Schwerpunkte - Institut für Transfusionsmedizin

Transfusionsmedizin_VL 1 

Schwerpunkte 

Bedeutung der erythrozytären Antigene 

bzw. Antikörper für die Therapie mit 

zellhaltigen Blutprodukten als auch 

ausgewählte Krankheitsbilder in der 

Klinik 

1. Pflichtvorlesung Transfusionsmedizin 

Universitätsklinikum Jena 

Institut für Transfusionsmedizin 

D. Barz 

1. Rechtliche Grundlagen 

2. Antigene auf Erythrozyten (Blutgruppen) 

3. Antikörper gegen erythrozytäre Antigene 

4. ausgewählte Krankheiten 

2 

1


1. Rechtliche und gesetzliche 

Grundlagen 

Rechtsprechung: 

jeder ärztliche Eingriff - so auch die 

Bluttransfusion - ist eine Verletzung der 

körperlichen Integrität 

Tatbestandsmäßig 

„vorsätzliche Körperverletzung“ 

Jeder diagnostische und 

therapeutische Eingriff bedarf einer 

Indikation 

fachgerechte Durchführung 

(Rechtfertigung) 

„Transfusionssicherheit“ für Patient 

3 

4 

2


Welche gesetzliche Grundlagen sind 

für behandelnde Ärzte verbindlich? 

1. Transfusionsgesetz vom 07.07.1998/1. Nov. 11/2005 (2007) 

2. Arzneimittelgesetz vom 17.08.1994 – 2005, 2009 

3. Medizinproduktegesetz 2003, 2008, 2009 

4. Richtlinie zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur 

Anwendung von Blutprodukten (Hämotherapie) vom Jahr 1996 – 

2005/2007/2010 (www.baek.de oder www.pei.de) 

5. Leitlinie zur Therapie mit Blutkomponenten und Plasmaderivaten, 

(BÄK 1995, 2003, 2008) (www.baek.de oder www.pei.de) 

6. Transplantationsgesetz 2006, 2007, 2009 

7. Geweberichtlinie und Zellersatz 2007 

Transfusionsgesetz 

(3. - 5. Abschnitt, §§ 13 - 34) 

Anwendung von Blutprodukten in der 

Klinik/Praxis 

Rückverfolgung 

Meldewesen 

§1 TFG: 

„Patient hat das Recht eine sichere und 

gesicherte Hämotherapie zu erhalten“ 

Arzneimittelsicherheit, Anwendersicherheit 

5 

6 

3


Richtlinien zur Hämotherapie 

1. Verantwortung/Auswertung blutgruppenserologischer Befunde 

2. Befund zur Blutgruppe/Antikörper muss bei jeder OP vorhanden 

sein, wenn Blutverlust > 0,1 % 

3. Anforderung an die Blutprobe des Patienten für die 

Blutgruppenbestimmung 

4. Nachweistechniken 

5. Dokumentation 

6. Transfusion der einzelnen Blutkomponenten 

7 

8 

4


Patientin 22 Jahre 

Anamnese: 

Seit 10. Lebensjahr schmerzhafte Schwellung der Fingergelenke 

Familienanamnese: 

Mutter Blutungsneigung 

Schwester ebenfalls Gelenkschwellungen 

Verdacht Blutgerinnungsstörung 

Diagnostik: 

Blutbild 

Blutgruppe (Aufgabe im Praktikum für Sie) 

allgemeine Gerinnungstest (aPPT, Blutungszeit, Plättchenzahl) 

Blutgruppenserologische 

Diagnostik vor Transfusion 

Was muss ich als transfundierender Arzt wissen!! 

Plasma 

AB0 

Plättchen 

AB0 

RhD 

Erythrozyten 

AB0, 

RhD, 

Rhesus-Formel 

Kell 

Antikörper 

Kreuzprobe 

evtl. direkter Antiglobulintest 

9 

10 

5


Serologische Untersuchungen 

Anforderung und Blutprobe 

Verwechslungsausschluss 

Probengefäß kennzeichnen 

(Name,Vorname; Geburtsdatum; Abnahmedatum) 

Untersuchungsauftrag ausfüllen 

verschreibungspflichtiges Arzneimittel 

Unterschrift des Arztes 

anfordernder Arzt verantwortlich für Identität der 

Blutprobe 

eindeutige Kennzeichnung des Einsenders 

(weil 30 Jahre Haftansprüche des Patienten bestehen) 

Serologische Untersuchungen 

Anforderung und Blutprobe 

Für die Diagnostik erforderliche Angaben 

Angabe von 

Diagnose 

(Störeffekte z.B. bei Plasmozytom?, Präparatebedarf?) 

Medikamenten, die die Verträglichkeitsprobe 

beeinträchtigen (z.B. Plasmaexpander?, Heparin?) 

Vortransfusionen (Mischagglutination) 

Schwangerschaften (Vorimmunisierung?) 

Vorergebnissen (Verwechslung?, nicht mehr 

nachweisbare Antikörper?) 

vorangegangener KMT/SZT (Blutgruppendiskrepanz) 

Nabelschnurblut (Störeffekte?) 

Angabe der Blutgruppe sofern bekannt 

11 

12 

6


2. Antigene auf Erythrozyten 

(Blutgruppen) 

Blutgruppenantigene 

1901 Karl Landsteiner 

„Agglutination von Erythrozyten 

durch Serum gesunder Menschen“ 

Blutgruppe: A, B, AB und 0 

lokalisiert auf der Oberfläche des Erythrozyten 

zusammengesetzt: 

Proteine, Kohlenhydrate (Glycoproteine, 

Glycolipide) > 260 

genetisch bedingte Polymorphismen von 

Proteinen oder Kohlenhydraten, verursacht 

durch Polymorphismen von Glykosyltransferasen 

bedingen die Vielfältigkeit 

270 verschiedene Antigene in 30 Blutgruppensystemen 

13 

14 

7


Schematische Darstellung der 

Blutgruppensysteme 

Erythrozyten 

Antigene 

Kollektionen, Serien (38 Antigene) 

molekulare Basis nicht geklärt 

z.B. Vel, LAN, AnWj 

HLA-Antigene 

nur wechselhaft rudimentär 

HLA-B7 (Bga ), HLA-B17 (Bgb ), HLA-A28 

(Bgc ) 

Störeffekte bei Diagnostik, 

transfusonsmedizinisch i.d.R. nicht relevant 

15 

16 

8



AB0 (z.B. 308 Blutgruppen), Rh, Kell, Duffy, Kidd, MNS, Lewis, P, 

Lutheran, Colton, Chido/Rodgers, Knops, Diego, Cartwright, 

Cromer, Dombrock, Hh, Xg, Scianna, LW, Kx, Gerbrich, Indian, OK, 

Raph, JMH, I, Globoside, GIL 

hochfrequente Antigene: 

Vel (>99%, Lan (>99%)), Co a (>99,8%), kp b (99,9%), 

k>99,8%), 

niederfrequente Antigene: 

Yt b (8%)) Co b( 8,6%), Wr a (


Der Erythrozyt 


Beispiele: 

System 

AB0 

Rh 

Kell 

wichtige Antigene 

A(43), B(9), A(1) (34) 

D(85), C(70), E(30), c(80), e(98) 

K(9), k(99,8), Kp(a)(2), Kp(b)(99,9), 

Js (a)( 230 

> 34 

Vorkommen: 

1. gebunden an: 

Proteine (Glykoproteine) 

Lipide (Glykolipide) 

2. Integraler Bestandteil von Membranen: 

Erythrozyten 

Epithelzellen 

Endothelzellen 

3. In lösliche Form in Plasma 

ISBT-Nr. 

001 

004 

006 

19 

20 

10


Immunhämatologische Grundlagen 

Erythrozyten 

Antigene Struktur Antikörper durch Antikörper 

induzierte 

unerwünschte 

A, B Kohlenhydrate 

A-, B- 

Substanz 

Rh-System Proteinstrukturen 

(Rh- 

Protein) D, C, 

c, E, e 

Kell-System Proteinstruktur 

en (Kell- 

Andere 


Protein) 

Protein- und 

Kohlenhydratstrukturen 

AB0-System 

Isoagglutinine 

Plasma 

mit 

Isoagglutininen 

Erythrozyten 

mit Antigenen 

Blutgruppen 

A 

Anti-A, Anti-B 

Anti-D, Anti-C, 

Anti-c etc. 

Anti-K, -k etc. 

Duffy, 

Kidd, 

MNS etc. 

Anti-B Anti-A 

A 

A 

A 

B B 

B 

Nebenraktionen 

Abhängig vom Titer und 

der Eigenschaft des 

Antikörpers: 

Intra- und/oder extravasale 

Hämolyse im RES, 

Leukozytenaktivierung. 

Folgen: Symptome einer 

akuten oder verzögerten 

hämolytischenTransfusionsreaktion, 

MHN 

B 

A 

B A B 

A 

B 

0 

21 

22 

11


AB0-Antigene 

Struktur 

Galactose 

N-Azetyl- 

Glukosamin 

AB0-Antigene 

Struktur 

Galactose 

N-Azetyl- 

Glukosamin 

Fukose 

Fukose 

Blutgruppe Blutgruppensubstanz 

0 H 

N-Azetyl- 

Galaktosamin 

23 


0 H 

A A 

N-Azetyl- 

Galaktosamin 

24 

12


AB0-Antigene 

Struktur 

Galactose 

N-Azetyl- 

Glukosamin 

AB0-Antigene 

Struktur 

Galactose 

N-Azetyl- 

Glukosamin 

Fukose 

Fukose 


0 H 

A A 

B B 

N-Azetyl- 

Galaktosamin 

25 

Blutgruppe Transferase 

0 keine 

A 

B 

N-Azetyl- 

Galaktosamin 

26 

13


AB0-Antigene 

Struktur 

Galactose 

N-Azetyl- 

Glukosamin 

Erythrozyten 

Antigene 

Gen → Protein 

Fukose 

Blutgruppe 

Gen → Protein (Transferase) 

Kohlenhydrat 

keine 

0 A/B-Transferase 

N-Azetyl- 

Galaktosamin 

Anti-A, Anti-B Anti 

Bombay keine Fucosyltransferase 

Anti-H 

Anti-A, Anti-B Anti 

Protein 

Erythrozytenmembran 

27 

28 

14


AB0-Antigene 

Transferasen 

Nachweistechniken für Antigene 

Test 

Agglutination 

Antiglobulin 

Enzym 

PCR 

Technik 

Festphasen 

Säulenzentrifugation 

molekulargenetisch 

29 

30 

15


Nachweistechniken 

Agglutination 

aus: S. Rudmann 

Textbook of blood banking 

and transfusion medicine 


Agglutination und Pseudoagglutination 

Agglutination Mischfeldagglutination 

aus: Metaxas-Bühler, Blutgruppen 

und Transfusion, 1994 

z.B. Blutgruppenestimmung 

bei Vortransfusion, Transfusionsreaktion, 

Anti- Lu(a), 

Anti-Sd(a), A(3), B(3) 

Geldrollenbildung 

31 

z.B. hohe Globulinkonzentration 

(Plasmozytom, M. 

Waldenström), Plasmaexpander, 

Wharton. Sulze 

32 

16



Röhrchen-, Säulen-, Capturetechnik 

Methode 

Röhrchen 

Säulentechnik 

Capturetechnik 

++ - (?) ( + ) 

+++ - 

- ++ ++++ 

Vorzüge 

AB0, Isoagglutinine, 

Mischagglutination, 

nat. AK gut erfasst 

Sensitive AK-Immun- 

AK Bestimmung (IgG 

+ IgM), 

Mischagglutination, 

Zweitablesung gut, 

Automatisierung 

Sensitive AK 

Bestimmung, Zweitablesung 

gut, 

Automatisierung 


IgG und IgM: unterschiedliches Verhalten bei 

Agglutination 

„Komplette Antikörper“ 

(IgM): 

Spontanagglutination 

„Inkomplette Antikörper“ 

(IgG): 

Nur selten 

Spontanagglutination, 

Detektion in im Enzym- 

u./o. AHG-Test 

Nachteile 

schwer 

ablesbar 

nat. AK mäßig 

erfasst, 

Störeffekte 

(Geldrollen, 

Stabilisator) 

nur IgG erfasst, 

nat. AK 

gering erfasst, 

Störeffekte 

33 

aus: Immunobase, 

DiaMed 34 

17



AB0 Blutgruppe – seltene Variante 

Antigeneigenschaften Serumeigenschaften 

Blutgruppe Ael Serumeigenschaften verlässlicher als Antigeneigenschaften 


AB0 Blutgruppe 

Vollständige Bestimmung erfordert 

Antigenbestimmung und Bestimmung 

der Serumeigenschaften 

bei Diskrepanz der beiden Ergebnisse 

Klärung! 

bei Neugeborenen und Säuglingen 

(fehlende Serumeigenschaften) kein 

endgültiges Ergebnis 

Kennzeichnung des Befundes! 

35 

36 

18



AB0 – Problemfälle 

Antigeneigenschaften 

(Patientenerythrozyten + 

Testserum) 

A B 

Serumeigenschaften 

(Indikatorzellen + 

Patientenserum) 

Anti- 

A (1) A(2) B 0 

Blutgruppe 

+ - + - + - A(2) mit irregulärem Anti- 

A(1) 

+ - - - - - A bei Neugeborenen, im 

Alter bei Immundefizienz 

+ + + + + + ? Whartonsche Sulze? 

Plasmozytom? 

Kälte/Wärmeagglutinine? 

+ - - + + + ? Anwesenheit eines 

irregulären Antikörpers 

37 

38 

19


Molekularbiologische Diagnostik 

Blutgruppen-Bestimmung 

bei kürzlicher Vortransfusion 

Antikörper Bestätigung durch Antigenbestimmung 

Transfusionsstrategie 

Antigenbestimmung bei pos. direkten Antihumanglobulintest 

Pränataldiagnostik 

Risikoabschätzung 

Zygotie-Bestimmung 

Risikoabschätzung bei Schwangerschaft 

unklare serologische Ergebnisse bei A, B, D und anderen Blutgruppen zur 

Festlegung der Transfusionsstrategie 

Kommerziell verfügbare Testkits: 

AB0, RhD, RhCE, Kell, Fy, Jk, MNSs, einige seltene niederfrequente und 

hochfrequente Blutgruppen 

Durchflusszytometrie 

Chimärismus und Mosaizismus 

Strachan & Read, Human Molecular Genetics, 1996 

M N S s 

NNss 

39 

40 

20


Durchflusszytometrie 

Chimärismus/Mosaizismus-Analyse 

z.B. bei hämatologischen Erkrankungen oder nach KMT 

Fallbeispiel: Erstdiagnose AML 

Blutgruppe 

Serologisch: Mischagglutination 

mit Anti-A (2+) 

Molekularbiologisch: O1A1 Durchflusszytometrisch: 13% A, 

87% 0 

0 A 

Chemotherapie, nach 4 Monaten 

serologisch ganz vorwiegend A (3-4+) 

Klinische Bedeutung 

Blutgruppenantigene 

Alloimmunisierung durch Transfusion/ 

Schwangerschaften 

z.B. Häufigkeit von serologischen TR ca. 0,1% 

Ursache: 

Immunogenität und Frequenz der 

Antigene 

41 

42 

21


Veränderung des Anti-A/Anti- 

B-Titers nach Transfusion von 

360 ml B-Blut auf A- 

Empfänger 

Mollision 2005 

Veränderung des Anti-A/Anti- 

B-Titers bei Patienten BG: 0 

nach Transfusion von 460 ml 

A-Blut 

Mollision 2005 

Rh-Antigene 

43 

22


Rh-System 

Makromolekularer Komplex 

Rh-System 

Rh null -Syndrom 

RhAG 

Glycophorin B 

(Ss) 

Ankyrin-R 

α 

Spektrin 

ß 

Kugelzellen Stomatozyten normale 

Erythrozyten 

45 

46 

23


Rh-System 

Rh null -Syndrom 

Chronische milde Hämolyse 

Kugelzellen, Stomatozyten 

herabgesetzte osmotische Resistenz 

Veränderter Kationentransport 

Abnormale Phospholipid-Organisation 

Rh-System 

Chromosomale Rh-Region 

Schematische Darstellung der chromosomalen Rh-Region 

Rh D c e 

Rh ce Rh Ce Rh cE RhCE 

C E 

Proteine D, Ce, 

ce 

D, Ce, 

ce 

ce ce, Ce 

Rh-Formel CcD.ee CcD.ee ccddee Ccddee 

Schreibweise 

Rh pos. 

(D pos.) 

Rh pos. 

(D pos.) 

Rh neg. 

(D neg.) 

Rh neg. 

(D neg.) 

47 

48 

24


Rh-System 

Partial D Phänotyp 

„Normales D- 

Protein“ 

D-Antigen 

Epitope 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 

Normalform des D-Antigens 

Partial-D 

Protein 

Rh-System 

RhD Epitope (9 Epitope Modell) 

Anzahl der 

Moleküle pro 

Erythrozyt 

49 

Häufigkeit 

(%) 

D + + + + + + + + + 10 000-33 000 > 99% 

D-Kategorien (D-Partialformen) 

Cat. II + (+) + + + + + (+) ?


Rh-System 

partial D 

32 

11 72 

2 

53 

107 158 167 230 231 282 290 347 358 

75 131 135 186 201 263 266 321 324 391 

Aminosäurenaustausche bei verschiedenen partial D 

Rh-System 

Partial D Phänotyp 

94 

„Normales D- 

Protein“ 

Intrazellulär 

Partial-D 

Protein 

Extrazellulär 

RhD 

51 

52 

417 

RhCE 

26


Rh-System 

D VI 

32 

2 

11 72 

Rh-System 

weak D 

32 

53 

11 72 

2 

53 

94 

94 

107 158 167 230 231 282 290 347 358 

75 131 135 186 201 263 266 321 324 391 

partial D DVI Typ 1 

Intracellular 

Aminosäurenaustausche bei verschiedenen weak D 

Exofacial 

Extrazellulär 

107 158 167 230 231 282 290 347 358 

75 131 135 186 201 263 266 321 324 391 

Intrazellulär 

53 

54 

417 

417 

27


Rh-System 

weak D und partial D 

Partial D – qualitativ verändert 

Immunisierung durch normales D 

1:6200 DVI, 1:1300 DNB in Deutschland, Bestimmung serologisch 

und durch PCR 

Probleme bei Schwangerschaften und Transfusionen 

einige partial D sind schwach exprimiert (qualitativ und quantitativ 

verändert) 

Typisierungsstrategie gemäß Hämotherapie-Richtlinien 

Empfänger mit DVI werden als D neg. typisiert 

Blutspender mit partial D werden als D pos. typisiert 

Individuen mit partial D sind als Empfänger D neg., als Spender 

D pos. 

Rh-System 


Weak D – quantitativ verändert 

ca. 1:200 in Deutschland 

> 90% der weak D Träger haben weak D Typ 1, 2, 3; 

diese 

sind D positiv als Blutempfänger 

benötigen bei Schwangerschaft keine RhD 

Prophylaxe 

sind als Blutspender D positiv 

Bestimmung der weak D Typen durch PCR 

bei den restlichen < 10% der weak D Träger 

vorsichtshalber D negative Transfusion 

55 

56 

28


Rh-System 


Blutgruppensystem mit der höchsten Variabilität 

Partial D 

Immunisierung durch normales D 

1:6200 DVI, 1:1300 DNB in Deutschland 

Probleme bei Schwangerschaften 

Probleme bei Transfusionen 

Weak D 

1:200 in Deutschland 

Bei >90% der weak D Träger D positive Transfusion 

möglich, bei Schwangeren keine RhD Prophylaxe 

nötig 

Weak D Typ 1, 2, 3, 4.0 

3. Antikörper gegen 

erythrozytäre 

Antigene 

57 

29


Erythrozytäre Antikörper 

Immunogenität 

In Abhängigkeit von Relative Relative Wahr- 

Vorerkrankungen Immunogenität scheinlichkeit der 

oder Vortransfusionen der Antigene (%) a Antikörperbildung, 

abhängig von der Anti- 

genfrequenz (%) b 

Sichelzellanämie D 50 D 6.4 

K 5 K 0.4 

Multiples Myelom c 2 E 0.36 

E 1.7 c 0.32 

Aplastische Anämie k 1.5 Fy-a 0.05 

e 0.6 C 0.02 

Myeloische Leukämie Fy-a 0.2 Jk-a 0.012 

C 0.1 e 0.012 

Thalassämie Jk-a 0.07 S 0.010 

S 0.04 Jk-b 0.006 

Vortransfusion Jk-b 0.03 s 0.003 

s 0.03 k 0.003 

a 

Häufigkeit der Antikörper-Bildung nach inkompatibler Transfusion 

b 

Sensibilisierungsrate = Immunogenität x Antigenhäufigkeit x (1 – Antigenhäufigkeit) 59 


bei Transfusionsreaktionen 

Akute hämolytische Verzögerte hämolytische Verzögerte serologische 

Transfusionsreaktion Transfusionsreaktion Transfusionsreaktion 

Antikörper, die häufig (nicht immer) hämolytische Transfusions- 

reaktionen verursachen: 

A Rh Rh: E Rh Rh: E 

B Jk(a) c K c 

D Fy(a) C Jk(a), Fy(a) C 

c K e Jk(b), Fy(b) e 

E Jk(b) D M 

Fy(a) Fy(b) S 

Jk(a) 

Andere: C, e, Fy(b), Jk(b), Andere: A, B, S, s, U, k 

S, s, U, k, P 

60 

30


Antikörper 

Immunglobulinklasse: IgG, IgM, IgA 

natürliche Antikörper 

(Aufnahme von Bakterien) 

Immune Antikörper 

(Exposition gegenüber Blutzellen, 

Transfusion und Schwangerschaft) 

Erythrozytäre Antikörper bei 

Transfusionsreaktionen 

Antikörper, die manchmal hämolytische 

Transfusionsreaktionen verursachen 

M, N, Le(a), Yt(a), Lu(b), Ge, Lan, Do, Vel, li, LW, H, 

At(a), In(b), M(a), Cs(a) 

Antikörper, die sehr selten oder nie hämolytische 

Transfusionsrealtionen verursachen: 

Bg(HLA), Ch/Rg (Komplement Komponente C4, 

Le(b), Kn/Mc/Yk (Komplement Rezeptor 1, Xg(a) 

61 

62 

31


Verlauf der Antikörperbildung 

Schneller Titerabfall z. B. bei Anti-Jk, Anti-Fy, Anti-E 

Ein einmal nachgewiesener Antikörper muss immer berücksichtigt 

werden, auch wenn der Titer unter die Nachweisgrenze gefallen ist! 


Verzögerte Transfusionsreaktion 

Antikörper im Plasma 

Plasma 

transfundierte 

Erythrozyten 

1. Transfusion 2. Transfusion 

(Boostereffekt) 

Mehrere 

Tage 

Indikation 

zur Elution 

keine 

Antikörper 

DCT positiv 

63 

Nachweisgrenze 

Zeit 

64 

32


Erythrozytäre Antikörper: 

Allo-, Auto- Isoantikörper 

Klinische Relevanz des Antikörpers ist 

abhängig von: 

1. Konzentration/Reaktionsstärke 

2. Immunglobulinklasse 

3. Fähigkeit zur Komplementaktivierung 

Unterscheidung nach dem 

serologischen Verhalten 

1. Komplette Antikörper: 

IgM, Saline, Kochsalz, agglutinierende MG: 900 000 

2. Inkomplette Antikörper: 

IgG, Albumine, Immunantikörper MG: 160 000 

Aufschwemmung der Erythrozyten: 

Supplement, Dextran, Gelantine u.a. 

Vorbehandlung der Erythrozyten mit proteolytischen Enzymen; 

Bromelin, Papain, Trypsin, Ficin 

65 

66 

33


Schematische Darstellung und Foto des 

Reaktionsablaufes zwischen Antigen X und 

inkomplettem Antikörper-Anti-X 


IgG und IgM: unterschiedliches Verhalten bei 

Agglutination 

„Komplette Antikörper“ 

(IgM): 

Spontanagglutination 

„Inkomplette Antikörper“ 

(IgG): 

Nur selten 

Spontanagglutination, 

Detektion in im Enzym- 

u./o. AHG-Test 

67 


DiaMed 

68 

34



Verfahren zum Antikörpernachweis: 

Enzym-Milieu (Papain, Bromelin, Ficin) 

IgG Antikörpernachweis: Enzymtechnik 

Enzymbehandlung 

Keine Agglutination Agglutination 

Nachweis insbesondere von Rh- 

AK, Le, P(1) 

Durch Enzym zerstört werden K, k, 

M, N, S, s, Fy Antigene 

Unterscheidung nach dem 

serologischen Verhalten 

3. Coombsreaktive Antikörper: IgG 

MG: 160 000 

Zusatz von sekundären Antikörpern 

z.B. Antihumanglobulin Serum 

(Coomsserum) 


DiaMed 69 

70 

35



Antikörpernachweis:Antihumanglobulintest 

Antihumanglobulinserum 

Agglutinat 

Antihumanglobulintest 

(Coombs-Test) 

Prinzip: 2 Phasen 

1. Phase: 

Sensibilisierung inkompletter AK mit Erythrozyt, 

3 x Waschen 

2.Phase: 

Zugabe eines Antihumanglobulinserums 

Agglutination 

IgG-Antikörper 

direkter Testnachweis von AK an der Zelle ; 

indirekter Testnachweis von freien AK im Serum 

71 

72 

36



Direkter und indirekter Antihumanglobulintest 

In vivo mit Antikörper beladene In vitro mit Antikörper beladene 

Erythrozyten Erythrozyten 

Direkter Antihumanglobulintest Indirekter Antihumanglobulintest 

In vivo mit 

Antikörpern 

beladene Patientenerythrozyten 


Antikörper im 

Plasma des 

Patienten 



Agglutinat Agglutinat 

Testerythrozyten 

73 

74 

37


Direkter Antihumanglobulintest 

Durchführung 

In vivo mit 

Antikörpern 

beladene Patientenerythrozyten 


Agglutinat 


Anti-IgG 

Anti-IgA 

Anti-IgM 

Anti-C3d 

polyspezifisch 

Nachweis und Spezifitätsbestimmung 

erythrozytärer AK 

1. Antikörpersuchtest 

Prinzip: 

Vorhandensein irregulärer inkompatibler AK im 

Serum ist erkennbar, wenn mind. ½ - 3 

Testerythrozytensuspensionen im 

Agglutinintest, Supplement-/Enzymtest, AHG 

reagiert. 

Panelzellen müssen die Mehrzahl der 

immunologisch u. klinisch relevanten Antigene 

tragen. 

75 

76 

38



Antikörpersuchtest 

E 

+ 

77 

78 

39



Häufigkeit von Alloantikörpern mit 

klinischer Relevanz 

Patientengruppe 

Neu aufgenommene Patienten 

Alle hospitalisierten Patienten 

Polytransfundierte Patienten 

Frequenz 

bis 1 % 

bis 5 % 

bis 10 % 

Nachweis und Spezifitätsbestimmung 

erythrozytärer AK 

2. Antikörperdifferenzierung 

Lippert/Flegel 2002 

79 

Prinzip: 

Testung des Serums gegen größere Anzahl 

von Panelzellen, die alle Erythrozytenantigene 

in bekannter Verteilung enthalten. 

Ansatz: 

Agglutination, Supplement u/o Enzym, AGT 

80 

40



Panel zur Antikörperdifferenzierung 

Eigentest 

Anti-E 


Verzögerte Blutversorgung 

Pat.1 Pat.2 

Abklärung und Bereitstellung von 

Präparaten benötigt Zeit! 

„Type and screen“ möglichst 

frühzeitig bei geplanter Operation, 

um Nachteile für alle beteiligten 

Seiten zu vermeiden! 

∅ 

Alloantikörper 

81 

Spezifität? 

82 

41



Autoantkörper 

Eigentest 

Autoantikörper 


Abklärung 

Untersuchungen 

bei Autoantikörpern 

Bestimmung der Spezifität 

Absorptionsverfahren zum Ausschluss der 

Anwesenheit von Alloantikörpern (aufwändig!) 

molekularbiologische Phänotyp-Vorhersage zur 

Unterstützung der Antikörperdiagnostik und der 

Auswahl kompatibler Erythrozytenkonzentrate 

Ggf. Bestimmung des Titerverlaufs 

83 

84 

42



Akute hämolytische Transfusionsreaktion 

Spender 

Blutgruppe 

A 

Anti-A 

Anti-B 

Beispiel: 

Spender Blutgruppe A, Empfänger Blutgruppe 0. Anti-A zerstört 

transfundierte A-Erytrozyten 

Empfänger 

Blutgruppe 

0 

Häufigkeit des Vorkommens eines 

positiven direkten AGT mit Anti-C3d 

1. Autoimmunhämolyse % 

a) vom Wärmetyp 45-50 

b) vom Kältetyp 100 

c) vom Donath-Landsteiner-Typ 100 

2. Alloimmunhämolyse > 95 

3. Medikament-induzierte Immunhämolyse 

durch „Immunkomplex-Mechanismus“ 100 

4. bei Infektionen, z.B. Malaria, Kala Azar, Sepsis u.a.* 

5. nach abgelaufener Immunhämolyse mit Komplementfixation** 

6. bei Krankenhauspatienten 

7. bei Gesunden 

* genaue Häufigkeit ist nicht bekannt 

** in der akuten Phase (Ausnahme paroxysmale nächtliche Hämoglobinurie) 

85 

86 

43


Diagnostik vor Transfusion 


Antikörpersuchtest 

E 

+ 

87 

88 

44



AB0 Blutgruppe - Reaktionsschema 

Antigeneigenschaften 

(Patientenerythrozyten + 

Testserum) 

A B 

Serumeigenschaften 

(Indikatorzellen + 

Patientenserum) 

Anti- 

A (1) A(2) B 0 

Blutgruppe 

Phänotypfrequenz 

- - + + + - 0 44% 

+ - - - + - A A(1) 35% 

A(2) 10% 

- + + + - - B 8% 

+ + - - - - AB A(1)B 2.5% 

A(2)B 0.8% 


AB0 Blutgruppe - Säulentechnik 

Antigeneigenschaften Serumeigenschaften 

Blutgruppe 0 

89 

90 

45


Kreuzprobe 

Durchführung 

Gel mit 


aus: Schönitzer, Prätransfusionelle Untersuchungen 

Kreuzprobe 

Gelzentrifugationsverfahren 

Antihumanglobulintest 

Inkubation, 

Zentrifugation 

Kreuzprobe 

Vorgaben der Richtlinien 

negativ positiv 

91 

Indirekter Antihumanglobulintest 

obligatorisch 

Kontrolle der AB0-Merkmale 

Gültigkeitsdauer: 3 Tage; nach Ablauf der 

Kreuzprobe mit frischem Blut nachkreuzen 

Verlängerung der Gültigkeit der Kreuzprobe 

auf 7 Tage möglich (wie beim 

Antikörpersuchtest ) 

Notfall: Nachholung der Kreuzprobe bei 

Ausgabe ungekreuzter EK 

92 

46


Kreuzprobe 

Vorgaben der Richtlinien 

beim Früh- und Neugeborenen: 

Antikörpersuchtest und Kreuzprobe mit dem Blut der 

Mutter möglich (AB0-Blutgruppe beachten) 

Wiederholung der Kreuzprobe kann entfallen bei 

Verwendung von Baby-EK 

bis Abschluss der 4. Woche nach errechnetem 

Geburtstermin 

wenn bei Mutter und Kind keine Antikörper nachweisbar 

wenn Direkter Antihumanglobulintest des Kindes neg. 

4. ausgewählte 

Krankheiten 

93 

47


Immunhämolytisches 

Syndrom 

Ursache: 

Sensibilisierung von Erythrozyten mit 

Antikörpern (IgG, IgM, IgA) mit und ohne 

Komplementeinwirkung 

Definition: Erythrozyten Überlebenszeit ist 

verkürzt in vivo ► Immunhämolyse 

1. Alloimmunhämolysen 

1.1. Morbus haemolyticus neonatorumfetomaternale 

Inkompatibilität 

1.1.1. AB0-Inkompatibilität 

1.1.2. RhD-Inkompatibilität 

1.1.3. Kell-Inkompatibilität 

und weitere 

95 

96 

48


Schwangerschaft 

MHN bei Rhesus D-Inkompatibilität 

mit freundlicher Genehmigung Dr. E. Klinker, Universitätsklinikum Würzburg 

Ursache feto-maternale Inkompatibilität: 

Plazentagängigkeit von Antikörpern 

Plazenta 

IgG-Antikörper überqueren die Plazenta (aktiver Transportmechanismus) 

IgM-Antikörper überqueren die Plazenta nicht (kein Transportmechanismus) 

IgG 

Plazenta 

IgM 

Nabelschnur 

97 

98 

49


Fetale Erythroblastose/ Morbus 

haemolytics neonatorum (MHN) bei Rh-D 

Inkompatibilität 

Plazenta 

Mütterliche Antikörper überqueren die Plazenta und zerstören kindliche 

Erythrozyten. 

IgG 

Mutter: Rh-D 

negativ 

Kind: Rh-D positiv 

Anti-D Antikörper 

MHN bei AB0-Inkompatibilität 

99 

100 

50


MHN Klinker et al., Transfus durch Med Hemother 2007;34(suppl Anti-D 

1):1-74 

2. Schwangerschaft, Mutter ccddee 

Woche 6: Antikörpersuchtest negativ, Vaginalblutung, 

Anti-D Prophylaxe 

Woche 20: erneute Vaginalblutung Anti-D Titer* 16, 

erneute Anti-D Prophylaxe 

Woche 26: Anti-D Titer 128 Titer bei Prophylaxe 1:2 bis 1: 32! 

Woche 29: Sonographie normal 

Woche 35: Hydrops fetalis, sofortige Sectio 

Mutter :Anti-D/C (Anti-G) Titer 512/16 

Neugeborenes: 0 Rh pos., ccD.Ee, Anti-D 

Titer 128, Elution Anti-D/C (Anti-G) 

Reanimation, Beatmung für 15 Tage, nach 10 

Wochen Entlassung 

*Säulenagglutinationstechnik 


Antigenausprägung beim Föten 

Aus: Schönitzer, Prätransfusionelle Untersuchungen, 1998 

101 

102 

51


Befundkonstellation bei Rh-D-MHN und bei AB0-MHN 


Anti-D 

92,4% 

Fetale Erythroblastose/Morbus haemolyticus neonatorum 

Relevanz von irregulären erythrozytären Antikörpern 

Antikörper bei fetaler/neonataler Erythroblastose 

MHN mit Notwendigkeit der Intervention 

durch intrauterine Transfusion (1991/92). 

Andere Antikörper 

7,6% 

103 

Anti-E 

14,3% 

Anti-Fy-a 

28,6% 

Anti-K 

28,6% 

Anti-c 

28,6% 

Am häufigsten bei schwerwiegenden Formen involviert: Anti-D, -c, -K 

MHN häufig bei: Anti-Fy(a), -Jk(a), -Cw, -e, -Ce 

Eher milde Verlaufsform bei: Anti-E, -C 

Kein MHN zu erwarten bei: Anti-Le(a), -Le(b), Lu(a), -P, -N, -HTLA (z.B. -Kn(a) 

104 

52



Anti-D Bildung bei AB0-Inkompatibilität 

Blutgruppe 

A 

Rh posirtiv 

Plazenta 

Kind Mutter 

Blutgruppe 

0 

Rh negativ 

Anti-A 

Anti-B 

Beispiel 0/A Konstellation: 

Reduziertes Risiko der Anti-D Bildung der Mutter bei AB0-Inkompatibilität 

2. Erythroblastose bei 

Stammzelltransplantation 

Empfänger nimmt AB0- Blutgruppe des 

Spenders an 

Vorkommen: AB0-ungleicher 

Transplantation 

Beachtung der Kompatibilität der 

Blutpräparate!!! 

105 

106 

53


107 

3. Hämolytische 

Transfusionsreaktion 

VL: Nebenwirkung 

54


4. Autoimmunhämolyse 

Wärme-/Kältetyp 

paroxysmale Kältehämoglobinurie vom Typ Donath-Landsteiner 

Autoimmunhämolysen (AIHA) Bildung von Auto-AK 

1. Exogene Faktoren führen zur Modifikation der 

Erythrozytenantigene, z.B. Viren, Bakterien, 

Medikamente, Alkohol 

2. Fremd-AK haben eine kreuzreagierende Wirkung zu 

Erythrozytenantigenen 

3. Verlust der Selbsttoleranz 

4. Genetische Dispositionen 

5. Somatische Mutation AK-bildender Zellen 

„verbotene Klone², z.B. Lymphome 

6. Beeinträchtigung der Immunregulation 

(Thymus-KH) 

7. medikamentös bedingte Immunhämolyse 

8. Paroxysmale nächtliche Hämoglobinurie 

9. Sonderformen 

Diagnosestellung: 

klinische und serologische Befunde 

109 

110 

55


Patient L. W. Kälteauto- Antikörper bei VD 

Spezifität Auto- Anti- I 

Temperaturamplitude bis 30 °C 

LTx am 14.05.2005 bei Äthyltoxischer Leberzirrhose, 

Ösophagusvarizen II. Grades u.a. 

Vorher 4 Plasmaaustauschbehandlungen bis zur Tx 

(Austausch je 0,75 fache PV des Patienten/ 3-4 Wochen 

mit 85% SD- Plasmen und 15% Humanalbumin 5%) 

letzter PA 2 Tage vor Tx 

Tx erfolgte bei 25°C ohne Komplikationen 

Hämotherapie: 3 TK`s, 6 SD- Plasma,4 x PPSB a 500 

mg, 2 x 2 Fibrinogen 

4 °C 4 °C 25°C 25°C 37°C 37°C 

20.01.2005 15.05.2005 20.01.2005 13.05.2005 20.01.2005 13.05.2005 

vor 1. PA nach 4. PA vor 1. PA nach 4. PA vor 1. PA nach 4. PA 

Pat. Ery 1:128 1:2 1:16 negativ 1:4 negativ 

Nabel- Ery 1:32 negativ 1:16 negativ negativ negativ 

Adulte 0-Ery 1:128 1:2 1:64 negativ 1:8 negativ 

Pap. Ery 1:2048 1:4 1:32 1:2 1:32 negativ 

Kälteagglutinintiter 

4°C 4°C 25°C 25°C 37°C 37°C 

20.01.05 13.05.05 20.01.05 13.05.05 20.01.05 13.05.05 

vor 1. PA nach 4. PA vor 1. PA nach 4. PA vor 1. PA nach 4. PA 

Pat. Ery 1:128 1:2 1:16 negativ 1:4 negativ 

Nabel-Ery 1:32 negativ 1:16 negativ negativ negativ 

Adulte 0- Ery 1:128 1:2 1:64 negativ 1:8 negativ 

Pap. Ery 1:2048 1:4 1:32 1:2 1:32 negativ 

AK- Kontrolle nach Tx 

24.05.2005 negativ 

23.06.2005 negativ 

16.02.2006 negativ 

111 

56


Erythrozyten 

Erythrozyten 

140 

120 

100 

80 

60 

40 

20 

0 

enzymbehandelte Erythrozyten 

10000 

1000 

14.01.05 

100 

64 

10 

1 

128 

2048 

14.01.05 

20.01.05 

04.02.05 vor 1. PA 

04.02.05 nach 1. PA 

22.02.05 

01.03.05 

08.03.05 

15.03.05 

16.03.05 nach 2. PA 

22.03.05 

29.03.05 

05.04.05 

12.04.05 

15.04.05 

04.05.05 

12.05.05 

13.05.05 nach 4. PA 

23.06.05 

16.02.06 

128 128 

20.01.05 

64 

8 

8 4 

32 

3264 

32 

2 

8 

32 

128 

32 32 

32 32 

16 

2 

4 

2 

8 8 8 8 2 21 

8 

2 

16 

64 

16 16 16 

4 4 4 

2 

2 

1 

0 

4 

16 16 

8 

8 8 

4 4 4 

2 

2 2 

Datum 

Adulte 0- Erythrozyten 

04.02.05 vor 1. PA 

04.02.05 nach 1. PA 

22.02.05 

01.03.05 

08.03.05 

15.03.05 

16.03.05 nach 2. PA 

22.03.05 

29.03.05 

05.04.05 

12.04.05 

15.04.05 nach 3. PA 

04.05.05 

12.05.05 

13.05.05 nach 4. PA 

23.06.05 

16.02.06 

Datum 

4 

16 

8 

4 4 8 

4°C 

25°C 

37°C 

4°C 

25°C 

37°C 

2 2 4 2 

113 

114 

57

Schwerpunkte - Institut für Transfusionsmedizin

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