Acetylcholine Receptor Autoantibodies (ARAb) RRA - IBL international

Arbeitsanleitung 

Acetylcholine Receptor 

Autoantibodies (ARAb) 

RRA 

Radiorezeptorassay zur semi-quantitativen in-vitro-Bestimmung von 

Autoantikörpern gegen den Acetylcholinrezeptor 

in humanem Serum und Plasma. 

RE21021 RE21023 

100 30 

2-8°C 

I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H 

Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0)40-53 28 91-0 IBL@IBL-International.com 

D-22335 Hamburg, Germany Fax: +49 (0)40-53 28 91-11 www.IBL-International.com

Acetylcholine Receptor Autoantibodies (ARAb) RRA (RE21021/RE21023) 

DEUTSCH 

1. ZWECKBESTIMMUNG 

Radiorezeptorassay zur semi-quantitativen in-vitro-Bestimmung von Autoantikörpern gegen den 

Acetylcholinrezeptor in humanem Serum und Plasma. Der Test ist ein wichtiges Hilfsmittel zur 

Differentialdiagnose der Myasthenia gravis. 

2. KLINISCHE BEDEUTUNG 

Laut Literatur werden bei 80-90 % der Patienten mit einer generalisierten Myasthenie und bei 55-70 % der 

Patienten mit einer rein okulären Symptomatik Autoantikörper gegen Acetylcholin-Rezeptoren gefunden. Die 

Höhe der Antikörpertiter korreliert interindividuell nicht mit der Schwere der Erkrankung. Dem gegenüber 

besteht intraindividuell eine sehr gute Korrelation zwischen Veränderungen der Acetylcholin-Rezeptor- 

Antikörperkonzentration und des klinischen Befundes. Die Autoantikörper-Bestimmung ist somit eine 

hochspezifische und sensitive Methode in der Diagnostik und Verlaufsbeurteilung der Myasthenia gravis. 

Insbesondere hat sich gezeigt, daß ein Anstieg der Autoantikörper häufig um mehrere Wochen einer 

klinischen Verschlechterung vorausgeht. 

3. TESTPRINZIP 

Acetylcholinrezeptoren aus humanem Muskelgewebe werden in diesem Test als Antigen verwendet. Die 

Rezeptoren sind mit 125 I-alpha-Bungarotoxin, einem Schlangengift, das hochspezifisch und mit sehr hoher 

Affinität an den Rezeptor bindet, radioaktiv markiert. Bei der Inkubation mit Patientenproben binden sich 

Acetylcholin-Rezeptor-Autoantikörper an die markierten Rezeptoren. Die gebildeten Immunkomplexe 

werden mit einem zugegebenen Anti-human-IgG-Antiserum präzipitiert. Die im Präzipitat vorhandene 

Radioaktivität ist direkt proportional zur Konzentration der Autoantikörper gegen Acetylcholinrezeptoren in 

der Probe. 

4. WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN 

1. Nur zum In-vitro-Gebrauch. Nur für den Gebrauch durch Fachpersonal. 

2. Vor der Testdurchführung sollte die Arbeitsanleitung vollständig und sorgfältig gelesen werden und 

verstanden worden sein. Die gültige Version aus dem Kit verwenden. 

3. Im Falle einer erheblichen Beschädigung der Testpackung ist IBL bzw. der jeweilige Lieferant innerhalb 

einer Woche nach Empfang der Ware schriftlich zu benachrichtigen. Beschädigte Komponenten dürfen 

nicht zur Testdurchführung verwendet werden, sondern sollten solange aufbewahrt werden, bis der 

Transportschaden endgültig geregelt ist. 

4. Chargen-Nummer und Verfallsdatum beachten. Es dürfen keine Reagenzien aus unterschiedlichen 

Chargen in einem Test verwendet werden. Verfallene Reagenzien dürfen nicht verwendet werden. 

5. Gute Laborpraxis und Sicherheitsrichtlinien beachten. Je nach Bedarf sollten Laborkittel, Einmal- 

Latexhandschuhe und Schutzbrillen getragen werden. 

6. Reagenzien dieses Kits, die Gefahrstoffe enthalten, können Reizungen der Augen und der Haut 

hervorrufen. Siehe Angaben in KOMPONENTEN DES KITS und auf den Etiketten. 

Sicherheitsdatenblätter für dieses Produkt sind auf der IBL-Homepage zum Download verfügbar oder 

auf Anfrage direkt von IBL erhältlich. 

7. Chemikalien und vorbereitete oder gebrauchte Reagenzien sind unter Beachtung der jeweiligen 

nationalen Bestimmungen als Gefahrstoffabfall zu entsorgen. 

8. Für den Umgang mit radioaktiven Stoffen gelten die Vorschriften der Strahlenschutzverordnung. 

Radioaktive Reagenzien dürfen nur an Personen abgegeben werden, die im Besitz einer gültigen 

Umgangsgenehmigung sind. 

9. Radioaktives Material sollte nur in besonders gekennzeichneten, regelmäßig überwachten Bereichen 

des Labors, die nur befugtem Personal zugänglich sind, gehandhabt werden. Einmal-Geschirr und - 

Abdeckmaterial verwenden. Die übliche Schutzausrüstung ist zu tragen (Laborkittel, Einmal- 

Handschuhe und Dosimeter). Verschüttete Tropfen sofort aufnehmen und kontaminierten Bereich mit 

einem Dekontaminierungsmittel reinigen. Jegliches kontaminierte Material ist als radioaktiver Abfall zu 

behandeln. 

10. Alle Reagenzien dieses Kits, die humanes Serum oder Plasma enthalten, ergaben bei der Prüfung auf 

anti-HCV, HBsAg bzw. Antikörper gegen HIV I/II-Virus ein negatives Ergebnis. Trotzdem kann das 

Vorhandensein solcher infektiöser Erreger nicht mit absoluter Sicherheit ausgeschlossen werden. Die 

Reagenzien sollten deshalb wie potentiell infektiöses Material behandelt werden. 

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DEUTSCH 

5. LAGERUNG UND HALTBARKEIT 

Der Kit wird bei Umgebungstemperatur angeliefert und sollte bei 2-8 °C gelagert werden. Vor Hitze und 

direkter Sonneneinstrahlung schützen. Hinweise zur Lagerung und Haltbarkeit der Proben und vorbereiteten 

Reagenzien sind den entsprechenden Kapiteln zu entnehmen. 

6. PROBENGEWINNUNG UND -AUFBEWAHRUNG 

Serum, Plasma (EDTA) 

Die üblichen Vorsichtsmaßnahmen bei der Blutabnahme sind einzuhalten. Die chemische Integrität der 

Blutproben muss vom Zeitpunkt der Blutabnahme bis zur Testdurchführung erhalten bleiben. Keine 

hämolytischen, ikterischen oder lipämischen Proben verwenden. Getrübte Proben sollten vor der 

Testdurchführung zentrifugiert werden, um Partikel zu entfernen. 

Lagerung: 2-8 °C ≤ -20 °C (aliquotiert) 

Haltbarkeit: 1 w 6 mon 

7. KOMPONENTEN DES KITS 

RE21021 RE21023 Symbol Komponente 

3 x 3.6 mL 1 x 3.6 mL TRACER LYO 

1 x 22 mL 1 x 7 mL ANTISERUM 

1 x 1.5 mL 1 x 1.5 mL CAL A 

1 x 5 x 0.2 mL 1 x 5 x 0.2 mL CAL B-F 

1 x 0.2 mL 1 x 0.2 mL CONTROL CO 

1 x 0.2 mL 1 x 0.2 mL CONTROL + 

2 x 110 mL 1 x 110 mL WASHBUF 

1 x 12 mL 1 x 12 mL BUF 

8. ZUSÄTZLICHES MATERIAL (NICHT IM KIT ENTHALTEN) 

Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. 

Wiederholtes Auftauen und Einfrieren vermeiden. 

ARAb 125 I-Tracer lyophilisiert 

Aktivität: < 100 kBq (2.7 µCi) 

125 I alpha-Bungarotoxin markierter humaner Acetylcholinrezeptor. 

IgG Antiserum 

Gebrauchsfertig. Enthält: anti-humanes IgG, 0.1 % NaN 3. 

Standard A 

0 nmol/L 

Gebrauchsfertig. Standard A = Probendiluent. 

Enthält: Humanserum, Antikörper gegen Acetylcholinrezeptoren 

(Standard A: humanes Normalserum), 0.1 % NaN 3. 

Standard B-F 

0; 0.2; 0.5; 1.2; 3.0; 8.0 nmol/L 

Gebrauchsfertig. Standard A = Probendiluent. 

Enthält: Humanserum, Antikörper gegen Acetylcholinrezeptoren 

(Standard A: humanes Normalserum), 0.1 % NaN 3. 

Cut-Off Kontrolle 

Gebrauchsfertig. Enthält: Humanserum, Antikörper gegen 

Acetylcholinrezeptoren, 0.1 % NaN 3. 

Konzentrationen / Akzeptanzbereiche siehe QC-Zertifikat. 

Positivkontrolle 

Gebrauchsfertig. Enthält: Humanserum, Antikörper gegen 

Acetylcholinrezeptoren, 0.1 % NaN 3. 

Konzentrationen / Akzeptanzbereiche siehe QC-Zertifikat. 

Waschpuffer 

Gebrauchsfertig. Enthält: PBS, 0.01 % Triton X-100, 0.1 % NaN 3. 

Puffer 

Gebrauchsfertig. Zur Rekonstitution des Tracers. 

Enthält: PBS, 0.5 % Triton, 0.005 % NaN 3. 

1. Pipetten (Multipette Eppendorf oder vergleichbare Produkte, < 3 % VK). Volumina: 20, 100, 200, 1000 µL 

2. Plastikröhrchen, Rundboden (12 x 75 mm) 

3. Reagenzglasgestell 

4. Dekantier- oder Absaugsystem 

5. Vortex-Mischer 

6. Zentrifuge (vorzugsweise mit Kühlung); ≥ 2000 x g 

7. Gammacounter 

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DEUTSCH 

9. HINWEISE ZUR TESTDURCHFÜHRUNG 

1. Fehler bei der Handhabung der Proben oder Abweichungen von der beschriebenen Testdurchführung 

können die Ergebnisse verfälschen. Die angegebenen Pipettiervolumina, Inkubationszeiten, 

Temperaturen und Vorbereitungsschritte sind unbedingt gemäß Arbeitsanleitung einzuhalten. Nur 

kalibrierte Pipetten und Geräte verwenden. 

2. Sobald mit der Testdurchführung begonnen wird, sollten alle Arbeitsschritte ohne Unterbrechung 

durchgeführt werden. Es ist sicherzustellen, dass alle benötigten Reagenzien, Geräte und Hilfsmittel zur 

rechten Zeit zur Verfügung stehen. Alle Reagenzien und Proben müssen auf Raumtemperatur 

(18-25 °C) gebracht und vor Gebrauch vorsichtig ohne Schaumbildung gemischt werden. 

3. Kontaminationen der Reagenzien, Pipetten und Wells/Röhrchen sind zu vermeiden. Neue Einmal- 

Pipettenspitzen für jede zu pipettierende Komponente und jede Probe verwenden. Die Deckel der 

Fläschchen nicht vertauschen. Nicht benötigte Fläschchen immer verschlossen halten. Wells/Röhrchen 

oder Reagenzien dürfen nicht wiederverwendet werden. 

4. Es wird empfohlen, Doppelbestimmungen durchzuführen, um eventuelle Pipettierfehler zu erkennen. 

5. Alle Röhrchen sollten eindeutig beschriftet werden. 

6. Die Erdbeschleunigung einer Zentrifuge (g) entspricht nicht der Umdrehungszahl (U/min), sondern muss 

in Abhängigkeit vom Rotordurchmesser der verwendeten Zentrifuge berechnet werden. 

10. TESTVORBEREITUNGEN 

10.1. Vorbereitung lyophilisierter oder konzentrierter Komponenten 

Verd. / rekonst. mit Diluent Bemerkungen Lagerung Haltbarkeit 

TRACER LYO 3.6 mL BUF 

Mind. 30 min vor 

Gebrauch herstellen. 

Ohne Schaumbildung 2-8 °C* 14 d 

mischen. 

Trübe Lösung. 

*Nach dem Rekonstituieren nicht einfrieren. 

10.2. Probenverdünnung 

Positive Patientenseren zeigen ein individuelles Verdünnungsverhalten. Mit zunehmender Autoantikörper- 

Konzentration erreichen die gemessenen Werte ein nichtlineares Plateau. Dadurch kann es in nicht 

ausreichend verdünnten Seren zu einer falschen Einschätzung der tatsächlichen Antikörper-Konzentration 

kommen. Daher ist es erforderlich, die Verdünnungslinearität für jede einzelne positive Probe zu bestimmen. 

Es wird empfohlen, alle unbekannten Proben zunächst unverdünnt zu messen. Proben mit Werten über 

1.5 nmol/L sollten mit Nullstandard in geeigneter Weise verdünnt (z.B. 1:10) und erneut gemessen werden. 

Die Ergebnisse der verdünnten Proben müssen im linearen Bereich des Assays (0.25 bis 1.5 nmol/L) liegen. 

Bei Verlaufskontrollen von Patienten sollte stets die gleiche Verdünnungsstufe für jede Probe desselben 

Patienten verwendet werden. 

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DEUTSCH 

11. TESTDURCHFÜHRUNG 

1. 20 µL Standards, Kontrollen und Patientenproben pipettieren. 2 Röhrchen für Totalaktivität (T) 

vorsehen. 

Hinweis: Für eine qualitative Bestimmung nur die Kontrollen (Standard A als 

Negativkontrolle, Cut-off und Positive Kontrolle) und Serumproben pipettieren. 

2. 100 µL 125 I-Acetylcholin-Rezeptor in jedes Röhrchen pipettieren. Mischen. T beiseite stellen. 

3. 2 h bei RT (18-25 °C) inkubieren. 

4. 200 µL IgG Antiserum in jedes Röhrchen (ausser T) pipettieren (vor Gebrauch aufschütteln). 

Mischen. 

5. 30 min. bei RT (18-25 °C) inkubieren. 

6. 1 mL Waschpuffer in jedes Röhrchen pipettieren (ausser T). Mischen. 

7. 15 min. bei 2000-3000 x g zentrifugieren (gekühlte Zentrifuge empfohlen). 

8. Überstand dekantieren oder absaugen (ausser T). Pellet nicht berühren. 

9. 1 mL Waschpuffer in jedes Röhrchen pipettieren (ausser T). 

10. Pellets mindestens 20 s resuspendieren (Vortex). 

11. 15 min. bei 2000-3000 x g zentrifugieren. 

12. Überstand dekantieren oder absaugen (ausser T). 

13. Mind. 1 min. im Gammacounter messen. 

12. QUALITÄTSKONTROLLE 

Die Testergebnisse sind nur gültig, wenn der Test gemäß der vorliegenden Arbeitsanleitung abgearbeitet 

wurde. Ferner muss der Anwender die GLP-Regeln (Good Laboratory Practice) und andere einschlägige 

Normen und Gesetze beachten. Alle Kit-Kontrollen müssen innerhalb der Akzeptanzbereiche, die auf den 

Etiketten und dem QC-Zertifikat angegeben sind, gefunden werden. Wenn die Kriterien nicht erfüllt sind, 

sind die Ergebnisse ungültig und der Test sollte wiederholt werden. Jedes Labor sollte darüber hinaus 

eigene bekannte Proben als weitere Kontrollen mitführen. Es wird empfohlen, an den einschlägigen 

Ringversuchen teilzunehmen. 

Bei Abweichungen sind die folgenden Fehlermöglichkeiten zu überprüfen: Haltbarkeit der (vorbereiteten) 

Reagenzien, Lagerungsbedingungen, Pipetten, Geräte und Hilfsmittel, Inkubationsbedingungen und 

Waschmethoden. 

13. TESTAUSWERTUNG 

Berechnen der prozentualen Bindung % B/T (% Bindung/Gesamt) für jeden Standard wie folgt: 

Mittelwert cpm (Standard) x 100 

% B/T = 

Totalaktivität 

Die erhaltenen %B/T der Standards (y-Achse, linear) gegen deren Konzentration (x-Achse, logarithmisch) 

auftragen, entweder auf semi-logarithmischem Papier oder durch ein entsprechendes Computerprogramm. 

Bei Verwendung eines Computerprogramms werden die Cubic-Spline-Methode, 4-Parameter-Analyse (linlog) 

oder Logit-Log-Berechnung empfohlen. 

Zur Berechnung der Standardkurve sollten alle Werte der Standards verwendet werden (bei Doppelwerten 

kann ein offensichtlicher Ausreißerwert eliminiert und stattdessen der plausiblere Einzelwert verwendet 

werden). 

Die Konzentrationen der Proben können direkt von der Standardkurve abgelesen werden. 

Die Werte von verdünnten Proben müssen mit dem entsprechenden Verdünnungsfaktor multipliziert 

werden. 

Proben, die oberhalb des höchsten Standards gemessen werden, müssen wie in TESTVORBEREITUNGEN 

beschrieben verdünnt und erneut analysiert werden. 

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Typische Standardkurve 

(Beispiel. Nicht zur Testauswertung verwenden!) 

Standard ARAb 

(nmol/L) 

Mittelwert cpm B/T 

(%) 

A 0 400.0 0.48 

B 0.2 2442.3 2.44 

C 0.5 5042.6 5.54 

D 1.2 10404.1 11.94 

E 3.0 17866.1 20.85 

F 8.0 23895.4 28.05 

B/T (%) 

30 

25 

20 

15 

10 

5 

0 

0,1 1 10 

ARAb (nmol/L) 

14. INTERPRETATION DER ERGEBNISSE 

ARAb (nmol/L) Interpretation 

< 0.25 negativ 

0.25–0.4 grenzwertig 

> 0.4 positiv 

Therapeutische Konsequenzen sollten nicht allein aufgrund 

der mit diesem Test ermittelten Werte getroffen werden, 

sondern nur unter Berücksichtigung aller klinischen 

Beobachtungen und weiterer diagnostischer Mittel. 

15. NORMWERTE 

Serum und EDTA Plasma von (130/129) augenscheinlich gesunden Spendern wurden untersucht (siehe 

Tabelle unten). Dabei wurden Normwerte zwischen 0.013 und 0.116 nmol/L für Serum bzw. zwischen 0.013 

und 0.086 nmol/L für EDTA Plasma gefunden. Die obere Grenze des Referenzbereiches (Normalbereichs) 

liegt bei 0.110 nmol/L für Serum bzw. 0.081 nmol/L für EDTA Plasma (99% Perzentile). Autoantikörpertiter 

über 0.4 nmol/L sind indizierend für Myasthenia gravis [3,4]. Werte zwischen 0.25 und 0.4 nmol/L sind als 

grenzwertig anzusehen. Bei Anwendung dieser Werte ergaben sich 93.3 % Spezifität und 100 % 

Sensitivität. (S. Punkt 17. Klinische Sensitivität / Spezifität). 

Mittelwert (nmol/L) SD (nmol/L) 95 % Perzentile (nmol/L) 99 % Perzentile (nmol/L) n 

Serum 0.029 0.018 0.060 0.110 130 

Plasma (EDTA) 0.023 0.013 0.048 0.081 129 

Jedes Labor sollte unter Berücksichtigung regionaler Gegebenheiten eigene Normalwertbereiche erstellen. 

16. GRENZEN DES VERFAHRENS 

Die korrekte Durchführung der Probengewinnung ist entscheidend für die Testergebnisse. Näheres siehe 

PROBENGEWINNUNG UND -AUFBEWAHRUNG. 

Angaben zu Kreuzreaktivitäten sind im Kapitel TESTCHARAKTERISTIKA zu finden. 

Die folgenden Blutbestandteile haben bis zu der angegebenen Konzentration keinen signifikanten Einfluss 

auf die Testergebnisse (+/- 15 %): 

Hämoglobin 

Bilirubin 

Triglyceride 

4.00 mg/mL 

0.50 mg/mL 

30.00 mg/mL 

17. TESTCHARAKTERISTIKA 

Analytische Spezifität (Kreuzreaktivität) 

Es wurden keine Kreuzreaktivitäten gefunden gegen: 

anti-Sm-Ak, RNP-Ak, Ro (SS-A)-Ak, La (SS-B)-Ak, dsDNA-Ak, RF-Ak, ANA-Ak. 

Analytische Sensitivität (Grenze des Leerwertes) 

Die Analytische Empfindlichkeit wurde berechnet aus dem Mittelwert der cpms von Standard-A 

(Nullstandard) plus 2 SD von 20 replizieren Analysen. Es wurde ein Wert von 0.01 nmol/L gefunden. 

Funktionellle Sensitivität (Quantifizierungsgrenze LOQ) 

Die funktionelle Sensitivität wurde aus dem Variationskoeffizienten von sehr niedrigen Serumproben 

bestimmt. Eine Regressionskurve mit r = 0.975 wurde mit Hilfe der Winstat Software erstellt. Die niedrigste 

ARAb-Konzentration, die mit einem Variationskoeffizienten unterhalb von 20 % gemessen werden kann, ist 

0.07 nmol/L. 

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Präzision 

Die Intra-Assay-Variation wurde bestimmt aus 22 replizieren Messungen von Kontrollproben innerhalb 

eines Prüfungslaufs. Die Probenwerte, die in den Bereich der Standardkurve fallen, wurden am 

Herstellerstandort in Einzelbestimmungen gemessen. Die Ergebnisse sind im Folgenden dargestellt: 

Messungen Nr. Serum 1 

(nmol/L) 

Serum 2 

(nmol/L) 

Serum 3 

(nmol/L) 

Serum 4 

(nmol/L) 

Serum 5 

(nmol/L) 

Serum 6 

(nmol/L) 

Serum 7 

(nmol/L) 

Mittelwert 0.19 0.41 0.75 1.55 2.62 4.57 5.72 

SD 0.01 0.01 0.02 0.06 0.17 0.39 0.65 

VK (%) 5.1 3.1 2.8 3.8 6.3 8.5 11.3 

Die Inter-Assay-Variation von 7 Serumproben, die den Bereich der Standardkurve abdecken, wurde in 

14/15 verschiedenen Prüfungsläufen gemessen. Die Assays wurden in verschiedenen 

Herstellerlaboratorien mit 3 verschiedenen Technikern mit einer Assaycharge durchgeführt. Pro Tag wurden 

ein oder zwei Prüfungen durchgeführt, die Standards und Proben wurden in Doppelbestimmung gemessen. 

Die Verwendung von unterschiedlichen Geräten führte zu ähnlichen Ergebnissen. Der mittlere 

Variationskoeffizient wurde bei 7.0 % gefunden (Bereich 2.8-13.1 %). 

Serum Mittelwert SD VK n 

Probe (nmol/L) (nmol/L) (%) 

1 0.21 0.01 5.3 14 

2 0.40 0.01 2.8 15 

3 0.75 0.02 3.0 15 

4 1.61 0.07 4.3 15 

5 2.63 0.20 7.7 15 

6 4.72 0.59 12.4 15 

7 6.10 0.80 13.1 15 

Linearität 

Vier Serumproben, die verschiedene Acetylcholinrezeptorantikörperkonzentrationen hatten, wurden seriell 

mit dem Nullstandard (Standard A) verdünnt und der Acetylcholinrezeptorantikörperbestandteil in den 

verdünnten Proben mit RRA getestet. 

Probe Verdünnung Gemessen 

(nmol/L) 

1 

2 

Wiederfindung 

(%) 

Probe Verdünnung Gemessen 

(nmol/L) 

- 7.038 100 - 2.711 100 

1:2 3.927 112 1:2 1.164 86 

1:4 1.833 104 1:4 0.565 83 

Wiederfindung 

(%) 

1:8 0.924 105 3 1:8 0.263 78 

1:16 0.467 106 1:16 0.134 79 

1:32 0.219 100 1:32 0.076 90 

1:64 0.122 111 

1:64 0.057 135 

- 4.926 100 - 1.624 100 

1:2 2.568 104 1:2 0.808 100 

1:4 1.200 97 1:4 0.416 102 

1:8 0.553 90 4 1:8 0.205 101 

1:16 0.269 87 1:16 0.108 106 

1:32 0.124 81 1:32 0.048 95 

1:64 0.075 97 

1:64 0.032 126 

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Wiederfindung 

Gesteigerte Mengen an Acetylcholinrezeptorantikörpern wurden Serumproben mit verschiedenen 

Acetylcholinrezeptorantikörper-Anfangskonzentrationen hinzugefügt. Jede (native und nicht-native) Probe 

wurde in Doppelbestimmung in einem Lauf geprüft. Es wurden die 

Acetylcholinrezeptorantikörperkonzentrationen gemessen und die Wiederfindungsraten in Prozent 

berechnet. Die mittlere Wiederfindung von Acetylcholinrezeptorantikörpern bei allen Serumproben lag bei 

106 % ± 19 % (Bereich 87-153 %). 

Serum 

Nr. 

1 

2 

3 

Endogenes ARAb 

(nmol/L) 

Zugefügt ARAb 

(nmol/L) 

ErwartetARAb 

(nmol/L) 

Gemessen ARAb 

(nmol/L) 

0.00 0.22 0.22 0.20 91 

0.00 0.60 0.60 0.52 87 

0.00 1.80 1.80 2.11 117 

0.21 0.22 0.43 0.43 100 

0.21 0.60 0.81 0.87 107 

Wiederfindung 

(%) 

0.21 1.80 2.01 3.07 153 

0.48 0.22 0.70 0.66 94 

0.48 0.60 1.08 0.97 90 

0.48 1.80 2.28 2.53 111 

Klinische Sensitivität / Spezifität 

Es wurde ein Vergleich des Acetylcholinrezeptorantikörpers mit Hilfe einer RIA-Methode und des IBL ARAb 

RRA Tests für klinisch diagnostizierte Myasthenia Gravis Patienten, die positiv oder negativ getestet 

wurden, durchgeführt. 

Achtunddreißig Proben waren positiv für MG, und fünfzehn Proben waren negativ für MG. Die zweideutigen 

Ergebnisse beider Prüfungen wurden als positiv betrachtet. 

Testcharakteristika der anderen RIA und der IBL ARAb RRA-Methoden mit positiven Myasthenia gravis 

Proben: 

Anderer Test Anderer Test Gesamt 

Positiv Negativ 

IBL Positiv 38 0 38 

IBL Negativ 0 0 0 

38 0 38 

Sensitivität anderer Assay = 100 % (38/38) mit 95 % CI: 90.8 % bis 100 %; 

Sensitivität IBL Assay = 100 % (38/38) mit 95 % CI: 90.8 % bis 100 %. 

Testcharakteristika der anderen RIA und der IBL ARAb RRA-Methoden mit negativen Myasthenia gravis 

Proben: 

Anderer Test Anderer Test Gesamt 

Positiv Negativ 

IBL Positiv 1 0 1 

IBL Negativ 2 12 14 

3 12 15 

Spezifität anderer Assay = 80.0 % (12/15) mit 95 % CI: 51.9 % bis 95.7 %; 

Spezifität IBL Assay = 93.3 % (14/15) mit 95 % CI: 68.1 % bis 99.8 %. 

Methodenvergleich 

Die Ergebnisse von achtunddreißig MG-positiven und fünfzehn MG-negativen Proben wurden mit Hilfe der 

linearen Regressionsanalyse. Die Ergebnisse aus den Messungen der Serumproben mit dem RIA und dem 

IBL RRA ergaben eine Korrelation von R 2 = 0.9366 mit folgender Regressionsformel: 

IBL-Assay = 0.703 (RIA) - 0.181; N = 53; R = 0.967 

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DEUTSCH 

In der Tabelle unten werden die qualitativen Ergebnisse der Prüfungen verglichen. Die zweideutigen 

Ergebnisse wurden als positiv betrachtet. 

anderer 

Test Positiv 

anderer Test 

Mehrdeutig 

anderer Test 

Negativ 

IBL Positiv 37 0 0 37 

IBL Mehrdeutig 2 0 0 2 

IBL Negativ 0 2 12 12 

39 2 12 53 

Positive Übereinstimmung = 95.1 % (39/41) mit 95 % CI: 83.5 % bis 99.4 %; 

Negative Übereinstimmung = 100 % (12/12) mit 95 % CI: 73.5 % bis 100 %. 

Vergleich Serum – Plasmaproben 

27 Patientenproben, jeweils Patientenserum und EDTA-Plasma, wurden mit dem IBL-ARAb RRA bestimmt. 

Es konnte kein signifikanter Unterschied gefunden werden. 

Der Korrelationskoeffizient der linearen Regression lag bei R = 0.984. Die Regressionsgerade wurde 

folgendermaßen berechnet: 

Plasma = 0.931 x (Serum) + 0.062 

25 

20 

Y = 0,062 + 0,931*X 

95,0% Confidence Interval band 

Y = X 

Plasma [nmol/L] 

15 

10 

5 

0 

0 5 10 15 20 25 

Serum [nmol/L] 

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DEUTSCH 

18. LITERATUR ÜBER DAS PRODUKT 

1. Bilinska M. Seronegative myasthenia gravis, Pol Merkuriusz Lek. 2002 Jan;12(67):49-53 

2. Ferrero B, Aimo G, Pagni R, Bergamasco B, Bongioanni MR, Bergamini L, Durelli L. Modified and 

improved anti-acetylcholine receptor (AChR) antibody assay: comparison of analytical and clinical 

performance with conventional anti-AChR antibody assay. Clin. Chem., 43 (5): 824-831 (1997) 

3. Toyka KV, Heininger K. Acetylcholine receptor antibodies in the diagnosis of myasthenia gravis. Study of 

406 confirmed cases] Dtsch Med Wochenschr. 1986 Sep 19; 111(38):1435-9. 

4. Jan Rıcny, Libuse Simkova and Angela Vincent. Determination of Anti-Acetylcholine Receptor 

Antibodies in Myasthenic Patients by Use of Time-resolved Fluorescence. Clinical Chemistry 48:3, 

549–554 (2002) 

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Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύµβολα 

REF 

LOT 

Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N.–Cat.: / Αριθµός-Κατ.: 

Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθµός -Παραγωγή: 

Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / 

Χρησιµοποιείται από: 

No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / 

Αριθµός εξετάσεων: 

CONC Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συµπύκνωµα 

LYO 

IVD 

Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασµένο 

In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In 

Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In 

Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ∆ιάγνωση. 

Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos 

para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. 

Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / 

Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni 

prima dell’uso. / ∆ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. 

Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / 

Garder à l’abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la 

luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να 

φυλάσσεται µακριά από θερµότητα και άµεση επαφή µε το φως του ηλίου. 

Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση 

στους: 

Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: 

Caution! / Vorsicht! / Attention! / ¡Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! 

Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. 

Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. 

Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. 

Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. 

Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. 

Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. 

Για τα σύµβολα των συστατικών του κιτ συµβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. 

IBL AFFILIATES WORLDWIDE 

IBL International GmbH 

Flughafenstr. 52A, 22335 Hamburg, Germany 

IBL International Corp. 

194 Wildcat Road, Toronto, Ontario M3J 2N5, Canada 

Tel.: + 49 (0) 40 532891 -0 Fax: -11 

E-MAIL: IBL@IBL-International.com 

WEB: http://www.IBL-International.com 

Tel.: +1 (416) 645 -1703 Fax: -1704 

E-MAIL: Sales@IBL-International.com 

WEB: http://www.IBL-International.com 

LIABILITY: Complaints will be accepted in each mode –written or vocal. Preferred is that the complaint is accompanied with the test performance 

and results. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These 

cases invalidate any claim for replacement. Regardless, in the event of any claim, the manufacturer’s liability is not to exceed the value of the test kit. 

Any damage caused to the kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer 

Symbols Version 3.5 / 2012-01-20

Acetylcholine Receptor Autoantibodies (ARAb) RRA - IBL international

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