódio; pH 5,0; cisteína 5 mM;
EDTA 5 mM) por 24 horas a 4º C. Adicione 1 mL de solução de papaína a 3% (feita
com tampão de digestão fresco) ao tubo contendo o fragmento, e incube por novas
24h, agora a 60°C. Lave o fragmento digerido com jatos de água para desprender
sobras de mesoílo das fibras. Alcançado o efeito desejado lava-se a amostra com
água limpa, desidrata-a com etanol 80–96% e passa-se a cortá-la, se for o caso, para
aplicação sobre lâmina e montagem.
Maceração sob lupa (microscópio estereoscópico): procedimento que pode ser
utilizado só, ou combinado aos demais, que consiste em auxiliar o desprendimento
das fibras com uma pinça de ponta fina. Se estiver trabalhando com água-sanitária
faça-o em ambiente bem ventilado ou em capela de exaustão. Conclua a limpeza,
desidratação e montagem como descrito acima.
Cortes espessos rápidos (Demospongiae e Hexactinellida)
Com lâmina de barbear ou bisturi, corte a esponja em seções perpendiculares e
tangenciais, não misturando os dois tipos de cortes. Por vezes pode ser mais cômodo
separar da amostra um fragmento com ângulos retos, a partir do qual se ensaia
a obtenção das seções perpendiculares e tangenciais. Algumas esponjas são mais
fáceis de cortar. Para outras, pode ser preferível secá-las primeiro por completo, ou
até mesmo congelá-las, de modo a obter-se estrutura mais firme para o corte. Os
cortes devem ter preferencialmente menos de 0,5 mm de espessura.
perpendiculares, e indicando na etiqueta quais são uns e quais são os outros.
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