AF-21 Rappfotometer - Umeå universitet

2)
absorbans
1,2
1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
-0,4
520 0,758 -0,091
530 0,755 -0,012
540 0,783 -0,095
550 0,834 0,214
560 0,884 0,32
570 0,919 0,396
580 0,938 0,44
590 0,947 0,459
600 0,956 0,457
610 0,967 0,442
620 0,985 0,417
630 1,001 0,384
640 1,003 0,349
650 0,982 0,314
660 0,931 0,281
670 0,853 0,252
680 0,751 0,226
690 0,641 0,205
700 0,527 0,184
710 0,422 0,164
720 0,33 0,144
730 0,255 0,125
740 0,194 0,105
750 0,15 0,091
-0,2400
500 600 700
våglängd (nm)
Abs prov med H2O
som blank
Abs prov med Bio-Rad
som blank
Figur 2. Visar absorptionen som funktion av våglängden för mätningarna av provet
med H2O resp. Bio-Rad som blank.
3)
Absorbansmätning av proteinlösningar blandade med Bio-Rad bör mätas vid cirka 600 nm
eftersom båda graferna uppvisar höga absorbansvärden där. Anledningen till att grafen som är
blankad med H2O uppvisar så mycket högre absorbansvärden än den andra grafen är att den
även visar Bio-Rads absorbans i provlösningen. Därför är den övre grafen ej användbar när
man vill räkna ut proteinkoncentrationen i provet. Grafen som är blankad med Bio-Rad visar
däremot endast proteinets absorbans och kan därför användas vid beräkning av proteinets
koncentration i provet. Vid våglängder mellan 400 nm och 540 nm absorberar provlösningen