Labanalyser - BLF

Analys av perifert blodVad betyder labsvaren?Gamla och moderna analyserSoheir Beshara, MD, PhDBitr överläkare1 Soheir Beshara

AnemiSänkt total cirkulerande hemoglobinmängdBlodbrist2 Soheir Beshara

AnemiHemoglobin concentrationand reticulocyte counts inpreterm and term infants.Curves describe medianvalues and 95%confidence limits forinfants of three differentweight categories.(Dallman PR: Anemia ofprematurity. Annu RevMed 32:143, 1981.)3 Soheir Beshara

Orsaker till anemi/3• Minskad erytrocytproduktion– Minskad/defekt hemoglobinsyntes– Defekt erytrocytmognad– Kronisk sjukdom– Stamcellsdefekt4 Soheir Beshara

Orsaker till anemi/2• Hemolys - förkortad erytrocytöverlevnad– Medfödd defekt– Förvärvad defektInfektionerImmunhemolytiska anemier5 Soheir Beshara

Orsaker till anemi/3• Blodförlust - blödning6 Soheir Beshara

UtredningÄr det enbart anemi?7 Soheir Beshara

Utredning• Blodstatus; inklusive index• B-celler/ B-neutrofila granulocyter• B-retikulocyter8 Soheir Beshara

Anemi: klassifikation vs etiologin Indices• Normocytär• Mikrocytär, hypokroma• Makrocytär Etilogi• Akut hemolys /blödning• Järnbrist / talassemi• B 12 -, folatbrist,hemolys (retikulocytos)9 Soheir Beshara

Retikulocyter Retikulocytos• Hemolys• Blödning Låg retikulocytantal iförhållande till anemi• Järnbrist anemi• Megaloblastisk anemi• Defekt i Hb syntes10 Soheir Beshara

11 Soheir BesharaJärnbalans

JärnbristAbsolut järnbrist1. Tomt förråd2. Järnbrist-eytropoes3. Järnbrist anemiFunktionell järnbristinflammationmalignitet12 Soheir Beshara

13 Soheir BesharaJärnbalans hos barn

Järnbalans hos barn14 Soheir BesharaLozoff et al. Am J Clin Nutr. 2006 Dec;84(6):1412-21

Järnbrist anemiHög-risk grupp• Prematurfödda barn/barn med låg födelsevikt• Hög prevalens av järnbrist anemi• Enbart amning i längre tid• Pojkar15 Soheir Beshara

Förslag till cut-off för anemidiagnostik4 mån6 mån9 månHb (g/L)105105100MCV (fL)757171Ferritin (µg/L)2095Domellöf et al. J Nutrition 2002:132:3680-616 Soheir Beshara

Järnstatus –lab diagnostikMärginvasivBl.status (inkl indices) vid anemiP-Järndygnsvariation/inflammationTransferrin (TIBC) leverpåverkan/inflammationJärnmättnad P-järn/TIBC *100Ferritin inflammationTfR, lösligt erytropoesen/järnomsättningTfR/log ferritin bättre markör, 2 analyserHypokroma erytrocyter Dålig hållbarhetHypokroma retikulocyter CHr, Ret-He17 Soheir Beshara

18 Soheir BesharaTfR

TfRHur används?• TfR, lösligt: mätning vid ett tillfälle• TfR inkrement: seriemätningar (t ex veckovis)• TfR index: TfR, lösligt/log ferritin19 Soheir Beshara

S-TfRIndikationer:I kombination med andra analyser (+retikulocyter/ ferritin)).“Seriemätningar” (Inkrement)Behnandlingseffekt: järn, kobalamin20 Soheir Beshara

TfR + RetikulocyterTfR, lösligt(ggr basalt)Cazzola, M10IneffektiverytropoesHemolysBr J Haematol11992, 80:278-284 Hypoprolifer.anemi0,10,1 1 1021 Soheir BesharaRetikulocyt index (%)

22 Soheir BesharaTfR + ferritin

TfR indexTfR index:Funktionell järnbrist vid samtidig inflammationVuxna >1,5: indikation på absolut järnbrist> 0,8 (0,9): vid samtidig inflammation: markör för funktionelljärnbrist (Thomas & Thomas, Clinical Chemistry 2002,48:1066-1076).Barn > 2: indikation på järnbristAngeles Vázquez López et al. J Pediatric Hematol 2006, 28:809-81523 Soheir Beshara

Hypokroma retikulocyetrCHr / Ret-He• Mått på hemoglobin innehåll i retikulocyter• Tidig tecken på järnbrist• Optimal markör vid samtidig infektion /inflammation• Cut-off

Receiver Operating Characteristic Curves for Reticulocyte Hemoglobin Content andHemoglobin for the Detection of Iron Deficiency at Initial ScreeningSänkt total cirkulerandehemoglobinmängdBlodbrist25 Soheir BesharaUllrich, C. et al. JAMA 2005;294:924-930.

Ret-He vs TfR-indexThomas C, Thomas L:“Biochemical markersand hematologicindices in the diagnosisof functional irondeficiency”. Clin Chem2002; 48:1066-1076/26 Soheir Beshara

Andra orsaker till mikrocytär anemi• Hb-sjukdomar: lågt RDW• Transitorisk erytroblastopeni (TEP):– Lågt Hb, EVF– Lågt EPK, Låga retikulocyter– Normalt MCV27 Soheir Beshara

HemoglobinsjukdomarOptimal utredning• Remissinfo om etnicitet, hereditet, blodstatus(inklusive index)• Tydlig frågeställning• CBC, erytrocytmorfologi• Järnstatus / Hemolys28 Soheir Beshara

Hemolytiska tillstånd• Hemolys; nedbrytning av röda blodkropparKompenserad hemolys vs Hemolytisk anemi• Förvärvade vs Medfödda• Medfödda defekter:– Membrandefekter– Hb-defekter– Enzymdefekter29 Soheir Beshara

• Anemi• Höga B-retikulocyter• MCV: varierande• Bilirubin, LD• DATHemolytiska tillstånd30 Soheir Beshara

Hereditär sfärocytos• Erytrocytmorfolgi, MCHC• Osmotisk resistens• Acid-glycerol Lysis test• Flödescytometriundersökning avmembranproteiner; spektrin och ankyrin31 Soheir Beshara

33 Soheir BesharaFlödescytometri

G-6-PD• X-linked recessiv• Akut hemolytisk episod av varierande grad• Retikulocytos försvårar diagnostik34 Soheir Beshara

• Spektrindefekter: 2-3%Flödescytometri• Spektrin o ankyrindefekter: 75-80%• Band 3:10-20%• Band 4.2: 5%• Flödescytometri: Sensitivitet & Specifitet: 92,7% resp 99,1% Komplettering med CD 47 för ankyrin35 Soheir Beshara

Analys av perifert blod• ID c:a 7%, IDA c:a 2-3%• Hb ( 2).• TfR i kombination med Retikulocyter• CHr/Re-He 30 pg.• TfR-index alt CHr som är behandling-resistenta kan varatecken på t ex celiaki.36 Soheir Beshara

Analys av perifert blod Hemolytiska tillstånd:• Diagnostik bör ske i ett lugnt skede• Flödescytometri har hög specificitet ochsensitivitet• Erytrocytmorfologi har en viktig roll37 Soheir Beshara

ReferenserGuidelines for the Diagnosis and Management of HereditarySpherocytosis.British Journal of Haematology 2004; 126:455-474Guidelines on the laboratory diagnosis of haemoglobinopathies.British Journal of Haematology 1998; 101, 783-792http://www.bcshguidelines.comThe British Committee for Standards in Haematology38 Soheir Beshara