绿竹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的克隆与分析 - ICBR

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一一 http://www.c … ’ 。 ’ 一 — 绿竹咖啡酰辅酶 A O 甲基转移酶基因的克隆与分析 Clon in g andCharacterization ofCCoA OM T Gene from Bam busa oldham i 目的基因片段的全长扩增产物电泳图。 Bo CCoA OM Tl 基因 ( 图 3) 的 cDNA 全长 873b p , 包含个 780b p 的读码框 , 编码分子量约为 288kD , 推测的等电点为 5. 个 259 aa 的蛋白 , 189。 M a b M 0. 5kb 1. 0kb 0. 5kb 图 1RA CE 电泳分析图 Fi g ure 1RACE p roducts checkedb y electro p horesis N ote:a:3 ’ RA CE p roducts checked ; b:5 ’ RA CE p rodu c~ checked 图 2BoCCoAOM TlPCR 产物电泳分析图 Fi g ure 2 PCR p roducts ofBoCCoAOM Tl g en e checked b y elec— tro p horesis l ff GCACCCGGATCTCGTCTCCTCGAAAACCOGCA 33 AT GGCCA CCGCGA CCGCCGAT GCGACGACGGCGACCAA GGAGCAAACCA GCGGCGGCGGC M A T A T A D A T T A T K E Q T S G G G 93 GGCGAGCA GAAGA CGCGCCACTCCGAGGT CGGGCACAA GAGCCT GCTCCA GA GCGA CGCG G E Q K T R H S E V G H K S L L Q S D A 153 CT CTA CCA GTA CATACT GGA GACGAGCGT GTA CCCGCGCGAGCACGAGTGCATGAA GGA G L Y Q Y I L E T S V Y P R E H E C M K E 213 CTCCGCGA GGTCACCGCCAAGCA CCCATGGAACCTGAT GACGACGTCGGCGGACGA GGGG L R E V T A K H p W N L M T T S A D E G 273 CA GTT CCT GAA CATGCTGCT CAA GCTCAT CGGCGCCAA GAAGA CCATGGA GATCGGCGT C Q F L N M L L K L I G A K K T M E I G V 333 TACA CCGGCTACT CCCT CCT CGCCACCGCGCTCGCCAT CCCCGA GGACGGCA CGAT CTTG Y T G Y S L L A T A L A I P E D G T I L 393 GCCAT GGA CATCAACCGCGAGAA CTACGA GCT CGGCCT GCCCTGCATCGAGAA GGCCGGC A M D I N R E N Y E L G L P C I E K A G 453 GTCGCCCACAAGATCGA CTTCCOCGAGGGCCCCGCCCT CCCCGT CCTCGACCAGCT CCTC V A H K I D F R E G P A L P V L D O L L 513 GA GGACGA GGCCAA CCA CGGCTCGTT CGA CTT CGTCTT CGTCGACGCCGACAA GGA CAA C E D E A N H G S F D F V F V D A D K D N 573 TA CCT CAA CTACCA CGA CCGCCT GAT GAA GCTGGTCAA GGTCGGCGGCCTCGTTGGCTA C Y L N Y H D R L M K L V K V G G L V G Y 633 GA CAA CACGCT CTGGAA CGGCTCCGTCGT GCTCCCCGCCGACGCGCCCATGCGCAA GTA C D N T L W N G S V V L p A D A p M R K Y 693 ATCCGCTA CTACCGCGACTTCGTGCT CGA GCT CAACAAGGCCCTCGCCGCCGA CGAGCGC I R Y Y R D F V L E L N K A L A A D E R 753 GTCGA GAT CT GCCA GCT CCCCGT CGGCGACGGCATCA CCCTCTGCCGCCGCGCCAA GT GA V E I C Q L P V G D G I T L C R R A K 813 ACCGTCCCTCCGGCCAT CTTGGTCGCT CGACGGCGCGCGCGCCACCATGAT GCCATCGTC 图 3BoCCoAOM Tl 的核酸序列及其推导出的氨基酸序列 Fi g ure 3Nucleotide se q u ence anddedu cedam ino acid se quence ofBoCCoA OM Tl
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