2011 - USAMV Cluj-Napoca

More documents

Recommendations

Info

Dr. Duma Mihaela Teză de doctorat <strong>2011</strong> cu cut-off-ul (3.601, 3.634/0.219). S-au obţinut densităţi optice peste valoarea prag (cut- off-ul) şi la cazul fără semne clinice (1.670, 2.306/0.220). Rezultatele obţinute, au fost interpretate ca pozitive pentru scrapie. Valoarea foarte mare a densităţilor optice obţinute la eşantioanele de ţesut nervos prelevate de la cazul cu simptomatologie nervoasă se datorează cantităţii mult mai crescute de PrP res detectată în ţesutul nervos, comparativ cu cantitatea de PrP res prezentă în ţesutul nervos la cazul fără semne clinice. Obţinerea densităţilor optice cu valoare mare, peste valoarea prag, la ovina clinic sănătoasă, sacrificată pentru consum uman, demonstrează sensibilitatea şi specificitatea testului imunoenzimatic de screening rapid în detecţia proteinei prionice anormale PrP res în ţesutul nervos infectat. Pentru ambele probe, imunoblotarea a dus la obţinerea profilelor specifice cu prezenţa unei pete mari doar pe banda corespunzătoare proteinelor cu greutate moleculară de 27-30 kDa, prezente în proba tratată cu proteinază K. Profilele rezultate prin migrare electroforetică, urmată de imunoblotare, demonstrează digestia PrP c şi transformarea proteinei prionice specifice de boală într-un fragment rezistent la proteinază, cu masă moleculară redusă prin îndepartarea capătului amino-terminal al proteinei; cele 2 benzi superioare corespund formelor mono şi di-glicozilate (27-30 kDa), iar banda inferioară corespunde formei neglicozilate. Examinarea histopatologică a identificat prezenţa de vacuolizări specifice localizate în pericarionul neuronilor şi în neuropilul substanţei cenuşii, cu distribuţie simetrică, bilaterală. Pericarionii s-au prezentat destinşi de una sau mai multe vacuole, rotunde sau ovale, cu contur net şi regulat care fuzionează, rezultând aspectul spongiform al materiei cenuşii. S-au întâlnit şi imagini de necroză neuronală, neuroni cu nuclei picnotici, citoplasmă omogenă, intens eozinofilă, discretă proliferare glială, precum şi depuneri de amiloid perivascular; nu s-au observat reacţii inflamatorii. Nucleul dorsal al vagului s-a dovedit a fi sediu de elecţie pentru vacuolizările specifice. Evidenţierea leziunilor demonstrează că pătrunderea prionilor în sistemul nervos central este urmată de convertirea proteinei normale PrP c , produsă de neuroni şi celule gliale, în PrP sc şi acumularea acesteia, urmată apoi de modificările histopatologice caracteristice, responsabile de tulburările clinice. [262]
Dr. Duma Mihaela Teză de doctorat <strong>2011</strong> Imunohistochimia efectuată la cazul cu simptomatologie nervoasă, în secţiunile histologice realizate din fragmentele de trunchi cerebral a identificat depozite punctiforme, în granule de PrP res , dispuse arbitrar, în mai multe focare sau difuze în neuropil şi pericarioni, cu o intensitate şi distribuţie a imunoreactivităţii diferite. Analiza rezultatelor demonstrează sensibilitatea şi specificitatea testului imunoenzimatic de screening rapid în detecţia proteinei prionice anormale PrP res în ţesutul nervos infectat, prin detectarea bolii la ovina clinic sănătoasă, sacrificată pentru consum uman şi că există corelaţie între cantitatea de proteină prionică anormală PrP res acumulată în ţesutul nervos şi declanşarea semnelor clinice, fapt evidenţiat de valoarea foarte mare a densităţilor optice obţinute la eşantioanele de ţesut nervos prelevate de la cazul cu simptomatologie nervoasă, comparativ cu cele obţinute la cazul fără semne clinice. Studiul a scos în evidenţă că scrapia poate evolua şi în absenţa semnelor clinice ceea ce înseamnă că infecţiile prionice oculte la animale sunt mult mai răspândite decât cazurile clinice cunoscute. Având în vedere că diagnosticarea cazului pozitiv la ovinele sacrificate pentru consum uman s-a făcut în cadrul monitorizării de rutină, subliniază importanţa acesteia. Concluzii generale 1. Studiul histopatologic, soldat cu depistarea de modificări/leziuni ale sistemului nervos central la 73% din cazurile examinate, scoate în evidenţă importanţa examinării acestui ţesut cu mai mare atenţie, atât macroscopic, cât şi prin prelevare de probe pentru studiu histopatologic în vederea identificării leziunilor primare, dar şi a celor asociate. 2. Modificări/leziuni în ţesutul nervos au fost diagnosticate la ovine sacrificate de urgenţă care nu au manifestat simptomatologie nervoasă sau modificări macroscopice ale sistemului nervos central şi la ovine clinic sănătoase sacrificate pentru consum uman. 3. Factorii de ordin infecţios, traumatic, toxic sau degenerativ din alte organe induc modificări ale organizării cito-histologice complexe a ţesutului nervos cu apariţia [263]
Page 1 and 2: Dr. Duma Mihaela Teză de doctorat
Page 13: Dr. Duma Mihaela Teză de doctorat

2011 - USAMV Cluj-Napoca

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?