Sborník abstrakt - Solen

B36
Abstrakta / Abstract book
pacientům podává také antidotum leukovorin
(LV).
Cílem této studie je analyzovat vliv MTX
na buněčné linie vybraných typů solidních nádorů
dětského věku (meduloblastom a osteosarkom).
Snahou je popsat cytostatické, resp.
cytotoxické působení MTX na obě linie, detekovat
změny v jejich buněčném cyklu a zjistit
rozdíly mezi působením HD-MTX a nízkodávkového
MTX (LD-MTX) v přítomnosti různých
koncentrací LV.
Pilotní experimenty byly prováděny na sbírkových
buněčných liniích Daoy (meduloblastom)
a Saos-2 (osteosarkom). MTX byl použit
v rozmezí koncentrací, které se vyskytují v plazmě
dětských onkologických pacientů léčených
MTX (0,1 až 40 μM). Změny v proliferaci buněk
byly zjišťovány MTT testem a změny v buněčném
cyklu průtokovou cytometrií.
Bylo zjištěno, že MTX působí výrazně cytotoxicky
na obě buněčné linie, přičemž nebyl zjištěn
rozdíl v účinnosti 1–40 μM MTX. Proliferace
po 6 dnech působení 1–40 μM MTX byla u linie
Daoy snížena průměrně o 85 % a u linie Saos-2
o 70 % oproti kontrole. Hodnota LC50 MTX činí
u linie Daoy 0,27 μM a u linie Saos-2 0,23 μM.
Z hlediska analýzy buněčného cyklu docházelo
k jeho zastavení u obou linií již 3. den po ovlivnění
MTX. Stejně tak byl pozorován nárůst frakce
apoptotických buněk u linie Daoy již 3. den kultivace
s koncentrací MTX 1–40 μM. U linie Saos-2
byl tento nárůst pozorován až 6. den. Apoptóza
byla detekována také pomocí protilátky proti
aktivované kaspáze-3. Dále byl zkoumán vliv LV
na působení MTX. Bylo zjištěno, že LV ovlivňuje
pouze účinek 0,1 μM MTX, u něhož byla po aplikaci
LV zaznamenána menší cytotoxicita, než
u varianty bez LV.
Ze získaných dat vyplývá, že MTX působí
cytotoxicky na oba typy linií, přičemž srovnatelný
antiproliferativní efekt vykazuje 1 μM, 10 μM
i 40 μM MTX. Dále bylo zjištěno, že LV v terapeutických
koncentracích neovlivňuje účinnost MTX
v rozsahu 1–40 μM. Dosažené výsledky ukazují,
že LD-MTX (1 μM) má stejné účinky in vitro jako
HD-MTX (40 μM) a může mít terapeutický potenciál
v léčbě nádorových onemocnění.
Podpořeno: MUNI/C/0803/2011 a RECAMO; CZ
1.05/2.1.00/03.0101.
23| Analysis of selected micro
RNAs in prostate cancer cell lines
Martina Raudenská 1,2 , Kristýna Hudcová 1 ,
Jaromír Gumulec 1,3 ,
Markéta Sztalmachová 1,2 ,
Veronika Tanhäuserová 1 , Michaela
Fojtů 1 , Petr Babula 4 , Vojtěch Adam 2,3 ,
Tomáš Eckschlager 5 , René Kizek 2,3 ,
Michal Masařík 1,3
1
Department of Pathological Physiology,
Faculty of Medicine, Masaryk University, Brno
2
Department of Chemistry and Biochemistry,
Mendel University in Brno
3
Central European Institute of Technology,
Brno University of Technology, Brno
4
Department of Natural Drugs, Faculty of
Pharmacy, University of Veterinary and
Pharmaceutical Sciences, Brno
5
Department of Paediatric Haematology and
Oncology, 2 nd Faculty of Medicine Charles
University, Prague
Micro RNAs (miRNAs) are a large class of
single-stranded RNA molecules involved in
post-transcriptional gene silencing. MiRNAs not
only regulate various developmental and physiologic
processes but also are involved in cancer
development. They can be also considred as
biomarkers of some pathological processes. The
aim of this study was to determinate the expression
levels of selected miRNA and zinc (II) -related
genes (ZIP-1, BAX, MT2A, and MT1A) in the nontumor
PNT1A prostate cell line in comparison
with cancer cell lines 22Rv1, PC-3, and LNCaP
after zinc (II) treatment. Using bioinformatic approaches
we selected miRNAs with putative
binding sites in 3’UTR regions in Metalothionein
1A and 2A as miRNA 23a, 141, 224, 296–3p, 320,
375 and 376. We observed significantly higher
expression of miRNA 23a in all tumor lines compared
to non-tumor PNT1A (13.6-fold in 22Rv1,
7.3-fold in PC-3, 8.3-fold in LNCaP, p